免疫透射比濁實(shí)驗(yàn)-2課件

1、醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)第二次試驗(yàn) 余小艷 （1110150306） 孫志榮 （1110150307） 彭 榮 （1110150308） 陳 超 （1110150309） 賴 娟 （1110150311）免疫透射比濁試驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?通過本實(shí)驗(yàn)了解透射比濁法的基本原理。掌握半自動或全自動生化分析儀的使用。當(dāng)光線通過一個渾濁介質(zhì)溶液時(shí)，由于溶液中存在混濁顆粒，光線被吸收一部分，吸收的多少與混濁顆粒的量成正比，這種測定光吸收量的方法稱為透射比濁法。這一方法早于1959年Schultre和Schuick等報(bào)道應(yīng)用于血漿蛋白與其抗體結(jié)合后形成復(fù)合物，導(dǎo)致濁度的改變，再進(jìn)行透射比濁測定，一般采用抗體對抗原定量的透

2、射比濁法，稱為免疫透射比濁法。實(shí)驗(yàn)原理： 免疫比濁實(shí)驗(yàn)：在一定量的抗體中分別加入遞增量的抗原，經(jīng)一定時(shí)間后形成可溶性免疫復(fù)合物，在PEG作用下可自液相析出，形成微粒，使檢樣濁度發(fā)生變化，用濁度計(jì)測量反應(yīng)液體的濁度，復(fù)合物形成越多濁度越高，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)濁度推算樣品的抗原含量。免疫透射比濁法：可溶性抗原與抗體在比例合適時(shí)形成抗原抗體復(fù)合物，在PEG作用下自液相析出，形成微粒，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過剩時(shí)，形成的復(fù)合物隨抗原量增加而增加，反應(yīng)液濁度亦隨之增加，即反應(yīng)液濁度與其中的抗原量呈正比。3.管號 測IgG 抗體空白管1.PEG-NaF稀釋液（ml） 1.0 1.02抗血清（ul）（效價(jià)1:100） 12.5 3待測血清（ul） 1.0 1.0管號 測IgM 抗體空白管1.PEG-NaF稀釋液（ml） 1.0 1.02.抗血清（ul）（效價(jià)1:100） 12.5 3.待測血清（ul） 10.0 10.0混勻，37水浴30min，340mm波長以抗體空白管調(diào)零，按終點(diǎn)法讀取各管光密度4.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 將標(biāo)準(zhǔn)Ig參考血清稀釋成5個不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)管，按上述操作步驟進(jìn)行，測定各管吸光度，以光密度對濃度進(jìn)行回歸處理，作標(biāo)準(zhǔn)曲線。由測定管A值再計(jì)算出待測血清中的免疫球蛋白的含量。 注意事項(xiàng)測定管的條件和空白管的要相