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Word-28-病理切片技術(shù)人員崗位職責(zé)
篇:病理組織切片制作技術(shù)病理組織切片制作技術(shù)
病理組織切片常用的制作辦法有三種。即石蠟切片法,冰凍切片法和火棉膠切片法。以石蠟切片法為代表,切片的基本制作過程是:
組織取材→固定→沖洗→脫水→透亮?????→浸蠟→組織包埋→組織切片→展片附貼→切片脫蠟→染色→脫水→染片透亮?????→封固。
以上基本過程是相互聯(lián)系的,任何一環(huán)節(jié)浮現(xiàn)問題,都將使囫圇切片制作歸于失敗。因此應(yīng)細(xì)致、耐心、仔細(xì)負(fù)責(zé),并事先做好方案支配。
一、取材
實行病料,要刀剪鋒利,剪切時不行擠壓,扯拉病料,以防人為損傷。切取的工具要清潔。實行病料越新奇越好,普通不超過死后24小時。應(yīng)挑選病變部與可疑病變部切取,切取時要由表及里,有淺入深并包括周圍正常組織一部分。特別病料應(yīng)按照器官的結(jié)構(gòu)特點切取。管狀,囊狀和皮膚組織應(yīng)注重垂直切?。M切)。帶有薄膜的組織,要防止切時薄膜分別和脫落。
切取組織塊大小,以1.5×1.5×0.3厘米為宜,最厚不宜超過0.5厘米。組織塊病變一面應(yīng)平整光潔,另一面可不平整,以便包埋時辨認(rèn)。切取后,放入事先預(yù)備好的裝有固定液的磨口玻璃廣口瓶中,并做好標(biāo)記。
二、固定
固定的目的是快速將組織細(xì)胞殺死,使細(xì)胞中的蛋白質(zhì),糖,脂肪等凝固,從而保持與活組織相像的結(jié)構(gòu)狀態(tài)。材料取下后,應(yīng)快速固定。固定液數(shù)量應(yīng)為病理組織塊的5到20倍。因為普通把組織塊浸入固定液后數(shù)小時,固定液滲入組織液的深度只達(dá)2到3厘米。因此,可以放置冰箱內(nèi)固定,使組織內(nèi)酶失去作用,細(xì)菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福爾馬林溶液:使用時,用40%的甲醛飽和水溶液10毫升,加水90毫升配成。
沖洗
固定后的組織塊,應(yīng)將固定液洗去。普通均用流水(自來水)沖洗12到24小時左右。準(zhǔn)時沖洗尚有停止固定的作用,防止固定過度,有利于制片染色。
沖洗時如不便利用流水沖洗,也可用較大容器盛裝水浸洗,每隔相當(dāng)初間換水一次。囫圇浸洗時光比流水沖洗應(yīng)稍長一些。酒精固定的組織材料不需沖洗。
四、脫水
經(jīng)過固定的組織,沖洗后要舉行脫水。脫水的目的在于將組織內(nèi)的水分用酒精或其他溶劑置換出來,為石蠟等其他包埋劑浸入組織制造條件。常用的脫水劑為酒精。因為酒精可以任何比例與水結(jié)合,對組織穿透力強,又能使組織硬化,因而不能將組織從水中直接移入濃度高的酒精中,應(yīng)從低濃度逐漸到高濃度。脫水必需充分,否則給浸蠟造成困難。
除用酒精作脫水劑外,還可以用正丁醇(N—Butylaalcohol)。正丁醇微溶于水,能與各種濃度酒精混合,也能直接溶解石蠟。故組織經(jīng)正丁醇脫水后,不須經(jīng)二甲苯透亮?????。用正丁醇作脫水劑,組織塊收縮減低,也不會過硬,故比酒精優(yōu)越。
五、透亮?????
透亮?????的目的是將組織內(nèi)的酒精用礦物油或植物油置換出來,并溶解石蠟,協(xié)助石蠟浸透組織。因為經(jīng)過透亮?????劑處理的組織塊用肉眼觀看呈透亮?????狀,故稱這一過程為透亮?????。常用的透亮?????劑為二甲苯(Xylol),因其穿透力較強,因而組織在二甲苯中停歇時光不宜過長,普通透亮?????時光在30分鐘左右即可。
六、浸蠟浸蠟是指組織經(jīng)過透亮?????作用以后,放入融化的石蠟中浸滲,使石蠟浸入組織塊中,冷卻后,才干舉行切片。
通常挑選熔點在52~56℃之間的石蠟,并視切片時環(huán)境的氣溫而挑選。室溫高則選用熔點稍高的石蠟,反之,則選用熔點較低的石蠟,這樣可防止切片時石蠟太軟或易碎裂。浸蠟的過程是:
二甲苯石蠟混合液(1:1)
1小時二甲苯石蠟混合液(1:2)
1小時
石蠟(1)
1小時30分石蠟(2)
1小時30分
上述過程可在56℃~58℃恒溫箱中舉行,含二甲苯的混合液可用磨口小瓶盛裝。
七、包埋
包埋就是將已浸滲好的組織包埋于浸滲劑中。按照需要,包埋的辦法常有石蠟包埋法和火棉膠包埋法。石蠟包埋法:
(1)先將熔化的石蠟倒入包埋框,用加熱的鑷子將欲包埋的組織塊在蠟液內(nèi)放置好。注重各組織塊之間的距離和每個組織塊的位置和方向。
(2)快速其次次往平皿內(nèi)傾倒蠟液,沉沒組織塊。待蠟液浮現(xiàn)凝固層后,即輕輕放入冷水盆中或冰箱中使其凝固。石蠟徹低凝固后,倒出冷縮的蠟塊片,用加熱的外科刀,按組織塊位置修整蠟片待用。
對于試驗動物(狗和兔等)組織,普通的脫水透亮?????和浸蠟時光如下:處理步驟處理時光(min)處理步驟處理時光(min)①75%酒精長短不定二甲苯Ⅰ、Ⅱ⑥30②85%酒精120-300二甲苯Ⅲ⑦60
③95%酒精Ⅰ和Ⅱ120-30056-58℃石蠟⑧30④無水酒精Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3056-58℃石蠟⑨60-120⑤無水酒精Ⅲ60-12056-58℃石蠟⑩120-180
注:摘自病理學(xué)技術(shù),人民衛(wèi)生出版社,王伯,李玉松,黃高,張遠(yuǎn)強主編。
八、組織切片
不同的切片制備辦法,其切片辦法也有較大差別,組織切片法包括石蠟切片法、冰凍切片法、火棉膠切片法、石蠟包埋半薄切片法、樹脂包埋薄切片法和大組織石蠟切片法等。常用的切片工具包括組織切片機、切片刀和自動磨刀儀器等。以下分離加以講述。
(一)石蠟切片法
組織經(jīng)石蠟包埋后制成的蠟塊,用切片機制成切片的過程稱為石蠟切片法。為現(xiàn)在病理診斷常用的制作切片的辦法。在切片前應(yīng)先切去標(biāo)本周圍過多的石蠟(此過程稱為修塊)但也不能留得太少,否則易造成組織破壞,延續(xù)切片時分片困難。普通切4-6μm的切片,特別狀況可切1-2μm。要觀看病變的延續(xù)性,可制作延續(xù)切片。除此之外,石蠟包埋的組織便于長久保存,因此石蠟切片仍是目前各種切片制作辦法中最常用,最普遍的一種辦法。
1.切片前的預(yù)備
(1)固定后的標(biāo)本經(jīng)脫水、透亮?????、浸蠟和包埋后,制成蠟塊。高質(zhì)量的蠟塊和銳利的切片刀是保證切片質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。檢查切片刀是否銳利,簡便的辦法是用頭發(fā)在刀鋒上碰一下,如一碰即斷,說明刀鋒銳利。用顯微鏡觀看可確定刀口是否平整,有無缺口。
(2)預(yù)備充沛的經(jīng)過處理的清潔載玻片和恒溫烤片裝置,大中號優(yōu)質(zhì)狼毫毛筆和鉛筆(用于在載玻片的粗糙端寫號),如用一般載玻片,可用碳素墨水和蛋白甘油按3:1體積混合后書寫。
2.切片制作過程
(1)將預(yù)先修好的組織塊先在冰箱中冷卻,而后裝在切片機固定裝置上。將切片刀裝在刀架上,刀刃與蠟塊表面呈5℃夾角。將蠟塊固定,調(diào)節(jié)蠟塊與刀至合適位置,并移動刀架或蠟塊固定裝置,使蠟塊與刀刃接觸。
(2)切片多使用輪轉(zhuǎn)式切片機,使用時左手執(zhí)毛筆,右手旋轉(zhuǎn)切片機轉(zhuǎn)輪。先修出標(biāo)本,直到組織所有裸露于切面為止,但小標(biāo)本注重不要修得太多,以免無法切出愜意的用于診斷的切片,標(biāo)本應(yīng)注重切全。切出蠟片后,用毛筆輕輕地托起,爾后用眼科鑷夾起,正面對上放入展片箱(展片溫度按照作用的石蠟熔點舉行調(diào)節(jié),普通低于蠟熔點10~12℃),待切片展平后,即可舉行分片和撈片。切片經(jīng)30%的酒精初展后,再用載玻片撈起放入展片箱更易展平。為削減切片刀與組織塊在切片過程中產(chǎn)生的熱量,使石蠟保持合適的硬度,切片時可常常用冰塊冷卻切片刀和組織塊,尤其在夏季高溫時節(jié)更為須要。(3)輪轉(zhuǎn)式切片機切取組織,是由下向上切,為得到完整的切片,防止組織浮現(xiàn)刀紋裂縫,應(yīng)將組織硬脆難切的部分放在上端(如皮膚組織,應(yīng)將表皮部分向上。而胃腸等組織,應(yīng)將漿膜面朝上)。
(4)撈片時注重位置,要留出貼標(biāo)簽的空間,并注重整齊美觀。撈起切片后,立刻寫上編號。
(5)切片撈起后,在空氣中稍微干燥后即可烤片。普通在60℃左右烤箱內(nèi)烤30min即可,也可用烤片器烤片。血凝塊和皮膚組織應(yīng)準(zhǔn)時烤片。但對腦組織待徹低晾干后,才干舉行烤片。否則,可能產(chǎn)憤怒泡影響染色。
3.注重事項
(1)組織的取材和固定取材時,組織塊的大小厚薄應(yīng)適當(dāng),過大、過厚的組織,固定液不易滲透,易引起固定不良。過小、過薄的組織,在固定和脫水的過程中易變硬或產(chǎn)生彎曲扭轉(zhuǎn),同樣影響切片質(zhì)量。陳舊、腐敗和干涸的組織不宜制作切片。用陳腐組織制成的切片,往往核漿共染,染色含糊,組織結(jié)構(gòu)不清,無法舉行觀看。固定不準(zhǔn)時和固定不當(dāng)?shù)慕M織,染色時常浮現(xiàn)核質(zhì)著色較淺,輪廓不清,浮現(xiàn)不同程度的片狀發(fā)白區(qū)。組織固定時,固定液的量應(yīng)充沛,至少要在4倍以上,同時注重組織塊不要與容器粘連。至于組織固定的時光,按照詳細(xì)狀況加以把握。有關(guān)固定時應(yīng)注重的事項,可參見有關(guān)章節(jié)。(2)組織脫水、透亮?????和浸蠟組織脫水用的各級酒精,應(yīng)保證相應(yīng)濃度,以便組織脫水徹底。但無水酒精中,組織塊放置時光不宜過長,否則組織過硬,切片困難。碰到此狀況,可將組織浸在香柏油中軟化,用二甲苯洗去香柏油后,再重新浸蠟和包埋。脫水酒精,尤其是無水酒精中混有水分,則組織脫水不整潔。經(jīng)二甲苯時,組織也無法透亮?????,展現(xiàn)渾濁。此時應(yīng)將組織在新的酒精中重新脫水。二甲苯透亮?????也應(yīng)充分,否則不利于石蠟的浸透。但組織在二甲苯內(nèi)的時光應(yīng)嚴(yán)格把握,時光過長組織易碎,也無法切出好的切片。時光不足,則石蠟不易浸透。浸蠟的溫度也不宜過高,時光長短也應(yīng)加以控制。總之,組織脫水、透亮?????和浸蠟對于切片質(zhì)量都有一定影響,組織脫水、透亮?????和浸蠟過度,組織塊變硬變脆,因此對于小塊組織或小動物標(biāo)本應(yīng)注重時光。但若時光不夠,組織塊硬化不夠,也不利于切片和染色,因此,應(yīng)注重各詳細(xì)環(huán)節(jié)的操作,并注重保證各種試劑的質(zhì)量。
(3)切片切片刀要求銳利且無缺口,切片自行卷起多由切片刀不銳利所致,切片刀有缺口時,易造成切片斷裂破裂和不完整。骨組織切片時,用重型刀較好。全鋼刀或單面鎢刀也適合石蠟或火棉膠包埋的骨組織。
(4)切片刀和切片機切片刀放置的傾角以20-30℃為好。傾角過大切片上卷,不能連在一起。過小則切片皺起。應(yīng)注重維護(hù)切片機,防止因螺絲松動產(chǎn)生震驚,切片時會造成切片厚薄不均。遇硬化過度的肝、腦、脾等組織時,應(yīng)輕輕切削,防止因為震驚產(chǎn)生空洞現(xiàn)象。(5)特別要求切片的制作石蠟切片雖然有無數(shù)優(yōu)點,但制片過程中要經(jīng)過酒精和二甲苯等有機溶劑處理,因此很易造成組織內(nèi)抗原性的喪失,在用于免疫組織化學(xué)染色時影響結(jié)果的精確?????性。因而有人采納冷凍干燥包埋法,即將新奇組織低溫速凍,通過冷凍干燥機在真空和低溫條件下除去組織內(nèi)的水分,然后用甲醛蒸汽固定干燥后的組織,而后在舉行浸蠟、包埋和切片。此法可保存組織內(nèi)的可溶性物質(zhì),防止蛋白質(zhì)變性和酶的失活,削減抗原的走失。用于免疫熒光標(biāo)記、免疫酶標(biāo)記和發(fā)射自顯影。
(二)冰凍切片法
冰凍切片在組織學(xué)技術(shù)中應(yīng)用廣泛,對臨床迅速病理診斷尤其具有重要意義。另外,因冰凍切片制作時不經(jīng)各級酒精的脫水,二甲苯的透亮?????等過程,因此對脂肪和類脂的保存較好,在舉行脂肪染色和神經(jīng)組織髓鞘的染色常用。冰凍切片多用于新奇組織,甲醛固定的組織和低溫冰箱冷藏的組織塊等。組織不經(jīng)任何包埋劑而直接放在制冷臺上冷卻后舉行切片。
1.恒冷箱切片將組織塊在恒冷箱的切片機上切片。恒冷箱切片機的種類較多,可按照實際狀況加以選用。普通調(diào)整溫度為-25℃左右。箱內(nèi)溫度下降后,打開觀看窗,將組織固著器放置到速凍臺上,先放少量OCT或羧甲基纖維素,待凍結(jié)后將組織塊放上,并在其周圍加適量包埋劑,將組織塊包埋。組織凍結(jié)后,將組織固著器裝到切片機上,調(diào)節(jié)組織的切面與刀刃平行并貼近刀刃,將厚度調(diào)至適當(dāng)位置后,關(guān)閉觀看窗。初步修出組織切面后,放下抗卷板,開頭切片。切出切片用載玻片貼附后,舉行吹干或固定。這種切片用于科研和的延續(xù)切片,效果較好。在切片前,應(yīng)預(yù)先啟動舉行預(yù)冷,同時預(yù)備多個冷卻臺,用于多塊組織切片。
2.半導(dǎo)體制冷冰凍切片法組織塊放置在半導(dǎo)體制冷臺上,加少許蒸餾水,調(diào)好切片的厚度。接通循環(huán)流水后,再接通電源,而且在使用的全過程中流水不能中斷,關(guān)閉電路后,才干停水。還應(yīng)注重電源正負(fù)極不能接反,用整流電源控制溫度。冰凍組織周圍的水不宜過多,用手檢查組織塊的硬度,當(dāng)可切成厚薄全都的切片時,即可切片。切片用毛筆展平后,立刻用載玻片貼附,待切片正要溶化時,即刻入固定液內(nèi)固定1min。已固定的組織切片,收集于清水中。按照目的舉行染色。臨時不染色的切片,用載玻片吸附。
3.甲醇制冷器制冷箱為附有帶導(dǎo)管的制冷臺和制冷刀的甲醇循環(huán)裝置,其冷卻速度較快,屬開放式,做普通常規(guī)冰凍切片用。
4.二氧化碳冰凍法將組織塊用蒸餾水洗后,放在冰凍切片機的冷凍臺上,加蒸餾水少許。打開冷凍臺的二氧化碳開關(guān),二氧化碳?xì)怏w噴出,待組織浮現(xiàn)冷霜時,關(guān)閉二氧化碳,即可切片。組織冷凍過硬易碎,若冷凍不夠,組織塊硬度不足,切片呈粥糜狀,無法成片,應(yīng)用間歇冷卻法繼續(xù)冷卻。硬度普通在剛開頭解凍時最適合,應(yīng)快速切片。
5.冰凍切片粘片法冰凍切片粘片法基本按石蠟切片的粘片處理,但烤片溫度不宜超過40℃??靖珊罅⒖倘〕?,溫度過高,時光過長,則切片易碎??靖珊笥?0%酒精和自來水略洗后即可染色。
九、蘇木精-伊紅染色辦法
蘇木精-伊紅染色辦法,簡稱HE染色辦法,是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的細(xì)胞與組織學(xué)最廣泛應(yīng)用的染色辦法。在病理學(xué)試驗室中稱為常規(guī)染色辦法。病理細(xì)胞和組織學(xué)的診斷,教學(xué)和討論都是用HE染色辦法觀看正常和病變組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。因此病理學(xué)工必須學(xué)習(xí)和把握這種染色辦法。
(一)HE染色的基本原理
1.細(xì)胞核染色的原理
細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,呈酸性,很簡單與帶正電荷的蘇木精鹼性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而染色。蘇木精在堿性染料中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。
2.細(xì)胞漿染色的原理
細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮亮的對照。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料。
隨著科學(xué)技術(shù)迅速進(jìn)展和電子計算機的廣泛應(yīng)用,染色自動儀器的浮現(xiàn),許多試驗室已用全自動染色機代替人工染色。
(二)人工操作蘇木精伊紅染色辦法
1.染色步驟二甲苯I脫蠟10min.二甲苯II脫蠟5min。
無水乙醇洗去二甲苯1min×2次。
95%酒精1min。
90%酒精1min。
85%酒精1min。自來水洗2min。
蘇木精染色1min至5min。自來水洗1min。
1%鹽酸酒精分化20s。自來水洗1min。
稀氨水(1%)反藍(lán)30s。自來水洗或蒸餾水洗1min。伊紅染色20s至5min。自來水洗30s。
85%酒精脫水20s。
90%酒精30s。
95%I酒精1min。
95%II酒精1min。無水乙醇I2min。無水乙醇II2min。二甲苯I2min。二甲苯II2min。二甲苯III2min。
中性樹膠或加拿大樹膠封片。
2.染色結(jié)果
細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞漿、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色。
(三)自動染色機蘇木精伊紅染色程序
1.二甲苯I10min。
2.二甲苯II10min。
3.無水乙醇1min。
4.無水乙醇1min。
5.95%酒精I(xiàn)1min。
6.95%酒精I(xiàn)I1min。
7.90%酒精I(xiàn)1min。
8.80%酒精1min。
9.自來水洗1min。
10.蘇木精染色1至5min。
11.自來水洗1min。
12.1%鹽酸酒精分化30s。
13.自來水洗5min。
14.伊紅染色30s至5min。
15.自來水洗30s。
16.85%酒精20s。
17.90%酒精30s。
18.95%酒精1min。
19.95%酒精1min。
20.無水乙醇I2min。
21.無水乙醇II2min。
22.二甲苯I2min。
23.二甲苯II2min。
24.二甲苯III2min。
25.中性樹膠或加拿大樹膠封片。
(四)冰凍切片蘇木精伊紅染色
1.恒冷箱冰凍切片,粘貼在載玻片上,用95%酒精95ml和冰醋酸5ml的混合固定液固定1min。自來水洗。
2.蘇木精染色1~2min。
3.自來水洗30s。
4.1%鹽酸酒精分化20s。
5.自來水洗20s。
6.稀氨水30s。
7.自來水洗20s。
8.伊紅染色20s~1min。
9.自來水洗10s。
10.85%酒精20s。
11.90%酒精30s。
12.95%酒精1min。
13.無水乙醇I1min。
14.無水乙醇II2min。
15.二甲苯I1min。
16.二甲苯II2min。
17.二甲苯III2min。
18.中性樹膠或加拿大樹膠封片。
(五)染色液的配制
1.蘇木精(素)
蘇木精是一種純自然?染料,是從蘇木素樹提煉出來的,蘇木樹主產(chǎn)墨西哥的坎偑切,蘇木精的染色性能差,經(jīng)過一百多年細(xì)心加工配制,現(xiàn)用的蘇木精配方,染色性能好,保持時光長,是世界上唯一的常規(guī)細(xì)胞核染料,
2.蘇木精的配制
蘇木精的配方無數(shù),可按照不同需要選用,Harris配方最常用。(1)Harris蘇木精的配制蘇木精1g硫酸鋁鉀15g無水乙醇10ml蒸餾水200ml
先用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀,用無水乙醇溶解蘇木精再倒入已溶解的硫酸鋁鉀蒸餾水中,煮沸1min后,稍冷卻,漸漸加入紅色氧化汞0.5g,繼續(xù)加熱至染液變?yōu)樽霞t色,用紗布蓋瓶口,用前濾紙過濾后每100ml加冰醋酸5ml。(2)Mayer蘇木精改良配法
A液蘇木精2g
無水乙醇40ml
B液
硫酸鋁鉀100g蒸餾水600ml
稍加熱使硫酸鋁鉀在水中溶解,將蘇木精溶于酒精中,再將A液與B液混合煮沸2min。用蒸餾水補足600ml,加入400mg碘酸鈉充分混勻,蘇木精染液呈紫紅色。(3)Gill改良蘇木精染液的配制蘇木精2g
無水乙醇250ml硫酸鋁鉀17g蒸餾水750ml碘酸鈉0.2g冰醋酸20ml
先將蘇木精溶于無水乙醇,再將硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中。兩液溶解后將其混合,加入碘酸鈉待蘇木精氧化成紫紅色,再加入冰醋酸。
3.伊紅溶液的配制(1)水溶性伊紅伊紅Y0.5-1g蒸餾水100ml
先將水溶性伊紅加入蒸餾水中,用玻璃棒將伊紅攪起泡沫后過濾,每100ml加冰醋酸1滴。(2)乙醇性伊紅液的配制伊紅Y0.5~1g
90%酒精100ml
先將伊紅溶于酒精中,用玻璃棒研碎溶解后,每100ml加冰醋酸1滴。用乙醇性伊紅液染細(xì)胞漿后不行經(jīng)水洗直接用85%酒精脫水。
4.鹽酸酒精分化液的配制濃鹽酸0.5~1ml
75%酒精99ml
此液用一段時光后需要延伸或更換液體,新液分化時光要短。
5.染色中注重事項(1)脫蠟石蠟切片必須經(jīng)過脫蠟后才干染色,脫蠟前切片要經(jīng)烘烤,這樣使組織與玻璃片粘貼牢固。組織切片脫蠟應(yīng)徹底,脫蠟好壞主要取決于二甲苯的溫度和時光,全部的時光都是指新的二甲苯在室溫25℃以下時,假如二甲苯是用過一段時光,切片又比較厚,室溫低應(yīng)增強脫蠟時光,脫蠟不凈是影響染色不良的重要緣由之一。(2)染色
石蠟切片經(jīng)水洗后放入Harris蘇木精染色,普通狀況下在新配的蘇木精溶液中只需要染1min左右,應(yīng)按照染片的多少,逐步把染色時光延伸。蘇木精染色后,不宜在水中和鹽酸酒精停歇過長,切片分化程度應(yīng)在鏡下觀看,分化過度,應(yīng)水洗后重新在蘇木精中染色,再水洗分化和使切片在自來水或稀氨水中充分變藍(lán)。
新配的伊紅染色快,切片染色不宜過長,應(yīng)按照染切片的多少逐步延伸染色時光,切片經(jīng)伊紅染后,水洗時光要短。(3)脫水
切片經(jīng)過染色后,利用各級酒精脫水,首先從低濃度到高濃度,低濃度酒精對伊紅有分化作用,切片經(jīng)過低濃度時光要短,向高濃度時逐步延伸脫水時光;脫水不徹底,使切片發(fā)霧,在顯微鏡下組織結(jié)構(gòu)含糊不清。(4)透亮?????與封片
石蠟組織切片染色經(jīng)過脫水后必需經(jīng)二甲苯處理,使切片透亮?????,才干用樹膠封片。常用切片封片膠有國產(chǎn)的中性樹膠,光學(xué)樹膠,加拿大樹膠和合成樹脂(DPX)。在封片時,樹膠不能太稀或太稠,不能滴加的太多或太少,太稀或太少切片簡單空泡,樹膠也不行太多,不要使樹膠溢出玻片四面太多。標(biāo)簽要附貼牢固。封片中不能對著切片呼氣。(5)常規(guī)石蠟切片和HE染色標(biāo)本的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(全國統(tǒng)一評定標(biāo)準(zhǔn))①切片完整,厚度4-6um,薄厚勻稱,無褶無刀痕。②染色核漿分明,紅藍(lán)適度,透亮?????潔凈,封裱美觀。
第2篇:技術(shù)人員崗位職責(zé)技術(shù)人員崗位職責(zé)
中鐵二十局集團(tuán)第一工程有限公司
醴陵樟村制梁場二0一0年八月
技術(shù)人員崗位職責(zé)
一、總工程師職責(zé)
1、負(fù)責(zé)梁場的技術(shù)和質(zhì)量工作,分管工程技術(shù)部、平安質(zhì)量部和實驗室。
2、組織專業(yè)技術(shù)人員舉行設(shè)計施工圖紙會審、編制工藝性文件,舉行技術(shù)交底等。
3、組織開展工序質(zhì)量檢查驗收、原材料檢查驗收等工作,保證產(chǎn)品質(zhì)量。
4、組織編制生產(chǎn)方案,制定批準(zhǔn)梁場產(chǎn)品技術(shù)文件和資料,確?,F(xiàn)場使用的技術(shù)資料統(tǒng)
一、有效正確、完整。
5、組織重要部位、特別過程的驗收,對不合格或潛在不合格的部位,仔細(xì)分析緣由,準(zhǔn)時實行訂正和預(yù)防措施,并落實。
6、定期召開質(zhì)量管理分析會,檢查管理體系運行的適應(yīng)性和有效性,準(zhǔn)時討論和處理管理中的重大技術(shù)問題。
7、負(fù)責(zé)梁場生產(chǎn)技術(shù)、測量實驗、環(huán)保水保和生產(chǎn)平安的領(lǐng)導(dǎo)工作,并保障相關(guān)資源的提供。
8、推廣應(yīng)用“四新”成績,組織開展QC小組活動,不斷提升產(chǎn)品質(zhì)量。
二、工程技術(shù)部部長職責(zé)
1、主持梁場的技術(shù)工作,執(zhí)行技術(shù)管理制度和質(zhì)量手冊有關(guān)質(zhì)量控制的詳細(xì)措施。對梁場負(fù)技術(shù)質(zhì)量責(zé)任。
2、參與施工圖紙審查和現(xiàn)場核對。按照施工組織設(shè)計,主持編制施工計劃并組織實施。
3、參加編制產(chǎn)品內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn),并負(fù)責(zé)組織落實。
4、負(fù)責(zé)對施工班組的技術(shù)交底,檢查指導(dǎo)技術(shù)交底實施狀況。
5、組織編制關(guān)鍵工序施工作業(yè)指導(dǎo)書,編制技術(shù)措施并組織實施。
6、組織技術(shù)人員的技術(shù)學(xué)習(xí)、閱歷溝通。落實培訓(xùn)方案,按要求組織專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)和職工技能培訓(xùn)。
7、組織做好測量及其復(fù)核工作。
8、催促檢查各項技術(shù)資料的簽證、收集、收拾和歸檔,檢查現(xiàn)場質(zhì)量自檢狀況,審查施工技術(shù)資料。
9、協(xié)作質(zhì)量部門對質(zhì)量管理中存在的質(zhì)量問題和質(zhì)量事故的初步調(diào)查、分析,準(zhǔn)時組織有關(guān)人員從技術(shù)上分析查找緣由,提出處理建議,落實訂正措施。
10、參與分項、分部工程質(zhì)量驗收,做好竣工質(zhì)量驗收預(yù)備。
11、對產(chǎn)品的技術(shù)方面的爭議,提出分析、處理看法。
12、完成領(lǐng)導(dǎo)交辦的其他工作。
三、技術(shù)員職責(zé)
1、保證本崗位編制、保管的各種技術(shù)文件、資料的質(zhì)量,并對由技術(shù)指導(dǎo)差錯引起的質(zhì)量事故負(fù)責(zé)。
2、制定關(guān)鍵工序、重要特性及特種工藝的質(zhì)量控制程序,制定重要特性工序的質(zhì)量控制點,對關(guān)鍵工序舉行技術(shù)指導(dǎo)。
3、負(fù)責(zé)檢查工藝的執(zhí)行狀況。
4、幫助領(lǐng)導(dǎo)搞好各種技術(shù)培訓(xùn)工作。
5、對日常工作中的技術(shù)指導(dǎo)及檢查形成詳實記錄,并形成相關(guān)質(zhì)量保證資料。
6、按有關(guān)要求撰寫施工日志。
7、對違背工藝操作的人員,有權(quán)勸阻或向領(lǐng)導(dǎo)提出處理看法。
四、平安質(zhì)量部部長職責(zé)
1、負(fù)責(zé)平安生產(chǎn)管理工作,依照國家法律規(guī)矩制定平安生產(chǎn)工作要求,組織平安檢查和考評,組織并建立突發(fā)大事預(yù)警機制和應(yīng)急處理機制,負(fù)責(zé)組織平安事故,質(zhì)量事故的調(diào)查處理。
2、負(fù)責(zé)工程質(zhì)量管理、檢查、落實現(xiàn)場質(zhì)量、平安、文明施工的各項措施。
3、負(fù)責(zé)平安標(biāo)準(zhǔn)工地建設(shè)和平安、質(zhì)量培訓(xùn)管理工作。
4、指導(dǎo)、監(jiān)督、檢查各工班技術(shù)質(zhì)量管理人員的配置狀況,確保能滿足施工現(xiàn)場的需要。
5、負(fù)責(zé)組織質(zhì)量自控體系的編制和完美,并組織培訓(xùn)和落實。
6、負(fù)責(zé)編制關(guān)鍵工序的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),明確關(guān)鍵工序的質(zhì)量控制要點及質(zhì)量保證措施,并組織實施。
7、組織實施創(chuàng)優(yōu)評選工作。
8、按時上報質(zhì)量報告或表格,準(zhǔn)時下達(dá)質(zhì)量指令。
9、參加設(shè)備物資質(zhì)量管理和過程質(zhì)量監(jiān)督檢查。
10、參加驗工計價工程質(zhì)量和過程質(zhì)量監(jiān)督檢查。
11、完成領(lǐng)導(dǎo)交辦的其他工作。
五、質(zhì)檢員職責(zé)
1、負(fù)責(zé)梁場工序控制、產(chǎn)品質(zhì)量檢驗工作,認(rèn)識把握橋梁生產(chǎn)的質(zhì)量、檢驗標(biāo)準(zhǔn)、工藝細(xì)則、工序控制要求及各種檢驗工具量器的正確使用,對檢驗的工序產(chǎn)品質(zhì)量負(fù)責(zé),對工序交接、各種統(tǒng)計報表的質(zhì)量數(shù)據(jù)負(fù)責(zé)。
2、負(fù)責(zé)各工序交接檢查驗收并指導(dǎo),照實填寫生產(chǎn)過程記錄,按要求傳遞每片箱梁,完工后原始資料收集填寫清晰,簽字完整舉行歸檔管理。
3、在生產(chǎn)過程中,嚴(yán)格執(zhí)行“三檢制”(自檢、?互檢、專檢),監(jiān)督工藝按工藝紀(jì)律、技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)作業(yè),對影響產(chǎn)品質(zhì)量的做法,有權(quán)制止、處理、報告。
4、發(fā)覺質(zhì)量問題準(zhǔn)時分析緣由,提出改進(jìn)措施看法,報告技術(shù)、質(zhì)檢負(fù)責(zé)人。
5、對影響橋梁生產(chǎn)的各種配件使用前仔細(xì)檢查,對不合格品加以標(biāo)識,不得使用,加強巡回檢查,對工序不合格,應(yīng)指導(dǎo)監(jiān)督訂正,把事故隱患?xì)缭诿妊繝顟B(tài)。
6、組織參與生產(chǎn)薄弱環(huán)節(jié)質(zhì)量問題的技術(shù)攻關(guān),做好技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、檢驗標(biāo)準(zhǔn)、工藝文件的宣揚指導(dǎo)實施。
六、實驗室主任職責(zé)
1、主持梁場實驗室的全面工作,對本項目實驗的技術(shù)、質(zhì)量、平安全面負(fù)責(zé),組織完成施工所要求的各項實驗檢測工作,審核簽發(fā)本工區(qū)各級實驗站的各類文件。
2、組織貫徹學(xué)習(xí)滬昆客專杭長湖南段項目技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)和新的實驗檢測技術(shù)、規(guī)范,建立健全實驗檢測工作體系和實驗室質(zhì)量保證體系。貫徹執(zhí)行國家、鐵道部頒布的有關(guān)規(guī)程、規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)。
3、負(fù)責(zé)建立健全實驗室信息管理體制,組織做好各種文件、資料歸檔工作。負(fù)責(zé)落實項目部下發(fā)的各項管理規(guī)定,聽從上級領(lǐng)導(dǎo)支配的檢查工作。
4、組織制定實驗室年度工作方案,樂觀開展各項專項質(zhì)量檢查,對實驗室不規(guī)范的行為準(zhǔn)時向相關(guān)部門提出處理建議。
5、參加重大技術(shù)和施工組織設(shè)計有關(guān)實驗檢測方面問題的審查,并提出相關(guān)看法。
6、組織編寫及上報各類報表及專項報告,制定工程實驗管理方法,編制工程實驗檢測實施細(xì)則。負(fù)責(zé)實驗檢測報告、報表、資料的終審與簽發(fā),對實驗檢測資料的真切性、精確?????性負(fù)責(zé)。
7、催促、檢查各檢測崗位工作執(zhí)行狀況,組織實施人員培訓(xùn)方案及業(yè)務(wù)考核,負(fù)責(zé)技術(shù)業(yè)務(wù)指導(dǎo)。考核本室全體人員的工作、學(xué)習(xí)狀況,準(zhǔn)時把握本室工作信息和解決存在的問題。
8、保證所管項目的工程質(zhì)量一次驗收合格率達(dá)100%。負(fù)責(zé)本工程的質(zhì)量優(yōu)良率和合格率達(dá)到甲方的標(biāo)準(zhǔn)。協(xié)作上級的檢查,確保檢查中不浮現(xiàn)不合格項或被通報批判。
9、監(jiān)督和管理全部實驗人員的檢測工作;完成領(lǐng)導(dǎo)交辦的其它實驗檢測工作。
10、完成領(lǐng)導(dǎo)交辦的其他工作。
七、實驗員職責(zé)
1、在主任和實驗工程師的支配下,完成擔(dān)當(dāng)?shù)母黜棇嶒灆z測任務(wù),并對各自的檢測工作質(zhì)量負(fù)責(zé)。
2、嚴(yán)格根據(jù)有關(guān)的實驗規(guī)程、實驗辦法做好各項實驗,準(zhǔn)時填寫實驗記錄,原始數(shù)據(jù)要清楚、精確?????,記錄完整。
3、具體觀看和記錄實驗過程中浮現(xiàn)的各種狀況,當(dāng)發(fā)覺有異樣現(xiàn)象或?qū)嶒灲Y(jié)果有疑問時,應(yīng)立刻向?qū)嶒灩こ處焻R報。
4、做好檢測前的樣品預(yù)備工作,需要舉行加工的樣品應(yīng)嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)辦法舉行加工和制樣;校對儀器設(shè)備量值、檢查儀器設(shè)備運轉(zhuǎn)是否正常及環(huán)境條件是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。
5、正確使用各種檢測儀器設(shè)備,準(zhǔn)時填寫儀器設(shè)備運行記錄,做好實驗儀器設(shè)備的保養(yǎng)工作,負(fù)責(zé)實驗區(qū)域環(huán)境衛(wèi)生和平安工作。
6、編制實驗報告,按規(guī)定程序送審,并準(zhǔn)時記下各項實驗臺帳。
7、嚴(yán)格遵守各項規(guī)則制度,不受行政干預(yù),提供精確?????、牢靠、公平的實驗結(jié)果,對檢驗數(shù)據(jù)的真切性和正確性負(fù)責(zé)。
8、對實驗資料嚴(yán)格保密,未經(jīng)實驗室主任同意不得將實驗數(shù)據(jù)及結(jié)果外傳和泄露。
9、完成領(lǐng)導(dǎo)交辦的其他實驗檢測工作。
八、物資設(shè)備部部長職責(zé)
1、對物資供給、倉庫管理、全部進(jìn)廠物資的質(zhì)量負(fù)責(zé),對器材的保管狀態(tài)和定額發(fā)放負(fù)有領(lǐng)導(dǎo)責(zé)任。
2、嚴(yán)把物資選購關(guān);嚴(yán)格進(jìn)貨渠道。嚴(yán)格抓好原材料入庫前的檢查,確保原材料質(zhì)量合格。
3、組織制訂合格原材料供給單位名單,參加對重要原材料供給單位質(zhì)量體系的考核,組織訂貨合同中質(zhì)量條款的起草工作,對因為忽略質(zhì)量條款而造成的訂貨差錯負(fù)有直接責(zé)任。
4、對設(shè)備的運行、保養(yǎng)、維修舉行檢查和管理。
5、完成好領(lǐng)導(dǎo)交辦的其它工作。
九、設(shè)備員職責(zé)
1、組織好群眾性的“三好”、“四會”活動,確保生產(chǎn)中使用的各種設(shè)備常常處于良好狀態(tài)。
2、把握設(shè)備的質(zhì)量動態(tài),改善設(shè)備的機械能力,提升工序能力指數(shù)。
3、確保設(shè)備修理后的精度和質(zhì)量。
4、完成好領(lǐng)導(dǎo)交辦的其它工作。
十、材料員職責(zé)
1、認(rèn)識把握橋梁生產(chǎn)的各種物資要求,負(fù)責(zé)梁場各類原材料、燃料、零配件、工器具和勞保用品等物資入庫保管,并按各項規(guī)則制度舉行管理、發(fā)放、使用。
2、仔細(xì)做好物資驗收、保管,嚴(yán)防偷盜、火災(zāi)、腐蝕變質(zhì),做到帳、卡、物收支存相符,并嚴(yán)格按定額、定量、限額控制使用、消耗。各種原始資料簽字完整歸檔管理。
3、嚴(yán)格按方案所需材料準(zhǔn)時領(lǐng)取,嚴(yán)格攤銷和核算物資成本,對貴重物品、工具支配采取集中管理,做到借出記下,歸還點檢。
4、對橋梁生產(chǎn)使用物資必需心中有數(shù),準(zhǔn)時方案選購,確保橋梁生產(chǎn),同有關(guān)業(yè)務(wù)部室轉(zhuǎn)送單據(jù)。準(zhǔn)時把握生產(chǎn)有關(guān)信息,給領(lǐng)導(dǎo)決策提供依據(jù)。
5、現(xiàn)場物料要求堆放整齊舉行標(biāo)識,做到限額發(fā)放使用。
6、做好物資管理工作,做好原始記錄,準(zhǔn)時填報各種報表,定期盤點,對盈虧現(xiàn)象找出緣由,幫助核算工作。權(quán)限
7、對所選購的物資和原材料沒有明確的規(guī)格、型號、質(zhì)量要求標(biāo)準(zhǔn)者,可否決選購和簽收。
8、完成好領(lǐng)導(dǎo)交辦的其它工作。
十一、資料員職責(zé)
1、負(fù)責(zé)管理體系文件及質(zhì)量記錄的統(tǒng)一管理工作。
2、負(fù)責(zé)對各種有效(或作廢)文件、圖冊及質(zhì)量記錄舉行標(biāo)識,并做好發(fā)放記下手續(xù)。
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