(完整)HCV-抗體檢測(cè)介紹ppt

丙型肝炎—面臨的挑戰(zhàn)全球性的公共衛(wèi)生的問題肝臟疾病的最重要的原因全球性流行性疾病不確定的傳播方式輸血，不潔注射，母嬰傳播，醫(yī)源性感染，性傳播等30%感染者感染途徑不明“隱匿”的殺手50-90%感染者無癥狀>30%感染者ALT正常通常在篩查中發(fā)現(xiàn)進(jìn)行性疾病55-85%的感染者會(huì)發(fā)展為慢性感染丙型肝炎—面臨的挑戰(zhàn)全球性的公共衛(wèi)生的問題1HCV病毒學(xué)特征黃病毒屬1有衣殼蛋白包裹2

已知6種基因型，>80個(gè)亞型3病毒基因組具有高度變異性3形成不同基因構(gòu)成的病毒亞群或準(zhǔn)種1,4增殖速度：1012個(gè)/天21.PurcellR.NIHConsensusConferenceonHepatitisC.1997;2.NeumannA,etal.Science1998;282:103;3.LauerG&WalkerB.NEnglJMed2001;345:41;4.HoofnagleJ.NIHConsensusConferenceonHepatitisC.1997衣殼

RNA基因組病毒顆粒核心蛋白HCV病毒學(xué)特征黃病毒屬11.PurcellR.NIH2中國丙肝臨床報(bào)告病例逐年遞增中國衛(wèi)生部公告.莊輝.2012世界肝炎日全國丙肝專題會(huì)議.

中國目前約有1000萬例丙肝感染者中國丙肝臨床報(bào)告病例逐年遞增中國衛(wèi)生部公告.莊輝.203臨床報(bào)告病例僅是總體患者的冰山一角中國目前約有1000萬例HCV感染者中國衛(wèi)生部公告.莊輝.2012世界肝炎日全國丙肝專題會(huì)議.

超過90%的HCV感染者尚未被發(fā)現(xiàn)歷年報(bào)告臨床病例總和<100萬例臨床報(bào)告病例僅是總體患者的冰山一角中國目前約有1000萬例H4HCV特征決定

準(zhǔn)確的檢測(cè)是疾病管理最重要防線病毒基因組具有高度變異性目前尚無預(yù)防性疫苗HCV在體外持久的穩(wěn)定性丙肝患者體液污染的器械具有很強(qiáng)的傳染性對(duì)于Anti-HCV篩查陽性者應(yīng)及早確診、規(guī)范治療HCV特征決定

準(zhǔn)確的檢測(cè)是疾病管理最重要防線病毒基因組具有5HCV感染診斷實(shí)驗(yàn)的選擇

方法篩查確診療程療效的評(píng)估持久性應(yīng)答預(yù)測(cè)ALT※Anti-HCV※RIBA※HCV

RNA※※※※HCV基因分型※HCV感染診斷實(shí)驗(yàn)的選擇

方法篩查確診療程療效的評(píng)估持久性應(yīng)6Anti-HCV是HCV感染篩查的指標(biāo)

80%急性感染進(jìn)展為慢性感染Anti-HCV是HCV感染篩查的指標(biāo)80%急性感染進(jìn)展為7Anti-HCV的漏檢和假陽性

是困擾實(shí)驗(yàn)室問題之一Anti-HCV的漏檢和假陽性

是困擾實(shí)驗(yàn)室問題之一8

Anti-HCV確認(rèn)陽性*+-Anti-HCV+9999(TP)9900(FP)PPV=9999/(9999+9900)=50.25%-1(FN)980100(TN)NPV=989,010/(1+989,010)=99.9999%感染者10,000未感染990,000靈敏度=99.99%特異性=99%prevalence=1%在低感染人群，假陽性不可忽略

1%的感染率，如特異性99%，PPV只有50%Anti-HCV確認(rèn)陽性*+-Anti-HCV+9999

抗-HCV篩查檢測(cè)報(bào)告陰性或根據(jù)S/Co比值判定為陽性所有陽性結(jié)果高S/Co比值陽性*報(bào)告低S/Co比值陽性*RIBAHCV檢測(cè)或陽性報(bào)告陰性報(bào)告不確定報(bào)告陽性陰性RIBAHCV檢測(cè)HCVRNA的NAT檢測(cè)陽性報(bào)告陰性報(bào)告不確定報(bào)告報(bào)告美國CDCAnti-HCV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告導(dǎo)則11，MiriamJ.Alteretal-GuidelinesforLaboratoryTestingandResultReportingofAntibodytoHepatitisCVirus抗-HCV篩查檢測(cè)報(bào)告陰性或根據(jù)S/Co比值判定10RIBA（以Chiron為例）

兩個(gè)以上條帶（＞1+）為陽性RIBA（以Chiron為例）兩個(gè)以上條帶（＞1+）為陽11Anti-HCV檢測(cè)靈敏度也是不能忽略<==窗口期==>（70天）DNA陽性3rdgen1stgen2ndgen不同的3rd試劑Anti-HCV檢測(cè)靈敏度也是不能忽略<==窗口期==>12第三代試劑之間也有明顯差異

2006Hep/RetroSymposiumIIIWashingtonD.C.,24-26September2006第三代試劑之間也有明顯差異13Anti-HCV有反應(yīng)性進(jìn)一步結(jié)果解釋Anti-HCV有反應(yīng)性RIBA（+）

Anti-HCV有反應(yīng)性HCVRNA（+）

Anti-HCV確認(rèn)陽性Anti-HCV確認(rèn)陰性CDC，GuidelinesforLaboratoryTestingandResultReportingofAntibodytoHepatitisCVirus

2003Anti-HCV有反應(yīng)性RIBA（-）；Anti-HCV有反應(yīng)性HCVRNA(-）/RIBA（-）HCVRNA（-）/RIBAIND視為低風(fēng)險(xiǎn)Anti-HCV有反應(yīng)性進(jìn)一步結(jié)果解釋Anti-HCV有反14Anti-HCV有反應(yīng)性進(jìn)一步結(jié)果解釋HCV有反應(yīng)性RNA(-)仍需要進(jìn)行RIBA

確認(rèn)，尤其是低流行區(qū)域根據(jù)流行率的確認(rèn)流程流行率<10%先RIBA，后RNA最經(jīng)濟(jì)

流行率>20%先RNA，后RIBA最經(jīng)濟(jì)流行率10-25%兩者方案，費(fèi)用相當(dāng)CDC，GuidelinesforLaboratoryTestingandResultReportingofAntibodytoHepatitisCVirus

2003Anti-HCV有反應(yīng)性進(jìn)一步結(jié)果解釋HCV有反應(yīng)性15

臨床需要高性能的檢測(cè)試劑假陽性不必要的補(bǔ)充確認(rèn)檢測(cè)不必要的就診和心理傷害醫(yī)療糾紛假陰性傳播擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)醫(yī)療安全風(fēng)險(xiǎn)延誤病情臨床需要高性能的檢測(cè)試劑假陽性假陰性16CE1E2NS2NS3NS4NS5ANS5B5′UTR結(jié)構(gòu)蛋白非結(jié)構(gòu)蛋白3′UTRa)b)

對(duì)于HCV病毒認(rèn)知的深入使檢測(cè)試

劑性能逐漸提高聚合酶抑制劑NS5A抑制劑蛋白酶抑制劑新藥物診斷試劑Core蛋白和NS3蛋白的免疫原性最強(qiáng)，是抗體檢測(cè)最重要組份；CE1E2NS2NS3NS4NS5ANS5B5′UTR結(jié)構(gòu)蛋17第三代Anti-HCV檢測(cè)試劑

精選抗原靶位，提升檢測(cè)性能NS3/Core抗體出現(xiàn)最早NS3抗原在早期診斷和提高靈敏度上都均有重要價(jià)值，提高NS3抗原的配比Core抗原中的N端保守區(qū)域易產(chǎn)生交叉反應(yīng)，適度減少Core抗原的配比隨著重組技術(shù)的進(jìn)展，使原料抗原的活性更強(qiáng)

各種抗原的配比調(diào)整第三代Anti-HCV的平均窗口期是6-8周；NS3和Core抗體要早于NS4和NS5抗體數(shù)周時(shí)間第三代試劑中加入Core，NS3，NS4（部分廠家加入NS5)抗原。

第三代Anti-HCV檢測(cè)試劑

精選抗原靶位，提升檢測(cè)性能18影響試劑性能的主要因素

各種抗原的配比平衡增加NS3抗原，同時(shí)減少核心區(qū)抗原益處：提升靈敏度減少了非特異性反應(yīng)挑戰(zhàn)：“度”的把握掌握不好，容易漏檢

抗原的選擇和生產(chǎn)工藝HCV病毒缺乏有效體外培養(yǎng)系統(tǒng)，難以從病毒中分離出天然抗原；生產(chǎn)的抗原材料與天然抗原的接近度越高，試劑性能越好。NS3是構(gòu)像依賴性抗原，需要使用重組抗原不同批次間抗原的均一性非常重要；NS4/Core抗原通常使用合成多肽抗原；影響試劑性能的主要因素各種抗原的配比平衡增加NS3抗19了解試劑性能，

是放心應(yīng)用的前提！了解試劑性能，

是放心應(yīng)用的前提！20Elecsys?Anti-HCVII

雙抗原夾心法，18分鐘Elecsys?Anti-HCVII

雙抗原夾心法，1821Elecsys?Anti-HCVII全面升級(jí)

viral(+)RNAgenomeviralpolyproteinCE1E2NS1NS2NS3NS4ANS4BNS5ANS5Bstructuralproteinsnon-structuralproteins合成肽合成肽重組抗原New!新的試劑緩沖液 減少干擾增強(qiáng)試劑的穩(wěn)定性應(yīng)用Core，NS3，NS4抗原片段不再應(yīng)用NS5（對(duì)于靈敏度提升有限但是會(huì)降低檢測(cè)特異性）Elecsys?Anti-HCVII全面升級(jí)

vir22Elecsys?Anti-HCVII多中心評(píng)估評(píng)估單位評(píng)估內(nèi)容1st:多中心研究北京大學(xué)人民醫(yī)院（Elecsys/Vitros/Architect）上海交通大學(xué)新華醫(yī)院（Elecsys/Vitros）四川大學(xué)華西醫(yī)院

(Elecsys/Lizvon/Intec)2nd:特殊樣本的評(píng)估衛(wèi)生部臨檢中心（多種方法）靈敏度血清轉(zhuǎn)換盤樣本日常檢測(cè)陽性樣本臨檢中心早期感染樣本特異性實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)樣本確認(rèn)方法：MIKROGEN?RIBAHCVCHIRON?Cobas?TaqmanHCVRNAElecsys?Anti-HCVII多中心評(píng)估評(píng)估單位評(píng)23應(yīng)用血清轉(zhuǎn)換盤評(píng)估靈敏度

Elecsys?Anti-HCVII靈敏度最高應(yīng)用血清轉(zhuǎn)換盤評(píng)估靈敏度

Elecsys?Anti-HCV24血清轉(zhuǎn)換盤是客觀評(píng)價(jià)早期感染靈敏度的標(biāo)準(zhǔn)血清轉(zhuǎn)換盤是客觀評(píng)價(jià)早期感染靈敏度的標(biāo)準(zhǔn)25常規(guī)樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院(n=830)

樣本數(shù)N=830Elecsys?Anti-HCVIIVitros?Anti-HCVArchitect?Anti-HCV陽性真陽性17171716假陰性001陰性真陰性813809805805假陽性488統(tǒng)計(jì)靈敏度100%100%94%特異性*99.50%99.02%99.02%陽性率2%*RIBA不確定+RNA(-)結(jié)果解釋為陰性

常規(guī)樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院(n=830)

樣本數(shù)E26常規(guī)樣本的評(píng)估

上海交通大學(xué)新華醫(yī)院（n=495)

樣本數(shù)N=495Elecsys?Anti-HCVIIVitros?Anti-HCV陽性真陽性111假陰性00陰性真陰性494494492假陽性02統(tǒng)計(jì)靈敏度100%100%特異性*100%99.60%陽性率0.2%

*沒有HCVRNA結(jié)果,排除RIBA不確定樣本常規(guī)樣本的評(píng)估

上海交通大學(xué)新華醫(yī)院（n=495)

樣本數(shù)27常規(guī)樣本的評(píng)估

四川大學(xué)華西醫(yī)院(n=1044)

樣本數(shù)N=1044Elecsys?Anti-HCVIIElecsys?Anti-HCVIntec?Anti-HCVLizvon?Anti-HCV陽性真陽性88877假陰性8811陰性真陰性10361034102210361034假陽性21402統(tǒng)計(jì)靈敏度100%100%88%88%特異性*99.8198.64%100%99.81%陽性率0.8%*沒有HCVRNA結(jié)果,排除RIBA不確定樣本常規(guī)樣本的評(píng)估

四川大學(xué)華西醫(yī)院(n=1044)

樣本數(shù)28預(yù)選樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院（n=67)

RIBA不確定樣本的RNA結(jié)果均為(-)低S/CO樣本中20%是真正陽性入選:Vitros(+)S/CO<8預(yù)選樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院（n=67)

RIBA29預(yù)選樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院（n=67)

靈敏度：92%特異性*：93%靈敏度：92%特異性*：63%*RIBA不確定+RNA(-)結(jié)果解釋為陰性

預(yù)選樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院（n=67)

靈敏30早期感染樣本的靈敏度評(píng)估1

方法Elecsysanti-HCVIIABCDEFG有反應(yīng)性11092989291868687靈敏率87.2%69.2%76.7%69.2%68.4%64.7%64.7%65.4%具體樣本組成RIBA（+）99RNA（+）121RNA(-)&RIBA(+)RNA(+)&RIBA(+)RIBA(-)/IND&RNA(+)1287341衛(wèi)生部臨檢中心評(píng)估數(shù)據(jù)HCVRNA和/或RIBA陽性（n=133)早期感染樣本的靈敏度評(píng)估1

方法ElecsysABCDEF31NEnglJMed2001;345:41;4.A：檢測(cè)RNA,RNA陰性視為Anti-HCV檢測(cè)假陽性NEnglJMed2001;345:41;4.應(yīng)用Core，NS3，NS4抗原片段1衛(wèi)生部臨檢中心評(píng)估數(shù)據(jù)（Elecsys/Vitros）RNA&RIBA陰性（n=307)不再應(yīng)用NS5（對(duì)于靈敏度提升有限但是會(huì)降低檢測(cè)特異性）影響試劑性能的主要因素anti-HCVII第三代Anti-HCV檢測(cè)試劑

精選抗原靶位，提升檢測(cè)性能先RIBA，后RNA最經(jīng)濟(jì)第三代試劑中加入Core，NS3，NS4（部分廠家加入NS5)抗原。Anti-HCVII美國CDCAnti-HCV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告導(dǎo)則1HCV感染診斷實(shí)驗(yàn)的選擇1-S/CO第三代Anti-HCV檢測(cè)試劑

精選抗原靶位，提升檢測(cè)性能特異性評(píng)估1

方法Elecsysanti-HCVIIABC有反應(yīng)性2213842無反應(yīng)性305286269265特異性99.35%93.16%87.62%86.32%方法Elecsysanti-HCVIIABC有反應(yīng)性3411611477無反應(yīng)性385303315342特異性91.89%72.23%75.18%81.63%1衛(wèi)生部臨檢中心評(píng)估數(shù)據(jù)RNA&RIBA陰性（n=307)RNA陰性&RIBA不確定(n=419)NEnglJMed2001;345:41;4.32判定真陽性的Cutoff的初步分析1

基于全部1072例/243例確認(rèn)陽性樣本

方法S/COn>S/CO假陽性真陽性率S/COn1-S/CO

假陽性真陽性率Elecsys1>5068593%1-501754674%>4587990%1-451564472%>401101091%1-401334368%>301441490%1-30993661%VITROS2>882890%1-818913031%VITROS文獻(xiàn)3>20可以確定陽性感染>893%3LaiKK,JinM,YuanS，etal.ImprovedreflexivetestingalgorithmforhepatitisCinfectionusingsignal-to-cutoffratiosofahepatitisCvirusantibodyassay.ClinChem.2011;57(7):1050-6.1衛(wèi)生部臨檢中心評(píng)估數(shù)據(jù)；2

兩種方法基于基本相同樣本的分析；判定真陽性的Cutoff的初步分析1

基于全部1072例/33總結(jié)應(yīng)該對(duì)目前使用的方法與試劑有充分的了解應(yīng)選用高靈敏性的HCV初篩的抗體檢測(cè)方法，減少漏檢關(guān)注特異性，采取正確的檢測(cè)策略，減少假陽性

先RIBA后核酸的方式更適合低流行區(qū)域中國的感染狀態(tài)復(fù)雜在低S/CO的人群中，有近20%比例是可以確認(rèn)陽性的高于美國CDC推薦S/CO的樣本，是否可以達(dá)到95%的特異性，尚需針對(duì)中國人群樣本的分析總結(jié)34致謝衛(wèi)生部臨檢中心王露楠教授北京大學(xué)人民醫(yī)院楊瑞峰魏來教授上海交通大學(xué)新華醫(yī)院劉洪景沈立松教授四川大學(xué)華西醫(yī)院陶傳敏教授致謝衛(wèi)生部臨檢中心35問題1Anti-HCV檢測(cè)有反應(yīng)性的樣本確認(rèn)的流程下列哪個(gè)是正確的？A：檢測(cè)RNA,RNA陰性視為Anti-HCV檢測(cè)假陽性B：檢測(cè)RIBA，RIBA陰性視為Anti-HCV檢測(cè)假陽性問題1Anti-HCV檢測(cè)有反應(yīng)性的樣本確認(rèn)的流程下列哪36謝謝觀看謝謝觀看37丙型肝炎—面臨的挑戰(zhàn)全球性的公共衛(wèi)生的問題肝臟疾病的最重要的原因全球性流行性疾病不確定的傳播方式輸血，不潔注射，母嬰傳播，醫(yī)源性感染，性傳播等30%感染者感染途徑不明“隱匿”的殺手50-90%感染者無癥狀>30%感染者ALT正常通常在篩查中發(fā)現(xiàn)進(jìn)行性疾病55-85%的感染者會(huì)發(fā)展為慢性感染丙型肝炎—面臨的挑戰(zhàn)全球性的公共衛(wèi)生的問題38HCV病毒學(xué)特征黃病毒屬1有衣殼蛋白包裹2

已知6種基因型，>80個(gè)亞型3病毒基因組具有高度變異性3形成不同基因構(gòu)成的病毒亞群或準(zhǔn)種1,4增殖速度：1012個(gè)/天21.PurcellR.NIHConsensusConferenceonHepatitisC.1997;2.NeumannA,etal.Science1998;282:103;3.LauerG&WalkerB.NEnglJMed2001;345:41;4.HoofnagleJ.NIHConsensusConferenceonHepatitisC.1997衣殼

RNA基因組病毒顆粒核心蛋白HCV病毒學(xué)特征黃病毒屬11.PurcellR.NIH39中國丙肝臨床報(bào)告病例逐年遞增中國衛(wèi)生部公告.莊輝.2012世界肝炎日全國丙肝專題會(huì)議.

中國目前約有1000萬例丙肝感染者中國丙肝臨床報(bào)告病例逐年遞增中國衛(wèi)生部公告.莊輝.2040臨床報(bào)告病例僅是總體患者的冰山一角中國目前約有1000萬例HCV感染者中國衛(wèi)生部公告.莊輝.2012世界肝炎日全國丙肝專題會(huì)議.

超過90%的HCV感染者尚未被發(fā)現(xiàn)歷年報(bào)告臨床病例總和<100萬例臨床報(bào)告病例僅是總體患者的冰山一角中國目前約有1000萬例H41HCV特征決定

準(zhǔn)確的檢測(cè)是疾病管理最重要防線病毒基因組具有高度變異性目前尚無預(yù)防性疫苗HCV在體外持久的穩(wěn)定性丙肝患者體液污染的器械具有很強(qiáng)的傳染性對(duì)于Anti-HCV篩查陽性者應(yīng)及早確診、規(guī)范治療HCV特征決定

準(zhǔn)確的檢測(cè)是疾病管理最重要防線病毒基因組具有42HCV感染診斷實(shí)驗(yàn)的選擇

方法篩查確診療程療效的評(píng)估持久性應(yīng)答預(yù)測(cè)ALT※Anti-HCV※RIBA※HCV

RNA※※※※HCV基因分型※HCV感染診斷實(shí)驗(yàn)的選擇

方法篩查確診療程療效的評(píng)估持久性應(yīng)43Anti-HCV是HCV感染篩查的指標(biāo)

80%急性感染進(jìn)展為慢性感染Anti-HCV是HCV感染篩查的指標(biāo)80%急性感染進(jìn)展為44Anti-HCV的漏檢和假陽性

是困擾實(shí)驗(yàn)室問題之一Anti-HCV的漏檢和假陽性

是困擾實(shí)驗(yàn)室問題之一45

Anti-HCV確認(rèn)陽性*+-Anti-HCV+9999(TP)9900(FP)PPV=9999/(9999+9900)=50.25%-1(FN)980100(TN)NPV=989,010/(1+989,010)=99.9999%感染者10,000未感染990,000靈敏度=99.99%特異性=99%prevalence=1%在低感染人群，假陽性不可忽略

1%的感染率，如特異性99%，PPV只有50%Anti-HCV確認(rèn)陽性*+-Anti-HCV+99946

抗-HCV篩查檢測(cè)報(bào)告陰性或根據(jù)S/Co比值判定為陽性所有陽性結(jié)果高S/Co比值陽性*報(bào)告低S/Co比值陽性*RIBAHCV檢測(cè)或陽性報(bào)告陰性報(bào)告不確定報(bào)告陽性陰性RIBAHCV檢測(cè)HCVRNA的NAT檢測(cè)陽性報(bào)告陰性報(bào)告不確定報(bào)告報(bào)告美國CDCAnti-HCV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告導(dǎo)則11，MiriamJ.Alteretal-GuidelinesforLaboratoryTestingandResultReportingofAntibodytoHepatitisCVirus抗-HCV篩查檢測(cè)報(bào)告陰性或根據(jù)S/Co比值判定47RIBA（以Chiron為例）

兩個(gè)以上條帶（＞1+）為陽性RIBA（以Chiron為例）兩個(gè)以上條帶（＞1+）為陽48Anti-HCV檢測(cè)靈敏度也是不能忽略<==窗口期==>（70天）DNA陽性3rdgen1stgen2ndgen不同的3rd試劑Anti-HCV檢測(cè)靈敏度也是不能忽略<==窗口期==>49第三代試劑之間也有明顯差異

2006Hep/RetroSymposiumIIIWashingtonD.C.,24-26September2006第三代試劑之間也有明顯差異50Anti-HCV有反應(yīng)性進(jìn)一步結(jié)果解釋Anti-HCV有反應(yīng)性RIBA（+）

Anti-HCV有反應(yīng)性HCVRNA（+）

Anti-HCV確認(rèn)陽性Anti-HCV確認(rèn)陰性CDC，GuidelinesforLaboratoryTestingandResultReportingofAntibodytoHepatitisCVirus

2003Anti-HCV有反應(yīng)性RIBA（-）；Anti-HCV有反應(yīng)性HCVRNA(-）/RIBA（-）HCVRNA（-）/RIBAIND視為低風(fēng)險(xiǎn)Anti-HCV有反應(yīng)性進(jìn)一步結(jié)果解釋Anti-HCV有反51Anti-HCV有反應(yīng)性進(jìn)一步結(jié)果解釋HCV有反應(yīng)性RNA(-)仍需要進(jìn)行RIBA

確認(rèn)，尤其是低流行區(qū)域根據(jù)流行率的確認(rèn)流程流行率<10%先RIBA，后RNA最經(jīng)濟(jì)

流行率>20%先RNA，后RIBA最經(jīng)濟(jì)流行率10-25%兩者方案，費(fèi)用相當(dāng)CDC，GuidelinesforLaboratoryTestingandResultReportingofAntibodytoHepatitisCVirus

2003Anti-HCV有反應(yīng)性進(jìn)一步結(jié)果解釋HCV有反應(yīng)性52

臨床需要高性能的檢測(cè)試劑假陽性不必要的補(bǔ)充確認(rèn)檢測(cè)不必要的就診和心理傷害醫(yī)療糾紛假陰性傳播擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)醫(yī)療安全風(fēng)險(xiǎn)延誤病情臨床需要高性能的檢測(cè)試劑假陽性假陰性53CE1E2NS2NS3NS4NS5ANS5B5′UTR結(jié)構(gòu)蛋白非結(jié)構(gòu)蛋白3′UTRa)b)

對(duì)于HCV病毒認(rèn)知的深入使檢測(cè)試

劑性能逐漸提高聚合酶抑制劑NS5A抑制劑蛋白酶抑制劑新藥物診斷試劑Core蛋白和NS3蛋白的免疫原性最強(qiáng)，是抗體檢測(cè)最重要組份；CE1E2NS2NS3NS4NS5ANS5B5′UTR結(jié)構(gòu)蛋54第三代Anti-HCV檢測(cè)試劑

精選抗原靶位，提升檢測(cè)性能NS3/Core抗體出現(xiàn)最早NS3抗原在早期診斷和提高靈敏度上都均有重要價(jià)值，提高NS3抗原的配比Core抗原中的N端保守區(qū)域易產(chǎn)生交叉反應(yīng)，適度減少Core抗原的配比隨著重組技術(shù)的進(jìn)展，使原料抗原的活性更強(qiáng)

各種抗原的配比調(diào)整第三代Anti-HCV的平均窗口期是6-8周；NS3和Core抗體要早于NS4和NS5抗體數(shù)周時(shí)間第三代試劑中加入Core，NS3，NS4（部分廠家加入NS5)抗原。

第三代Anti-HCV檢測(cè)試劑

精選抗原靶位，提升檢測(cè)性能55影響試劑性能的主要因素

各種抗原的配比平衡增加NS3抗原，同時(shí)減少核心區(qū)抗原益處：提升靈敏度減少了非特異性反應(yīng)挑戰(zhàn)：“度”的把握掌握不好，容易漏檢

抗原的選擇和生產(chǎn)工藝HCV病毒缺乏有效體外培養(yǎng)系統(tǒng)，難以從病毒中分離出天然抗原；生產(chǎn)的抗原材料與天然抗原的接近度越高，試劑性能越好。NS3是構(gòu)像依賴性抗原，需要使用重組抗原不同批次間抗原的均一性非常重要；NS4/Core抗原通常使用合成多肽抗原；影響試劑性能的主要因素各種抗原的配比平衡增加NS3抗56了解試劑性能，

是放心應(yīng)用的前提！了解試劑性能，

是放心應(yīng)用的前提！57Elecsys?Anti-HCVII

雙抗原夾心法，18分鐘Elecsys?Anti-HCVII

雙抗原夾心法，1858Elecsys?Anti-HCVII全面升級(jí)

viral(+)RNAgenomeviralpolyproteinCE1E2NS1NS2NS3NS4ANS4BNS5ANS5Bstructuralproteinsnon-structuralproteins合成肽合成肽重組抗原New!新的試劑緩沖液 減少干擾增強(qiáng)試劑的穩(wěn)定性應(yīng)用Core，NS3，NS4抗原片段不再應(yīng)用NS5（對(duì)于靈敏度提升有限但是會(huì)降低檢測(cè)特異性）Elecsys?Anti-HCVII全面升級(jí)

vir59Elecsys?Anti-HCVII多中心評(píng)估評(píng)估單位評(píng)估內(nèi)容1st:多中心研究北京大學(xué)人民醫(yī)院（Elecsys/Vitros/Architect）上海交通大學(xué)新華醫(yī)院（Elecsys/Vitros）四川大學(xué)華西醫(yī)院

(Elecsys/Lizvon/Intec)2nd:特殊樣本的評(píng)估衛(wèi)生部臨檢中心（多種方法）靈敏度血清轉(zhuǎn)換盤樣本日常檢測(cè)陽性樣本臨檢中心早期感染樣本特異性實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)樣本確認(rèn)方法：MIKROGEN?RIBAHCVCHIRON?Cobas?TaqmanHCVRNAElecsys?Anti-HCVII多中心評(píng)估評(píng)估單位評(píng)60應(yīng)用血清轉(zhuǎn)換盤評(píng)估靈敏度

Elecsys?Anti-HCVII靈敏度最高應(yīng)用血清轉(zhuǎn)換盤評(píng)估靈敏度

Elecsys?Anti-HCV61血清轉(zhuǎn)換盤是客觀評(píng)價(jià)早期感染靈敏度的標(biāo)準(zhǔn)血清轉(zhuǎn)換盤是客觀評(píng)價(jià)早期感染靈敏度的標(biāo)準(zhǔn)62常規(guī)樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院(n=830)

樣本數(shù)N=830Elecsys?Anti-HCVIIVitros?Anti-HCVArchitect?Anti-HCV陽性真陽性17171716假陰性001陰性真陰性813809805805假陽性488統(tǒng)計(jì)靈敏度100%100%94%特異性*99.50%99.02%99.02%陽性率2%*RIBA不確定+RNA(-)結(jié)果解釋為陰性

常規(guī)樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院(n=830)

樣本數(shù)E63常規(guī)樣本的評(píng)估

上海交通大學(xué)新華醫(yī)院（n=495)

樣本數(shù)N=495Elecsys?Anti-HCVIIVitros?Anti-HCV陽性真陽性111假陰性00陰性真陰性494494492假陽性02統(tǒng)計(jì)靈敏度100%100%特異性*100%99.60%陽性率0.2%

*沒有HCVRNA結(jié)果,排除RIBA不確定樣本常規(guī)樣本的評(píng)估

上海交通大學(xué)新華醫(yī)院（n=495)

樣本數(shù)64常規(guī)樣本的評(píng)估

四川大學(xué)華西醫(yī)院(n=1044)

樣本數(shù)N=1044Elecsys?Anti-HCVIIElecsys?Anti-HCVIntec?Anti-HCVLizvon?Anti-HCV陽性真陽性88877假陰性8811陰性真陰性10361034102210361034假陽性21402統(tǒng)計(jì)靈敏度100%100%88%88%特異性*99.8198.64%100%99.81%陽性率0.8%*沒有HCVRNA結(jié)果,排除RIBA不確定樣本常規(guī)樣本的評(píng)估

四川大學(xué)華西醫(yī)院(n=1044)

樣本數(shù)65預(yù)選樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院（n=67)

RIBA不確定樣本的RNA結(jié)果均為(-)低S/CO樣本中20%是真正陽性入選:Vitros(+)S/CO<8預(yù)選樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院（n=67)

RIBA66預(yù)選樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院（n=67)

靈敏度：92%特異性*：93%靈敏度：92%特異性*：63%*RIBA不確定+RNA(-)結(jié)果解釋為陰性

預(yù)選樣本的評(píng)估

北京大學(xué)人民醫(yī)院（n=67)

靈敏67早期感染樣本的靈敏度評(píng)估1

方法Elecsysanti-HCVIIABCDEFG有反應(yīng)性11092989291868687靈敏率87.2%69.2%76.7%69.2%68.4%64.7%64.7%65.4%具體樣本組成RIBA（+）99RNA（+）121RNA(-)&RIBA(+)RNA(+)&RIBA(+)RIBA(-)/IND&RNA(+)1287341衛(wèi)生部臨檢中心評(píng)估數(shù)據(jù)HCVRNA和/或RIBA陽性（n=133)早期感染樣本的靈敏度評(píng)估1

方法ElecsysABCDEF68NEnglJMed2001;345:41;4.A：檢測(cè)RNA,RNA陰性視為Anti-HCV檢測(cè)假陽性NEnglJMed2001;345:41;4.應(yīng)用Core，NS3，NS4抗原片段1衛(wèi)生部臨檢中心評(píng)估數(shù)據(jù)（Elecsys/Vitros）RNA&RIBA