仔豬副傷寒活疫苗課件

仔豬副傷寒活疫苗（C500株）生產(chǎn)操作細(xì)則本品系使用免疫原性良好的豬霍亂沙門氏菌弱毒株，接種適宜培養(yǎng)基培養(yǎng)，收獲培養(yǎng)物加入適當(dāng)穩(wěn)定劑，經(jīng)真空冷凍干燥制成。本品用于預(yù)防仔豬副傷寒活疫苗。1、菌種1.1疫苗生產(chǎn)用菌種為豬霍亂沙門氏菌C500弱毒株，原種購于中國獸藥檢查所，經(jīng)擴(kuò)繁后由質(zhì)檢部鑒定、保管、供應(yīng)。1.2菌種標(biāo)準(zhǔn)1.2.1C500弱毒株應(yīng)符合以下標(biāo)準(zhǔn)1.2.1.1形態(tài)和生化特性本菌為革蘭氏陰性小桿菌，生化特性應(yīng)符合細(xì)菌分類學(xué)中本菌的特性。1.2.1.2培養(yǎng)特性在普通瓊脂平板上，37℃培養(yǎng)18-22小時，菌落為圓形、邊緣整齊、突起、半透明、略濕潤的光滑型。1.2.1.3血清學(xué)特性普通瓊脂新鮮培養(yǎng)物用玻片凝集檢查法，對沙門氏菌屬O7因子血清出現(xiàn)凝集反應(yīng)。1.2.1.4特異性在含1%的醋酸鉈的普通肉湯中呈均勻渾濁生長，用新鮮普通瓊脂培養(yǎng)物與1\500%吖啶黃溶液做玻片凝集試驗應(yīng)不出現(xiàn)凝集反應(yīng)。1.2.1.5安全性用pH7.4-7.6的普通肉湯或蛋白胨水，將培養(yǎng)24-48小時的普通瓊脂斜面培養(yǎng)物洗下并作活菌計數(shù)，注射下列動物應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)。1.3凍干菌種2-8℃保存期為10年。2、疫苗制造及半成品檢驗2.1生產(chǎn)用菌種的制備2.1.1一級種子繁殖和鑒定凍干種子用普通肉湯稀釋或經(jīng)普通肉湯后，接種普通瓊脂平板，37℃培養(yǎng)18-20小時，觀察菌落形態(tài)，菌落為圓形、邊緣整齊、突起、半透明、略濕潤的光滑型。選取中等偏大的菌落5-10個，混合后接種于普通瓊脂斜面若干只，37℃培養(yǎng)24小時，經(jīng)純粹檢驗合格，并用0.2%吖啶黃溶液做玻片凝集試驗應(yīng)合格，作為一級種子。在2-8℃保存期不超過1個月，在此期間可以移植1-2次，在培養(yǎng)基上繼代不超過5代。2.2制苗用培養(yǎng)基制備2.2.1材料牛肉要求應(yīng)采購新鮮的精牛肉，3-5歲，前后腿、胸部，盡量少含脂肪、肌腱、筋膜等。魚蛋白胨1.5%胰蛋白胨0.5%氯化鈉0.5%氫氧化鈉水2.2.2制備方法將新鮮的精牛肉去掉脂肪、筋膜等絞碎，純化水低溫浸泡24小時，100℃煮沸2小時，補(bǔ)足失去的水分，冷卻靜止沉淀24小時，抽取上清液，加入魚蛋白胨、胰蛋白胨、氯化鈉溶化，用氫氧化鈉溶液調(diào)整pH值至7.8，煮沸20分鐘，降溫靜止沉淀。3.1條件準(zhǔn)備3.1.1根據(jù)菌液制備所需物品及設(shè)備條件，進(jìn)行全面準(zhǔn)備。3.1.2按使用時間，提前做好對發(fā)酵罐空消工作，包括罐體、空氣過濾系統(tǒng)、各個進(jìn)出料口，確保滅菌無死角。將準(zhǔn)備好的各種物品提前移入潔凈工作間待用。3.1.3在工作開始前30～40min，按凈化級別要求調(diào)整送風(fēng)量，達(dá)到潔凈級別要求。3.1.4提前一天對發(fā)酵罐進(jìn)行全面滅菌，并保持發(fā)酵罐正壓。滅菌結(jié)束后馬上夾層通冷水進(jìn)行降溫并及時補(bǔ)充無菌空氣保持罐內(nèi)正壓。當(dāng)溫度降至40℃時，關(guān)閉冷水管道停止降溫，通無菌空氣保持罐內(nèi)正壓，打開自動控溫系統(tǒng)的閥門和開關(guān)，溫度控制在37℃。3.3接種在火焰保護(hù)下，連接種子瓶和發(fā)酵罐接種口，打開發(fā)酵罐出氣閥關(guān)小發(fā)酵罐進(jìn)氣閥使罐內(nèi)壓力接近于0，確認(rèn)無誤后打開接種閥門，利用正壓空氣將二級種子按1%-2%的接種量接種于普通肉湯中，然后按2.5%加入40%滅菌葡萄糖溶液。4、配苗將事先準(zhǔn)備好的凍干保護(hù)劑加入收苗瓶中搖勻，保護(hù)劑和菌液的比例是1:7，明膠和蔗糖的最終含量分別是1.3%和5%。配苗完成后馬上進(jìn)行分裝和凍干。注意事項：1、培養(yǎng)基是菌苗生產(chǎn)的關(guān)鍵，一定要把握好原材料的質(zhì)量。2、發(fā)酵罐滅菌時，應(yīng)注意千萬不要留有死角，通氣管道壓力應(yīng)高于罐內(nèi)壓力，不要造成培養(yǎng)基倒吸入空氣過濾器。3、通氣培養(yǎng)時應(yīng)認(rèn)真仔細(xì)，10小時后每小時要測定pH值，根據(jù)pH值的變化加入適量的葡萄糖溶液。4、注意無菌操作，生產(chǎn)種子應(yīng)進(jìn)行純粹檢驗，接種、補(bǔ)料應(yīng)盡量采用管道連接而不采用開口方式進(jìn)行操作。5、合理掌握收苗時間，提高凍干菌存率。仔豬副傷寒是由沙門氏菌屬引起的一種嚴(yán)重危害仔豬生產(chǎn)的傳染病。臨診上多表現(xiàn)為敗血癥和腸炎，也可使懷孕母豬發(fā)生流產(chǎn)。該病對6月以內(nèi)仔豬易發(fā)，特別是1—4月齡發(fā)病較多，病程一般在2天至3周，長的達(dá)1個月以上，往往因體質(zhì)下降并發(fā)其它疫病，治療時間長，效果不佳。本病潛伏期為3天～30天。本病是由于仔豬的飼養(yǎng)管理及衛(wèi)生條件不良促進(jìn)發(fā)生和傳播的。因此，預(yù)防本病的根本措施是必須認(rèn)真貫徹“預(yù)防為主”的方針。發(fā)病機(jī)制沙門氏菌的許多血清型可使人感染，發(fā)生食物中毒和敗血癥等，是重要的人獸共患病原體。由于抗菌藥物的廣泛使用（包括作為豬飼料添加劑）等因素的影響，該類細(xì)菌耐藥性日趨嚴(yán)重，發(fā)病率逐漸上升。各種年齡豬只均可感染沙門氏菌，但仔豬較成豬易感，6月齡以下的仔豬（尤其以1—4月齡者）最易感。帶病豬只和帶菌豬只是本病的主要傳染源。病原隨糞便、尿、乳汁以及流產(chǎn)的胎兒、胎衣和羊水排出，污染水源和飼料等，經(jīng)消化道感染健康豬只?；疾∝i只與健康豬只交配或用患病豬只的精液人工受精可發(fā)生感染。此外，子宮內(nèi)感染也有可能發(fā)生。本病一年四季均可發(fā)生，但豬在多雨潮濕季節(jié)發(fā)病較多。本病一般呈散發(fā)性或地方流行性。飼養(yǎng)管理較好的豬群，即使發(fā)病，亦多呈散發(fā)性；反之，則常為地方流行性。流行特點下列因素可促進(jìn)本病的發(fā)生：1、環(huán)境污穢、潮濕，圈舍擁擠，糞便堆積通風(fēng)不良，溫度過低或過高，飼料和飲水供應(yīng)不良。2、長途運輸中氣候惡劣、疲勞和饑餓、內(nèi)寄生蟲和病毒感染。3、分娩、手術(shù)。4、母豬缺奶。5、新引進(jìn)豬只未實行隔離檢疫等。1、多年來對生豬堅持春秋普防制度，主要是針對豬瘟、豬肺疫、豬丹毒和口蹄疫，而忽視了仔豬副傷寒的預(yù)防。2、仔豬副傷寒的免疫程序和方法不統(tǒng)一，農(nóng)戶愿防則防，不分仔豬日岑和體況，不注重免疫方法。3、仔豬副傷寒發(fā)生后，注重的是治療，而未從預(yù)防措施上多研究探索。4、仔豬圈舍環(huán)境衛(wèi)生差，消毒不經(jīng)常、不徹底。農(nóng)戶對母豬和仔豬的飼養(yǎng)管理松懈。5、同院鄰居戶所養(yǎng)母豬易相互感染發(fā)病，多在低溫潮濕雨季多發(fā)。6、基層獸醫(yī)站無診斷化驗設(shè)備，加之仔豬副傷寒往往并發(fā)其它疫病，導(dǎo)致準(zhǔn)確診斷和治療不及時。仔豬副傷寒流行原因分析1、對仔豬推行統(tǒng)一的副傷寒免疫技術(shù)，是控制仔豬副傷寒發(fā)生的根本措施。2、仔豬副傷寒免疫技術(shù)是結(jié)合母豬飼養(yǎng)戶仔豬培育的實際而制定的，合理適用，易為獸醫(yī)人員掌握和養(yǎng)母豬戶接受。3、我鎮(zhèn)仔豬仍存在零星散發(fā)副傷寒的情況，可能與每頭仔豬的體質(zhì)和采食副傷寒疫苗飼料的多少有關(guān)，有待于進(jìn)一步總結(jié)完善該免疫技術(shù)。4、仔豬副傷寒在多雨潮濕季節(jié)最易發(fā)生，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，改善衛(wèi)生條件，嚴(yán)格環(huán)境消毒，增強(qiáng)仔豬抵抗力，可有效遏制內(nèi)源性感染。免疫注意事項免疫失敗的原因1.粗放式飼料管理，豬群健康水平差。2.貫徹獸醫(yī)衛(wèi)生防疫工作不夠。