環(huán)境毒理學(xué)-魚類毒性試驗課件

環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗主要內(nèi)容

前言

目的與要求

實驗原理3

實驗步驟

實驗報告

注意事項75126

實驗材料與實驗條件4環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗1前言

魚類是水生食物鏈的頂級生物，也是水體中最為重要的經(jīng)濟(jì)動物。在污染水體中，當(dāng)污染物達(dá)到一定濃度時，就會引起魚類各種中毒反應(yīng)。在人為控制條件下，進(jìn)行各種魚類毒性實驗，不僅用于化學(xué)品毒性強(qiáng)度測定、水體污染程度、廢水及其處理效果檢查，而且也為制定水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)、評價環(huán)境質(zhì)量和管理廢水排放提供科學(xué)依據(jù)。環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗2目的與要求通過本實驗，熟悉和掌握魚類急性毒性試驗的設(shè)計、條件、操作步驟，以及試驗結(jié)果的計算、分析和報告擬寫等全過程。環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗3實驗原理魚類對環(huán)境反映靈敏引起中毒污染物濃度達(dá)到一定程度行為異常組織細(xì)胞病變生理功能紊亂死亡環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗4實驗材料與實驗條件4.1實驗魚的選擇與馴養(yǎng)對污染物敏感在生態(tài)類群中具有代表性經(jīng)濟(jì)價值比較高來源豐富、取材方便遺傳穩(wěn)定、生物學(xué)背景資料豐富體積大小適中原則在室內(nèi)條件下易于飼養(yǎng)和繁殖斑馬魚是國際上通用的魚類急性毒性實驗魚種。本實驗以斑馬魚為實驗魚。建議的實驗溫度21-25℃，建議實驗魚的全長2.0±1.0cm。試驗前必須馴養(yǎng)（健康選擇）：相同水質(zhì)水溫的水體中至少馴養(yǎng)7d（＜2個月）、每天換水、每天喂食1-2次、試驗前一天應(yīng)停止喂食、馴養(yǎng)期間試驗魚死亡率不得超過5％。環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗4實驗材料與實驗條件4.2實驗儀器設(shè)備（1）實驗容器實驗容器一般用玻璃或其他化學(xué)惰性材質(zhì)制成的水族箱或水槽。容器的深度必須超過16cm，水體表面積越大越好。同一實驗應(yīng)采用相同規(guī)格和質(zhì)量的容器。為防止魚類跳出容器，可在容器上加上網(wǎng)罩。實驗容器使用后，必須徹底洗凈，以除去所有毒性殘留物。（2）其他溶解氧測定儀、溶解氧控制儀、水硬度計、溫度控制儀、pH計、分析天平、分光光度計（六價鉻：二苯碳酰二肼分光光度法）、抄網(wǎng)。環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗4實驗材料與實驗條件4.4實驗用水（稀釋水）高質(zhì)量的自然水標(biāo)準(zhǔn)稀釋水未受污染的清潔水天然湖水、河水或地下水，需要過濾等處理。實驗方法配制環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗4實驗材料與實驗條件4.4實驗用水（稀釋水）溶液中鈣離子和鎂離子的總和是2.5mmol/L。Ca:Mg為4:1，Na:K為10:1。必要時，用氫氧化鈉溶液或鹽酸調(diào)節(jié)pH，使其穩(wěn)定在7.8±0.2。稀釋用水需經(jīng)曝氣直到氧飽和為止，然后儲存?zhèn)溆?，在使用前不必再曝氣。環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗4實驗材料與實驗條件4.5水質(zhì)條件確保試液溫度控制在23℃±1℃水溫實驗液的pH在6.7～8.5為宜pH至少應(yīng)保持在4mg/L以上，不低于空氣飽和值的60%DO水的總硬度為10～250mg/L硬度以96h為宜（至少24h）周期系統(tǒng)承載量為1.0g魚/L溶液負(fù)荷12-16h/d光照環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗5實驗步驟第六頁設(shè)置跨度較大的濃度范圍每個濃度下放入5條魚，靜態(tài)實驗每天記錄魚的死亡率，取出死魚24h全死亡濃度Cm96h無死亡濃度C03~6h后觀察魚類活動異常行為24h、48h、72h、96h后檢查受試魚的狀況實驗結(jié)束測pH、DO溫度、受試物濃度無以上結(jié)果，另取濃度范圍重新實驗C0~Cm間設(shè)5個濃度組每個濃度3個平行實驗每系列一個空白對照實驗開始測pH、DO溫度、受試物濃度，期間日測一次pH、DO、t第一階段——預(yù)處理：為正式實驗確定濃度范圍。第二階段——正式實驗：確定不同溶液濃度和不同培養(yǎng)時間下魚類的死亡率，找出24h、48h、72h、96h時的LC50值。環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗6實驗報告6.1數(shù)據(jù)處理用直線內(nèi)插法或常用統(tǒng)計程序計算出24h、48h、72h、96h的半致死濃度（LC50）值，并計算95％的置信限。如果試驗數(shù)據(jù)不適于計算LC50，可用不引起死亡的最高濃度和引起100％死亡的最低死亡濃度估算LC50的近似值，即這兩個濃度的幾何平均值。環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗6實驗報告6.3實驗報告擬寫在實驗報告中應(yīng)包括：試驗名稱、目的、試驗原理、試驗的準(zhǔn)確起止日期，還有如下幾項：試驗魚：種名、來源、體重、體長、健康和馴化狀況受試物質(zhì)：名稱、來源物化性質(zhì)和保存方法試驗方法及標(biāo)準(zhǔn)稀釋水、儲備液、試驗液的配制方法及性質(zhì)條件：水溫、光照、DO、pH、水質(zhì)、容器形式、負(fù)荷率等實驗開始后24h、48h、72h、96h時的LC50值和95%置信限中毒癥狀、所采用的計算方法及毒性分級試驗報告環(huán)境毒理學(xué)——魚類毒性試驗