高考生物6年題按知識點分類匯編5蛋白質的提取和分離

蛋白質的提取和分離2012廣東29．（16分）食品種類多，酸堿度范圍廣。生物興趣小組擬探究在食品生產應用范圍較廣的蛋白酶，查閱相關文獻，得知：（1）pH對不同蛋白酶的活力影響有差異。據圖12可知，_________更適宜作為食品添加劑，理由是________。蛋白酶的活力可用________的量來表示。該蛋白酶的提取工藝流程如下：興趣小組分別對酶保護劑濃度、提取液pH進行了探究實驗。結果顯示，酶保護劑濃度在0.02～0.06mol/L范圍內，酶活力較高；提取液pH在6.0～8.0范圍內，酶活力較高。他們認為，要進一步提高粗酶制劑的酶活力，以達到最佳提取效果，還需對酶保護劑濃度和提取液pH進行優(yōu)化，并確定以此為探究課題。請擬定該課題名稱，設計實驗結果記錄表。【答案】（1）木瓜蛋白酶由圖可以看出，木瓜蛋白酶的活性不隨pH的變化而變化單位時間內底物消耗（產物產生）（2）課題：探究酶保護劑的最適濃度和提取液的最適pH單位時間內底物的消耗量提取液的pH6.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.0酶保護劑的濃度0.020.030.040.050.06【解析】（1）審題結合圖形和文字，在題目中已經提供了信息“食品種類多，酸堿度范圍廣”，所以選擇的食品添加劑應該有較廣的酸堿適應范圍。從圖形中，可以看出木瓜蛋白酶的適應范圍最廣，所以可以選作食品添加劑。酶的活力，一般用酶催化的底物消耗量或者產物生成量來表示。（2）實驗設計，應該明確實驗目的：探究酶保護劑的最適濃度和提取液的最適pH值，所以可以將酶保護劑的濃度和提取液的pH值作為自變量，因變量為單位時間內底物的消耗量?！驹囶}點評】本題以蛋白酶在食品方面的應用為背景，考查了蛋白酶的應用、活力測定、蛋白酶的提取流程等內容和學生繪制表格的能力，難度不大。2012安徽31．（24分）甲型血友病是由X染色體上的隱性基因導致的遺傳?。℉對h為顯性）。圖1中兩個家系都有血友病發(fā)病史，III2和III3婚后生下一個性染色體組成是XXY的非血友病兒子（IV2），家系中的其他成員性染色體組成均正常。圖1（1）根據圖1，（填“能”或“不能”）確定IV2兩條X染色體的來源；III4與正常女子結婚，推斷其女兒患血友病的概率是。（2）兩個家系的甲型血友病均由凝血因子VIII（簡稱F8，即抗血友病球蛋白）基因堿基對缺失所致。為探明IV2的病因，對家系的第III、IV代成員F8基因的特異片段進行了PCR擴增，其產物電泳結果如圖2所示，結合圖I，推斷III3的基因型是。請用圖解和必要的文字說明IV2非血友病XXY的形成原因。現III3再次懷孕，產前診斷顯示胎兒（IV3）細胞的染色體為46，XY；F8基因的PCR檢測結果如圖2所示。由此建議III3。圖2（4）補給F8可治療甲型血友病。采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時，在凝膠裝填色譜柱后，需要用緩沖液處理較長時間，其目的是；若F8比某些雜蛋白先收集到，說明F8的相對分子質量較這些雜蛋白。（5）利用轉基因豬乳腺生物反應器可生產F8。要使乳腺細胞合成F8，構建表達載體時，必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的等調控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆篩選獲得，該cDNA比染色體上的F8基因短，原因是該cDNA沒有。（6）為獲得更多的轉基因母豬，可以采用體細胞克隆技術，將純合轉基因母豬的體細胞核注入，構成重組胚胎進行繁殖。【答案】（1）不能0（2）XHXh，遺傳圖解如下：說明：說明：Ⅲ2產生異常的XhY精子和Ⅲ3產生正常的卵細胞XH結合而成XHXhY在III3形成卵細胞過程中的減數第二次分裂后期，帶有基因H的姐妹染色單體移向細胞的同一極，形成XHXH卵細胞，XHXH卵細胞與正常精子結合形成XHXHY受精卵。（3）終止妊娠。（4）洗滌平衡凝膠，并使凝膠裝填緊密大（5）啟動子內含子（6）去核的卵母細胞【解析】（1）因為Ⅳ2的染色體組成可能是XHXH，也可能是XHXhY，所以不能確定，Ⅲ4的基因型為XHY，所以后代女性中沒有患病個體。（2）由圖可知第一條帶是顯性，第二條帶是隱性，所以Ⅲ3基因型為XHXh，圖解如下：在III3形成卵細胞過程中的減數第二次分裂后期，帶有基因H的姐妹染色單體移向細胞的同一極，形成XHXH卵細胞，XHXH卵細胞與正常精子結合形成XHXHY受精卵。（3）由題可知，IV3是血友病患者，所以建議III3終止妊娠。（4）采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時，在凝膠裝填色譜柱后，需要用緩沖液處理較長時間，其目的是洗滌平衡凝膠，并使凝膠裝填緊密；若F8比某些雜蛋白先收集到，說明F8的相對分子質量較這些雜蛋白較大。（5）要使乳腺細胞合成F8，構建表達載體時，必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的啟動子和終止子等調控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆篩選獲得，該cDNA比染色體上的F8基因短，原因是該cDNA沒有內含子。（6）為獲得更多的轉基因母豬，可以采用體細胞克隆技術，將純合轉基因母豬的體細胞核注入去核卵細胞，構成重組胚胎進行繁殖?！驹囶}點評】本題考查了遺傳規(guī)律，減數分裂，血紅蛋白的提取，基因工程，胚胎工程；遺傳規(guī)律是近幾年的考查熱點，但每年考查的都有區(qū)別，在解遺傳題時，要記住一些常用解題方法，減數分裂的圖示是高中生物的基本技能，會畫，能理解，能夠對遺傳規(guī)律有個很高的認識，遺傳實質都體現在其中。至于選修部分，基因工程、胚胎工程是近幾年的考查熱點，而血紅蛋白的提取，是今年生物考試說明中有，意味著我們要認真閱讀考試說明?？傮w來說，該題是本試卷中的難題，原因是，遺傳本身對于學生來說就難，加之選修部分題目較偏僻，從該題可以看出，安徽高考對于選修的考查，與必修部分建立了聯系，進行了學科內的綜合，希望學生在備考的過程中多加注意。2011廣東5.以下關于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是（D）A．洗滌紅細胞時，使用生理鹽水可防止紅細胞破裂B．豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核，提純時雜蛋白較少C．血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測D．在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白比分子量較少的雜蛋白移動慢2011山東34.（8分）（生物—生物技術實驗）研究發(fā)現柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白質）均有抑菌作用，兩者的提取及應用如圖所示。（3）培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長提供______________。電泳法純化乳酸菌素時，若分離帶電荷相同的蛋白質，則其分子量越大，電泳速度___________。答案：（3）碳源和氮源越慢09年廣東38.（10分）生物技術實踐（2）利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖：Ⅰ中的主要成分為；Ⅱ中包含植酸酶等多種蛋白質。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據。答案：（2）小分子雜質，凝膠色譜法：根據蛋白質之間的分子大小、吸附性質等差異進行純化（或電泳法：根據蛋白質之間的電荷、分子大小等差異進行純化）；2008山東34.(8分)【生物—生物技術實踐】科學家發(fā)現家蠅體內存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質具有極強的抗菌能力，受到研究者重視。(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法．其原理是根據蛋白質分子的、大小及形狀不同，在電場中的不同而實現分離。答案：(1)電荷(帶電情況)遷移速度(2)碳源氮源2008江蘇18．下列敘述中錯誤的是A．改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B．在沸水浴中，DNA遇二苯胺試劑會呈現藍色C．加鹽和加酒都能抑制微生物的生長D．密封瓶口前最好將瓶口通過火焰以防雜菌污染答案：A2007江蘇38．（8分）單基因遺傳病可以通過核酸雜交技術進行早期診斷。鐮刀型細胞貧血癥是一種在地中海地區(qū)發(fā)病率較高的單基因遺傳病。已知紅細胞正常個體的基因型為BB、Bb，鐮刀型細胞貧血癥患者的基因型為bb。有一對夫婦被檢測出均為該致病基因的攜帶者，為了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都進行產前診斷。下圖為其產前核酸分子雜交診斷和結果示意圖。(1)從圖中可見，該基因突變是由于引起的。巧合的是，這個位點的突變使得原來正常基因的限制酶切割位點丟失。正?；蛟搮^(qū)域上有3個酶切位點，突變基因上只有2個酶切位點，經限制酶切割后，凝膠電泳分離酶切片段，與探針雜交后可顯示出不同的帶譜，正?；蝻@示條，突變基因顯示條。(2)DNA或RNA分子探針要用等標記。利用核酸分子雜交原理，根據圖中突變基因的核苷酸序列(…ACGTGTT…)，寫出作為探針的核糖核苷酸序列。(3)根據凝膠電泳帶譜分析可以確定胎兒是否會患有鐮刀型細胞貧血癥。這對夫婦4次妊娠的胎兒Ⅱ-l～II-4中基因型BB的個體是，Bb的個體是，bb的個體是?！敬鸢浮浚?分）(1)堿基對改變(或A變成T)21(2)放射性同位素(或熒光分子等)…UGCACAA…(3)Ⅱ一l和Ⅱ一4Ⅱ一3Ⅱ一207新課標廣東卷41．（《現代生物科技專題》，15分）香蕉原產熱帶地區(qū)，是我國南方重要的經濟作物之一。廣東省冬季常受強寒潮和霜凍影響，對香蕉生長發(fā)育影響很大。由香蕉束頂病毒（BBTV，單鏈環(huán)狀DNA病毒）引起的香蕉束頂病，對香蕉生產的危害十分嚴重。當前香蕉栽培品種多為三倍體，由于無性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遺傳變異性，因此利用基因工程等現代科技手段提高其種質水平，具有重要意義。請根據上述材料，回答下列問題：（5）如何利用afp基因，通過轉基因技術獲得抗寒能力提高的香蕉植株?在運用轉基因香蕉的過程中，在生態(tài)安全方面可能會出現什么問題?（列舉兩點）【答案】（15分）（5）將afp基因插入土壤農桿菌的質粒，