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母種培養(yǎng)基的制作德化鵬祥中學(xué)第一頁,共十五頁。食用菌栽培第二頁,共十五頁。食用菌栽培食用菌在分類上屬于真菌。食用菌靠不斷生長(zhǎng)著的菌絲體,從它們著生的基質(zhì)中吸收營養(yǎng),當(dāng)積累了足夠的養(yǎng)分,達(dá)到生理成熟后形成形形色色的子實(shí)體(也稱菇體)。食用菌的可食用部分絕大多數(shù)是子實(shí)體。第三頁,共十五頁。食用菌栽培食用菌不僅味美,而且營養(yǎng)豐富,富含蛋白質(zhì)、多種維生素和大量糖類。第四頁,共十五頁。食用菌栽培菌種,即食用菌生產(chǎn)中的“種子”。優(yōu)良菌種的制備是食用菌栽培中極其重要的環(huán)節(jié)。第五頁,共十五頁。食用菌栽培食用菌菌種的制備一般需要經(jīng)過母種、原種和栽培種三個(gè)培養(yǎng)步驟。菌種母種原種栽培種又稱一級(jí)種、試管種、斜面種二級(jí)種、瓶裝種三級(jí)種、袋裝種、生產(chǎn)種培養(yǎng)容器試管菌種瓶塑料袋、菌種瓶培養(yǎng)基固體(斜面)固體(或液體)固體第六頁,共十五頁。第一單元:母種培養(yǎng)基的制作母種,即由組織分離(由食用菌實(shí)體的組織直接分離菌種的方法)或孢子分離(將食用菌的孢子接種在培養(yǎng)基上,讓其萌發(fā)成菌絲而獲得菌種的方法)等方法獲得的菌絲體,又稱一級(jí)菌種,由于菌絲生長(zhǎng)在試管的斜面培養(yǎng)基上,因此又稱試管種或斜面種。生產(chǎn)上的母種實(shí)際上是再生母種。母種既可繁殖原種,又適用于菌種保藏。第七頁,共十五頁。第一單元:母種培養(yǎng)基的制作培養(yǎng)基是用人工方法配置的、供食用菌生長(zhǎng)繁殖所需營養(yǎng)的基質(zhì)。母種培養(yǎng)基,是專門用來培養(yǎng)母種的營養(yǎng)基質(zhì),一般用試管作容器,故又稱試管斜面培養(yǎng)基,常用于菌種分離、提純及轉(zhuǎn)管、保存菌種。母種試管斜面培養(yǎng)基第八頁,共十五頁。母種斜面培養(yǎng)基的制作按200mL水的比例稱取各種材料,配制16支試管培養(yǎng)基,以備制種用。一、母種培養(yǎng)基(常用的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基)配方:馬鈴薯200g、瓊脂18~22g、葡萄糖或白糖20g、水1000mL。瓊脂是由麒麟菜、石花菜或江籬(屬紅藻)經(jīng)加熱至溶化后,加以冷卻凝固而成的海藻精華。瓊脂含有豐富的膳食纖維(含量為80.9%),蛋白質(zhì)含量高,熱量低,具有排毒養(yǎng)顏、瀉火、潤(rùn)腸、降血壓、降血糖和防癌作用。第九頁,共十五頁。母種斜面培養(yǎng)基的制作二、實(shí)驗(yàn)用具:天平1臺(tái)、小刀1把、搪瓷量杯2個(gè)、鋁鍋1個(gè)、電爐1個(gè)、玻璃分液漏斗1個(gè)、試管16支、試管架1個(gè)、高壓滅菌鍋1個(gè)(共用)、棉花塞16粒、漏斗架1個(gè)、紗布1塊。第十頁,共十五頁。母種斜面培養(yǎng)基的制作三、實(shí)驗(yàn)材料:馬鈴薯40g、瓊脂4g、葡萄糖或白糖4g、水200mL。瓊脂第十一頁,共十五頁。母種斜面培養(yǎng)基的制作四、方法步驟:1、稱取材料:將馬鈴薯洗干凈,去皮,稱取40g,切成薄片;稱取瓊脂4g和葡萄糖(或白糖)4g;量取水200mL。2、將40g馬鈴薯薄片放入鋁鍋,加入200mL水,加熱煮沸30分鐘,趁熱用6層紗布過濾。3、馬鈴薯的濾液用開水補(bǔ)足到200mL,倒回鋁鍋,加入4g瓊脂和4g葡萄糖(或白糖),用小火繼續(xù)加熱并不斷攪拌至全部熔化為止,最后補(bǔ)水至200mL。第十二頁,共十五頁。母種斜面培養(yǎng)基的制作4、趁熱分裝入試管內(nèi),每支試管裝至其長(zhǎng)度的五分之一(試管口的內(nèi)外3cm內(nèi)粘附的培養(yǎng)基,必須擦拭干凈),塞入棉塞(棉塞總長(zhǎng)4cm,要求松緊適宜,塞入長(zhǎng)度為棉塞長(zhǎng)度的2/3)。然后以每7~10支為一捆,棉塞外再包上牛皮紙,并用繩扎好。5、將高壓鍋蓋擰開,加入適量的水,把包扎好的試管直立放入高壓鍋的內(nèi)桶(不能裝太緊,防止阻礙蒸氣流通),蓋上鍋蓋(依此、對(duì)稱旋緊螺絲),進(jìn)行滅菌。6、待高壓鍋內(nèi)壓力達(dá)0.5千克/平方厘米時(shí),打開放氣閥門放氣,待壓力表指示為“0”時(shí),關(guān)放氣閥門。在壓力達(dá)1.5千克/平方厘米時(shí),用小火維持溫度126℃(滅菌期間應(yīng)專人看守),30分鐘后停止加熱,當(dāng)壓力下降到接近“0”時(shí),移入無菌室,先打開放氣閥,再打開高壓鍋蓋。第十三頁,共十五頁。母種斜面培養(yǎng)基的制作7、培養(yǎng)基冷卻到60℃左右,從
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