人教版生物選修三11DNA重組技術(shù)的基本工具課件

專題1基因工程

1.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、基因工程的原理1、概念：按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀?；蚱唇蛹夹g(shù)或DNA重組技術(shù)2、別稱：生物體外3、操作環(huán)境：基因/DNA4、操作對(duì)象：分子水平5、操作水平：6、基本過程：剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)7、原理：基因重組8、結(jié)果：人類需要的基因產(chǎn)物9、優(yōu)點(diǎn)：定向改造生物性狀；克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙。專題1基因工程

1.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、基因1基礎(chǔ)理論和技術(shù)的發(fā)展催生了基因工程

DNA是遺傳物質(zhì)的證明DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立遺傳密碼的破譯基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)工具酶的發(fā)現(xiàn)DNA合成和測(cè)序技術(shù)的發(fā)明DNA體外重組的實(shí)現(xiàn)重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)的成功第一例轉(zhuǎn)基因動(dòng)物問世PCR技術(shù)的發(fā)明基礎(chǔ)理論技術(shù)發(fā)明基礎(chǔ)理論和技術(shù)的發(fā)展催生了基因工程DNA是遺傳物質(zhì)的證明基21、基因拼接的理論基礎(chǔ)（1）DNA是生物的主要遺傳物質(zhì)。（2）DNA的基本組成單位都是四種脫氧核苷酸。（3）雙鏈DNA分子的空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。二、基因工程誕生的理論基礎(chǔ)2、外源基因在受體內(nèi)表達(dá)的理論基礎(chǔ)（1）基因是控制生物性狀的獨(dú)立遺傳單位。（2）遺傳信息的傳遞都遵循中心法則闡述的信息流動(dòng)方向。（3）生物界共用一套遺傳密碼。1、基因拼接的理論基礎(chǔ)二、基因工程誕生的理論基礎(chǔ)2、外源基因3準(zhǔn)確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”）——限制性核酸內(nèi)切酶DNA片段的連接工具（“分子縫合針”）——DNA連接酶基因轉(zhuǎn)移工具（“分子運(yùn)輸車”）——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體三、DNA重組技術(shù)的基本工具準(zhǔn)確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”）三、DNA重組技術(shù)的基41、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）——“分子手術(shù)刀”（1）來源：主要是從__________中分離純化出來的。原核生物a.限制酶就是細(xì)菌的一種防御性工具，防止外來病原物的侵害。當(dāng)外源DNA侵入時(shí)，會(huì)利用限制酶將外源DNA切割掉，以保證自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，從而達(dá)到保護(hù)自身的目的。b.含有某種限制酶的細(xì)胞，其DNA分子中或者不具備這種限制酶的識(shí)別切割序列，或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識(shí)別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。為什么限制酶不切割細(xì)菌本身的DNA?（2）化學(xué)本質(zhì)：蛋白質(zhì)1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）——“分子手術(shù)刀”（1）來源：5（3）作用：催化磷酸二酯鍵的斷裂，可重復(fù)利用。用于DNA的切割以獲取目的基因和載體的切割。（5）作用特點(diǎn)：專一性，限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子中的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。磷酸二酯鍵（4）作用部位：磷酸二酯鍵：兩個(gè)核苷酸分子核苷酸殘基的兩個(gè)羥基分別與同一磷酸基團(tuán)形成的共價(jià)連接鍵。（3）作用：催化磷酸二酯鍵的斷裂，可重復(fù)利用。用于DNA的切6人教版生物選修三11DNA重組技術(shù)的基本工具課件7黏性末端限制酶(EcoRⅠ)能識(shí)別GAATTC序列，并在G和A之間切開。EcoRⅠ黏性末端EcoRⅠ黏性末端限制酶(EcoRⅠ)能識(shí)別GAATTC序列，并在G和8限制酶被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端？要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶斷幾個(gè)磷酸二酯鍵？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？斷4個(gè)磷酸二酯鍵，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端限制酶被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端？9（6）限制酶所識(shí)別的序列的特點(diǎn)：

大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由6個(gè)核苷酸組成。也有少數(shù)限制酶的識(shí)別序列由4、5或8個(gè)核苷酸組成。限制酶所識(shí)別的序列，可以找到一條中心軸線，中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。另外，能被限制酶特異性識(shí)別的切割部位基本都具有回文序列：在切割部位，一條鏈正向讀的堿基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。（6）限制酶所識(shí)別的序列的特點(diǎn)：大多數(shù)限制酶的識(shí)別序10

①錯(cuò)位切：產(chǎn)生兩個(gè)相同的黏性末端②平切：形成平末端（7）切割方式及產(chǎn)生的DNA末端形式：①錯(cuò)位切：產(chǎn)生兩個(gè)相同的黏性末端②平切：形成平末端（7）112、DNA連接酶——“分子縫合針”（1）種類：根據(jù)酶的來源不同①E.coliDNA連接酶（從大腸桿菌來）②T4DNA連接酶（從T4噬菌體來）（2）作用部位：磷酸二酯鍵（3）作用：

將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。①E.coliDNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來。②T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端，又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端，但連接平末端之間的效率比較低。2、DNA連接酶——“分子縫合針”（1）種類：根據(jù)酶的來源不12人教版生物選修三11DNA重組技術(shù)的基本工具課件13

可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶即恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，E·coliD14

T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低T4DNA連接酶T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效15（4）比較：①DNA連接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶DNA連接酶DNA聚合酶RNA聚合酶不同點(diǎn)連接DNA片段，將DNA雙鏈的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來連接游離的脫氧核苷酸，將單個(gè)脫氧核苷酸連接成一條互補(bǔ)的DNA鏈連接游離的核糖核苷酸，將其連接成RNA不需要模板需要模板需要模板相同點(diǎn)①化學(xué)本質(zhì)：__________；②具有酶的基本特點(diǎn)：__、_____、_______

③都能形成______________鍵；蛋白質(zhì)高效性、專一性、需要適宜的條件磷酸二酯限制酶DNA解旋酶區(qū)別切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯鍵將DNA兩條鏈的氫鍵打開形成兩條單鏈②限制性內(nèi)切酶與DNA解旋酶（4）比較：①DNA連接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶DNA163、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體---“分子運(yùn)輸車”

（1）載體的作用：

①將外源基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中去。

②利用載體在受體細(xì)胞內(nèi)，對(duì)外源基因進(jìn)行大量復(fù)制。（2）載體必須具備的條件：

①能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存；

②具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接；

③具有某些標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選。（如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等）

④對(duì)受體細(xì)胞無害（3）常用的載體有：質(zhì)粒，λ噬菌體的衍生物，動(dòng)植物病毒等3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體---“分子運(yùn)輸車”（1）載體17常用的載體：質(zhì)粒（1）裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的小型雙鏈環(huán)狀DNA分子（2）具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段（基因）插入（3）攜帶外源DNA片段在受體細(xì)胞中自我復(fù)制，或整合到染色體DNA上，隨染色體DNA同步復(fù)制（4）具有標(biāo)記基因，如四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因等，供重組DNA的鑒定和選擇（5）用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的。常用的載體：質(zhì)粒（1）裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA18注意：必修二教材說法：1、運(yùn)載體2、常用運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒等。3、質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物的細(xì)胞中，是擬核或細(xì)胞核外能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子。注意：19有關(guān)基因工程概念的理解正確的是A．操作對(duì)象是脫氧核苷酸B．對(duì)DNA進(jìn)行改造只能在細(xì)胞內(nèi)完成C．打破遠(yuǎn)緣雜交不育的障礙D．不能定向改造生物的遺傳性狀C下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述,正確的是（）A.重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶和載體B.所有的限制酶都只能識(shí)別同一種特定的核苷酸序列C.選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因?yàn)榧?xì)菌繁殖快D.只要目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞就能實(shí)現(xiàn)表達(dá)C有關(guān)基因工程概念的理解正確的是C下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述,20在基因工程中，切割運(yùn)載體和含有目的基因的DNA片段，需使用（）同種限制酶B.兩種限制酶同種連接酶D.兩種連接酶基因工程常用的受體細(xì)胞有（）（1）大腸桿菌（2）枯草桿菌（3）支原體（4）動(dòng)植物細(xì)胞A.（3）（4）B.（1）（2）（4）C.（2）（3）（4）D.（1）（2）（3）AB在基因工程中，切割運(yùn)載體和含有目的基因的DNA片段，需使用（21下列關(guān)于限制酶的說法正確的是（）A.限制酶廣泛存在于各種生物中，但微生物中很少B.一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列C.不同的限制酶切割DNA后都會(huì)形成黏性末端D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵B不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是

A、能復(fù)制

B、有多個(gè)限制酶切點(diǎn)

C、具有標(biāo)記基因

D、它是環(huán)狀DNAD下列關(guān)于限制酶的說法正確的是（）B不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載22據(jù)右圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是（）A.限制性內(nèi)切酶可以切斷a處，DNA連接酶可以連接a處B.DNA聚合酶可以連接a處C.解旋酶可以使b處解開D.連接C處的酶可以為DNA連接酶D據(jù)右圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是（）D23下列關(guān)于DNA連接酶作用的敘述，正確的是A.將單個(gè)核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯鍵B.將斷開的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來，重新形成磷酸二酯鍵C.連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D.只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來，而不能將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接BB24A、BamHI和EcoRI；末端互補(bǔ)序列—AATT—B、BamHI和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列—GATC—C、EcoRI和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列—AATT—D、BamHI和BglII；末端互補(bǔ)序列—GATC—限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列。下圖為四種限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨識(shí)序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合？其正確的末端互補(bǔ)序列為何？（）DA、BamHI和EcoRI；末端互補(bǔ)序列—AATT—限25以下是兩種限制酶切割后形成的DNA片段，試分析：①GC…②AATTC…③…GC④…CTTAACG…G…

…CG…G（1）其中①和

是由一種限制酶切割形成的

末端，兩者要重組成一個(gè)DNA分子，所用DNA連接酶通常是

。（2）

和

是由另一種限制酶切割形成的

末端，兩者要形成重組DNA片段，所用的連接酶通常是

。③T4DNA連接酶②④T4DNA連接酶或E.coliDNA連接酶以下是兩種限制酶切割后形成的DNA片段，試分析：（1）其中①26基因的針線：DNA連接酶

G

AA

TT

CC

TT

AA

GG

AA

TT

CC

TT

AA

GGC

TT

AA

AA

TT

C

GG

C

TT

AA

AA

TT

C

GGC

TT

AA

AA

TT

C

G用同種限制酶切割基因的針線：DNA連接酶

GAATTCC27專題1基因工程

1.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、基因工程的原理1、概念：按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀?；蚱唇蛹夹g(shù)或DNA重組技術(shù)2、別稱：生物體外3、操作環(huán)境：基因/DNA4、操作對(duì)象：分子水平5、操作水平：6、基本過程：剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)7、原理：基因重組8、結(jié)果：人類需要的基因產(chǎn)物9、優(yōu)點(diǎn)：定向改造生物性狀；克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙。專題1基因工程

1.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、基因28基礎(chǔ)理論和技術(shù)的發(fā)展催生了基因工程

DNA是遺傳物質(zhì)的證明DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立遺傳密碼的破譯基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)工具酶的發(fā)現(xiàn)DNA合成和測(cè)序技術(shù)的發(fā)明DNA體外重組的實(shí)現(xiàn)重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)的成功第一例轉(zhuǎn)基因動(dòng)物問世PCR技術(shù)的發(fā)明基礎(chǔ)理論技術(shù)發(fā)明基礎(chǔ)理論和技術(shù)的發(fā)展催生了基因工程DNA是遺傳物質(zhì)的證明基291、基因拼接的理論基礎(chǔ)（1）DNA是生物的主要遺傳物質(zhì)。（2）DNA的基本組成單位都是四種脫氧核苷酸。（3）雙鏈DNA分子的空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。二、基因工程誕生的理論基礎(chǔ)2、外源基因在受體內(nèi)表達(dá)的理論基礎(chǔ)（1）基因是控制生物性狀的獨(dú)立遺傳單位。（2）遺傳信息的傳遞都遵循中心法則闡述的信息流動(dòng)方向。（3）生物界共用一套遺傳密碼。1、基因拼接的理論基礎(chǔ)二、基因工程誕生的理論基礎(chǔ)2、外源基因30準(zhǔn)確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”）——限制性核酸內(nèi)切酶DNA片段的連接工具（“分子縫合針”）——DNA連接酶基因轉(zhuǎn)移工具（“分子運(yùn)輸車”）——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體三、DNA重組技術(shù)的基本工具準(zhǔn)確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”）三、DNA重組技術(shù)的基311、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）——“分子手術(shù)刀”（1）來源：主要是從__________中分離純化出來的。原核生物a.限制酶就是細(xì)菌的一種防御性工具，防止外來病原物的侵害。當(dāng)外源DNA侵入時(shí)，會(huì)利用限制酶將外源DNA切割掉，以保證自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，從而達(dá)到保護(hù)自身的目的。b.含有某種限制酶的細(xì)胞，其DNA分子中或者不具備這種限制酶的識(shí)別切割序列，或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識(shí)別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。為什么限制酶不切割細(xì)菌本身的DNA?（2）化學(xué)本質(zhì)：蛋白質(zhì)1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）——“分子手術(shù)刀”（1）來源：32（3）作用：催化磷酸二酯鍵的斷裂，可重復(fù)利用。用于DNA的切割以獲取目的基因和載體的切割。（5）作用特點(diǎn)：專一性，限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子中的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。磷酸二酯鍵（4）作用部位：磷酸二酯鍵：兩個(gè)核苷酸分子核苷酸殘基的兩個(gè)羥基分別與同一磷酸基團(tuán)形成的共價(jià)連接鍵。（3）作用：催化磷酸二酯鍵的斷裂，可重復(fù)利用。用于DNA的切33人教版生物選修三11DNA重組技術(shù)的基本工具課件34黏性末端限制酶(EcoRⅠ)能識(shí)別GAATTC序列，并在G和A之間切開。EcoRⅠ黏性末端EcoRⅠ黏性末端限制酶(EcoRⅠ)能識(shí)別GAATTC序列，并在G和35限制酶被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端？要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶斷幾個(gè)磷酸二酯鍵？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？斷4個(gè)磷酸二酯鍵，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端限制酶被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端？36（6）限制酶所識(shí)別的序列的特點(diǎn)：

大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由6個(gè)核苷酸組成。也有少數(shù)限制酶的識(shí)別序列由4、5或8個(gè)核苷酸組成。限制酶所識(shí)別的序列，可以找到一條中心軸線，中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。另外，能被限制酶特異性識(shí)別的切割部位基本都具有回文序列：在切割部位，一條鏈正向讀的堿基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。（6）限制酶所識(shí)別的序列的特點(diǎn)：大多數(shù)限制酶的識(shí)別序37

①錯(cuò)位切：產(chǎn)生兩個(gè)相同的黏性末端②平切：形成平末端（7）切割方式及產(chǎn)生的DNA末端形式：①錯(cuò)位切：產(chǎn)生兩個(gè)相同的黏性末端②平切：形成平末端（7）382、DNA連接酶——“分子縫合針”（1）種類：根據(jù)酶的來源不同①E.coliDNA連接酶（從大腸桿菌來）②T4DNA連接酶（從T4噬菌體來）（2）作用部位：磷酸二酯鍵（3）作用：

將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。①E.coliDNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來。②T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端，又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端，但連接平末端之間的效率比較低。2、DNA連接酶——“分子縫合針”（1）種類：根據(jù)酶的來源不39人教版生物選修三11DNA重組技術(shù)的基本工具課件40

可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶即恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，E·coliD41

T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低T4DNA連接酶T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效42（4）比較：①DNA連接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶DNA連接酶DNA聚合酶RNA聚合酶不同點(diǎn)連接DNA片段，將DNA雙鏈的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來連接游離的脫氧核苷酸，將單個(gè)脫氧核苷酸連接成一條互補(bǔ)的DNA鏈連接游離的核糖核苷酸，將其連接成RNA不需要模板需要模板需要模板相同點(diǎn)①化學(xué)本質(zhì)：__________；②具有酶的基本特點(diǎn)：__、_____、_______

③都能形成______________鍵；蛋白質(zhì)高效性、專一性、需要適宜的條件磷酸二酯限制酶DNA解旋酶區(qū)別切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯鍵將DNA兩條鏈的氫鍵打開形成兩條單鏈②限制性內(nèi)切酶與DNA解旋酶（4）比較：①DNA連接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶DNA433、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體---“分子運(yùn)輸車”

（1）載體的作用：

①將外源基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中去。

②利用載體在受體細(xì)胞內(nèi)，對(duì)外源基因進(jìn)行大量復(fù)制。（2）載體必須具備的條件：

①能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存；

②具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接；

③具有某些標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選。（如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等）

④對(duì)受體細(xì)胞無害（3）常用的載體有：質(zhì)粒，λ噬菌體的衍生物，動(dòng)植物病毒等3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體---“分子運(yùn)輸車”（1）載體44常用的載體：質(zhì)粒（1）裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的小型雙鏈環(huán)狀DNA分子（2）具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段（基因）插入（3）攜帶外源DNA片段在受體細(xì)胞中自我復(fù)制，或整合到染色體DNA上，隨染色體DNA同步復(fù)制（4）具有標(biāo)記基因，如四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因等，供重組DNA的鑒定和選擇（5）用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的。常用的載體：質(zhì)粒（1）裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA45注意：必修二教材說法：1、運(yùn)載體2、常用運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒等。3、質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物的細(xì)胞中，是擬核或細(xì)胞核外能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子。注意：46有關(guān)基因工程概念的理解正確的是A．操作對(duì)象是脫氧核苷酸B．對(duì)DNA進(jìn)行改造只能在細(xì)胞內(nèi)完成C．打破遠(yuǎn)緣雜交不育的障礙D．不能定向改造生物的遺傳性狀C下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述,正確的是（）A.重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶和載體B.所有的限制酶都只能識(shí)別同一種特定的核苷酸序列C.選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因?yàn)榧?xì)菌繁殖快D.只要目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞就能實(shí)現(xiàn)表達(dá)C有關(guān)基因工程概念的理解正確的是C下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述,47在基因工程中，切割運(yùn)載體和含有目的基因的DNA片段，需使用（）同種限制酶B.兩種限制酶同種連接酶D.兩種連接酶基因工程常用的受體細(xì)胞有（）（1）大腸桿菌（2）枯草桿菌（3）支原體（4）動(dòng)植物細(xì)胞A.（3）（4）B.（1）（2）（4）C.（2）（3）（4）D.（1）（2）（3）AB在基因工程中，切割運(yùn)載體和含有目的基因的DNA片段，需使用（48下列關(guān)于限制酶的說法正確的是（）A.限制酶廣泛存在于各種生物中，但微生物中很少B.一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列C.不同的限制酶切割DNA后都會(huì)形成黏性末端D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵B不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是

A、能復(fù)制

B、有多個(gè)限制酶切點(diǎn)

C、具有標(biāo)記基因

D、它是環(huán)狀DNAD下列關(guān)于限制酶的說法正確的是（）B不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載49據(jù)右圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是（）A.限制性內(nèi)切酶可以切斷a處，DNA連接酶可以連接a處B.DNA聚合酶可以連接a處C.解旋酶可以使b處解開D.連接C處的酶可以為DNA連接酶D據(jù)右圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是（）D50下列關(guān)于DNA連接酶作用的敘述，正確的是A.將單個(gè)核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯鍵B.將斷開的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來，重