結(jié)核感染細(xì)胞檢測

關(guān)于結(jié)核感染細(xì)胞檢測第1頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五1、結(jié)核病的疫情結(jié)核病是一種慢性傳染病，可在身體各個器官發(fā)病，其中以肺結(jié)核最為常見，因此肺結(jié)核病是一種嚴(yán)重危害人類健康的傳染病，得了肺結(jié)核病如果不能徹底治療就會完全喪失勞動能力，而且還會傳染他人，對個人、家庭和社會都是極大的危害。我國是全球22個結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一，活動性肺結(jié)核病人數(shù)僅次于印度，居世界第二位。結(jié)核病仍是目前嚴(yán)重影響我國人民健康的公共衛(wèi)生問題，而且影響到社會和經(jīng)濟的發(fā)展，是我國重點控制的疾病之一。第2頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五1.3結(jié)核診斷

2結(jié)核診斷

細(xì)菌培養(yǎng)不能區(qū)分非結(jié)核分枝桿菌敏感度低，近半肺結(jié)核陰性肺外結(jié)核取材難結(jié)核桿菌生長緩慢，培養(yǎng)周期長，不利于早期診斷第3頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五3.TSPOT檢測原理結(jié)核感染的免疫應(yīng)答反應(yīng)以細(xì)胞免疫為主，結(jié)核感染后體內(nèi)長期存在抗原特異性的記憶性T細(xì)胞。當(dāng)再次遇到抗原刺激時，能迅速活化增殖，釋放γ干擾素γ干擾素是結(jié)核分枝桿菌感染后機體免疫應(yīng)答中最重要的細(xì)胞因子。第4頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五T-SPOT.TB技術(shù)：利用結(jié)核桿菌感染者外周血單個核細(xì)胞（PBMC）中存在結(jié)核特異性T細(xì)胞，這些淋巴細(xì)胞在受到結(jié)核特異抗原刺激后分泌γ干擾素而設(shè)計的T細(xì)胞免疫斑點試驗。檢測外周血中受結(jié)核特異抗原刺激釋放γ干擾素的T淋巴細(xì)胞，經(jīng)酶聯(lián)免疫顯色后，通過ELISPOT分析系統(tǒng)對斑點進(jìn)行計數(shù)，1個斑點代表一個分泌細(xì)胞，計算出抗原特異性細(xì)胞的頻率。第5頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五第6頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五第7頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五第8頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五空白對照孔內(nèi)斑點數(shù)小于10且陽性對照孔內(nèi)斑點數(shù)大于20時視為試驗有效T-SPOT.TB試驗結(jié)果用每106PBMCs中斑點形成細(xì)胞（SFCs）的數(shù)目來描述，即SFCs/106PBMCs第9頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五5.T-SPOT.TB的臨床意義T-SPOT.TB高靈敏度第10頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五種類內(nèi)容摘要受試者數(shù)量文獻(xiàn)發(fā)表活動性結(jié)核/靈敏度將T-SPOT.TB的檢測結(jié)果與最后通過涂片和培養(yǎng)確診的結(jié)果進(jìn)行比較。包括牛型結(jié)核桿菌和非洲型結(jié)核桿菌感染的患者。T-SPOT.TB的靈敏度為97.2%。（CI90.3-99.7%）72MeieretalEurJMicrobiolInfectDis(2005)；24:529-536在經(jīng)培養(yǎng)確診的活動性結(jié)核受試者中，T-SPOT.TB的靈敏度為96.6%。其中29例免疫力低下患者，T-SPOT.TB的靈敏度為100%87Leeetal.ERJ2006;28:24–30在確診病例（涂片或培養(yǎng)陽性）和臨床診斷病例（有臨床癥狀和抗癆治療有效）中，T-SPOT.TB的靈敏度為90.3%，并且不受CD4細(xì)胞數(shù)量影響。30Clarketal.Clin.Exp.Imm.2007;150(2):238-44在經(jīng)痰培養(yǎng)或肺部病變組織病理活檢確診的結(jié)核患者中，T-SPOT.TB的靈敏度為92%。140KangetalChest.2007Sep;132(3):959-65在確診的肺結(jié)核患者和疑似肺外結(jié)核患者中，T-SPOT.TB的陽性率94%。32Kimetal.ArchInternMed.2007;167;20:2255-2259在免疫力正常和免疫力低下的受試人群中，T-SPOT.TB的靈敏度分別為94%和95%。所有受試者中，42%為肺外結(jié)核患者。186Kimetal.AmJMed2009；122,189-195經(jīng)培養(yǎng)確診、抗癆治療不超過2周的結(jié)核患者用T-SPOT.TB檢測，陽性率98%（57/58）。58JanssensetalERJ2007；30(4):722-8在經(jīng)培養(yǎng)確診的活動性結(jié)核患者中，T-SPOT.TB的靈敏度為94%。32DominguezetalClinVaccImmunol2008;15;168-71第11頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五T-SPOT.TB高特異性

檢測所用的ESAT-6＆CFP10抗原均來自結(jié)核分枝桿菌基因組RD1區(qū)域，RD1區(qū)基因僅存在于結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群（人型、牛型、非洲型）?？ń槊绾痛蠖鄶?shù)環(huán)境分枝桿菌缺失RD1區(qū)基因因此T-SPOT.TB不會受卡介苗或者非結(jié)核分枝桿菌影響。第12頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五種類內(nèi)容摘要受試者數(shù)量文獻(xiàn)發(fā)表特異性用T-SPOT.TB檢測14例鳥分枝桿菌感染者，13例陰性，1例為臨界值，復(fù)查也為陰性。14AdamsetalSc.JInf.Dis..2008;40(3):196-203.經(jīng)過結(jié)核篩查的無癥狀的受試者，T-SPOT.TB檢測結(jié)果全部為陰性，特異性100%。47Clarketal.Clin.Exp.Imm.2007;150(2):238-44在德國用T-SPOT.TB對健康的衛(wèi)生保健工作者進(jìn)行篩查。僅1例陽性（1/95）

，為影像學(xué)工作者，接觸病人超過35年。

TST檢測假陽性結(jié)果34%（32/95）。

95Barsegianetal.JofHospitalInf2008；69(1):69-76在接觸結(jié)核的健康醫(yī)務(wù)工作者和健康對照受試者中用TST和T-SPOT.TB檢測。155健康醫(yī)務(wù)工作者中，TST陽性的27例，而T-SPOT.TB僅3例陽性。健康對照組T-SPOT.TB全部陰性而TST有3例陽性。

218

Storlaetal.BMCInfectiousDiseases2009,9:60

第13頁，共14頁，2022年，5月20日，19點36分，星期五6.結(jié)論T-SPOT.TB在診斷結(jié)核感染方面具有良好的敏感性和特異性，在現(xiàn)有結(jié)核診斷方法