高效液相色譜法測(cè)定食品中的苯甲酸、山梨酸和糖精鈉

1、高效液相色譜法測(cè)定食品中的苯甲酸、山 梨酸和糖精鈉作者：高明陽來源：現(xiàn)代食品2018年第3期摘 要：用高效液相色譜法對(duì)食品添加劑苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的含量進(jìn)行了測(cè)定，并 對(duì)其加標(biāo)回收率及精密度進(jìn)行分析，以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的可行性。關(guān)鍵詞：苯甲酸；山梨酸；糖精鈉；高效液相色譜；食品安全Abstract： The contents of benzoic acid, sorbic acid and saccharin sodium in food additives weredetermined by high performance liquid chromatography, and the reco

2、very and precision of their addition wereanalyzed to verify the feasibility of the experiment.Key words: Benzoic acid; Sorbic acid; Saccharin sodium; High performance liquid chromatography;Food safety中圖分類號(hào)：O657.72； TS207.3苯甲酸、山梨酸屬有機(jī)酸類防腐劑，酸性條件下，具有廣譜抑菌作用；糖精鈉（鄰苯甲酰 磺酰亞胺鈉），屬人工合成甜味劑，價(jià)格低廉，添加方便，適用范圍廣。若未嚴(yán)格控制

3、添加量， 過量會(huì)對(duì)人體健康造成危害1。本文的實(shí)驗(yàn)采用GB5009.28-2016中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定，選取一般性試樣、含膠基的試樣及高油脂試樣，對(duì) 食品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉進(jìn)行了測(cè)定。1實(shí)驗(yàn)條件1.1主要試劑及標(biāo)準(zhǔn)品試劑：甲醇（色譜純）、亞鐵氰化鉀、乙酸鋅、無水乙醇、正己烷、乙酸銨、氨水。除非 另有說明，分析中僅使用分析純?cè)噭┖虶B/T 6682-2008中規(guī)定的一級(jí)水。標(biāo)準(zhǔn)品（1.00 mg/mL）:苯甲酸、山梨酸和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。1.2試劑溶液及標(biāo)準(zhǔn)溶液配制1.2.1 試劑溶液氨水溶液（1+99）:吸取1 mL氨水至100 mL容量瓶中，用水定容至

4、刻度。亞鐵氰 化鉀溶液（92 g/L）:稱取53 g亞鐵氰化鉀至500 mL容量瓶中，加適量水溶解，用水定容至 刻度。乙酸鋅溶液（183 g/L）:稱取110 g乙酸鋅至500 mL容量瓶中，加適量水溶解，加 入30 mL冰乙酸，用水定容至刻度。1.2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液配制移取濃度為1.0 mg/mL的苯甲酸、山梨酸、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.0 mL至10 mL容量瓶 中用水定容，配制成100.0 Ug/mL的混標(biāo)工作液。在6個(gè)液相小瓶中分別準(zhǔn)確移入1 000.0、990.0、950.0、900.0、800.0、500.0,0.0 UL 的水，再分別準(zhǔn)確移取上述 100.0 ug/mL 的混標(biāo)工作液 0

5、.0、10.0、50.0、100.0、200.0、500.0, 1 000.0 nL 至其中，蓋蓋 搖勻，配制成最終濃度為0.0、1.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100. 0的7種混標(biāo)溶液；另 取2個(gè)液相小瓶分別準(zhǔn)確移入980.0、960.0 uL的水，再分別準(zhǔn)確移取上述10.0 Ug/mL的 混標(biāo)溶液20.0、40.0 uL至其中，蓋蓋搖勻，配制成最終濃度為0.2、0.4 ug/mL的兩種混 標(biāo)溶液。最終得到 0.0、0.2、0.4、1.0、5.0、10.0、20.0、50.0,100.0 ug/mL 共 9 個(gè)濃 度的苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的混標(biāo)溶液，分別注入液相色譜儀中，測(cè)

6、定相應(yīng)峰面積。1.3主要儀器高效液相色譜儀（Agilent Technologies 1260 Infinity ），高速冷凍離心機(jī)，大型超聲 波提取器，隔膜真空泵，多管渦旋振蕩器，分析天平1.4液相色譜條件色譜柱，Agilent ZORBAX SB-C18，5 um，30 C；流動(dòng)相等度，B 泵 5% 甲醇，D 泵 95% 20 mmol/L乙酸銨；流速，1.0 mL/min；進(jìn)樣量，10 uL；檢測(cè)波長(zhǎng)，UV 230 nm。1.5樣品處理1.5.1 一般性試樣（果汁）稱取樣品至50 mL離心管中，加水約25 mL，渦旋混勻，50 C水浴超聲10 min，8 000 r/min離心5 min

7、，上清液移至50 mL容量瓶中。底部殘?jiān)铀?0 mL左右，渦旋混勻，50 C 水浴超聲10 min，8 000 r/min離心5 min，水相移至同一容量瓶中，放冷，用水定容至刻度 線，搖勻，上清液用0.22 um濾膜過濾，待測(cè)。1.5.2含膠基的試樣（果凍）稱取樣品至50 mL離心管中，加水約25 mL，渦旋混勻，70 C水浴超聲10 min，50 C 水浴超聲20 min，8 000 r/min離心5 min，上清液移至50 mL容量瓶中。殘?jiān)铀?0 mL左 右，渦旋混勻，50 C水浴超聲20 min，8 000 r/min離心5 min，水相移至同一容量瓶中，放 冷，用水定容至刻度線

8、，搖勻，上清液用0.22 um濾膜過濾，待測(cè)。素-加所回我反精密度實(shí)員對(duì)果表序號(hào)平均回敏卓海.果汁S3. 11. 91栗襪93.32. n食周油97,51. 7果計(jì)卸93Z2山型酸man93.4&G世用洲實(shí).10. fKI. 72. 13峙精鈉% qOrt100-6a, 21.5.3高油脂試樣（植物油）稱取樣品至50 mL離心管中，加正己烷10 mL，60 C水浴加熱5 min，并不時(shí)振搖， 加氨水溶液（1 + 99） 25 mL、乙醇1 mL，渦旋混勻，50 C水浴超聲20 min，加入亞鐵氰化 鉀溶液2 mL、乙酸鋅溶液2 mL，混勻，10 000 r/min離心10 min，棄去有機(jī)相，

9、水相轉(zhuǎn)移至 50 mL容量瓶。殘?jiān)铀?0 mL左右，渦旋混勻，50 C水浴超聲20 min，10 000 r/min離心 10 min，水相移至同一容量瓶中，放冷，用水定容至刻度線，搖勻，上清液用0.22 um濾膜 過濾，待測(cè)。2加標(biāo)回收及精密度實(shí)驗(yàn)采用果汁、果凍、食用油作為加標(biāo)基質(zhì)，分別在10、50、100 mg/kg 3個(gè)點(diǎn)進(jìn)行3水平加 標(biāo)，每個(gè)點(diǎn)做6個(gè)平行，每個(gè)點(diǎn)的6個(gè)平行數(shù)據(jù)計(jì)算RSD值，選用3個(gè)平行數(shù)據(jù)計(jì)算加標(biāo)回 收率。加標(biāo)回收及精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果，見表1。由表1可知，樣品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的平均回收率為96.5%、92.5%、99.8%。被 測(cè)組分含量10 mg/kg的，RSD W 7.5%；被測(cè)組合含量50 mg/kg和100 mg/kg的，RSD W 5.3%，均符合 GB/T 2