對乙酰氨基酚的鑒定結構確證與含量測定

1、-、實驗目的掌握對乙酰氨基酚的鑒定的方法了解對乙酰氨基酚結構確證的過程運用儀器分析手段對對乙酰氨基酚進行含量測定二、實驗原理對乙酰氨基酚(CHNO)為白色結晶或結晶性粉末；無臭，味微苦。在熱水或892圈|對乙醉抵基酚麗分子結陶Fi-ir.Tin1eiiiJituJujslJurliLfi!ul.xiLiiiLi)cijl.*ri乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中微溶。熔點168-172C。對乙酰氨基酚是臨床常用的解熱鎮(zhèn)痛藥物，且毒副作用小，較適合兒科患者使用。已成為全世界應用最廣泛的的藥物之一，是國際醫(yī)藥市場上頭號解熱鎮(zhèn)痛藥。以一定濃度的對乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成對氨基酚溶液，對氨基酚溶液

2、在堿性條件下與亞硝基鐵氫化鈉試劑作用，生成藍色配位化合物。利用721分光光度計測定其波長確定最大吸收，并通過分光光度計進行條件優(yōu)化，依據比爾定律繪制標準曲線。通過標準曲線法求得對乙酰氨基酚的濃度，從而求得對乙酰氨基酚的含量。取對乙酰氨基酚溶解于流動相后于200400波長范圍掃描，結果在250的波長處有最大吸收，故選擇此波長作為測定波長。對乙酰氨基酚易溶于熱水中，用溫水浴溶解15分鐘以上時對乙酰氨基酚已全部溶解。以甲醇-水-磷酸(22-78-0.1)為流動相，能使對乙酰氨基酚得到很好的分離。采用外標法，用對乙酰氨基酚標準溶液作為對照品，求得樣品對乙酰氨基酚的濃度，從而求得對乙酰氨基酚的含量。三、

3、實驗過程鑒定本品的水溶液加三氯化鐵試液，即顯藍紫色。取本品約0.1g，加稀鹽酸5ml,置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1,滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性B-萘酚試液2ml，振搖，即顯紅色。本品的紅外吸收圖譜應于對照的光譜一致。結構確證紅外光譜圖4C1CM132002DOC9SCOI2CKJftUQ4001核磁共振氫譜（3）含量測定紫外分光光度法3.1.1溶液的制備Na2C03溶液的制備準確稱取Na2CO35.3035g,置于1000mL容量瓶中，加純水標定至刻度，搖勻。圖1對乙酰氨基酚和內標鄰苯二屮酸氫鉀的結構覆其氫譜Fi場1TheslruelureandHNMRs

4、peciraofparaceientolantiKriassiuniliyrljogenphlhillale3.1.2對乙酰氨基酚溶液的制備準確稱取對乙酰氨基酚標準品0.1023g,置于100mL的燒杯中，加濃鹽酸10mL，純水10mL,在70C水浴加熱75min，冷卻至室溫，將水解液轉移到1000mL的容量瓶中。用Na2C03溶液稀釋至刻度，搖勻。0043g置于100mL容量瓶中加純水標定到刻度，搖勻。3.1.3顯色劑（1%亞硝基鐵氰化鈉）的制備準確稱取Na2C031.0019g亞硝基鐵氰化鈉1.3.1.4實驗方法段光廉與弟占汀同義系曲苗；Fi苗.MjTVT：with呷知1嚳泗tjilYir

5、先以一定濃度的對乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成對氨基酚溶液，對氨基酚溶液在堿性條件下與亞硝基鐵氫化鈉試劑作用，生成藍色配位化合物。由圖4知當絡合時間超過20分鐘，吸光度也不會發(fā)生較大改變，故定絡合時間為20分鐘。精確吸取對乙酰氨基酚溶液100mL，放入1000mL的容量瓶中，加水至刻度線，搖勻，定為溶液（I）。在752-分光光度計上測定波長范圍,選擇出最大波長利用752分光光度計測定其波長確定最大吸收。在上述條件下，按實驗方法改變溶液中對乙酰氨基氨基酚的加入量，測定吸光度并繪制標準曲線。精確取樣品對乙酰氨基酚0.1000g,置于100mL的燒杯中，加濃鹽酸10mL，純水10mL，在70C水浴加

6、熱75min,冷卻至室溫，將水解液轉移到1000mL的容量瓶中。用Na2C03溶液稀釋至刻度，搖勻。精確吸取樣品對乙酰氨基酚溶液100mL，放入1000mL的容量瓶中，加水至刻度線，搖勻，在752分光光度計下測定其吸光度，由標準曲線求得濃度，從而求得樣品對乙酰氨基酚的含量。HPLC法3.2.1儀器與試劑儀器高效液相色譜儀：高效液相色譜儀（島津LC-10A）紫外檢測器,N2000色譜工作站，C反18向鍵合相色譜柱(150mmx4.6mm),微量注射器(25uI)試劑及試藥甲醇:色譜純;磷酸:分析純;水:二次蒸餾水對乙酰氨基酚對照品(純度99%)對乙酰氨基酚樣品3.2.2色譜條件色譜柱：Cq反向鍵

7、合相色譜柱(150mmx4.6MM)流動相：甲醇-水-磷酸(22-78-0.181)流速：1.0ml/min檢測波長：250nm;進樣量：50ul柱溫：35C。2.3實驗方法精密稱取對乙酰氨基酚對照品10mg,置100ml容量瓶中,加甲醇至刻度，搖勻。精密吸取10ml與另一100ml容量瓶，加入流動相稀釋至刻度，作為標準溶液。精密稱取對乙酰氨基酚樣品10mg置100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。精密吸取10ml與另一100ml容量瓶，加入流動相稀釋至刻度，作為待測溶液。在相同的色譜條件下各進兩針待測液與標準液，通過峰面A積求得待測液的濃度。3(%)=10 xixCxO.IOOOxMAmss

8、i(A樣品對乙酰氨基酚的色譜峰面積A標準對乙酰氨基酚的色譜峰面積C標準對iss乙酰氨基酚的的物質的量濃度M對乙酰氨基酚的相對分子量)標準對乙酰氨基酚峰面積As樣品對乙酰氨基酚的峰面積Ai第一次測量第二次測量參考文獻1張金磊，李海龍分光光度法測定藥品中對乙酰氨基酚含量【J】廣州化工第40卷第18期2012年9月2.楊靜偉劉曉放王瑞紅HPLC法測定外用對乙酰氨基酚凝膠中對乙酰氨基酚的含量【J】黑龍江醫(yī)藥VOL.20NO.320073朱炯孫會敏岳志華田頌九PLC法測定對乙酰氨基酚栓劑中對乙酰氨基酚的含量【J】藥物分析雜志ChinJPharmAnal,2004(4)中國藥典(2010年版二卷)中國醫(yī)藥出版社嚴拯