MM-FS-CNG-0290食用菌總糖含量測定方法

MM_FS_CNG_0290食用菌總糖含量費(fèi)林氏容量法MM_FS_CNG_0290食用菌總糖含量測定方法適用范圍本方法適用于黑木耳、銀耳和茯苓三類食用菌中總糖的測定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于蛋白質(zhì)含量高的其他菇類（磨菇、香菇、平菇等）中總糖含量的測定。原理概要黑木耳、銀耳和茯苓中水溶性糖和水不溶性多糖經(jīng)熱稀鹽酸徹底水解后轉(zhuǎn)化成還原糖，還原糖可用費(fèi)林氏容量法定量，以此計算出樣品中總糖含量。主要試劑和儀器主要試劑氫氧化鈉；濃鹽酸：密度1.18g／mL；氫氧化鈉溶液：6mol／L；費(fèi)林氏試劑A液：溶解69.28g五水合硫酸銅（CuSO4·5H2O）于水中，定容至1000mL，過濾后備用；B液：溶解346g酒石酸鉀鈉（NaKC4H4O6·4H2O）和100g氫氧化鈉于水中，定容至1000mL，過濾后備用；葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：精確稱取烘干的葡萄糖1.0000g，精確到0.0001g，用水溶解，加入5mL濃鹽酸，再以水配制成10g／L濃度溶液定容至1000mL，成為1gL濃度溶液；次甲基藍(lán)指示液：10g／L。3.2.儀器電熱鼓風(fēng)干燥箱；小型植物粉碎機(jī)：備有 1mm孔徑的金屬篩網(wǎng)；玻璃研缽：備有研杵；分樣篩：備有孔徑 0.84mm（20目）篩子；分析天平：感量 0.0001g；電熱水浴鍋；廣口瓶：帶磨口；濾紙：直徑15cm；玻璃三角漏斗：直徑 75mm；圓底燒瓶：250mL，上部插有作回流用的 30cm長玻璃管；容量瓶：250、1000mL；量筒：100mL；燒杯：25、500mL；錐形瓶：250mL；移液管：5、10、20mL；酸式滴定管：50mL；稱量瓶；廣范pH紙；可調(diào)電爐：0～600W，附石棉網(wǎng)；玻棒和滴管。樣品制備4.1.取樣方法和數(shù)量干制品按GB12530中規(guī)定要求進(jìn)行。總量不得少于 100g。鮮耳和鮮茯苓在每批不同的地方隨機(jī)取樣作為原始樣品，總量不得少于1000g。4.2.試樣的制備干品直接用剪刀剪成小塊，在 80～100℃干燥箱中烘至發(fā)脆后冷卻，立即用小型植物粉碎機(jī)粉碎。棄去開始粉碎出的樣品（約占總樣十分之一）。粉碎過的樣品需過20目篩。未能過篩部分經(jīng)烘干之后再次粉碎或經(jīng)缽內(nèi)研磨之后再次過篩，直至全部樣品過篩為止。過篩后的樣品裝入清潔的廣口瓶內(nèi)。樣品密封后填寫標(biāo)簽，注明品名、日期、交樣單位和取樣人等。鮮耳取樣后用手撕成小塊，鮮茯苓則需去皮后用小刀切成小塊。樣品均勻地攤在干燥箱內(nèi)墊有紗布的鐵絲網(wǎng)上，50℃鼓風(fēng)干燥6h以上，待樣品半干后再逐步提高溫度至80～100℃。樣品發(fā)脆之后冷卻，立即用粉碎機(jī)粉碎。其他操作同干品。過程簡述稱樣和水解：稱取約0.25g試樣，精確到0.0001g，小心地倒入圓底燒瓶中，加100mL水和10mL濃鹽酸。燒瓶瓶口插上回流用的玻璃管，置100℃沸水浴上水解3h。冷卻后過濾。濾渣用100mL水無損地洗回到圓底燒瓶中（用滴管小心地操作），再加酸10mL，重復(fù)上述操作。合并兩次過濾液，用6mol／L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至中性（用pH紙測試），適當(dāng)加熱濃縮后定容至250mL。同時，按GB12531中規(guī)定的方法稱樣并測定試樣的含水量。費(fèi)林氏液的標(biāo)定：準(zhǔn)確吸取費(fèi)林氏A液和B液各5mL于250mL錐形瓶中，混勻，加玻璃珠數(shù)粒，置于石棉網(wǎng)上加熱?？焖購牡味ü苤蟹湃肫咸烟菢?biāo)準(zhǔn)溶液49mL，調(diào)節(jié)溫度，使之在2min內(nèi)沸騰，保持微沸2min，期間加入次甲基藍(lán)指示液3滴；隨后逐滴加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至藍(lán)色褪盡。滴定過程須在3min總沸騰時間內(nèi)完成。10mL費(fèi)林氏混合液需耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液50mL左右。該滴定值為所配制的費(fèi)林試劑標(biāo)定值。在大批樣品測定時，可將A、B液等體積混合后標(biāo)定和使用，混合液保存不宜超過一個月。試樣液的滴定：250mL錐形瓶中加入費(fèi)林 A、B液各5mL，混勻，再加入試樣液10～20mL，加玻璃珠數(shù)粒，置于石棉網(wǎng)上加熱。在正式滴定前，應(yīng)先用一份試樣進(jìn)行粗滴定，一邊加熱一邊逐滴加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，確定出試樣液大致耗糖體積。正式滴定時，錐形瓶加熱后應(yīng)快速從滴定管中放出比實(shí)際少1mL左右的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，其他操作同費(fèi)林氏液的標(biāo)定。6.結(jié)果計算6.1.計算總糖（干基，以葡萄糖計，％）＝ （V0－V1）×0.001×250×100V2×m×（1－X）式中：V0——10mL費(fèi)林氏混合液耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的體積，mL；V1——試樣液滴定時耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的體積，mL；V2——試樣液吸取體積，mL；m——試樣的質(zhì)量，g；0.001——1mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液中葡萄糖質(zhì)量， g；2