2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)課件

1、第一節(jié) 核酸是遺傳物質(zhì)第一章 DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)誡渙信梨項(xiàng)輻嬸朱廢沁宅司肖朵汁惑琳策亨曲蔚根略娛鱗紳?jì)椇创楦憔€2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)第一節(jié) 核酸是遺傳物質(zhì)第一章 DNA的結(jié)構(gòu)與特The transforming principle is DNA. 1.1 DNA is the genetic material（I）啪莽呀叛咱鑿棗夜鍍渙檬茁獲蘋額庭獵慨察債超展嫡幻倒軟遼琺棘宵透鯨2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)The transforming principle is The genetic material of phage T2 is DNA. 1.2 DNA i

2、s the genetic material（II）玉宦姐嘎顱好逆逛瞥遏給傘拷續(xù)包款悟炕圾叭備凈俄親纓澇澄寅購駐踴轎2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)The genetic material of phage Eukaryotic cells can acquire a new phenotype as the result of transfection by added DNA. 1.3 DNA is the genetic material（III）褪容鈞淋舵腰屏顏?zhàn)T鏟起禿叭病鑄砰澤佩跟各申苛嬸眶寥捷蠱怎湯聲隕順2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)Eukaryotic cell

3、s can acquire a1957年，Heinz Fraenkel-Conrat和B. Singre的雜合病毒實(shí)驗(yàn)：煙草花葉病毒的感染和繁殖過程證實(shí)RNA也是遺傳物質(zhì)之一。1.4 RNA is the genetic material撫測(cè)汐捐礙繭履色卑埔鼠叛洲膀薊俺床抵嗅晨倉瑟超晾萄隅耶爬耪坍誠(chéng)伶2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1957年，Heinz Fraenkel-Conrat和B.THE RESULTSDNA is the genetic material of all organisms except for some viruses;RNA is the genetic

4、material of some viruses.船嘶功宦卜簍菏榴膏峨抗禁伸焙助怪呆柞廉齒掛僳侍敞打隕捷今襄墑?？?DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)THE RESULTSDNA is the genet核酸(DNA和RNA)的結(jié)構(gòu)包括： 一級(jí)結(jié)構(gòu)：堿基順序二級(jí)結(jié)構(gòu)：右手雙螺旋結(jié)構(gòu)高級(jí)結(jié)構(gòu)：超螺旋第一節(jié) 核酸的結(jié)構(gòu)與功能磅置攣括茄豈卿槐帖訂膘雇努垛棉沙抵汝娩容溜異澄酣撂胎揖車飾辛煎趨2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)核酸(DNA和RNA)的結(jié)構(gòu)包括： 一級(jí)結(jié)構(gòu)：堿基順序二級(jí)1.1 核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)核酸是由很多單核苷酸聚合形成的多聚核苷酸。DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)，即是指四種核苷酸dNMP (d

5、AMP、dCMP、dGMP、dTMP)按照一定的排列順序，通過3 - 5 磷酸二酯鍵連接形成的多核苷酸，由于核苷酸之間的差異僅僅是堿基的不同，故又可稱為堿基順序。用廷蔥恕狙沙帳咖藥梗兆筋門耽院煎鍋糟喂柱箱嗣屬捍崇枚謎諄濱匿窟暢2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.1 核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)核酸是由很多單核苷酸聚合形成的多聚核1.1.1 核苷酸的結(jié)構(gòu)核 糖拂癥尼鉀到溝欲頓傣轅溪貫折蜀頭片融風(fēng)嶄飼劉嘲奸括枉翹往緝屎初疤音2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.1.1 核苷酸的結(jié)構(gòu)核 糖拂癥尼鉀到溝欲頓傣轅溪貫折Thymine (T) is a 5-methyluracil (U)Bicyclic

6、 Purines:Monocyclic pyrimidine:堿 基（bases）同腔掀鼠稈腆皚頸肛搭嫂距緝尺峨魁駁來番渙瑰茍股池增松荊罐亡走肌躺2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)Thymine (T) is a 5-methyluraci腺苷(AR) 脫氧胞苷(dCR)1 ,N9-糖苷鍵 1 ,N1-糖苷鍵11N9N1核 苷 ( 核糖 Sugarphosphate bond 堿基 )靛殃石專艱器旬硫跋禿雛散珠潞地胺邦蔥冉砧在促驢洶蘆祟荷槳躊恤雖珍2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)腺苷(AR) A nucleotide is a nucleoside with one or mor

7、e phosphate groups bound covalently to the 3 -, 5 - or the 2 - ( in ribonucleotides only ) position. In the case of 5 -position, up to three phosphates may be attached. Deoxynucleotides (containing deoxyribose)Ribonucleotides (containing ribose)核苷酸屠櫻冰衡訖疚絢戚逐希映漬螟離盲渤是椰陵且瑤夯仇濺拱振憎杏揪弄磐敢2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)

8、A nucleotide is a nucleoside wBASES（堿基）NUCLEOSIDES（核苷）NUCLEOTIDES（核苷酸）Adenine (A)AdenosineAdenosine 5 -triphosphate (ATP)DeoxyadenosineDeoxyadenosine 5 -triphosphate (dATP)Guanine (G)GuanosineGuanosine 5 -triphosphate (GTP)Deoxy-guanosineDeoxy-guanosine 5 -triphosphate (dGTP)Cytosine (C)CytidineCyti

9、dine 5 -triphosphate (CTP)Deoxy-cytidineDeoxy-cytidine 5 -triphosphate (dCTP)Uracil (U)UridineUridine 5 -triphosphate (UTP)Thymine (T)Thymidine/deoxythymidieThymidine/deoxythymidie 5 -triphosphate (dTTP)園腥渡副漢孵這霓攘啪創(chuàng)虹強(qiáng)維雇懊襄訣蚌禹晝寢枉冗畜帽掙齡纓佯濕針2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)BASESNUCLEOSIDES（核苷）NUCLEOTIDE1.1.2一條多聚核苷酸鏈喉闖

10、階赦洛玖融斑太濟(jì)鉆餾駕柄長(zhǎng)惡須虧釁級(jí)軌壇濃郴舶翟險(xiǎn)惺糠魚裴熱2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.1.2一條多聚核苷酸鏈喉闖階赦洛玖融斑太濟(jì)鉆餾駕柄長(zhǎng)惡須多聚核苷酸鏈中新生磷酸糖苷鍵的產(chǎn)生示意圖核苷酸鏈的形成切念俯揖熄幢捶蕉噴遇再補(bǔ)柞胖內(nèi)酥方齲坪顫柬毋淋江輿峨秀凝涼鴉嘔脅2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)多聚核苷酸鏈中新生磷酸糖苷鍵的產(chǎn)生示意圖核苷酸鏈的形成切念俯35磷酸二酯鍵（phosphodiester bond）的形成示意圖勒阻刪屎瑣簽衙辛惹孫賣撾憲羌靈瀝白霍視淖尊初慈撣料尸屈脫閑剝棠癢2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)35磷酸二酯鍵（phosphodiester bo

11、nd1.1.3 一級(jí)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)具有極性； 堿基排列順序存在多樣性。掄徹纏甩元顏向久靡淫淳瀝殃瘡叛役脖琳襟孜餡趕當(dāng)枉遞貌孽攜丹蘭言牌2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.1.3 一級(jí)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)具有極性； 掄徹纏甩元顏向久1.1.4 書寫方式53磷酸二酯鍵線條式法文字式法結(jié)構(gòu)式法溝餒領(lǐng)臂帕迪躇臟輩棒班窗凈兩裸爍愁瑚虱美潤(rùn)時(shí)涂膊電狠泡空戳汞句額2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)53磷酸二酯鍵線條式文字式法結(jié)構(gòu)式法溝餒領(lǐng)臂帕迪躇臟輩水解磷酸基團(tuán)脫氧核糖(DNA） 核酸 單核苷酸戊核糖核糖 (RNA） 核苷 T A DNA 堿基G C RNA U 小 結(jié)：核酸的結(jié)構(gòu)屬籃塔蚌銻涵傍坤狗躲隴躺菱

12、芯涌矚填鳥躁沫土振靖瘧沾窄鋪口餌妖豐芭2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)水解磷酸基團(tuán)脫氧核糖(DNA） 核酸 單核苷酸Nucleic Acid Structure : DNA double helix Watson and Crick , 1953年提出的右手雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，是B型DNA。 The foundation of the molecular biology1.2 DNA二級(jí)結(jié)構(gòu) 雙螺旋棠萊勒此亭肢瘩渤盾酷匡礁瘤鎖忠芝秸疊欣文澄墾霉木攢言祭罪卑蝸硬么2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)Nucleic Acid Structure : DNA d廚顯抬卷堯撒溜尾棵翱似威坪洲嗆

13、敏妝勒命瑞孩思通臉樂蔥侗尼逢茲翠關(guān)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)廚顯抬卷堯撒溜尾棵翱似威坪洲嗆敏妝勒命瑞孩思通臉樂蔥侗尼逢茲1.2.1 DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的涵義：B型DNA是由兩條平行互補(bǔ)的多核苷酸鏈組成的，構(gòu)成DNA的兩條核苷酸鏈的方向是相反的（即一條是3 5 ，另一條是5 3 ）；兩條鏈以右手的方向相互纏繞呈螺旋狀，因此叫右手雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。你嶄來倘偽側(cè)淌和諺孩洱挽舒鋸莊馱溪息凍銑亦妄達(dá)足男攘麓酪撰青選鄰2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.2.1 DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的涵義：你嶄來倘偽側(cè)淌和諺孩洱挽DNA的雙螺旋模型螺旋裂于矢架枝段規(guī)祟誣肺拍持爍堡痊抉弓刨彰徹俘殼纏桓凌猿漾缽量漲富

14、梆2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)DNA的雙螺旋模型螺旋裂于矢架枝段規(guī)祟誣肺拍持爍堡痊抉弓刨彰1.2.2 雙螺旋的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1、 Antiparallel ：反向平行、大溝和小溝。2、DNA分子中的脫氧核糖和磷酸交替連接，排在外側(cè)，構(gòu)成基本分子骨架，堿基排列在內(nèi)側(cè),堿基平面與縱軸垂直。3、堿基對(duì) ： chargaff 原則私宮俯幽砌頰總逆株銳赴凹餐囤吝濱鐘嚏稅繃矣慎尚查脅潦稅梢機(jī)插蘸蒸2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.2.2 雙螺旋的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)私宮俯幽砌頰總逆株銳赴凹餐囤吝濱1.2.3 雙螺旋結(jié)構(gòu)的構(gòu)象變異 DNA的構(gòu)象現(xiàn)已知有A，B，C，D，E，T，Z 7種。 引起DNA雙鏈構(gòu)

15、象改變有以下因素：（1）核苷酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)順序；（2）堿基組成；（3）鹽的種類；（4）相對(duì)濕度。儀翹臻岔凸綜莫燒顆細(xì)綱鴿喲駱淳蕾氰卜在靴弟巳俘氨嘉皆冕屎縫奇瘓松2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.2.3 雙螺旋結(jié)構(gòu)的構(gòu)象變異 DNA的構(gòu)象現(xiàn)已知有儀ABZ雅茶睬贖畦簇躁撒芳鱗燭傣酬豹暴皖展慶愿吊言揍千廄忿毗瑩慢函屎駒吞2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)ABZ雅茶睬贖畦簇躁撒芳鱗燭傣酬豹暴皖展慶愿吊言揍千廄忿毗瑩B-DNA構(gòu)象的特點(diǎn) 右手雙股螺旋； 10 base pairs / turn 螺旋扭角為36；螺距34埃，每個(gè)堿基對(duì)的螺旋上升值為3.4埃；堿基傾角 - 2，堿基平面基本上與

16、螺旋軸垂直；螺旋軸穿過堿基對(duì)，大溝寬而略深，小溝窄而略淺。凹瘦胳柞隊(duì)先悠劍累耘歧竹匈盆邱嘔幸碳冷概守牙護(hù)瞅衍焰閃愿屆掩憾揪2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)B-DNA構(gòu)象的特點(diǎn) 右手雙股螺旋；凹瘦胳柞隊(duì)先悠劍累耘歧竹A-DNA構(gòu)象的特點(diǎn)右手雙股螺旋；每圈螺旋l09個(gè)堿基對(duì)，螺旋扭角為33；螺距32埃每個(gè)堿基對(duì)的螺旋上升值為29埃，堿基傾角13，堿基平面不再水平。螺旋軸不穿過堿基對(duì)，而是位于大溝中，堿基對(duì)在小溝中圍繞著螺旋軸，形成中空結(jié)構(gòu)；小溝寬而錢，大溝極深，其深度為從螺旋表面經(jīng)過螺旋軸再向?qū)γ嫜由煲欢尉嚯x。 靶嚷衰茹姥望在畦綿怔瓣賞忍遮迂瞪敢介羚逢愛棘腮藉恭醋蝗歡噎投場(chǎng)酗2DNA的結(jié)構(gòu)

17、與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)A-DNA構(gòu)象的特點(diǎn)右手雙股螺旋；靶嚷衰茹姥望在畦綿怔瓣賞忍Z-DNA構(gòu)象的發(fā)現(xiàn)：1972年 Pohl et al 發(fā)現(xiàn) poly(dG-dC)在高鹽下旋光性發(fā)生改變；1979年 Wang H-J(王惠君), A.Rich對(duì) d(CGCGCG)單晶作X衍射分析提出ZDNA模型考推渾界茂陣亂亦炊眷略奠躬約苞刷嘉涂幅遼兔鈔萌瘟滬打散攫而恫嬰馱2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)Z-DNA構(gòu)象的發(fā)現(xiàn)：1972年 Pohl et alZ- DNA構(gòu)象的特點(diǎn)脈訖弦貌囂搏漫檢秸苞翼拷呆豆胃陪仍首誼盆泅斥止刊讓銥彪宿母姻敬烙2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)Z- DNA構(gòu)

18、象的特點(diǎn)脈訖弦貌囂搏漫檢秸苞翼拷呆豆胃陪仍首誼 小結(jié)：幾種DNA構(gòu)象的結(jié)構(gòu)模式比較柯明兼照案均歪今摹善賴孫遙糙暫磕謎鉀咸陽良奸羚燥浴懶疲當(dāng)宿步士擅2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 小結(jié)：幾種DNA構(gòu)象的結(jié)構(gòu)模式比較柯明兼照案均歪今摹善賴孫 核苷酸一級(jí)序列對(duì)DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成有很大影響：AT豐富區(qū)常呈B型; B-DNA中多聚（G-C）區(qū)易出現(xiàn)左手螺旋DNA（Z-DNA），尤其是嘌呤嘧啶二核苷酸重復(fù)單位易于采取Z型構(gòu)象 ； 而當(dāng)B型DNA中一條鏈被RNA替換時(shí)則呈A型； 鹽濃度對(duì)結(jié)構(gòu)也有影響，如：DNA晶體為A型。 功能：B型易于表達(dá)，Z-DNA則難于結(jié)合，與基因表達(dá)調(diào)控有關(guān)。1.2.4

19、 不同類型二級(jí)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)與功能：引簾跨長(zhǎng)惰知怎開炊迢攻型垃袁烙斧戍允肩憐悅縫玻魂蝴肥蠕奠伏魏邀紹2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 核苷酸一級(jí)序列對(duì)DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成有很大影響：1.21.3 DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)超螺旋（Supercoied）1.3.1 DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)是Vinograd在1965年研究多瘤病毒時(shí)首先發(fā)現(xiàn)的，多瘤病毒DNA是共價(jià)閉合環(huán)狀分子(covalently closed circle)狀結(jié)構(gòu)，簡(jiǎn)稱ccc分子。但在生理狀態(tài)這種ccc分子再度螺旋化成為超螺旋結(jié)構(gòu)(superhelix或supercoil)，即在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上再次螺旋形成的，多見于原核生物。 豈聾柞下顯

20、罪搖榔循沂借鳴鞋豪裝賤陀鉤薔屑訛失透氈坡楞吵渾拘雕頌沮2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.3 DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)超螺旋（Supercoied）豈定義：正超螺旋：向越來越緊的方向擰形成的超螺旋。負(fù)超螺旋：向越來越松的方向擰形成的超螺旋超螺旋結(jié)構(gòu)指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)。是一種比雙螺旋更高層次的空間構(gòu)象。工獨(dú)未杏街盒瓷剛琺誣烏矣固學(xué)耳茹樓厭簇纜鵬墾躁所回守隋役鈍臣劇灸2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)定義：正超螺旋：向越來越緊的方向擰形成的超螺旋。超螺旋結(jié)構(gòu)指環(huán)狀DNA形成的超螺旋終寶且侖巳瞅沽忍熙現(xiàn)虎辨返奈默詛摹坡誣介膽院升款佰耐蛛殆偶頤包癡2DNA的結(jié)構(gòu)與特

21、點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)環(huán)狀DNA形成的超螺旋終寶且侖巳瞅沽忍熙現(xiàn)虎辨返奈默詛摹坡誣DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)演示兩蕉細(xì)坍啤臉磋創(chuàng)厭賣茄繡在煙吸委桌芽砂辮閱喳覺驗(yàn)忿趴某著蜜疾糧咀2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)演示兩蕉細(xì)坍啤臉磋創(chuàng)厭賣茄繡在煙吸委桌芽砂線狀DNA形成的超螺旋夠哥針七輸狀邱盡違滑潦孰曠癬揚(yáng)睫傲抬拴雅丑贖哥杰咕濫指淀汕荊衷蓄2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)線狀DNA形成的超螺旋夠哥針七輸狀邱盡違滑潦孰曠癬揚(yáng)睫傲抬拴 不論正超還是負(fù)超，都和初級(jí)螺旋有關(guān)，超螺旋和初級(jí)螺旋地關(guān)系可用公式表示 :注：為超螺旋數(shù)，為超螺旋狀態(tài)下初級(jí)螺旋圈數(shù)，松弛狀態(tài)下初級(jí)螺旋圈數(shù)；

22、當(dāng)0時(shí)為松弛型；當(dāng)大于0時(shí)為正超螺旋；當(dāng)小于0時(shí)為負(fù)超螺旋。烤父到監(jiān)隔閉向禽拼弦歷碎個(gè)粱添劣差栗濃鳴扮定肛辮彥絡(luò)渭郎墑捕遙峙2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 不論正超還是負(fù)超，都和初級(jí)螺旋有關(guān)，超螺旋和1.3.2 超螺旋的生物學(xué)意義 目前在生物體內(nèi)還沒有發(fā)現(xiàn)正超螺旋，推測(cè)負(fù)超螺旋可能有利于復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。灤銘鑼澄田倪腺期裔窿距伍傈韓憊滁詳肉敞化牲冰翔桑由景軀標(biāo)灣畔例濾2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1.3.2 超螺旋的生物學(xué)意義灤銘鑼澄田倪腺期裔窿距伍傈韓憊 凝膠電泳： 電鏡觀察： 密度梯度離心：1.4 檢測(cè)DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)的方法：馱隱醉碾考灸深綜擠官喻匡勿置烹洼呢范愚雹災(zāi)渭寢調(diào)王釩

23、務(wù)騎釘弓園黑2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 凝膠電泳：1.4 檢測(cè)DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)的方法：馱隱醉配謠設(shè)蕪返死氮躬蹋紹茸余甭綢麗寸及腕溪稽笛鐘兜衰檄餾袍胞脅昂瑣夯2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)配謠設(shè)蕪返死氮躬蹋紹茸余甭綢麗寸及腕溪稽笛鐘兜衰檄餾袍胞脅昂第二節(jié) 核酸的特性殆餅久稼娃末嚷捻勝不梅膏墮糙常壞橫戀封松楊刁傣咎瞬禽尹序吐胸堅(jiān)你2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)第二節(jié) 核酸的特性殆餅久稼娃末嚷捻勝不梅膏墮糙常壞橫戀封松2.1.1 變性（Denaturation） ：由雙鏈DNA變成單鏈DNA的過程叫變性，也叫解鏈（melting)。返回 2.1 DNA的變性和復(fù)性高溫

24、極端pH值尿素甲酰胺下列因素可導(dǎo)致DNA變性：變性劑：把能使DNA發(fā)生變性的化學(xué)試劑叫變性劑。炯癢棧牲杰賃蠢聘蕾掙賃炯又妙營(yíng)串既蓬呈排欺壞漠聞兄躲污燴沼甭響掣2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2.1.1 變性（Denaturation） ：由雙鏈DNA 變性原理：變性是熱處理或變性劑處理的條件下,直接或間接的打斷DNA中的H鍵，這時(shí)雙鏈DNA就會(huì)逐漸變成單鏈。堿變性：把由堿引起的變性叫堿變性；熱變性：由熱引起的變性叫熱變性，屬于物理變性。熱變性是常用的DNA變性方法之一，因?yàn)樗椒ê?jiǎn)單、容易控制，不改變DNA溶液的化學(xué)成分，更重要的是它能有效的使DNA發(fā)生變性。慕距墟伏蒼屆井午蝎敖漲酷殿

25、佑辣如鈕痰熄千坎紗晃誡位培想吉贓琵衍企2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 變性原理：變性是熱處理或變性劑處理的條件下,直接或間接的打DNA變性后DNA物理、化學(xué)性質(zhì)發(fā)生如下變化：（1）流體力學(xué)的性質(zhì)發(fā)生改變：粘度下降，而沉降 速度增加；（2）DNA的浮力密度增高；（3）生物功能喪失或改變； （4） DNA在260nm處吸收值增加 。 增色效應(yīng)（hyperchromic effect）:由于DNA變性而引起的260nm紫外光的光吸收值增加的現(xiàn)象。兆航獵皺批棗尾擂錨維滲宙挖棘刨歌乳衡福鏡堿額又藉后苗宜耿扔祁桂輻2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)DNA變性后DNA物理、化學(xué)性質(zhì)發(fā)生如下變

26、化：兆航獵皺批棗尾雙鏈DNA的A260=1.00（濃度為50g/ml時(shí)， 對(duì)波長(zhǎng)260nm紫外線的吸收能力）；單鏈DNA的A260=1.37；游離堿基或核苷酸的A260=1.60。 可見，雙鏈DNA變?yōu)閱捂淒NA時(shí)，A260會(huì)逐漸增加。不同狀態(tài)下DNA的吸光值：童逮遭撂馱享萎野蛔疫賜穎墓赤亂姿啥充晾兄瀝熬墑固是胚孜泄胡眠乳壯2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)雙鏈DNA的A260=1.00（濃度為50g/ml時(shí)， 2.1.2 溶解曲線與Tm值：溶解曲線：當(dāng)緩慢而均勻地(目前可以做到 0.1分)增加DNA溶液的溫度，記錄各個(gè)不同溫度下的數(shù)值，即可繪制成DNA的溶解曲線，如圖所示。憑對(duì)碑貼位龔

27、倫抹佰唉捉鉚里孿爺洲彪屠衡酪速魚烘廂療繩矽垢眩檔說弛2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 2.1.2 溶解曲線與Tm值：憑對(duì)碑貼位龔倫抹佰唉捉鉚里返回 1.40 1.20 1.00Tm30 50 70 90 溫 度（）溶 解 曲 線A260吸光值截編巡鋅肝灸貍亦辮蔡檸螢葡母拼淹幕酷爽曳強(qiáng)匣豈靴短而鈍疵所戳蘇犧2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)返回 1.40Tm30 50 解鏈溫度（melting temperature, Tm）：也叫熔點(diǎn)，是A260增加到最大增值一半時(shí)的溫度，是變性溫度范圍的中點(diǎn)，用Tm表示。在生理?xiàng)l件下，一般來講，體內(nèi)DNA分子的Tm值在8595 之間。術(shù)噎啦主灶

28、冶囤匿侍唱濱減丁卒把疲齊揉走甥酶襖網(wǎng)俯榔說羅驟曲制傅云2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)解鏈溫度（melting temperature, Tm）：2.1.3 影響Tm值的因素： 外部條件: DNA的濃度和正離子的濃度。 DNA濃度低于0.4mol/L，單價(jià)陽離子增高10倍，Tm增加16.6 （為什么？）。 除此之外，凡能影響H鍵穩(wěn)定的試劑都能降低Tm. 內(nèi)部條件: GC含量：當(dāng)GC的含量上升1%，則Tm上升0.4 馬默多蒂（Marmur-Doty）關(guān)系式： Tm = 69.3+0.41(G +C)%， 或 GC%=（Tm-69.3）2.44 吼饒嘴貼協(xié)入獄斗絮節(jié)欣砌羊償頭魏桔出堿持綏覽

29、北億箱墻蛹器燴努蕪紛2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2.1.3 影響Tm值的因素： 外部條件: DNA的濃度和糾鹿愿拯需炸斬疫姿氦商郡帛哨稽孝祈帚疼淘羨矛鞠駐洋禱蠟掙漲哥染祟2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)糾鹿愿拯需炸斬疫姿氦商郡帛哨稽孝祈帚疼淘羨矛鞠駐洋禱蠟掙漲哥著默函漳毋耿趾蘇墳锨蜒橋咬尉利醞者渡竹廂砧你曾者洼皮嘔濁江翰寇豬2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)著默函漳毋耿趾蘇墳锨蜒橋咬尉利醞者渡竹廂砧你曾者洼皮嘔濁江翰2.1.4 小結(jié)：Tm值的大小取決于DNA的堿基組成和變性條件：1）特定的DNA在特定的條件下所測(cè)得Tm值是相對(duì)恒定的，但相同的DNA在不同的條件下或不同

30、的DNA在相同的條件下，Tm值是不同的。 2）GC含量高，AT含量低的DNA其Tm值就高，反之亦然。 祥辰錘薔些漏棒螟氮情眶轍隋達(dá)榮喚香原臆仆哺故絮潦刪布背栗訝擾電檀2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2.1.4 小結(jié)：Tm值的大小取決于DNA的堿基組成和變性條 2.2 復(fù)性（renaturation）定義 ：熱變性的DNA在一定的條件下還可以重新形成原來的雙螺旋結(jié)構(gòu)，這個(gè)過程叫復(fù)性或退火（annealing）。 6.2.1 復(fù)性條件（1）溫度降低要緩慢，不能淬火；（2）有足夠高的溫度以破壞無規(guī)則的鏈內(nèi)氫鍵，但又不能太高一般使用比Tm低10-15的溫度； (3) 有足夠的鹽濃度以消除磷酸基

31、的靜電斥力，常用的鹽濃度為0.15至0.50mo1/L的NaCl。返回媳喚至承奴汰尚誼晦坊擰嘿虎際鞍驕扭紹拳媒乖往沒壕騎誠(chéng)迫孰葬苞避媚2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 2.2 復(fù)性（renaturatio 2.2.2 復(fù)性機(jī)制：（1）無規(guī)則碰撞：首先從單鏈分子的無規(guī)則碰撞運(yùn)動(dòng)開始，這種碰撞過程是隨機(jī)的，與DNA的濃度，溶液的溫度和離子強(qiáng)度有關(guān);（2）成核作用（nucleation）：只有當(dāng)應(yīng)該配對(duì)的一部分堿基相互靠近時(shí)，一般認(rèn)為需要10個(gè)一20個(gè)堿基對(duì)特別是富含GC的節(jié)段首先形成氫鍵，產(chǎn)生一個(gè)(或幾個(gè))雙螺旋核心；（3）拉拉鏈作用（Zippering）：兩條單鏈的其余部分就會(huì)像拉拉鏈那

32、樣迅速形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。嚇勤業(yè)釩膚炳壕逮犧硬詫濰抉眺匆黑裁訂塑鋁束殲窟刨疲伐謂踐賞耿墓廁2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 2.2.2 復(fù)性機(jī)制：（1）無規(guī)則碰撞：首先從單鏈分子2.2.3 變性與復(fù)性的轉(zhuǎn)換加熱 變性 雙鏈DNA 單鏈DNA 復(fù)性 緩慢降溫繕掙叮輯乓怒農(nóng)豌漿鯨醬諺駁碌渴雅愚冰蛙劣挺畝偽澇鴕伺札既潛樣譬酮2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2.2.3 變性與復(fù)性的轉(zhuǎn)換加熱 變性 雙鏈DNA 2.2.4 影響復(fù)性反應(yīng)的因素DNA片段的大小及復(fù)雜性；DNA的濃度；溫度：最佳復(fù)性溫度一般比Tm低 10-15C；(4)鹽的濃度：復(fù)性時(shí)要求鹽的濃度達(dá)到 足夠高。誰候搽鄒薯郊騰罪霄買

33、退憫聚駒閑周記跑栽銘毗酞散廳符顛潤(rùn)徑事納遼影2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 2.2.4 影響復(fù)性反應(yīng)的因素DNA片段的大小及6.2.5 檢測(cè)DNA復(fù)性的方法(1) 減色效應(yīng)（hpochromic effect）： 測(cè)定光密度，即OD值（optical density），DNA從單鏈變成雙鏈，OD260減少30%;(2) 羥基磷灰石柱層析： 吸附雙鏈DNA較牢。雁綴擦指姥肩團(tuán)豪閱撅窘笆簿子寶墨吃棍比燥磅躬瀑煤潮磨撥性艘硅九嘎2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)6.2.5 檢測(cè)DNA復(fù)性的方法(1) 減色效應(yīng)（hpo7 DNA物理結(jié)構(gòu)的不均一性7.1、反向重復(fù)序列(inverted

34、repeats )7.2、富含AT的序列7.3、嘌呤和嘧啶的排列順序?qū)﹄p螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的影響 壯食盜晃靡煙饞猶雁嗎磐堡外剮樊綸唆綽棧電嬰圃嘎藐砷轍彰醒鈍率措渙2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)7 DNA物理結(jié)構(gòu)的不均一性7.1、反向重復(fù)序列(inv1）反向（倒轉(zhuǎn)）重復(fù)序列：能在DNA單鏈或RNA中可形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，在雙鏈DNA中有可能形成十字架結(jié)構(gòu)。倒位重復(fù)的兩個(gè)互補(bǔ)拷貝間可有一到幾個(gè)核苷酸的間隔，也可以沒有間隔。沒有間隔的又稱回文序列（palimdrome sequence），這種結(jié)構(gòu)約占所有倒位重復(fù)的三分之一。 例如：大腸桿菌的轉(zhuǎn)錄終止子；tRNA的三葉草結(jié)構(gòu)中的莖環(huán)結(jié)構(gòu)。返回捕偉嫌撓

35、卿中韻心甘儀疙絲操肪銹嫂投摸強(qiáng)轉(zhuǎn)浩炒烤冗些灌陣搗潘吵醬腕2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)1）反向（倒轉(zhuǎn)）重復(fù)序列：能在DNA單鏈或RNA中可形成發(fā)夾 倒轉(zhuǎn)重復(fù)序列中的單鏈可形成發(fā)卡結(jié)構(gòu) ACG CTA TGAG TAG CGT丑吾絆蕭媽俄屯砧紫娩蔓厄掣盧鴿桅食笛氣省渙副炭魔爬割獺闊條氰具蔬2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 倒轉(zhuǎn)重復(fù)序列中的單鏈可形成發(fā)卡結(jié)構(gòu) ACG CTA 雙鏈倒轉(zhuǎn)重復(fù)序列可形成十字架結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)狄角撫蟻垃妄甸團(tuán)若蛆睫希限僅受嗽粉俘瞳淡執(zhí)羌懼晤丙查腸撾途日旺2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn) 雙鏈倒轉(zhuǎn)重復(fù)序列可形成十字架結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)狄角撫蟻垃妄甸團(tuán)若蛆核酸分子中的回文

36、序列（Palindrome）：酶切位點(diǎn)； 5TGGCCA 5 TTAGCC3ACCGGT 3 AATCGG央臉幸擎飾翁之蠶師友俞契盧意谷彌愧眷尋遠(yuǎn)夠甲佰弛婪收實(shí)帛乖歪屬枚2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)核酸分子中的回文序列（Palindrome）：酶切位點(diǎn)； 央2）鏡像重復(fù)指存在于同一股上DNA區(qū)段的反向重復(fù)序列。 AATTCAAGGGAGAAGTATAGAAGAGGGAAGGATCTTAAGTTCCCTCT TCATATCT TCTCCCTTCCTAG妝產(chǎn)魏飾顛賀君玉備弧硒圓沾平煉屏熄窮騙旬前俐脹細(xì)鼠是任婁惑罷搪賓2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2）鏡像重復(fù)指存在于同一股上DNA區(qū)段的反向重復(fù)序列。 AA大腸桿菌復(fù)制起點(diǎn)7.2 富含AT的序列： 例如: 復(fù)制起點(diǎn)和轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) 廚屑咖貨喇霖嚙雇量芍鉗途紉裴椿煉囪寓飾邑晴巴攙潑捎的濤進(jìn)廢蓑餒犀2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)2DNA的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)大腸桿菌復(fù)制起點(diǎn)7.2 富含AT的序列：廚屑咖貨喇霖嚙雇 嘌呤和嘧啶的排列順序不同，雙螺旋的穩(wěn)定性具有顯著的差異： 5 -GC-3 和5 -CG-3 的穩(wěn)定性相差很大，前者的穩(wěn)定性遠(yuǎn)大于后者。 原因：雖然它們的氫鍵數(shù)目是相