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中藥指紋圖譜綜述編輯整理:尊敬的讀者朋友們:這里是精品文檔編輯中心,本文檔內(nèi)容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的,發(fā)布之前我們對(duì)文中內(nèi)容進(jìn)行仔細(xì)校對(duì),但是難免會(huì)有疏漏的地方,但是任然希望(中藥指紋圖譜綜述)的內(nèi)容能夠給您的工作和學(xué)習(xí)帶來便利。同時(shí)也真誠的希望收到您的建議和反饋,這將是我們進(jìn)步的源泉,前進(jìn)的動(dòng)力。本文可編輯可修改,如果覺得對(duì)您有幫助請(qǐng)收藏以便隨時(shí)查閱,最后祝您生活愉快業(yè)績(jī)進(jìn)步,以下為中藥指紋圖譜綜述的全部?jī)?nèi)容。中藥中藥指指紋紋圖譜綜圖述譜摘要:實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化首先要解決的是中藥的現(xiàn)代化質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)問題,其關(guān)鍵就要建立合乎現(xiàn)代科學(xué)要求的“中藥指紋圖譜”。正如國家藥品監(jiān)督管理局任德權(quán)副局長指出,“中藥指紋圖譜的建立已是牽動(dòng)行業(yè)全面進(jìn)步的關(guān)鍵技術(shù),其應(yīng)用研究,對(duì)保證中成藥功效,提高中藥工業(yè)整體水平,帶動(dòng)中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化,推進(jìn)中藥走向世界,具有非常重要的意義。"關(guān)鍵詞:中藥指紋圖譜、測(cè)定、DNA、化學(xué)特征中藥指紋圖譜借用DNA指紋圖譜發(fā)展而來,廣義的中藥指紋圖譜包括中藥材DNA指紋圖譜和中藥材化學(xué)(成分)指紋圖譜,狹義的中藥指紋圖譜僅指后者,是表達(dá)中藥代謝產(chǎn)物化學(xué)特征的指紋圖,包括光譜、波譜和色譜指紋圖.色譜指紋圖譜發(fā)展最早,也是迄今為止最為重要的指紋圖譜。按謝培山先生的定義〔,中藥色譜指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒別手段,是當(dāng)前符合中藥特色的評(píng)價(jià)中藥真實(shí)性、穩(wěn)定性和一致性的質(zhì)量控制模式之一。整體性和模糊性是它的基本屬性。色譜指紋圖譜應(yīng)滿足專一性(或稱唯一性)、重現(xiàn)性和實(shí)用性的技術(shù)要求[1]。中藥生產(chǎn)的原材料,因土壤、氣候等環(huán)境因素及采收加工的不同,實(shí)際使用時(shí)不能保證藥材質(zhì)量的穩(wěn)定,經(jīng)加工提取得到的中間體,每個(gè)批次在成分含量、成分組成及各成分比例方面都不能保持一致[2]。因此對(duì)中藥原材料、中間體及成方制劑的質(zhì)量控制在中藥的應(yīng)用上占據(jù)著很主要的位置。中藥指紋圖譜借用了法醫(yī)學(xué)上指紋鑒定的概念,對(duì)中藥的化學(xué)信息以現(xiàn)代分析技術(shù)給予表征并加以描述,全面反映中藥內(nèi)在化學(xué)成分的種類與數(shù)量,對(duì)判斷中藥真?zhèn)蝺?yōu)劣,控制中藥原材料、中間體及成品的質(zhì)量,減少批間差異,并最終控制成品的質(zhì)量起到了極其重要的作用。國家食品藥品監(jiān)督管理局在《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術(shù)要求》中對(duì)原料藥(中藥材)指紋圖譜的定義是:“中藥材指紋圖譜系指中藥材經(jīng)適當(dāng)處理后,采用一定的分析手段,得到的能夠標(biāo)示該藥材特性的共有峰的圖譜”;中藥注射液指紋圖譜的定義是:“中藥注射劑指紋圖譜系指中藥注射劑經(jīng)適當(dāng)處理后,采用一定的分析手段,得到的能夠標(biāo)示該注射劑特性的共有峰的圖譜”。根據(jù)以上定義,則所有中藥的指紋圖譜系指某種(或某產(chǎn)地)中藥材或中成藥經(jīng)適當(dāng)處理后,采用一定的分析手段,得到的能夠標(biāo)示該中藥材或中成藥特性的共有峰的圖譜[3]。中藥指紋圖譜綜述中藥指紋圖譜綜述中藥指紋圖譜的特點(diǎn):①通過指紋圖譜的特異性,能有效鑒別樣品的真?zhèn)位虍a(chǎn)地;②通過指紋圖譜主要特征峰的含量或比例的制定,能有效控制樣品的質(zhì)量,確保質(zhì)量的相對(duì)穩(wěn)定。中藥指紋圖譜有2個(gè)基本屬性:整體性和模糊性。所謂整體性,是指要把所得指紋圖譜作為一個(gè)整體進(jìn)行評(píng)價(jià),而不是孤立地看其中單個(gè)峰的有無、高低來判斷藥材或成藥的質(zhì)量;而模糊性是指?jìng)€(gè)體樣品本身就存在著差異,難以精確地進(jìn)行測(cè)量,絕大多數(shù)的指紋圖譜本身就存在著模糊性,不能保證所得的指紋圖譜中每個(gè)峰都沒有重疊,而且也不能保證所得的圖譜包含了樣品的所有特征,只要能圈定圖譜中關(guān)鍵部分就可對(duì)樣品進(jìn)行質(zhì)量控制[4].中藥指紋圖譜的分類:(1)按指紋圖譜的測(cè)定對(duì)象分類:中藥材(原料藥材)指紋圖譜:中藥品種混雜,歷史上形成的同名異物的情況比較多見。同一物種由于產(chǎn)地環(huán)境或季節(jié)氣候的影響所含有的成分也往往相差很大,因而建立中藥材化學(xué)指紋圖譜要充分考慮到上述因素,制訂較為寬松合理的指紋圖譜。中藥原料藥(包括飲片、配方顆粒)指紋圖譜:對(duì)中藥飲片指紋圖譜的要求基本和中藥材指紋圖譜相同.對(duì)中藥配方顆粒(包括標(biāo)準(zhǔn)提取物)指紋圖譜的要求可以稍高一些.應(yīng)鼓勵(lì)生產(chǎn)廠家采用標(biāo)準(zhǔn)提取工藝,嚴(yán)格控制操作參數(shù),并對(duì)原藥材采取“混批勾兌”的作法,建立相對(duì)穩(wěn)定的指紋圖譜。林文艷等采用RP-HPLC法,建立市售的11批板藍(lán)根飲片的指紋圖譜,發(fā)現(xiàn)其特征共有峰有12個(gè)[5]。王麗莉等建立了麻黃湯配方顆粒劑的HPLC指紋圖譜,通過與傳統(tǒng)湯劑進(jìn)行比較,為顆粒劑的可行性及合理性提供依據(jù)[6]。中藥制劑指紋圖譜:中藥制劑指紋圖譜穩(wěn)定性取決于生產(chǎn)工藝全過程。將原藥材投料改為提取物投料,嚴(yán)格控制工藝流程等都是有效的方法。傅萍等分別以ELSD和UVD為檢測(cè)器,建立了注射用血塞通、血栓通注射液及注射用血脈通的HPLC的指紋圖譜.(2)按指紋圖譜的測(cè)定方法分類:從方法學(xué)角度來說,中藥指紋圖譜主要包括色譜法如薄層色譜(TLC)、高效液相色譜(HPLC)、氣相色譜(GC)、高效毛細(xì)管電泳(CE)和高速逆流色譜(HSCCC)等,其中HPLC為其主流方法;光譜法如紅外光譜(IR)和紫外-可見光譜(U-Vis)以及核磁共振譜(NMR)和色譜聯(lián)用技術(shù)如液相色譜一質(zhì)譜(LC—MS)和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)等.色譜法和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是目前實(shí)用性較強(qiáng)、研究較多的中藥指紋圖譜信息獲取技術(shù),利用色譜指紋圖譜技術(shù),結(jié)合計(jì)算機(jī)智能信息處理,可以對(duì)中藥進(jìn)行比較全面的質(zhì)量評(píng)價(jià)[7]。(3)按指紋圖譜在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)中的應(yīng)用不同進(jìn)行分類:中藥化學(xué)指紋圖譜:中藥化學(xué)指紋圖譜通過藥材中各色譜峰的峰面積或峰高比值來確定樣品中化學(xué)成分的相對(duì)量,并結(jié)合數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法通過相似度的比較來評(píng)價(jià)中藥材或制劑質(zhì)量的優(yōu)劣[8]。多指標(biāo)成分定量指紋圖譜是在中藥化學(xué)指紋圖譜基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種分析方法,它兼具化學(xué)指紋圖譜的整體定性優(yōu)勢(shì)和指標(biāo)成分的定量分析功能,綜合表征了中藥方劑的整體定性質(zhì)量特征和特異性成分的定量質(zhì)量特征,尤其是對(duì)于組成極其復(fù)雜的中藥復(fù)方,或有效成分的指紋信息不突出甚至缺失的情況下,多指標(biāo)成分定量指紋圖譜技術(shù)具有尤其重要的意義,其在一定程度上彌補(bǔ)了傳統(tǒng)化學(xué)指紋圖譜定性分析方法的不足,在中藥質(zhì)量控制領(lǐng)域中具有良好的應(yīng)用前景。果德安課題組在對(duì)丹參藥材及其復(fù)方制劑的質(zhì)控研究中,首先建立了丹參色譜指紋圖譜,并在指紋譜中指認(rèn)了17個(gè)酚酸類成分和17個(gè)丹參酮類成分,進(jìn)一步對(duì)藥材及制劑進(jìn)行了多指標(biāo)成分定量分析,采用不同的色譜條件,定量分析了6個(gè)酚酸類成分和4個(gè)丹參酮類成分,并將該方法成功地用于控制丹參藥及其4種不同制劑的質(zhì)量[9].中藥譜效關(guān)系指紋圖譜:中藥譜效關(guān)系指紋圖譜是在中藥化學(xué)指紋圖譜、藥效物質(zhì)成分鑒定和中藥藥效活性測(cè)定的基礎(chǔ)上,充分利用現(xiàn)代化學(xué)與生物信息學(xué)研究的成果,開展指紋圖譜信息與藥效活性信息的相關(guān)性研究,以實(shí)現(xiàn)中藥化學(xué)指紋圖譜向中藥藥效組分指紋圖譜的轉(zhuǎn)化,從而建立中藥指紋圖譜組效學(xué)研究體系.其核心任務(wù)是研究特征化學(xué)成分與生物活性相關(guān)的量效關(guān)系[10]。中藥譜效關(guān)系的研究彌補(bǔ)了目前以化學(xué)指紋圖譜控制中藥質(zhì)量時(shí)與藥效脫鉤的不足,可為中藥質(zhì)量控制提供更為科學(xué)有效的數(shù)據(jù).周立艷等采用HPLC法建立了牡丹皮活血化瘀部位的藥效指紋圖譜。中藥生物指紋圖譜:中藥生物指紋圖譜是利用基因組學(xué)和蛋白組學(xué)技術(shù)研究藥材基因型特征和中藥作用于特定生物細(xì)胞后引起基因和蛋白表達(dá)的變化規(guī)律和作用機(jī)制,從分子水平上揭示中藥與生物細(xì)胞作用后的基因與蛋白表達(dá)特征.主要包括中藥基因組學(xué)指紋圖譜、中藥蛋白組學(xué)指紋圖譜和中藥材DNA指紋圖譜。此外,還包括反映藥材內(nèi)部組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀的中藥顯微圖譜,即生物物理圖譜.利用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA法(RAPD)和多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)測(cè)序技術(shù)(AP—PCR),從不同生物樣品中人工合成DNA片段,而這種DNA片段的大小、數(shù)目因不同的生物而異,故又稱之為DNA指紋圖譜[⑴。由于DNA分子標(biāo)記直接分析的是生物的基因型而非表現(xiàn)型,鑒別結(jié)果不受環(huán)境因素、樣品形態(tài)和材料來源的影響,因此可為中藥鑒定提供更加準(zhǔn)確可靠的手段。陶鈞等運(yùn)麻APD技術(shù)測(cè)定了天麻的DNA指紋圖譜,其研究成果為天麻基因組DNA的開發(fā)與利用提供了科學(xué)依據(jù),可應(yīng)用于天麻種群的遺傳分類。中藥基因組學(xué)指紋圖譜和中藥蛋白組學(xué)指紋圖譜系指用中藥制劑作用于某種特定細(xì)胞或動(dòng)物后,引起的基因和蛋白的復(fù)雜的變化情況,這兩種指紋圖譜可稱為生物活性指紋圖譜。王志安等運(yùn)用AFLP分子標(biāo)記技術(shù)建立了白術(shù)種質(zhì)的基因指紋圖譜,為白術(shù)種質(zhì)保存和育種提供了依據(jù)。中藥代謝指紋圖譜:眾所周知,藥物進(jìn)入人體后會(huì)經(jīng)過一系列的生物轉(zhuǎn)化過程,在體內(nèi)真正起效的成分可能是原型化合物也可能是其代謝產(chǎn)物。因此,中藥代謝指紋圖譜的研究越來越受到重視。代謝指紋圖譜反映的是機(jī)體狀況的分子集合與其功能之間的關(guān)系,其整體反應(yīng)性特點(diǎn)與中醫(yī)藥治療疾病的觀念相吻合。應(yīng)用代謝指紋圖譜尋找中藥效應(yīng)成分的基本思路是運(yùn)用LC—MS、LC-NMR等技術(shù),比較藥物提取物化學(xué)指紋圖譜與生物體液代謝指紋圖譜(如血液、尿液等),發(fā)現(xiàn)代謝產(chǎn)物(內(nèi)源性和外源性)與原型成分,通過代謝產(chǎn)物與原型成分組和量的經(jīng)時(shí)變化,借助于化學(xué)計(jì)量學(xué)和多元統(tǒng)計(jì)分析等手段,找出與療效相關(guān)的生物標(biāo)示物(組),鑒定其結(jié)構(gòu),找出其在中藥提取物中的“關(guān)聯(lián)”成分(群),該成分(群)即為中藥特定的效應(yīng)成分。阮毅銘采用HPLC—MS對(duì)中藥穿心蓮的代謝產(chǎn)物進(jìn)行研究,從而制定與生物有效性相關(guān)聯(lián)的穿心蓮化學(xué)成分指紋圖譜[⑵。吳秀君等建立了中藥注射劑腦血寧的HPLC指紋圖譜,通過鑒定給藥后血清中的主要化學(xué)成分并對(duì)主要化學(xué)成分的藥物動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了初步的研究,其結(jié)果將有利于闡明腦血寧注射液體內(nèi)發(fā)揮療效的真正物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制[13]。加強(qiáng)中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究是實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的必要前提。以現(xiàn)代分析技術(shù)為依托的指紋圖譜分析是現(xiàn)階段可行的中藥質(zhì)量控制模式.但是,中藥指紋圖譜并不是萬靈的,發(fā)揮其質(zhì)控作用有前提條件。實(shí)施中藥種植與加工的規(guī)范化(GAP與GMP),是獲得合格指紋圖譜的先決條件。以一張譜圖對(duì)中藥做真?zhèn)蝺?yōu)劣的全面鑒定是不大可靠的,中藥指紋圖譜分析需要分級(jí)多譜鑒定,即對(duì)不同產(chǎn)地的樣品分別做不同部位、不同采集時(shí)間的鑒定,對(duì)同一部位要盡可能地做各種提取物的多譜分析,如水溶性成分、脂溶性成分的LC指紋圖譜和揮發(fā)性成分的GC指紋圖譜.中藥指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)涉及的問題范圍廣、數(shù)量多,它的完善及其在全行業(yè)的推廣應(yīng)用不是一蹴而就的,還會(huì)碰到方方面面的問題.中藥指紋圖譜將隨著人們認(rèn)識(shí)的深化、分析技術(shù)的快速發(fā)展和計(jì)算機(jī)功能的日益強(qiáng)大以及中藥藥理、生化和臨床研究與中醫(yī)理論的逐漸逼近和融合做到譜效結(jié)合。雖然國際上有很多國家早已將指紋圖譜用于植物藥質(zhì)量控制,但像我們國家這樣大規(guī)模地、成系統(tǒng)地、深入地進(jìn)行研究,卻是不多見的。我們有理由相中藥指紋圖譜綜述信,中藥指紋圖譜技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,必將為中藥現(xiàn)代化及中醫(yī)藥走向世界發(fā)揮重要的作用,同時(shí)也將帶來豐厚的經(jīng)濟(jì)效益和良好的社會(huì)效益。中藥指紋圖譜綜述參考文獻(xiàn)[1]柴逸峰,羅國安,黃晟,等.知母藥材高效液相指紋圖譜研究[J]。分析試驗(yàn)室,2005,24(7):1-6。黃際薇,李瑞珍,劉杰,等。黃芪藥材HPLC指紋圖譜研究[J藥,2005,27(11):1244—1246.黎瓊紅,張國剛,徐世義,等。丹參藥材脂溶性成分的HPLC指紋圖譜[J]。沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,23(1):22-25,52。[4]于建東,楊青,王鋼力,等.HPLC法測(cè)定柴胡中柴胡皂苷的含量及皂苷類成分指紋圖譜初步研究[」]。中國中醫(yī)藥信息雜志,2004,11(2):137-138.[5]黃晟,張國慶,婁子洋,等.虎杖藥材高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜研究[J]。藥物分析雜志,2006,26(1):2—26.[6]聶磊,胡震,羅國安,等.中藥指紋圖譜的融合技術(shù)[J].分析化學(xué),2005,33(6):898.[7]劉永鎖,曹敏,陳玉英,等.中藥材提取物的混批勾兌研究“]。色譜,2006,24(2):117-121.朱海容,宋磊.淺談近幾年中藥炮制的研究進(jìn)展[J].中華實(shí)用中西醫(yī)雜志,2006,19(16):1996—1997.田潤濤,謝培山。色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)方法的規(guī)范化研究(一)[J]。中藥新藥與臨床藥理,2006,17(1):40—42,1
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