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關(guān)于糖皮質(zhì)激素的抗炎作用第1頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)用蛋清致炎劑致動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性急性炎癥的方法。觀察糖皮質(zhì)激素的抗炎作用。第2頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五實(shí)驗(yàn)原理異體蛋白進(jìn)入機(jī)體以后,可在短時(shí)間內(nèi)引起組織的急性炎癥反應(yīng),炎癥部位明顯腫脹,體積增大。本實(shí)驗(yàn)用蛋清為異種蛋白質(zhì),注入大鼠足跖內(nèi),可致局部急性炎癥反應(yīng),使局部組織腫脹。通過測定炎癥部位的體積,觀察炎癥的發(fā)生及氫化可的松的抗炎作用。第3頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五
糖皮質(zhì)激素(GCS)是由腎上腺皮質(zhì)中束狀帶分泌的一類甾體激素,主要為皮質(zhì)醇,具有調(diào)節(jié)糖、脂肪、和蛋白質(zhì)的生物合成和代謝的作用,還具有抑制免疫應(yīng)答、抗炎、抗毒、抗休克作用。抗炎作用:GCS有快速、強(qiáng)大而非特異性的抗炎作用。對(duì)各種炎癥均有效。在炎癥初期,GCS抑制毛細(xì)血管擴(kuò)張,減輕滲出和水腫,又抑制白血細(xì)胞的浸潤和吞噬,而減輕炎癥癥狀。在炎癥后期,抑制毛細(xì)血管和纖維母細(xì)胞的增生,延緩肉芽組織的生成。而減輕疤痕和粘連等炎癥后遺癥??寡鬃饔脵C(jī)制:GCS擴(kuò)散進(jìn)入胞漿內(nèi),并與GR—Hsp結(jié)合。同時(shí)Hsp被分離。GCS和GR復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞核,與靶基因啟動(dòng)子序列的GRE結(jié)合,增加抗炎細(xì)胞因子基因轉(zhuǎn)錄,與nGRE結(jié)合。抑制致炎因子的基因轉(zhuǎn)錄,而產(chǎn)生抗炎作用。第4頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五圖解第5頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五實(shí)驗(yàn)對(duì)象大鼠,雌雄各半,體重150克。第6頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五實(shí)驗(yàn)器材與試劑器材:大鼠后足容積測量器、1mL注射器、50mL小燒杯。試劑:新鮮蛋清,氫化可的松注射液,生理鹽水。第7頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五實(shí)驗(yàn)步驟1.取大鼠2只,標(biāo)記,稱重,分別腹腔注射下列藥物,1號(hào)鼠生理鹽水3mL/kg,2號(hào)鼠:氫化可的松溶液15mg/kg(0.5%溶液3mL/kg)。2.取帶有側(cè)管的大鼠后足容積測量器,將注射器與側(cè)管相連,盛入水,使液面與20mL處平齊。3.將各鼠右踝關(guān)節(jié)的突起點(diǎn)處用圓珠筆畫圈作為測量標(biāo)志,依次將各鼠右后足放入容積測量器內(nèi),使后肢暴露在筒外,浸入的深度以圓圈處與20ml刻度重合為度。該足進(jìn)入液體以后,液面升高,液體自側(cè)管溢出流入注射器中,溢出液體的毫升數(shù)即為該鼠右后足的體積。依次測定各鼠右后足的正常體積。第8頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五
4.各鼠腹腔注射藥后15min,從右后足掌心向掌趾關(guān)節(jié)方向進(jìn)針,皮下注射新鮮蛋清0.1ml。5.注射蛋清后20min、40min、60min、80min,分別測量右后足的體積,記錄溢出液體的毫升數(shù)。各鼠致炎以后的體積減去正常的體積,即為各個(gè)時(shí)間右后足的腫脹度。即:各個(gè)時(shí)間點(diǎn)右后足腫脹度=致炎后的容積-致炎前的容積。6.根據(jù)公式計(jì)算:右后足腫脹率(%)=(致炎后最大容積-致炎前的容積)/致炎前的容積×100%第9頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五計(jì)算結(jié)果填入下表糖皮質(zhì)激素的抗炎作用第10頁,共12頁,2022年,5月20日,16點(diǎn)26分,星期五注意事項(xiàng)蛋清應(yīng)實(shí)驗(yàn)當(dāng)天現(xiàn)行配置,置于4℃冰箱保存。注意操作的一致性,測量要有專人負(fù)責(zé)。盡量
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