湖北省咸寧市2023年生物高二第二學(xué)期期末達(dá)標(biāo)檢測模擬試題（含解析）

2023學(xué)年高二年級下學(xué)期生物模擬測試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．某棄耕荒地經(jīng)過很長時間的演替，最終形成森林。下列敘述正確的是（）A．該棄耕荒地的演替方向受氣候條件的影響B(tài)．該群落在演替過程中優(yōu)勢種始終保持不變C．森林是頂級群落，不再發(fā)生變化D．該棄耕荒地的演替屬于初生演替2．某小組進(jìn)行了有關(guān)酶的實驗，如下表所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）項目淀粉溶液蔗糖溶液淀粉酶蔗糖酶要林試劑水浴加熱磚紅色沉淀試管①+-+-++試管②-++-+-試管③-+-++？注：“+”表示添加或有，“一”表示不添加或沒有A．斐林試劑中的NaOH為CuSO4與還原糖反應(yīng)提供堿性條件B．試管③中沒有磚紅色沉淀生成C．該實驗的目的是驗證酶的催化具有專一性D．為減少操作可用碘液替代斐林試劑3．下圖是某種生物的精細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞內(nèi)染色體的類型（黑色來自父方、白色來自母方），下列說法錯誤的是A．可能來自同一個次級精母細(xì)胞的兩個精細(xì)胞是A和E以及C和DB．這6個精細(xì)胞至少來自2個精原細(xì)胞，至少來自4個次級精母細(xì)胞C．精細(xì)胞A的一條染色體在初級精母細(xì)胞時期發(fā)生了交叉互換D．這6個精細(xì)胞中同時含有該生物父方和母方遺傳物質(zhì)的是A、B、C細(xì)胞4．犬細(xì)小病毒(CPV)的單克隆抗體（CpvMcAb）可抑制病毒對宿主細(xì)胞的侵染，現(xiàn)利用小鼠制備該單克隆抗體時，不需要考慮()A．選擇的小鼠必須是純種B．用同種抗原多次注射小鼠C．利用促融技術(shù)促進(jìn)細(xì)胞融合D．篩選時采用單個細(xì)胞克隆化培養(yǎng)技術(shù)5．關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性,下列說法中不正確的是()A．運用重組DNA技術(shù)可以將致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器B．轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)入自然界后不會與野生物種雜交進(jìn)而威脅其他生物的生存C．人類在發(fā)展基因工程作物時,沒有充分考慮生物和環(huán)境之間的相互影響D．一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題,要馬上停止實驗,并銷毀重組生物6．細(xì)胞有氧呼吸過程的三個階段中都產(chǎn)生的物質(zhì)是：A．ATP B．[H] C．C02 D．丙酮酸7．如圖是PCR技術(shù)擴增中，引物對與模板結(jié)合的示意圖，則由一個該模板DNA片段擴增n次后，可獲得2n個子代DNA片段。下列有關(guān)敘述正確的是A．該過程需要的原料是核糖核苷酸B．該過程中至少需要引物的數(shù)量是2n-2C．該過程需要解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶D．兩條鏈等長的子代DNA數(shù)量是2n-2n8．（10分）圖1至4表示不同情況下某些物質(zhì)跨膜運輸速度的曲線圖。下列相關(guān)敘述，不正確的是（）A．可用圖1與圖3表示甘油進(jìn)入人的皮膚細(xì)胞B．可用圖2與圖4表示人體小腸細(xì)胞吸收葡糖糖C．圖中A、C兩點的限制運輸速度的主要因素不相同D．圖中B、D兩點的限制運輸速度的主要因素不相同二、非選擇題9．（10分）細(xì)胞的分離和培養(yǎng)成功是胚胎工程中的重大成就之一，在基礎(chǔ)生物學(xué)、畜牧學(xué)和醫(yī)學(xué)上都具有十分重要的應(yīng)用價值。下圖是ES細(xì)胞利用的部分過程，請回答下列問題：（1）①過程體現(xiàn)了ES細(xì)胞具有__________的特點，該過程的實質(zhì)是__________。（2）由于ES細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生__________，科學(xué)家們嘗試?yán)肊S細(xì)胞來制備單克隆抗體，過程如圖所示。X細(xì)胞通常從小鼠的__________（填器官名稱）中抽取。（3）經(jīng)過篩選得到的Y細(xì)胞應(yīng)具備的特點是__________。采用體外培養(yǎng)法經(jīng)③過程制備單克隆抗體時，通常需要在培養(yǎng)液中添加一定量的__________，以防培養(yǎng)過程中的污染；同時為滿足營養(yǎng)需求，在人工配制的合成培養(yǎng)基中通常需要加入__________等一些天然成分。10．（14分）植物細(xì)胞受損后通常會釋放出酚氧化酶，使無色的酚氧化生成褐色的物質(zhì)。人們利用酚氧化酶的功能和特性加工制作商品。請分析回答問題：（1）植物細(xì)胞中的酚類物質(zhì)與酚氧化酶在細(xì)胞質(zhì)中是分隔開的，是因為細(xì)胞內(nèi)具有____________________系統(tǒng)。（2）把含有酚氧化酶的提取液作如下表的處理：步驟試管①酚氧化酶提取液的處理②加入緩沖液③加入酚類底物實驗后的顏色A不作處理2mL2mL褐色B加入蛋白酶，10min2mL2mL無色C加入三氯乙酸（強酸），10min2mL2mL？酚氧化酶的作用機理是_____________________。實驗后試管C中的顏色為__________________。試管A、B對照，說明酚氧化酶的化學(xué)本質(zhì)是_______________。試管A、C對照，能獲得的結(jié)論是_____________。（3）茶樹葉細(xì)胞中存在眾多種類的酚類物質(zhì)與酚氧化酶。顏色為綠色的茶制取過程中必須先進(jìn)行_______________（手工或機械揉搓；熱鍋高溫炒制；曬干、炒干）工藝過程，這一過程的原理是_______________。11．（14分）許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ′基因（內(nèi)含EcoRⅠ的酶切位點），其編碼的產(chǎn)物β—半乳糖苷酶在X—gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。基因工程中常利用該原理從導(dǎo)入質(zhì)粒的受體細(xì)胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過程如下圖所示。請據(jù)圖回答：（1）獲取目的基因時，可以從____________中直接提取。（2）限制酶EcoRⅠ的識別序列和酶切位點是-G↓AATTC-，SmaⅠ的識別序列和酶切位點是-CCC↓GGG-。圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相成的末端，連接的末端序列是______。（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中，除了目的基因外，還必須有_________和_________、復(fù)制原點和標(biāo)記基因等。（4）轉(zhuǎn)化過程中，大腸桿菌應(yīng)先用____________處理，使其成為____________細(xì)胞。（5）菌落①②③中顏色為白色的是____________（填序號），原因是_______________。（6）菌落③中的目的基因是否表達(dá)，可采用的分子檢測辦法是____________。12．蟲草中的超氧化物歧化酶(SOD)具有抗衰老作用，研究人員培育了能合成SOD的轉(zhuǎn)基因酵母菌?；卮鹣铝袉栴}：注:HindⅢ和ApaLⅠ是兩種限制酶,箭頭表示酶的切割位置。（1）將圖中的重組DNA分子用HinⅢ和ApaLⅠ完全酶切后,可得到____種DNA片段。圖示的表達(dá)載體存在氨芐青霉素抗性基因，不能導(dǎo)入用于食品生產(chǎn)的酵母菌中,據(jù)圖分析，可用______（填限制酶的種類）切除該抗性基因的部分片段使其失效，再用_________酶使表達(dá)載體重新連接起來。（2）作為受體細(xì)胞的酵母菌缺失URA3基因，必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活，因此，圖示表達(dá)載體上的URA3基因可作為________供鑒定和選擇，為了篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的酵母菌，所使用的培養(yǎng)基______(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為______。為了確定受體細(xì)胞中SOD基因是否轉(zhuǎn)錄,可用標(biāo)記的__________作探針進(jìn)行分子雜交檢測，分子雜交的原理是___________________。（4）利用蛋白質(zhì)工程獲得活性更高的SOD時,需根據(jù)所設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測其_____________序列,最終確定相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列并經(jīng)____________獲得所需的基因。

參考答案（含答案詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【答案解析】

隨時間的推移，一個群落被另一個群落代替的過程，叫做演替。演替的種類有初生演替和次生演替兩種。1、初生演替指在一個從來沒有植被覆蓋的地面，或者原來存在植被，但是被徹底消滅了的地方發(fā)生的演替，如在沙丘、火山巖冰川泥進(jìn)行的演替。2、次生演替指在原有植被雖已不存在，但原有土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子或其他繁殖體(如能發(fā)芽的地下基)的地方發(fā)生的演替，如火災(zāi)后的草原過量砍伐的森林、棄耕的農(nóng)田上進(jìn)行的演替。3、群落演替的原因：生物群落的演替是群落內(nèi)部因素(包括種內(nèi)關(guān)系、種間關(guān)系等)與外界環(huán)境因素綜合作用的結(jié)果。4、演替的趨勢：生物數(shù)量越來越多，種類越來越豐富，群落的結(jié)構(gòu)也越來越復(fù)雜，穩(wěn)定性增強?！绢}目詳解】A、該棄耕荒地的演替方向受氣候條件的影響，屬于次生演替，A正確；B、該群落在演替過程中優(yōu)勢種隨著演替類型發(fā)生變化，B錯誤；C、一般情況下，森林是頂級群落，不過還受環(huán)境影響，不是每一個演替都能形成森林，C錯誤；D、該棄耕荒地的演替屬于次生演替，D錯誤；故選A。2、C【答案解析】

斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色（沉淀）。斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖（如葡萄糖、麥芽糖、果糖）存在與否，而不能鑒定非還原性糖（如淀粉）?！绢}目詳解】A、斐林試劑中的NaOH與CuSO4需要混合使用，二者結(jié)合形成的Cu（OH）2與還原糖會發(fā)生磚紅色反應(yīng)，A錯誤；B、試管③中蔗糖在蔗糖酶的催化下，生成葡萄糖和果糖，可以與斐林試劑發(fā)生磚紅色反應(yīng)，B錯誤；C、該實驗用同種酶催化不同的底物或不同的酶催化同種底物，可以驗證酶的專一性，C正確；D、碘液不能鑒定蔗糖是否水解，故不能替代斐林試劑，D錯誤。故選C。3、D【答案解析】

減數(shù)分裂是進(jìn)行有性生殖的生物，在產(chǎn)生成熟生殖細(xì)胞時進(jìn)行的染色體數(shù)目減半的細(xì)胞分裂。在細(xì)胞分裂過程中，染色體只復(fù)制一次，而細(xì)胞分裂兩次。減數(shù)分裂的結(jié)果是，成熟生殖細(xì)胞中的染色體數(shù)目比原始生殖細(xì)胞的減少一半?！绢}目詳解】A、次級精母細(xì)胞形成精子時會發(fā)生著絲點的分裂，姐妹染色單體的顏色完全相同（未發(fā)生交叉互換）或少部分不同（交叉互換），可能來自同一個次級精母細(xì)胞的兩個精細(xì)胞是A和E以及C和D，A正確；B、A和E可能來自一個次級精母細(xì)胞，C和D可能來自于一個次級精母細(xì)胞，B和F分別來自不同的次級精母細(xì)胞，AEF可能來自于一個精原細(xì)胞，BCD可能來自于一個精原細(xì)胞，故這6個精細(xì)胞至少來自2個精原細(xì)胞，至少來自4個次級精母細(xì)胞，B正確；C、精細(xì)胞A中黑色的染色體上含有一小段白色片段，說明初級精母細(xì)胞時期發(fā)生了交叉互換，C正確；D、這6個精細(xì)胞中同時含有該生物父方和母方遺傳物質(zhì)（即同時含有黑色和白色染色體）的是A、B、C、E、F，D錯誤。故選D。4、A【答案解析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！绢}目詳解】A.單克隆抗體的制備，目的是要獲取化學(xué)性質(zhì)單一的抗體，和選擇的小鼠是否為純種無關(guān)，A錯誤；

B.用同種抗原多次注射小鼠，使之產(chǎn)生數(shù)量較多的漿細(xì)胞，便于獲取漿細(xì)胞，B正確；

C.誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合要采用一定的促融技術(shù)，C正確；

D.一種漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，故篩選時采用單個細(xì)胞克隆化培養(yǎng)可獲得大量能產(chǎn)生同種特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。

故選A。【答案點睛】本題考查動物細(xì)胞工程的相關(guān)知識。意在考查學(xué)生能理解單克隆抗體的知識要點，綜合運用所學(xué)知識分析問題的能力。5、B【答案解析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。有關(guān)生物安全問題，反對者的觀點是：轉(zhuǎn)基因植物可能會對生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險和威脅。他們的理由：①轉(zhuǎn)基因植物擴散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉(zhuǎn)基因植物競爭能力強，可能成為“入侵的外來物種”；③轉(zhuǎn)基因植物的外源基因與細(xì)菌或病毒雜交，重組出有害的病原體；④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”，據(jù)此答題?！绢}目詳解】A、轉(zhuǎn)基因技術(shù)如果被用于軍事，制造出生物武器，那將是對人類社會極大的毀滅，A正確；B、轉(zhuǎn)基因生物有可能會在近緣物種之間通過花粉雜交，造成基因庫的污染，B錯誤；C、人類在推廣轉(zhuǎn)基因作物時，沒有充分考慮生物和環(huán)境之間的相互影響，C正確；D、實驗過程中一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物，D正確。故選B?！敬鸢更c睛】本題考查生物技術(shù)的安全性和倫理問題的分析，此題容易混淆，基本知識必須扎實，易混知識必須區(qū)分清楚。6、A【答案解析】

細(xì)胞有氧呼吸包括三個階段，第一階段在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行，第二第三階段在線粒體中進(jìn)行?！绢}目詳解】細(xì)胞有氧呼吸過程的三個階段中都產(chǎn)生的物質(zhì)是ATP，A正確；有氧呼吸的第一和第二階段產(chǎn)生[H]，第三階段不產(chǎn)生，B錯誤；有氧呼吸第一階段產(chǎn)生丙酮酸，第二階段產(chǎn)生二氧化碳，不是每個階段都產(chǎn)生二者，C、D錯誤；故選A7、D【答案解析】

PCR技術(shù)利用DNA雙鏈復(fù)制的原理，在體外快速復(fù)制DNA，使DNA呈指數(shù)式增長。根據(jù)DNA半保留復(fù)制原理，可分析子代DNA分子的特點?！绢}目詳解】A、該過程需要的原料是脫氧核苷酸，A錯誤；B、一個模板DNA片段擴增n次后，可獲得2n個子代DNA片段，共2n+1條DNA單鏈，除最初的模板鏈外均含有引物，該過程中至少需要引物的數(shù)量是2n+1-2，C錯誤；C、該過程不需要解旋酶，DNA在高溫下解旋，需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶，C錯誤；D、經(jīng)過n次擴增后，得到DNA總數(shù)是2n，其中只含有一種引物的DNA分子有2個，含有兩種引物但兩條鏈不等長的DNA分子共有2n—2個，則共有2n個DNA分子兩條鏈不等長，故兩條鏈等長的子代DNA數(shù)量是2n-2n，D正確。故選D。8、D【答案解析】

本題考查物質(zhì)跨膜運輸方式的有關(guān)知識，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系以及識圖能力。據(jù)圖分析：圖1表示影響因素為物質(zhì)濃度，運輸方式為自由擴散；圖2表示影響因素為物質(zhì)濃度、載體蛋白數(shù)量或能量，運輸方式為協(xié)助擴散或主動運輸；圖3說明該物質(zhì)運輸不消耗能量，運輸方式為被動運輸；圖4表示影響因素為能量和載體蛋白，該物質(zhì)運輸方式為主動運輸或者胞吞和胞吐?！绢}目詳解】圖1與圖3說明該物質(zhì)的運輸方式是自由擴散，甘油進(jìn)出細(xì)胞的方式是自由擴散，A正確；圖2與圖4表示運輸方式為主動運輸，人體小腸細(xì)胞吸收葡糖的方式是主動運輸，B正確；限制圖中A、C兩點的運輸速度的主要因素分別是物質(zhì)濃度和氧氣，C正確；B、D兩點的限制因素都是載體的數(shù)量，D錯誤。二、非選擇題9、發(fā)育的全能性基因的選擇性表達(dá)分化脾臟既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一性抗體抗生素血清、血漿【答案解析】

哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES細(xì)胞，其來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來，具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的關(guān)鍵是需要一種培養(yǎng)體系，這種體系必須能促進(jìn)胚胎干細(xì)胞的生長，同時抑制其分化，一般在培養(yǎng)皿底部制備一層飼養(yǎng)層細(xì)胞，用于飼養(yǎng)層的細(xì)胞一般是胚胎成纖維細(xì)胞。本實驗中單克隆抗體制備是以ES細(xì)胞和經(jīng)過免疫的B細(xì)胞形成的雜交細(xì)胞培養(yǎng)獲得，所融合得到的雜交細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體，體外培養(yǎng)過程中動物細(xì)胞培養(yǎng)液成分中含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等，還應(yīng)該加入動物血清或者血漿?！绢}目詳解】（1）①過程是分裂分化產(chǎn)生多種組織細(xì)胞的過程，體現(xiàn)了ES細(xì)胞具有發(fā)育的全能性特點，該過程的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。（2）ES細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下可以增殖而不發(fā)生分化；科學(xué)家們嘗試?yán)肊S細(xì)胞來制備單克隆抗體，則X細(xì)胞是從小鼠的脾臟中取得已免疫的B細(xì)胞，該細(xì)胞能夠產(chǎn)生抗體，因此通常從小鼠的脾臟中抽取。（3）Y是由ES細(xì)胞和已免疫的B細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞篩選得到，又可產(chǎn)生單克隆抗體，其同時具備類兩種細(xì)胞的特性，即既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一性抗體。采用體外培養(yǎng)法經(jīng)③過程制備單克隆抗體時，通常需要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染；同時為滿足營養(yǎng)需求，在人工配制的合成培養(yǎng)基中通常需要加入血清等一些天然成分?！敬鸢更c睛】本題結(jié)合教材中單克隆抗體的制備，考查了學(xué)生理解胚胎干細(xì)胞的特點和培養(yǎng)，以及單克隆抗體制備的原理，意在考查學(xué)生進(jìn)行知識拓展和遷移的能力。10、生物膜顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能無色蛋白質(zhì)強酸使酶失去活性熱鍋高溫炒制高溫使酚氧化酶失活【答案解析】

酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的具有生物催化能力的有機物，大多數(shù)是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA；酶的催化具有高效性（酶的催化效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于無機催化劑）、專一性（一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行）、需要適宜的溫度和pH值（在最適條件下，酶的催化活性是最高的，低溫可以抑制酶的活性，隨著溫度升高，酶的活性可以逐漸恢復(fù)，高溫、過酸、過堿可以使酶的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，使酶永久性的失活）?！绢}目詳解】（1）細(xì)胞中具有生物膜系統(tǒng)，將細(xì)胞中的酚類物質(zhì)與酚氧化酶在細(xì)胞質(zhì)中分隔開。

（2）酶促進(jìn)反應(yīng)的機理是能顯著降低化學(xué)反應(yīng)所需的活化能；C試管加入強酸使酶失活，不能使無色的酚氧化生成褐色的物質(zhì)，故C試管中為無色；B試管用蛋白酶處理，也不會變色，酚氧化酶被蛋白酶水解了，說明酚氧化酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)；A、C試管對照，強酸條件下，酚氧化酶也會失去作用，所以強酸使酶失去活性。

（3）高溫可以改變酶的空間結(jié)構(gòu)使其失活，綠茶制取過程中必須先進(jìn)行熱鍋高溫炒制以防變色?！敬鸢更c睛】此題主要考查酶的概念以及酶的特性，意在考查學(xué)生對基礎(chǔ)知識的理解掌握，難度適中。11、基因文庫-TTAA啟動子終止子Ca2+感受態(tài)③lacZ′標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出β-半乳糖苷酶，故菌落為白色抗原-抗體雜交【答案解析】

分析題圖，目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識別序列，右側(cè)是限制酶SmaI的識別序列，而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識別序列，則需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒，用限制酶EcoRI和SmaI來切割含有目的基因的外源DNA分子，而這樣會使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接，所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端，即-TTAA；用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時，會破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因，但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后，lacZ'基因又被修復(fù)，能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，所以菌落①②呈現(xiàn)藍(lán)色；菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒，其lacZ'基因被破壞，不能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，菌落顏色為白色。【題目詳解】（1）基因工程中，目的基因可以從基因文庫中直接獲取。（2）根據(jù)以上分析可知，圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端，即-TTAA。（3）基因表達(dá)載體的組成成分包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。（4）將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞之前，應(yīng)先用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于能吸收周圍DNA的感受態(tài)。（5）根據(jù)以上分析已知，用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時，會破壞質(zhì)粒上的lacZ‘基因，但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后，lacZ'基因又被修復(fù)，能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，所以菌落①②呈現(xiàn)藍(lán)色；菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒，其lacZ'基因被破壞，不能表達(dá)產(chǎn)