大學儀器分析實驗教案

河南科技大學?儀器分析實驗？教案化工與制藥學院2010.9實驗一水樣pH值的測定一、目的要求.了解電位法測定水樣pH值的原理和方法，.認識和了解各種型號酸度計。.學會使用pHS-25型酸度計。二、測定原理將指示電極（玻璃電極）與參比電極插入被測溶液組成原電池（-）Ag|AgC1,HCI（0.1mo1?L“）1玻璃膜|H+（xmo1?L」）||KCI（飽和）|Hg2c12,Hg（+）玻璃電極 試液鹽橋甘汞電極在一定條件下，測得電池的電動勢就是pH的直線函數(shù)E=K十0.059pH（25℃）由測得的電動勢就能算出被測溶液的pH值。但因上式中的K值是由內(nèi)外參比電極電位及難于計算的不對稱電位和液接電位所決定的常數(shù)，實際不易求得，因此在實際工作中，用酸度計測定溶液的pH值（直接用pH刻度）時，首先必須用已知pH值的標淮溶液來校正酸度計（也叫定位”）。校正時應選用與被測溶液的pH值接近的標準緩沖涪液，以減少在測量過程個可能由于液接電位、不對稱電位及溫度等變化而引起的誤差。一支電極應該用兩種不同pH值的緩沖溶液校正。在用一種pH值的緩沖溶液定位后，測第二種緩沖溶液的pH佰時，誤差應在0.05pH單位之內(nèi)。粗略測量中用一種pH值緩沖溶液校正即可，但必須保證電極斜率在允許誤差范圍內(nèi)。經(jīng)過校正后的酸度計就可以直接測量水或其它溶液的pH值。用離子活度計測量溶液的pH值，其原理仍然是依據(jù)能斯特方程，測量電池在標準緩沖溶液中的電動勢為：Es=K十spHs同樣，在樣品溶液中電池電動勢為：Ex=K十spHx上述兩式相減得到：pHx=pHs十Ex-Es/s=pHs+AE/s在離子計上儀器的示值按照AE/s分度，而且儀器有電極斜率s的調(diào)節(jié)路線。當用標準緩沖溶液對儀器進行校正后，樣品溶液的pHx即可從儀器示值上直接讀出。注意：.指針式與數(shù)字式酸度計的差異。.高、中、低檔酸度計之間的差異。.旋鈕式、鐘表式、齒輪式溫度補償器的使用方法。.緊固式、彈球式、自鎖式電極插口的使用注意事項。.復合電極與單電極的差異.將復合電極接口變換成單電極接口需要電極轉(zhuǎn)換接頭附件來完成。三、試劑與儀器pH=4.00標準緩沖溶液(20℃)pH=6.88標準緩沖溶液(20℃)pH=9.22標準緩沖溶液(20℃)pHS-25型酸度計，23I型玻璃電極，232型甘汞電極.pHS-3E型、pHS-3C型型酸度計。100mL燒杯四只。標準緩沖液通常能穩(wěn)定貯放二個月，溫度不同，其相應標準值也不同。溫度℃051015202530354050-10.050mol?LKHC8H4。44.0033.9993.9983.9994.0034.0084.0154.0244.0354.060-10.025mol?LKM 3HPn46.9846.9516.9236.9006.8816.8646.8536.8446.8386.833■10.010mol?L9.4649.3959.3329.2769.2259.1829.1399.1029.0689.011四、測定步驟.按照所使用儀器的操作方法進行操作。.預熱儀器達到穩(wěn)定。.測量標準緩沖溶液溫度，確定該溫度下的pHs值，將儀器的溫度補償旋鈕調(diào)節(jié)到該溫度上。.將電極和燒杯用水沖洗干凈后，用標準緩沖溶液蕩洗I?2次(電極用濾紙吸干)。.將電極浸入標準緩沖溶液內(nèi)，待達到穩(wěn)定讀數(shù)后，調(diào)節(jié)定位旋鈕使儀器示值為pHs值。.將電極取出，用水樣將電極和燒杯沖洗多次。.測量水樣溫度，將儀器的溫度補償旋鈕調(diào)節(jié)至該溫度。.將沖洗過的電極置于水樣中，待讀數(shù)穩(wěn)定后，從標尺或數(shù)字顯示器上讀出水樣的pHx值。.測定完畢后，將電極(甘汞電極套上電極帽)和燒杯沖洗干凈妥善保存..為了檢驗儀器示值的準確性，可以在測定樣品溶液之前對儀器的示值準確性進行測定。即用其中某一標準pH溶液對儀器進行定位，測定另一已知pH標準溶液，按下式計算測量誤差示值測量誤差;pH -pH測量S.如果儀器帶有斜率旋鈕，可以通過斜率旋鈕進行校正。五、實驗的注意事項.鄰苯二甲酸氫鉀緩沖溶液、磷酸鹽緩沖溶液和硼酸鈉緩沖溶液的pH值隨溫度不同稍有差異（如上表）。.用蒸儲水或去離子水沖洗電極時，應當用濾紙吸去玻璃膜上的水分而不是擦拭電極。.由于玻璃電極內(nèi)阻很高，使用電磁攪拌可能引起電磁干擾，攪拌引起的渦流可能使液接電位波動，因此用玻璃電極測量pH值時一般不使用電磁攪拌。正確的操作是將電極浸入溶液后，用手搖動一下測量杯或開啟攪拌使電極與溶液充分接觸，然后停止攪拌進行測量。.玻璃電極球泡很薄，小心打碎o.不同儀器型號的測量精度.思考題.電位法測定水的pH值的原理是什么？.酸度計為什么要用己知pH值的標準緩沖溶液校正？校正時應注意什么？.標準緩沖溶液的pH值受那些因素的影響？如何保證其pH值恒定不變？.玻璃電極在使用前應如何處理？為什么？玻璃電極、甘汞電極在使用時應注意什么？.安裝電極時，應注意哪些問題？實驗二 用氟離子選擇性電極測定水中微量 F-離子 標準曲線法一、目的要求-離子的原理和測定方法。1.學習氟離子選擇性電極測定微量F.學習標準曲線法定量分析。.學習離子計及酸度計測定溶液電位的使用方法。二、基本原理氟離子選擇性電極的敏感膜為LaF3單晶膜（摻有微量EuFz利于導電），電極管內(nèi)放入NaF+NaCI混合溶液作為內(nèi)參比液，以Ag-AgCI作內(nèi)參比電極。當將氟.離子溶液中時，在其敏感膜內(nèi)外兩側(cè)產(chǎn)生膜電位電極浸入含F(xiàn)m?A<pm=K-0.0591gof.*（25℃）以氟電極作指示電極，SCE為參比電極，浸入試液組成工作電池Hg,Hg2CI2IKCI（飽和）||「試液叱3|NaCI,NaF（均為。/ImoPL“）|AgCI,AgE=K：0.0591gcf-（25℃）在測量時加入以HAc,NaAc,檸檬酸鈉和大量NaCI配制成的總離子強度調(diào)節(jié)緩沖液（TISAB），由于加入了高離子強度的溶液（本實驗所用的TISAB液其離子強度1>1.2）,可以在測量過程中維持離子強度恒定，因此工作電池電動勢與F離于濃度的對數(shù)成線性關系。本實驗采用標準曲線法測定F.離子濃度,即配制成不同濃度的F，離子標準溶液，測定工作電池的電動勢，并在同樣條件下測得試液的Ex,由E-pF（或E-lgcf.）-離子濃度。如果用E-c曲線查得未知試液中的FF-曲線，必須用半對數(shù)座標紙。當試液組成較為復雜時，則應采用標推加入法或Gran作圖法測定之。氟電極的適用酸度范圍為pH=5-6,測定濃度在10 106mol?L'范圍內(nèi)-A<pm與Ige已呈線性響應，電極的檢測下限在106mol?L左右（隨著電極的不斷老化，檢測下限會不斷升高）.氟離子選擇性電極是比較成熟的離子選擇性電極之一，其應用范圍比較廣泛。.離子的測定（指甲需先經(jīng)適當?shù)谋緦嶒炈榻B的測定方法，完全適用于人指甲中F預處理），為診斷氟中毒程度提供科學依據(jù)；采取適當措施，用標準曲線法可以直接測定雪和雨水中的痕量F-離子，磷肥廠的廢渣，經(jīng)HCI分解，即可用來快速、簡便地測定其L離子含量；用標準加入法不需預處理即可直接測定尿中的無機氟及河水中的F離子，通過預處理，則可測定尿和血中的總氟含量；大米、玉米、小麥粒經(jīng)磨碎、干燥、并經(jīng)HCICU浸取后，不加TISAB,即可用標準加入法測定其中的微量氟；本法還可測定兒童食品中的微量氟，因此，是食品分析的國標方法。三、儀器.任意型號離子計或酸度計.氟離子選擇性電極.飽和甘汞電極.電磁攪拌器.容量瓶 1000mL,塑料瓶1000mL6個.吸量管 10mL8支.塑料燒杯50mL8支四、試劑.0.100mol?LF.離子標準溶液準確稱取120℃干燥2h并經(jīng)冷卻的優(yōu)級純NaF4.20g于小燒杯中，用水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中配成水溶液，然后轉(zhuǎn)入洗凈、干燥的塑料瓶中。.總離子強度調(diào)節(jié)緩沖液（TISAB）于1000mL燒杯中加入500mL水和57mL冰乙酸，58gNaCI,12g檸檬酸鈉（Na3c6H5O7?2H2。），攪拌至溶解。將燒杯置于冷水中，在pH計的監(jiān)測下，緩慢滴加6mol?L-1NaOH溶液，至溶液的pH=5.0~5.5,冷卻至室溫，轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。轉(zhuǎn)入洗凈、干燥的容量瓶中。_匕離子試液（自來水），濃度約在1010-5mol?L-1.五、實驗步驟1.按離子計或酸度計操作步驟，調(diào)試時各按下mV按健。摘去甘汞電極的橡皮帽，并檢查內(nèi)電極是否浸入飽和KCI溶液中，如未浸入，應補充飽和KCI溶液。安裝電極，清洗氟電極空白電位值至300mV以上。氟電極空白電位值受制備工藝、內(nèi)參比液中f■離子濃度、7K質(zhì)純度、電極老化程度、離子計型號等因素的影響，因此，視情況清洗到空白電位值最大即可.2,準確吸取0.l00mol?L“F-離子標準液10.00mL,置于100mL容量瓶中，加入TISAB液10.0mL,用水稀釋至刻度，搖勻，得pF=2.00溶液。.吸取pF=2.00溶液10.00mL,置于100mL容量瓶中，加入TISAB9.0mL,用水稀釋至刻度，搖勻，得pF=3.00溶液。仿照上述步驟，配制pF=4.00,pF=5.00和pF=6.00的溶液。.將配制的標準溶液系列由低濃度到高濃度逐個轉(zhuǎn)入塑料小燒杯中，并放入氟電極和飽和甘汞電極及攪拌子，開動攪拌器，調(diào)節(jié)至適當?shù)臄嚢杷俣?，攪?min,至指針無明顯移動時，讀取各溶液的mV值，讀數(shù)時注意使眼睛、指針和刻度三者在一直線上。.吸取F-離子試液10.00mL,于50mL容量瓶中，加入10.0mLTISAB液，用水稀釋至刻度，搖勻。按標準溶液的測定步驟，將電極重新清洗到最大空白電位值后，測定其試液的電位值。六、數(shù)據(jù)及處理實驗卑據(jù) ——_UJ0——2>00——X00 ^00 ——&Q0 E/mV.以電位值為縱坐標，pF值為橫坐標，繪制E-pF標準曲線。.在標準曲線上找出與Ex值相應的pF值，帶入有關計算公式求得原始試液中氟離子的含量，以mg.」表示?；?qū)?shù)據(jù)輸入微機，以Excel一元線性回歸方程求出F-離子含量。思考題.本實驗測定的是f-離r的活度，還是濃度？為什么？.測定F離子時，加入的TISAB由那些成分組成？各起什么作用？.測定F.離子時，為什么要控制酸度，pH值過高或過低有何影響7.測定標準溶液系列時，為什么按從稀到濃的順序進行？.為什么要反復清洗空白電位值？實驗三 用氯離子選擇姓電極測定微量氯離子——標準加入法和 Gran作圖法一、目的要求.學習標準加入法的基本原理和測定技術，.學習Gran作圖法的基本原理和數(shù)據(jù)處理方法。二、基本屬理氯離子選擇性電極是由AgCI和Ag2s的粉末混合物壓制成的敏感薄膜，固定在電極管的一端，用焊錫或?qū)щ娔z封接于敏感膜內(nèi)側(cè)的銀箔上，裝配成無內(nèi)參比溶液的全固態(tài)型電極。當將氯離子選擇性電極浸入含ci?離子溶液中，它可將溶液中的氯離子活度OCI-轉(zhuǎn)換成相應的晶電Ji△《m：2.303RTmK IgaClnF測定Cl?離子時，不能使用通常的飽和甘汞電極作參比電極，因為電極內(nèi)的C|-離子將通過陶瓷芯或玻璃砂芯等多孔物質(zhì)向試濃中擴散，而干擾分析測定，為避免這一影響，應在飽和甘汞電極上連接可卸的非KC1鹽橋套管，內(nèi)盛適當?shù)囊航右后w（本實驗采用KNO3溶液），即構(gòu)成雙鹽橋飽和甘汞電極，作為參比電極。以氯離子選擇性電極、雙鹽橋飽和甘汞電極和試液組成工作電池：Hg.HgClKCI(飽和JkNOCl試液AgCI-AgSHg.Hg2 2 3 2其電動勢=-2.303IXI.EK IgacinF即在一定條件下，工作電池的電動勢E與溶舉:中壁-離—了活度的對數(shù)值成線性關系。K與溫度、參比電極電位以及膜的特性等有關，在實驗中K為工常數(shù)。分析工作中常需測定離子的濃度，根據(jù)a c,在實驗中加入離子強ClClCI度調(diào)節(jié)緩沖液的離子強度保持恒定，從而使活度系數(shù)為一常CI數(shù)，則工作電池電動勢E可寫作：__2.303lxI,Ek lgccinF即E與c的對數(shù)值成線性關系。cimol?L-1范氯離子選擇電極宜在pH=2?7的酸度范圍內(nèi)使用，濃度在I?10圍內(nèi)，電極呈線性電位響應。根據(jù)上述關系式，通過標準曲線法，測定微量C1-離子含量，操作簡便，數(shù)據(jù)處理也很簡單，是較常用的一種定量方法。但是標準曲線法的適用范圍有其局限性，在分析測定較復雜體系（實際試樣）而配制標準溶液系列時，應考慮到試樣基體和其它共存組分及其含量所引起的離子強度變化等情況，以便標準溶液與實際試液的成分盡量保持一致，顯然，這種情況下使用標準曲線法實驗操作將變得復雜，有時甚至不可能，而采用標準加入法和Gran作圖法則是克服這一困難的有效途徑。 A標準加入法是先測量而苦必未知苧■液中的電位值Ei,然后加入小體積欲測組分的標準溶液，要求加入的標準溶液濃度約為試樣中欲測組分的100倍，所以加入的體積Xs%以很.、，二斗約,試參體型Vx的1%,混合均勻后再測量電極在混合液中的電位E2，根據(jù)兩次測量值的增量△E,按下式計算欲測組分的濃度Cx。C(+)?Cx E(+)?10 11式中C式中CE2B.S2.303RT/nFGran作圖法與上述標準加入法相類似.只是多次加入欲測組分的標推溶液，然后以其為縱座測量電位值E,并計算每次加入標準溶液后的&v10ffi然后以其為縱座標，以Vs為橫座標作圖，延長各實驗點的聯(lián)線，得出與橫座標軸的交點Vs。由下式計算預測組分的濃度：c=-cV/Vxss0（+ ）?E/SGran作圖法中VoV10的計算較繁，若采用特制的半反對數(shù)座標紙，可S將實驗數(shù)據(jù)直接標在圖紙上，不需要計算，即可求得Vs值。Gran圖所示的座標紙是以取100mL試液進行測定和假設電極響應的斜率s為58mV（對一價離子）為根據(jù)而設計的，橫座標每一大格表示加入1ml標準溶液，縱座標每一大格表示電位變化值（4E）私5mV。當電極響應斜率s不是58m2時，可以用圖左方的4E校正圖，將溯得的Em與實際的s值聯(lián)線，并且延長與E修的座標相交，然后以交點的數(shù)值E他作圖。為了校正由于標準溶液的加入而引起的稀釋效應，縱軸上同一位置的分度值間距從左向右逐漸增大（即向上傾斜）.在Gran圖的實際應用中，可以按100mL的0.5倍，1.5倍，2.0倍適當擴大或縮小，本實驗采用0.5倍進行測定。由于Gran作圖法是通過多次測量電位值進行求其欲測組分濃度的，提高了測定準確度，尤其是對于含量較低的試樣，加入標準溶液后，欲測組分濃度增加，于是在較高濃度進行電位測量，電極易于達到平衡，測得的電位較穩(wěn)定，因而實驗的重現(xiàn)性也較好。標準加入法和Gran作圖法都是在有其它組分共存情況下進行測量的，因此實際上減免了共存組分的影響，所以這兩種方法都適合于成分不明或組成復雜試樣的測定.氯離子選擇性電極使用方便，是應用較廣的一種離子選擇性電極，在化學工業(yè)、食品工業(yè)以及環(huán)境科學等許多領域都有實際應用。三、儀器.任意型號酸度計或離子計.氯離子選擇性電極.雙液接（雙鹽橋）飽和甘汞電極.電磁攪拌器.滴定管50mL.吸量管0.5mL,1mL,5mL,10mL.大肚移液管50mL.容量瓶100mL.燒杯150mL四、試劑.離子強度調(diào)節(jié)緩沖液(ISAB)稱取42.5gNaNO3(M=84.9947)于燒杯中，加水溶解后，加濃HNO3調(diào)節(jié)至pH=3-4.以pH試紙試驗確定，稀釋至1000mL,配成0.5mo1n'NaNO3溶液。也可以配成0.1mol?L-1KNO3(M=101.107)溶液(稱量10g)來使用。.0.05mol?L-1NaCI標準溶液取優(yōu)級純NaCI于高溫爐中在500?600C灼燒半小時，放置于干燥器中冷卻，準確稱取NaCI(M=58.44)2.9222g于小燒杯中，用水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中配成水溶液。. 1.00mol?L-1NaCI標準溶液稱取上述灼燒并放置冷卻后的NaCI14.61g于小燒杯中，用水溶解后，轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中配成水溶液。.待測試液自來水五、實驗步驟.按酸度計或離子計操作步躲所述，調(diào)試儀器，按下mV按鍵。摘去飽和甘汞電極的橡皮帽，并檢查內(nèi)電極是否浸入飽和KCI溶液中，如未浸入，應補充飽和KCI溶液。安裝電極，并用濾紙吸去電極上的水滴。2.空白溶液的測定由滴定管準確放出去離子水45.00mL，置于100mL燒杯中，加入ISAB液5.00mL(總體積為50mL),插入氯離子選擇性電極和雙鹽橋飽和甘汞電極，放入攪拌子，開動攪拌器，調(diào)節(jié)至適當?shù)臄嚢杷俣龋娢环€(wěn)定后，讀取電位值.用刻度吸管向燒杯中加入0.05mol?L-1NaCI標推溶液0.5mL,待電位穩(wěn)定后，讀取電位位。然后每加0.5mL標準溶液，測量一次電位值，連續(xù)測量5~6次。.待測溶液的測定 由滴定管準確放出試樣45.00mL,以下按步躲2操作，連續(xù)測量5-6次?.一次標準加入法準確吸取試樣45.00mL,加入ISAB液5.00mL，插入氯離子選擇性電極和飽和甘汞電極，放入攪拌子，開動攪拌器，調(diào)節(jié)至適當?shù)臄嚢杷俣?，待電位穩(wěn)定后，讀取電位值。-15.于上述燒杯中加入1.00mol?LNaCI標準溶液0.50mL,待電位穩(wěn)定后，讀取電位值.六、數(shù)據(jù)及處理.將測量數(shù)據(jù)填入下表Vx=45.00mL,Ds=0.050mol?L標準溶液加入量Vs/mL0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0去離子水電位E/mV水樣電位E/mV.將實驗數(shù)據(jù)直接標在Gran圖上，從圖上查出Vs值并計算結(jié)果。.根據(jù)加入標準溶液前和0.50mL1.00mol?L-1NaCI標準溶液后的兩次電位測量值，用下列公式計算原始試液中C1一的質(zhì)量濃度，以mg?J表示。△CCV1TOC\o"1-5"\h\zC=-A = F-xE/s-VV10 -110 1Xs = x——-——+I-I_ I-11.1.000.50 10.0099EE EiE2/591z159 10 150.000.5010 14.采用標準加入法公式計算，并和Gran圖法計算結(jié)果進行比較，結(jié)果以mg?L"我示。思考題1.本實驗為什么要使用干燥的燒杯？.試比較標準曲線法，標準加入法和Gran作圖法的優(yōu)缺點。.本實驗選擇甘汞電極作為參比電極對測定結(jié)果有何影響？應該采用什么樣的參比電極較合適？為什么？注意事項：如果被測溶液中C「離子的含量偏低，將會使曲線的下限發(fā)生彎曲，此時應采用加入標準溶液較多的上限數(shù)值連線。實驗四 電位滴定法測定水中氯離子的含量一、目的要求.鞏固電位滴定法的理論知識。.了解沉淀滴定過程中溶液電位變化與離子濃度變化的關系。.了解電位滴定法測定廢水中氯離子的原理和方法。.學會用電位滴定法測定廢水中氯化物的含量。二、測定原理用電位滴定法測定水中ci.時，用雙液接甘汞電極作參比電極（最好用玻璃電極作參比電極，因為在滴定過程中溶液的pH值基本上保持不變，更沒有干擾離子的存在），銀電極作指示電極，用AgNO3溶液滴定。在滴定過程中用ZD-2型自11-含量高時用E?V曲線法，含動電位滴定計測量兩個電極間電動勢的變化，當C1量低時用一次微分曲線法確定滴定終點。當C1-Br.、I.共存時，可以利用它們的溶度積不同連續(xù)滴定，形成三個突躍（KspAga=1.8x102°、Ksp -13>AgBr=5.2X10KspAgi=8.3x1017-1°在測定C1.時，水中含少量的「、Br\高鐵氟化物，會使結(jié)果偏高。Fe"的含量若超過C1-的含量，也有影響。Cr3+、Fe3+、PO43?沒有干擾。嚴重污染的水樣，一般需要預處理，如污染較小，加入HN。3就可破壞一些污染物。三、試劑與儀器-10.01mo1?LAgNC>3標準溶液溶解1.6991gAgNO3于蒸儲水中，并稀釋到1000mL。必要時可以用NaCI標準溶液標定AgNO3。6m0l?L-1HN03KNO3或Ba（NO3）2固體ZD-2型自動電位滴定計。銀電極、甘汞電極（代）。攪拌磁子 50mL移液管100mL燒杯四、操作步驟移取50.00mL水樣于100mL的燒杯內(nèi)。滴加3滴濃HNO3酸化，然后加入約2克的硝酸鉀作為離子強度調(diào)節(jié)劑，必要時可加水稀釋。把攪拌棒和電極都浸入水樣內(nèi)，開始攪拌，待硝酸鉀溶解完后，按照儀器使用方法作必要調(diào)整，把選擇開關調(diào)到適當位置以測量兩個電極間的電動勢。先預作一遍，找出滴定突躍的大致范圍，然后另取一份樣品進行細作，并記錄每加入一定體積后所對應的電位值。繪出E-V滴定曲線，找出終點電位值和對應的終點體積計算含量。并對儀器設置終點電位值進行第三次自動滴定。五、結(jié)果計算= cVCssXVx_最終換算成mg?L"表示。思考題.玻璃電極是H+濃度的指示電極，為什么可以在這里用作參比電極？.試液滴定前為什么要用HNO3酸化？實驗五 鄰二氮菲分光光廢法測定微量鐵的條件試驗一、目的要求.通過本實驗學習確定實驗條件的方法。.學習721型和722型或其他型號分光光度計的使用方法。二、基本原理在可見光分光光度測定中，通常是將被測物質(zhì)與顯色劑反應，使之生成有色物質(zhì)，然后測其吸光度，進而求得被測物質(zhì)含量.因此，顯色反應的完全程度和吸光度的物理測量條件都影響到測定結(jié)果的準確性。顯色反應的完全程度取決于介質(zhì)的酸度、顯色劑的用量、反應的溫度和時間等因素。在建立分析方法時，需要通過實驗確定最佳反應條件。為此，可改變其中一個因素（例如介質(zhì)的pH值），暫時固定其它因素，顯色后測定相應溶液的吸光度，通過吸光度一pH曲線確定顯色反應的適宜酸度范圍。其它幾個影響因素的適宜值，也可按這一方式分別確定。本實驗以鄰二氮菲為顯色劑，找出測定微量鐵的適宜顯色條件，反應式如下：橙紅色三、儀器.722型和72I型分光光度計.容量瓶50mL.吸量管1mL,2mL,5mL,10mL四、試劑鐵鹽標準溶液（配制方法見實驗教材）0.15%鄰二氮菲（又稱鄰菲啰琳）水溶液10%鹽酸羥胺水溶液imol?L-1NaAc溶液（pH=4-6）0.2mol?L-1NaOH溶液-11mol?LHCI溶液廣泛pH試紙和不同范圍的精密pH試紙五、實驗步驟.顯色反應時間的影響及有色溶液的穩(wěn)定性取2只50mL容量瓶，分別加入0,5.00mL鐵標液，分別加入10%鹽酸羥胺1mL,搖勻，稍停，再加入NaAc溶液5mL,鄰二氮菲溶液2mL,記下稀釋至刻2+度后的時刻（Omin）,立即以不含F(xiàn)e離子，但其余試劑用量完全相同的試劑空白作參比，在波長508nm處測定溶液吸光度。然后依次測量放置0、1、3、5、10、30.60、90、120和150min時溶液的吸光度，每次都取原容量瓶中的溶液測定。量結(jié)果填入卜表。放苴時間/minU1351U3UbUyu120IbU吸光度A.酸度影響于8只50mL容量瓶中，然后按下表分別配制溶液再分別用蒸馀水稀釋到刻度，搖勻，用1cm比色皿，并以蒸儲水作參比，在波長508nm處測定各溶液的吸光度。并先用廣泛pH試紙粗略測定所配制各溶液的pH值，再用精密pH試紙準用測定各溶液陽pH值o容量瓶編號No123450(8氏初、混1ft成10yrniL-15.005.005.00S.005.005.005.005.0010%鹽酸把胺， --1HCI110110110110110110110!10OL。608010001401600.2mol?Lnque0.15%鄰二氮菲22222222pHA.顯色劑用量的影響同理，按下表配制不同顯色劑用量的溶液，用蒸儲水分別稀釋至刻度，搖勻,K置10min,以蒸播；K為參匕：溶液，在波長508nm處測量號溶液F勺吸光ISo容量瓶編號No12345678鐵標準密液b.UUb.UUb.UUb.UUb.UUb.UUb.UUb.UU10%鹽酸羥胺111111111mol?L''NaAc555555550.15%鄰二夙菲00.10.20.51.02.03.04.0A六、數(shù)據(jù)及處理1.根據(jù)上列三組數(shù)據(jù)分別繪制：A-pH曲線（吸光度為縱坐標）；A—Vr用量曲線（吸光度為縱坐標）；A-t曲線（吸光度為縱坐標）。2.從上列三條曲線上確定顯色反應適宜的pH值范圍、顯色劑用量范圍和適宜的顯色時間范圍。思考題.根據(jù)什么原則從吸光度pH曲線確定顯色的適宜pH值范圍？如果選擇不當，其后果怎樣？.在從吸光度-反應時間曲線選定適宜的顯色時間范圍時，主要應考慮什么問題？如果時間選擇過短或過長對測定有何影響？.顯色劑用量的選擇原則是什么？實驗六鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵（選作）一、試驗目的.學習722型和721型或其他型號分光光度計的使用方法，.學習繪制吸收光譜曲線的方法。.掌握利用標準曲線進行微量成分分光光度測定的基本方法和有關計算。二、基本原理2+離子與鄰二氮菲鄰二氮菲（簡寫作Phen）,在pH值為2?9的溶液中，F(xiàn)e發(fā)生下列顯色反應：2+十3Phen=Fe（Phen） 2+Fe 3）生成的橙紅色絡合物非常穩(wěn)定，1gKB=21.3（20℃）.其溶液在508nm處有最大吸收峰，摩爾吸光系數(shù)KSio=1.1x104L?cm-1?mol-1,利用上述反應可以測定微量鐵。顯色反應的適宜pH值范圍很寬（2?9）,酸度過高（pH<2）反應進行較慢；若酸度過低，F(xiàn)e?+離子將水解，通常在PH值約為5的NaAc緩沖介質(zhì)中測定。鄰二氮菲與F?+離子反應的選擇性很高，相當于含鐵量5倍的Co2+、CLP+離子，20倍量的Cr3*，Mn2+,PO），V（V）離子，甚至40倍量的A13*,Ca2+,Mg2+,SiO2-,一 4 3Sn2+和ZM+離子都不干擾測定。本實驗以鹽酸羥胺為還原劑，也可使用抗壞血酸將Fe”還原為Fe-3+ 2+ +4Fe+2NH2OH—>4Fe +4H+H2O利用分光光度法進行定量測定時，一般是選擇與被測物質(zhì)（或經(jīng)顯色反應后產(chǎn)生的新物質(zhì)）最大吸收峰相應單色光的波長為測量吸光度的波長。顯然，該波長下的摩爾吸光系數(shù)E最大，測定的靈敏度也最高.為了找出物質(zhì)的最大吸收蜂所在的波長，需測繪有關物質(zhì)在不同波長單色光照射下的吸光度曲線，即吸收曲線（或稱吸收光譜）。通常采用標準曲線法進行定量測定，即先配制一系列不同濃度的標準溶液，在選定的反應條件下使被測物質(zhì)顯色，測得相應的吸光度，以濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線（或稱工作曲線）。另取試液經(jīng)適當處理后，在與上述相同的條件下顯色，由測得的吸光度從標準曲線上求得被測物質(zhì)的含量。由于鄰二氮菲與Fe2+離子的反應選擇性高，顯色反應所生成的有色絡合物的穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性也好，因此在我國的國家標準（GB）中，測定鋼鐵、錫、鉛焊料、鉛錠等冶金產(chǎn)品和工業(yè)硫酸、工業(yè)碳酸鈉、氧化鋁等化工產(chǎn)品中的鐵含量，都采用鄰二氮菲顯色的分光光度法。三、儀器.722型、72I型分光光度計.容量瓶50mL.吸量管1mL,2mL,5mL,10mL四、試劑鐵標準溶液10〃6mL10.15%鄰二氮菲水溶液10%鹽酸瘦胺水溶液1mol?LNaAc溶液五、實驗步驟.刎耳匚2一Phen吸收曲線.測量Fe-1用吸量管吸取10/zg?ni-的鐵標準液5.00mL于一只50mL容量瓶中，另一只不加鐵標準液，然后分別加入1mL鹽酸羥胺溶液，搖勻，再加入5mLNaAc緩沖溶液和2mL鄰二氮菲溶液，用蒸儲水稀釋至刻度，搖勻.以1cm比色皿，試劑空白溶液（即上述不加標準鐵的溶液）為參比溶液，在分光光度計上，在450?550nm波長區(qū)間測定溶液的吸光度隨波長的變化。在510nm附近須每隔2nm測量一次。.繪制標準曲線用吸量管分別吸取10〃加￡’的鐵標準溶液0，20'4016018。，10.0mL于6只50mL容量瓶中，依次各加入1mL鹽酸羥胺、5mLNaAc緩沖溶液、2mL鄰二氮菲溶液，用蒸儲水稀釋至刻度，搖勻。放置10min,用1cm比色皿，以不加鐵的試劑空白溶液為參比溶液，在實驗步驟1所得到的最大吸收波長下，分別測量各溶液的吸光度。.試樣中微量鐵的測定準確稱取試樣0.4-0.5g(如鐵含量較高，則適當減少稱樣量)于小燒杯中，加少量蒸鐳水潤濕，蓋上表面皿，小心滴加3mol?L-1HCI溶液至試樣溶解，轉(zhuǎn)移試樣至50mL容量瓶中，用少量蒸儲水淋洗燒杯，一并轉(zhuǎn)移至容量瓶中。然后依次加入1mL鹽酸羥胺、5mLNaAc緩沖溶液、2mL鄰二氮菲溶液，以蒸儲水稀釋至刻度，搖勻，放置10min.以試劑空白溶液作參比溶波，用1cm比色皿，在實驗步驟1所得到的最大吸收波長下，測量吸光度。六、數(shù)據(jù)及處理.將測量結(jié)果填入下表(1)吸收曲線波長Xnm450460470480490500502504506508510512514516518520530540550吸光度A(2)標準曲線?：M/mL0.002.004.006.008.0010.00VV/mgm吸光度A(3)試樣編號 ,試樣的稱量記錄，.繪圖及計算(1)以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制Fe-Phen吸收曲線，并求出最大吸收峰的波長Anaxo一般選用Anax作為分光光度法的測量波長。(2)以顯色后的50mL溶液中的含鐵量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制測定鐵的標準曲線.(3)根據(jù)試樣的吸光度，計算試樣中鐵的含量(mg?L')°思考題.鄰二氮菲分光光度法測鐵的原理是什么？用該法測出的鐵含量是否為試祥中亞鐵的含量？.吸收曲線與標準曲線各有何實用意義？

訓經(jīng)2+-phen吸收曲線時，在510nm附近，測量間隔為什么要密一些？U ID.本實驗所用的參比溶液為什么選用試劑空白，而不用蒸儲水？2+、Fe3+離子含量的.試擬出以鄰二氮菲分光光度法分別測定試樣中微量Fe分析方法。實驗七 利用紫外吸收光譜檢查物質(zhì)的純度一、目的要求.學習利用紫外吸收光譜檢查物質(zhì)純度的原理和方法，.熟練紫外-可見分光光度計的操作。二、基本原理由于物質(zhì)的紫外吸收光譜是物質(zhì)分子中生色團和助色團的貢獻，也是物質(zhì)整個分子的特征表現(xiàn)。例如具有；r電子的共扼雙鍵化合物、芳香燒化合物等，在紫外光譜區(qū)都有強烈吸收，其摩爾吸光系數(shù)e可達IO,?105數(shù)量級，這與飽和煌化合物有明顯的不同。利用這一特性，可以很方便地檢查純飽和燃化合物中是否含有共筑雙鍵、芳香煌等化合物雜質(zhì)。如果乙醇中含有微量苯，會在波長230?270nm處出現(xiàn)苯吸收帶，而純乙醇在該波長范圍內(nèi)不出現(xiàn)苯的吸收帶。因此可利用物質(zhì)的紫外吸收光譜的不同，檢查物質(zhì)的純度。圖1曲線圖1曲線1.純乙醇紫外光譜圖2意醍（曲線1）和鄰笨二甲酸肝曲線2曲線2.苯在乙醉中的紫外光譜（曲線2）在甲醇中的紫外吸收光譜從圖1的曲線1和曲線2可以看出由于乙醇中含有微量苯，故在波長230?270nm處出現(xiàn)B吸收帶而純乙醇在該波長范圍內(nèi)不出現(xiàn)苯的B吸收帶。因此可利用物質(zhì)的紫外吸收光譜的不同，檢查物質(zhì)的純度。如圖2所示的意配和鄰苯二甲酸酊的紫外吸收光譜，由于在慈醒分子結(jié)構(gòu)中的雙鍵共甄體系大于鄰苯二甲酸酢，因此，慈醍的吸收帶紅移比鄰苯二甲酸酎大，且吸收帶形狀及其最大吸收波長各不相同，由此得到鑒定。三、儀器752、752C、UV-2000、UV7504、2800UV/VIS、或其他型紫外可見分光光度計四、試劑.苯、無水乙醇分析純.苯的正庚烷溶液和苯的乙醇溶液取二只50mL容量瓶各注入10/zL苯，然后分別用正庚烷和乙醇稀釋至刻度，搖勻。五、實驗條件.波長范圍 220~280nm.石英比色皿1cm六、實驗步驟.根據(jù)實驗條件，將各儀器按操作步驟進行調(diào)節(jié)，若儀器狀態(tài)正常，即可測定各實驗的紫外吸收光譜，如果測得紫外吸收光譜的吸收峰為平頭蜂或太小，可適當改變試液濃度。.使用分光光度計測定時，因儀器無自動波長掃描及記錄裝置；因此應先測定各試液在不同波長下的吸光度，然后繪制吸光度對波長的曲線，即得紫外吸收光譜。測定時要求先間隔10nm測量一次吸光度，在峰值吸收附近。間隔逐步改為5nm、2nm、Inm、0.5nm等，以便較準確測繪紫外吸收光譜。七、數(shù)據(jù)及處理.記錄實驗條件.通過紫外吸收光譜的對比，說明檢查純度的可行性。思考題.如何利用紫外吸收光譜進行物質(zhì)的純度檢查？.在紫外光譜區(qū)飽和烷燒為什么沒有吸收蜂？.為什么紫外吸收光譜可用于物質(zhì)的純度檢查？實驗八原子吸收分光光度法測定自來水中鈣、鎂的含量-標準曲線法一、目的要求.學習原子吸收分光光度法的基本原理；.了解原子吸收分光光度計的基本結(jié)構(gòu)及其使用方法，.掌握應用標準曲線法測定自來水中鈣、鎂的含量。二、基本原理標準曲線法是原子吸收分光光度分析中一種常用的定量方法.常用于未知試液中共存的基體成分較為簡單的情況.如果溶液中共存基體成分比較復雜.則應在標準溶液中加入相同類型和濃度的基體成分，以消除或減少基體效應帶來的干擾，必要時須采用標準加入法而不用標準曲線法.標準曲線法的標準曲線有時會發(fā)生彎曲現(xiàn)象。造成標準曲線彎曲原因有：(1)當標準溶液濃度超過標準曲線的線性范圍時，待測元素基態(tài)原子相互之間或與其它元素基態(tài)原子之間的碰撞幾率增大，使吸收線半寬度變大，中心波長偏移，吸收選擇性變差，致使標準曲線向濃度座標軸彎曲(向下)。(2)因火焰中共存大量其它易電離的元素，由這些元素原子的電離所產(chǎn)生的大量電子，將抑制待測元素基態(tài)原子的電離效應，使測得的吸光度增大.使標準曲線向吸光度座標軸方向彎曲(向上)。(3)空心陰極燈中存在雜質(zhì)成分.產(chǎn)生的輻射不能被待測元素基態(tài)原子所吸收，以及雜散光存在等因素，形成背景輻射，在檢測器上同時被檢測，使標準曲線向濃度座標軸方向彎曲(向下)。(4)由于操作條件選擇不當，如燈電流過大，將引起吸光度降低，也使標準曲線向濃度座標軸方向彎曲?？傊?，要獲得線性好的標準曲線，必須選擇適當?shù)膶嶒灄l件，并嚴格實行。三、儀器.原子吸收分光光度計3200型(上海分析儀器廠)或其它型號.鈣、鎂空心陰極燈.無油空氣壓縮機或空氣鋼瓶.乙塊鋼瓶.通風設備四、試劑.金屬鎂或碳酸鎂均為優(yōu)級純.無水碳酸鈣優(yōu)級純.濃鹽酸優(yōu)級純，稀鹽酸溶液1mol?L.純水去離子水或重蒸儲水u1-vtt?,力m*il*ztin#<nnncJ儲備液，然后鈣稀釋成100〃g?mL-1>.標準溶液配制首先配成1000ng?mL "3T使用液(參看實驗教材)鎂稀釋成50“g?mL五、實驗條件(以3200型原子吸收分光光度計為例，若使用其它型號，實驗應根據(jù)具體儀器前足)指標鈣鎂1.吸收線波長Xnm422.7285.22.空心陰極燈電流l/mA10103.狹縫寬度d/mm0.2（2擋）0.08（1擋）4.燃燒器高度h/mm6.04.0-15.乙煥流量Q/L?min0.50.56.空氣流量Q/L?min4.5 4.5六、實驗步驟.配制標準溶液系列(1)鈣標準溶液系列準確吸取2.00、4.00、6.00、8.00>10.00mL上述鈣標準使用液(100〃g?mL“)’分別置于5只50mL容量瓶中'用水稀釋至刻度'搖-1q勻備用。該標準溶液系列鈣的濃度分別為4.00>8.00,12.0016.00>20.00/zg?mL(2)鎂標準溶液系列準確吸取1。0、2.00、3.00,4.00、5.00mL上述鎂標準使用液，分別置于5只50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻備用。該標準溶液系列鎂的濃度分別為1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ng?mL。.配制自來水樣溶液準確吸取適量(視未知鈣、鎂的濃度而定)自來水置于50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。.根據(jù)實驗條件，將原子吸收分光光度計按儀器操作步驟進行調(diào)節(jié)，待儀器電路和氣路系統(tǒng)達到穩(wěn)定，記錄儀基線平直時，即可進樣。測定各標難溶液系列溶液的吸光度。.在相同的實驗條件下，分別測定自來水樣溶液中鈣、鎂的吸光度.七、數(shù)據(jù)及處理.記錄實驗條件(1)儀器型號(2)吸收線波長(nm)(3)空心陰極燈電流(mA)(4)狹縫寬度(mm)(5)燃燒器高度(mm)(6)乙塊流量(L?min-1)(7)空氣流量(L?min')(8)燃助比乙快：空氣=.列表記錄測量鈣、鎂標準溶液系列溶液的吸光度(A),然后以吸光度為縱座標，標準溶液系列濃度為橫座標繪制標準曲線。.測量自來水樣溶液的吸光度(A),然后在上述標準曲線上查得水樣中鈣、鎂的濃度(〃g?mL若經(jīng)稀釋需乘上相應倍數(shù)求得原始自來水中鈣'鎂含量?；?qū)?shù)據(jù)輸入微機，以一元線性回歸計算程序，計算鈣、鎂的含量。思考題.簡述原子吸收分光光度分析的基本原理。.原子吸收分光光度分析為何要用待測元素的空心陰極燈作光源？能否用氣燈或銬燈代替？為什么？.如何選擇最佳的實驗條件？實驗九 氣相色譜定性分析-純物質(zhì)對照法1一、目的要求.了解氣相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)、工作原理與操作方法.學習利用保留值進行色譜對照的定性方法二、基本原理各種物質(zhì)在一定的色譜條件(一定的固定相與操作條件等)下有各自確定的保留值，因此保留值可作為一種定性指標。對于較簡單的多組分混合物，若其中所有待測組分均為己知，它們的色譜峰均能分開，則可將各個色譜峰的保留值與各相應的標準樣品在同一條件下所得的保留值進行對照比較，就能確定各色譜蜂所代表的物質(zhì)，這就是純物質(zhì)對照法定性的原理。該法是氣相色譜分析中最常用的一種定性方法。以保留值作為定性指標，雖然簡便，但由于保留值的測定，受色譜操作條件的影響較大，而相對保留值，僅與所用的固定相和溫度有關，不受其它色譜操作條件的影響，因而更適合用于色譜定性分析。相對保留值r,定義為:=t-=t 1-RR-M還應注意，有些物質(zhì)在相同的色譜條件下，往往具有相近的甚至相同的保留值，因此在進行具有相近保留值物質(zhì)的色譜定性分析時，要求使用高柱效的色譜柱，以提高分離效率，并且采用雙柱法（即分別在兩根具有不同極性的色譜柱上測定保留值）。在沒有已知標準樣品可作對照的情況下，可借助于保留指數(shù)（Kovats指數(shù)）文獻值進行定性分析。對于組分復雜的混合物，采用更為有效的方法，即與其它鑒定能力強的儀器聯(lián)用，如氣相色譜/質(zhì)譜、氣相色譜/紅外吸收光譜聯(lián)用等手段進行定性分析。本實驗以甲苯作為標準物質(zhì)，利用保留值和相對保留值進行苯、乙苯和1,2,3-三甲苯的定性分析。三、儀器.氣相色譜儀7890n型.氮氣或氫氣鋼瓶.色譜柱2mmx2mOV-101或SE-30不銹鋼柱.微量進樣器1“L、5//L和100入注射器四、試劑苯、甲苯、乙苯、鄰二甲苯、對二甲苯、間二甲苯（或正己烷、正庚烷、正辛烷=1:1:1）五、實驗條件.色譜柱2mmx2m（i,d）OV-101或SE-30不銹鋼柱-1.流動相氫氣流量為35mL?min.柱溫80℃.氣化溫度150℃.檢測器TCD檢測溫度100℃.橋電流80mA六、實驗步驟.在四只10mL容量瓶中，按1:100（V/V）比例分別配制：苯：甲苯；甲苯：乙苯；甲苯：鄰二甲苯；甲苯：對二甲苯；甲苯：間二甲笨；甲苯：1,2,3-三甲苯溶液，搖勻備用。.根據(jù)實驗條件，將色譜儀按儀器操作步驟調(diào)節(jié)至可進樣狀態(tài)，待儀器上的電路和氣路系統(tǒng)達到平衡，記錄儀上基線平直時，即可進樣。.分別吸取以上各種混合液0.54L,依次進樣，并在色譜工作站上，于進樣信號附近標明混合液組分名稱.重復進樣三次。.為測定死時間，在相同的實驗條件下，取100/zL空氣進樣，記錄色譜圖，并重復進樣三次。.試驗完畢，用乙醛或無水乙醇抽洗微量注射器數(shù)次，并按儀器操作步驟中的有關細節(jié)關閉儀器。七、數(shù)據(jù)及處理.記錄實驗條件.測量各色譜圖中各組分的保留時間，空氣保留時間（死時間）。并計算各組分的調(diào)整保留時間、相對保留時間（以甲苯作標準物質(zhì)）和各組分在該柱上的n克?和H并把數(shù)據(jù)列于表中（以min作單位）。思考題.為什么可以利用色譜峰的保留值進行色譜定性分析？.在測繪空氣的色譜圖時，若不嚴格控制相同實驗條件，會發(fā)生什么后果？.利用ri.s進行色譜定性時，對實驗條件是否可以不必嚴格控制，為什么？.用同一根色譜柱，分離不同組分時，其塔板數(shù)是否一樣，為什么？實驗十 氣相色譜定性分析——純物質(zhì)對照法2一、目的要求.學習利用保留值和相對保留值進行色譜對照的定性方法.熟悉色譜儀器操作二、基本原理各種物質(zhì)在一定的色譜條件（一定的固定相與操作條件等）下有各自確定的保留值，因此保留值可作為一種定性指標。對于較簡單的多組分混合物，若其中所有待測組分均為已知且它們的色譜峰均能分開，則可將各個色譜峰的保留值與各相應的標準樣品在同一條件下所得的保留值進行對照比較，就能確定各色譜蜂所代表的物質(zhì)，這就是純物質(zhì)對照法定性的原理。該法是氣相色譜分析中最常用的一種定性方法。以保留值作為定性指標，雖然簡便，但由于保留值的測定受載氣流速等色譜操作條件的影響較大，可靠性較差；若采用僅與所用的固定相種類和柱溫有關而不受其它色譜操作條件影響的相對保留值r作為指標，則更適合用于色譜定性分析。相對保留值r定義為：i.s?一=t—=t 1"RR-Mr??i.s'tRslRstM式中Im't、t分別為死時間、被測組分i及標準物質(zhì)S的調(diào)整保留時間；MRR,t、tR為被測組分i及標準物質(zhì)S的保留時間。R.B還應注意，有些物質(zhì)在相同的色譜條件下，往往具有相近的甚至相同的保留值，因此在進行具有相近保留值物質(zhì)的色譜定性分析時，要求使用高柱效的色譜柱，以提高分離效率，并且采用雙柱法（即分別在兩根具有不同極性的色譜柱上測定保留值）。在沒有已知標準樣品可作對照的情況下，可借助于保留指數(shù)（Kovats指數(shù)）文獻值進行定性分析。對于組分復雜的混合物，則應采用更為有效的方法，即與其它鑒定能力強的儀器聯(lián)用，如氣相色譜-質(zhì)譜、氣相色譜-紅外吸收光譜聯(lián)用等手段進行定性分析。本實驗以正庚烷作為標準物質(zhì)，利用保留值和相對保留值進行丁酮、環(huán)己烷、甲苯和乙酸正丁酯的定性分析。三、儀器.氣相色譜儀7890n型.氫氣鋼瓶.色譜柱2mmx2mOV-101或SE-30不銹鋼柱.微量進樣器5aL和504L注射器四、試劑丁酮、環(huán)己烷、甲苯、乙酸正丁酯正庚烷均為分析純25.色譜柱2mmx2m(i.d)OV-101或SE-30不銹鋼柱.流動相氫氣流量為35mL?min.柱溫70℃.氣化溫度150℃.檢測器TCD檢測溫度100℃.橋電流80mA.進樣量0.5/zL六、實驗步驟.在四只10mL容量瓶中，按1:1(V:V)比例分別配制：丁酮：正庚烷、環(huán)己烷：正庚烷、甲苯：正庚烷、乙酸正丁酯：正庚烷溶液，搖勻備用。.根據(jù)實驗條件，將色譜儀按儀器操作步驟調(diào)節(jié)至可進樣狀態(tài)，待儀器上的電路和氣路系統(tǒng)達到平衡，記錄儀上基線平直時，即可進樣。.分別吸取以上各種混合液14L,依次進樣，并在色譜工作站上，于進樣信號附近標明混合液組分名稱。重復進樣1次。.為測定死時間，在相同的實驗條件下，取304L空氣進樣，記錄色譜圖，并重復進樣1次。.試驗完畢，用乙醛或無水乙醇抽洗微量注射器數(shù)次，并按儀器操作步驟中的有關細節(jié)關閉儀器ris.記錄各色譜圖中各組分的保留時間Rt,正庚烷的保留時間tR、空氣保留I *時間（死時間t）。并計算各組分的調(diào)整保留時間、相對保留時間（以正庚烷作標準M物質(zhì)）和各組分在該柱上的n強和H“"，并把數(shù)據(jù)列于表中（以min作單位）。.測量未知試樣中各組分的tR,并計算t和心值，然后與上表所列數(shù)據(jù)進行R.對照比較，確定未知試樣中的各個組分。思考題.為什么可以利用色譜峰的保留值進行色譜定性分析？.在利用相對保留值進行色譜定性時，對實驗條件是否可以不必嚴格控制，為什么？.除了利用氣相色譜的保留值（包括相對保留值和調(diào)整保留值）定性外，還有哪些定性方法？TOC\o"1-5"\h\z測定結(jié)果ri,s如下：rrm.正廉烷0.4；r 0.75環(huán)己烷，正庚烷 ；「 1.0：rip. 1.5：r 2.0乙酸正丁麗,正炭烷實驗十一火焰光度法測定樣品中的鉀、鈉一、目的要求.學習和熟悉火焰光度法測定樣品中鉀、鈉地方法。.加深對火焰光度法原理的理解。.了解火焰光度計的結(jié)構(gòu)及使用方法。二、實驗原理以火焰為激發(fā)源的原子發(fā)射光譜法叫火焰光度法，它是利用火焰光度計測定元素在火焰中被激發(fā)時發(fā)射出的特征譜線的強度來進行定量分析?；鹧婀舛确ㄓ纸谢鹧姘l(fā)射光譜法。當樣品溶液經(jīng)霧化后噴入燃燒的火焰中，溶劑在火焰中蒸發(fā)，試樣熔融后轉(zhuǎn)化為氣態(tài)分子，繼續(xù)加熱又離解為原子，再由火焰高溫激發(fā)而發(fā)射特征光譜，用單色器把元素所發(fā)射的特定波長的光分離出來，經(jīng)光電檢測系統(tǒng)進行光電轉(zhuǎn)換，再由檢流計測出特征譜線的強度。用火焰光度法進行定量分析時，若激發(fā)的條件保持一定，則譜線的強度與待測元素的濃度成正比，可以用下式表示：27式中：a—與待測元素的激發(fā)電位、激發(fā)溫度及試樣組成等有關的系數(shù)，當實驗條件固定時，a為常數(shù)，b—譜線的自吸收系數(shù)。當濃度很低時，自吸現(xiàn)象可忽略不計，此時，b=1,則I=ac通過測量待測元素特征譜線的強度，即可進行定量分析.K、Na元素通過火焰燃燒容易激發(fā)輻射出不同能量的譜線，用火焰光度計測定K原子發(fā)射的766.5nm和Na原子發(fā)射的589.0nm的這兩條譜線的相對強度，利用標準曲線法可進行K、Na的定量測定。為抵消K、Na間的相互干擾，其標準溶液可配成K、Na混合標準溶液。本實驗可使用汽油-空氣或液化石油氣-空氣火焰。三、實驗用品.儀器火焰光度計吸量管(5mL,10mL)曲頸小漏斗振蕩機燒杯(100mL,250mL,500mL)容量瓶(10mL,50mL,100mL,250mL)可調(diào)溫電熱板分析天平(0.1mg) 聚乙烯試劑瓶帶塞錐形瓶(100mL)漏斗臺秤.試劑(1)1000gJK的貯備標準溶液稱取09534g于105℃烘干4?6h的KCI(AR)，溶于水后，移入500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，轉(zhuǎn)入聚乙烯試劑瓶中貯存。-1⑵1.000gLNa的貯備標準溶液稱取1.270g于110℃烘干4?6h的NaCI(AR),溶于水后，移入500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，轉(zhuǎn)入聚乙烯試劑瓶中貯存。(3)K,Na混合標準工作溶液"1”移取5.00mLK貯備標準溶液，2.50mLNa貯備標準溶液于50mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。此標準溶液含-1 -110Omg-LK,含50mg-LNa....—好?日入*、爾ljzci一c '),H2so4(h1.84gcm-3),HCIO4(60%)(4)二酸混合溶液HNO3(^1.429cm' \ >以8:1:1的比例混合而成。(5)K,Na混合標準工作溶液“2”(如果不是測定土壤樣品此溶液不必配制)。移取5.00mLK貯備標準溶液，12.50mLNa貯備標準溶液于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。此標準溶液含 -1K.含125mg.L-iNa。50mg.L(6)Al2(SO4)3溶液稱取34gAi2(SO4)3或66gAi2(SO4)3-18H2O溶于水中(7)K標準工作溶液吸取5.00mLK貯備標準溶液于100mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，配成50mg.L，。(8)Na標準工作溶液吸取10.00mLNa貯備標準溶液于100mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，配成100mg.L-1"(9)混合酸消化液 HNO3與HCIO4以4:1比例混合而成。(10)1%HCI溶液3.其它定量濾紙植物樣品玻璃球四、操作步驟植物樣品中K,Na含量的測定.樣品的預處理植物樣品通常用濕消化法處理成分析試液。準確稱取1.000g通過40目篩的干樣品，置于錐形瓶中，加入2?3粒玻璃球以防暴沸，瓶口加一曲頸小漏斗，移入10.0mL三酸混合溶液，在通風櫥中于電熱板上低溫消化40min后，升高溫度使HCIO4冒白煙分解，此過程2?3min即可完成，見到硫酸回流，即呈現(xiàn)縷狀白煙時取下錐形瓶，稍冷后，加20mL左右1%HCI溶液，加熱至沸以溶解殘渣，趁熱用快速濾紙過濾至50mL容量瓶中，用熱的1%HCI溶液洗滌沉淀三次，洗至濾液近刻度后加水定容，搖勻。此溶液一般可直接用于測Na,用逐級稀釋法稀釋100倍后測Ko.標準系列溶液的配制在五個50mL容量瓶中，分別加入1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL和5.00mLK,Na混合標準工作溶液“1”，加水稀釋至刻度，搖勻。.K,Na含量的測定按使用方法開動儀器并點火，選擇適當?shù)撵`敏度并用蒸福水噴霧調(diào)零，用標準曲線中濃度最大的溶液調(diào)節(jié)儀器滿刻度。儀器預熱10?20min后，由稀到濃依次測定標準系列溶液和未知試樣溶液的發(fā)射強度(I),每個溶液要測定三次，取平均值。五、數(shù)據(jù)處理以濃度為橫坐標，K,Na的發(fā)射強度為縱坐標，分別繪制K,Na的標準曲線。由未知試樣的發(fā)射強度求出樣品中的K,Na含量(用質(zhì)量分數(shù)表示)。注釋如果為土壤樣品或食物樣品可分別按下法測定。1.土壤樣品中水溶性K,Na含量的測定(1)土壤樣品的預處理土壤樣品通常用浸提法處理。待測溶液中Ca對K的干擾不大，而對Na的干擾較大，可以用Al2(SO4)3抑制鈣的激發(fā)減少干擾。稱取10g通過1mm篩孔烘干土樣放入100mL帶塞的錐形瓶中，加水50mL蓋好瓶蓋，在振蕩機上振蕩3min立即過濾，根據(jù)具體情況吸取一定體積浸出液，放入50mL容量瓶中，加1mLAl2(SO4)3溶液，定容，搖勻備用。(2)標準系列溶液的配制及測定在九個50mL容量瓶中，分別加入0.00mL,2.00mL,4.00mL,6.00mL,8.00mL,10.00mL,12.00mL,16.00mL,20.00mLK,Na混合標準工作溶液"2”,分別加?1 -1 -1入1mLAl2(SO4)3溶液，定容，各瓶中分別含K為Omg.L,2mg-L,4mg-L6mg-L118mg?L-1,10mg-L1,12mg-L-1,16mg-L1,20mg-I_t,含Na為0mg-L-5mg-L1,10mg-L-1,15mg-L，,20mg-L1,25mg-L-1,30mg-L-1,40mg-L-1,-150 °mg?L儀器預熱10?20min后，由稀到濃依次測定標準系列溶液中K,Na的發(fā)射強度，每個溶液要測定三次，取平均值。然后在火焰光度計上測定未知液，記錄檢流計讀數(shù)，在標準曲線上查出其濃度。2.食物樣品中K,Na含量的測定食物樣品通常用濕消化法處理成分析試液。(1)食物樣品的預處理準確稱取均勻樣品(0.5?1g干樣或1?2g濕樣或3?5g飲料)于250mL高型燒杯中，加20?30mL混合酸消化液，蓋上表面皿，置于電熱板或電沙浴上加熱消化。如消化不完全，再補加幾毫升混合酸消化液，繼續(xù)加熱消化，直至無色透明為止。加幾毫升去離子水，加熱以除去多余的HN。3.待燒杯中的液體接近2?3mL時，取下冷卻。用水洗并轉(zhuǎn)移到10mL刻度試管中，定容至刻度。取與消化樣品相同的混合酸消化液，按上述操作做試劑空白測定。(2)標準系列溶液的配制及測定吸取0.00mL,0.50mL,1.00mL,1.50mL,2.00mL,2.50mLK標準工作溶液分別置于250mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。將消化樣液、試劑空白液、K標準系列溶液分別導入火焰光度計，測定發(fā)射強度。吸取0.00mL,1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mLNa標準工作溶液分別置于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。將消化樣液、試劑空白液、Na標準系列溶液分別導入火焰光度計，測定發(fā)射強度。思考題.火焰光度計中的濾光片有什么作用？.如果標準系列溶液濃度范圍過大，則標準曲線會彎曲，為什么會有這種情況？實驗十二 熒光光度分析法測定維生素 b2一、目的要求1.學習和掌握熒光光度分析法的基本原理和方法2,熟悉熒光分光光度計（或熒光光度計）的結(jié)構(gòu)和使用方法二、實驗原理在紫外光或波長較短的可見光照射后，一些物質(zhì)會發(fā)射出比入射光波長更長的熒光。以測量熒光強度和波長為基礎的分析方法叫做熒光分光光度分析法。對同一物質(zhì)而言，若ale?0.05,即對很稀的溶液，熒光強度F與該物質(zhì)的濃度c有以下的關系F=2.36Ioale式中：力f 熒光效率；Io 入射光強度；a 熒光分子的吸收系數(shù)；I試液的吸收光程。Io和I不變時，F(xiàn)=Kc式中K為常數(shù)。因此，在低濃度的情況下，熒光物質(zhì)的熒光強度與濃度呈線性關系。維生素B2（即核黃素）在430?440nm藍光的照射下，發(fā)出綠色熒光，其峰值波長為535nm。維生素B?的熒光在pH=6?7時最強，在pH=11時消失。熒光分析實驗首先選擇激發(fā)光單色器波長和熒光單色器波長，基本原理是使測量獲得最強熒光，且受背景影響較小。激發(fā)光譜是選擇激發(fā)光單色器波長的依據(jù)，熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜是指在熒光最強的波長處，改變激發(fā)光單色器的波長測量熒光強度，用熒光強度對激發(fā)光波長作圖所得的譜圖。大多數(shù)情況下，熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜與其吸收光譜相同。熒光光譜是選擇熒光單色器波長的主要依據(jù)，熒光物質(zhì)的熒光光譜是將激發(fā)光單色器波長固定在最大激發(fā)光波長處，改變熒光單色器波長測量熒光強度，用熒光強度對熒光波長作圖所得的譜圖。下圖為維生素B2的吸收（激發(fā)）光譜及熒光（發(fā)射）光譜示意圖。圖VB2的吸收（激發(fā)）光譜及熒光光譜示意圖A——吸收光譜；F——熒光光譜本實驗采用標準曲線法來測定維生素B2的含量。激發(fā)光單色器波長選440nm.熒光單色器波長選535nm，可將440nm的激發(fā)光及水的拉曼光（360nm）濾除，從而避免了它們的干擾.三、實驗用品.儀器國產(chǎn)930型（或其它型號）熒光光度計容量瓶（50mL,1L）吸量管（5mL）棕色試劑瓶（500mL）.藥品-1100.0mg.L維生素B2標準貯備液準確稱取0.1000g維生素B2,將其溶解于少量的1%乙酸中，轉(zhuǎn)移至1L容量瓶中，用1%乙酸稀釋至刻度，搖勻。⑵500maL“維生素B 維9g 2工作標準溶液準確移取50.00mL100.0mg.L生素B2標準貯備液于1L容量瓶中，用1%乙酸稀釋至刻度，搖勻。（3）待測液取市售維生素B2一片，1%乙酸溶液溶解，在1L容量瓶中定容。以上溶液均應裝于棕色試劑瓶中，置于冰箱冷藏保存。四、操作步驟.標準系列溶液的配制在五個干凈的50mL容量瓶中，分別加入1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL和5.00mL5.00mg.L維生素By 2工作標準溶液，用蒸儲水稀釋至刻度，搖勻。.標準系列溶液的測定開啟儀器電源，預熱約10min.用蒸儲水做空白，從稀到濃依次測量標準系列溶液的熒光強度。.未知試樣的測定取2.50mL待測液置于50mL容量瓶中，用蒸儲水稀釋至刻度，搖勻。用測定標準系列溶液時相同的條件，測量其熒光強度。五、數(shù)據(jù)處理.用標準系列溶液的熒光強度繪制標準曲線。.根據(jù)待測液的熒光強度，從標準曲線上求得其濃度。.計算藥片中維生素B2的含量，用mg/片表示。思考題.怎樣選擇激發(fā)光單色器波長和熒光單色器波長？.熒光光度計中為什么不把激發(fā)光單色器和熒光單色器安排在一條直線上？實驗十三冷原子吸收光譜法測定天然水中痕量汞一、基本原理天然水中痕量汞的冷原子吸收測定，基本上都是采用SM+還原氣化法，即于試液中加入還原劑，使Hg2還原成金屬汞。然后利用金屬汞在常溫下具有較高的蒸氣壓的性質(zhì)，將汞蒸氣導入吸收池進行測定；或者使Hg與金、銅等接觸，生成汞齊，進行富集，然后再加熱產(chǎn)生汞蒸氣進行測定。天然水中含有少量有機物，在酸性條件下，SnCI2還原劑不能有效的還原有機汞，因此，必須將有機汞轉(zhuǎn)化成無機汞。即在酸性條件下加入KMnO4溶液并2+加熱進行消化，濃縮至小體積，然后加入還原劑將Hg還原成Hg,將汞蒸氣導入吸收池，測定Hg253.7nm的吸收。二、儀器和試劑.F732-S型測汞儀.硝酸重鋁酸鉀溶液：稱取0.25g重鋸酸鉀，溶于無汞去離子水，加入25mL優(yōu)級純硝酸，再用去離子水稀釋到500mL。.準確稱取HgCI2(AR)0.1354克溶于硝酸重鋁酸鉀溶液中并稀釋至100mL,即為1mgHg/mL的標準溶液。.汞標準使用液A（10/zg/mL）：取1mgHg/mL濃度的標準溶液1mL加硝酸重鋁酸鉀稀釋液至100mL,即為10.0ugHg/mL標準溶液。.汞標準液B（0.1ng/mL）：取10.0ugHg/mL標準溶液1mL加硝酸重鋁酸鉀稀釋液至100mL,即為0.1〃gHg/mL標準溶液。.汞標準液C（0.01flg/mL）：取0.1〃gHg/mL10mL加硝酸重鋁酸鉀稀釋液至100mL,即為0.01ngHg/mL標準溶液。.10%氯化亞錫溶液（臨用前配制）：稱取10g氯化亞錫于小燒杯內(nèi)，加入20mL濃鹽酸，微微加熱至透明，冷卻后再用去離子水稀釋到100mL。KMnO4溶液（5%）：稱取5克KMnO4溶于蒸馀水中，加入少量H2SO4稀釋至100mL搖勻。5%硝酸溶液：量取50mL分析純硝酸，用去離子水稀釋至1000mL供洗滌用。1:1H2so4。10%鹽酸羥胺溶液（或1:6H2CD2）三、操作步驟取100mL水樣二份于200mL燒杯中，加入1:1H2so42mL,5%KMnO41mL,于電熱板上低溫加熱（約30min）消化濃縮試樣，當試樣蒸發(fā)至30mL左右時，取下，沿杯壁滴加10%鹽酸羥胺溶液1mL,使過量的KMnO4和MnO2還原為無色溶液，轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中，以蒸儲水稀釋至刻度，搖勻。將試液全部轉(zhuǎn)入反應瓶內(nèi)，力口入4mL還原劑，塞緊瓶塞，測量吸光度。同條件下作二份空白。工作曲線：分別取汞標準溶液B0.0、0.5、1.0>1.5、2.0mL于50mL容量瓶中，先加入2mLi:1H2SO4,稀釋至刻度（各容量瓶中對應Hg的濃度分別為：0.0、1.0、2.0、3.0、4.0ng/mL），搖勻。以下與試樣操作相同，測量吸光度。四、數(shù)據(jù)處理以汞標準溶液的濃度（c）為橫坐標，測得的吸光度（A）為縱坐標，繪制工作曲線，并查得被測水樣中汞的含量（ng/mL）.以下式計算原水樣中汞的含量（ng/mL水樣中的含量 =%xCHg（?/L）v式中：Vi-原水樣體積（mL）；V2—消化后定容的體積（mL）；c—由工作曲線查得的汞含量（ng/mL）.五.注意事項.實驗前，必須掌握測汞儀的操作方法。.加熱消化.濃縮時，溫度不可太高。一般在微沸的狀態(tài)下即可。.滴加鹽酸羥胺時，應沿杯壁滴入，使杯壁上的MnO2溶解，若有部分MnO2尚沒有溶完，可將燒杯稍微傾斜，使試液與杯壁上的MnO2接觸，既可溶完。.在加熱過程中，若溶液的紫紅色消失，應繼續(xù)添加高鈦酸鉀溶液。.每測完一份樣品都要用5%硝酸溶液徹底清洗還原瓶，否則將會對下一份樣品產(chǎn)生嚴重干擾。.本機帶有8mL,15mL、60mL三種規(guī)格還原瓶兩套，視樣品含量多少選擇相應的還原瓶。樣品含量高選擇小體積還原瓶，含量低選擇大體積還原瓶，同時試液定容體積也要做相應的調(diào)整。.操作時，前一次測定結(jié)束，應盡量使管道內(nèi)的余汞排放干凈，若此時儀器讀數(shù)不回到000,可用零調(diào)電位器進行微調(diào)到000,然后進行第二次操作。附錄：721型分光光度計簡介721型分光光度計是72型分光光度計的改進型，將穩(wěn)壓電源裝置、光源燈、單色器、比色皿架、光電管暗盒(電子放大器)和微安表等部件全部裝成一體，裝置緊湊，操作簡便。儀器工作波長范圍是360?800nm,是用于近紫外和可見光區(qū)的分光光度計。721型分光光度計，儀器用鐺絲白熾燈做光源，棱鏡作色散元件.采用自準式光路，以GD-7型光電管為光電轉(zhuǎn)換元件，微弱的光電流信號通過微電流放大器放大后，由微安表顯示出來。.721型分光光度計操作步驟(1)接通電源前，將各旋鈕調(diào)節(jié)至起始位置，微安表的指針應在“0”位否則旋轉(zhuǎn)校正螺絲加以調(diào)節(jié)。(2)接通電源，打開比色皿暗箱蓋，選擇適當?shù)臏y量波長和相應的靈敏度檔，調(diào)節(jié)透光率“0”電位旋鈕，使微安表指“(E放大器的靈敏度共有5檔，“1檔'最低，以后逐漸增大，在能使參比溶液調(diào)到100%的情況下，應盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩(wěn)定性。在改變靈敏度檔后，應重新校正“0”和100”。(3)將參比溶液和待測溶液分別倒入比色皿中，合上比色皿暗箱蓋，此時選定的單色光透過參比溶液照射到光電管上，旋轉(zhuǎn)-100%"電位器，使微安表指針在滿刻度附近，并預熱儀器20min,然后反復校正“0"和“00%”。(4)將比色皿拉桿拉出一格，使待測溶液進入光路，微安表的讀數(shù)即為該溶液的吸光度(或透光率)，讀取讀數(shù)后，立即打開比色皿暗箱蓋。(5)重復操作，校核讀數(shù)，再依次測量其它溶液的吸光度。(6)測量完畢，取出比色皿，洗凈擦干，將各旋鈕回復到起始位置，開關置于“關”處，撥下電源插頭，罩好儀器罩。721型分光光度計的維護注意事項(1)如實驗室電源電壓波動較大，為確保儀器工作狀態(tài)穩(wěn)定，最好外加穩(wěn)壓電源，同時儀器保持接地良好.(2)應經(jīng)常檢查干燥簡內(nèi)的干燥刑是否已變色失效，如果失效應及時烘干處理或換裝新的干燥劑。儀器長時間不用時，在儀器罩內(nèi)也應放置數(shù)袋防潮的硅膠。(3)儀器工作一段或經(jīng)搬動后，要檢查波長的準確性，以保證測定的可靠性。比色皿(吸收池)使用注意事項.比色皿要配對使用，因為相同規(guī)格的比色皿仍有或多或少的差異，致使光通過比色溶液時，吸收情況將有所不同。.注意保護比色皿的透光面，拿取時，手指應捏住其毛玻璃的兩面，以免沾污或磨損透光面。.在已配對的比色皿上，于毛玻璃面上作好記號，使其中一只專置參比溶液，另一只專置試液。同時還應注意比色皿放入比色皿槽架時應有固定朝向。.如果試液是易揮發(fā)的有機溶劑，則應加蓋后，放入比色皿架上。.倒入溶液前，應先用該溶液淋洗內(nèi)壁三次，倒入量不宜過多，以比色皿高度的4/5為宜。.每次使用完畢后，應用蒸鐳水仔細淋洗，并以吸水性好的軟紙吸干外壁水珠，放回比色皿盒內(nèi)。.不能用強堿或強氧化劑浸洗比色皿，而應用稀鹽酸或有機溶劑，再用水洗滌，最后用蒸儲水淋洗三次。722光柵分光光度計的使用方法722型光柵分光光度計能在近紫外，可見光譜區(qū)域內(nèi)對樣品物質(zhì)作定性和定量的分析.其色散元件為衍射光柵，波長精度比721好，且數(shù)字顯示讀數(shù)。操作方法及注意事項：(1)將靈敏度旋鈕調(diào)整“1”檔(放大倍率最小)。(2)開啟電源，指示燈亮，儀器預熱20分鐘，選擇開關置于“T”(3)打開試樣室蓋(光門自動關閉)，調(diào)節(jié)“0%T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0".(4)將裝有溶液的比色皿放置比色架中。(5)旋動儀器波長手輪，把測試所需的波長調(diào)節(jié)至刻度線處。(6)蓋上樣品室蓋，將參比溶液比色皿置于光路，調(diào)節(jié)透過率"100%T"旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0T-(如果顯示不到100%T,則可適當增加靈敏度的檔數(shù)，同時應重復“3”，調(diào)整儀器的“00.0")(7)將被測溶液置于光路中，數(shù)字表上直接讀出被測溶液的透過率(T)值。(8)吸光度A的測量，參照“3” “6”調(diào)整儀器的“00.0”和“100.0”，將選擇開關置于A旋動吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為.000,然后移入被測溶液，顯示值即為試樣的吸光度A值。(9)濃度C的測量，選擇開關由A旋至C,將已標定濃度的溶液移入光路，調(diào)節(jié)濃度按鈕，使得數(shù)字顯示為標定值，將被測溶液移入光路，即可讀出相應的濃度值.(10)儀器在使用時，應常參照本操作方法中"3"-6"進行調(diào)“00Q”和0100.0”的工作。(11)每臺儀器所配套的比色皿不能與其它儀器上的比色皿單個調(diào)換。(12)本儀器數(shù)字顯示后背部，帶有外接插座，可輸出模擬信號，插座1腳為正，2腳為負接地線。(13)如果大幅度改變測試波長時，需等數(shù)分鐘后才能正常工作。(因波長由長波向短波或短波向長波移動時，光能量變化急劇，光電管受光后響應較慢，需一段光響應平衡時間。附：典型紫外-可見光分光光度計簡介紫外-可見光分光光度計有很多型號，分單光束和雙光束兩大類型，目前應用都很普遍。其主要部件兩者大致相同，多以氫燈和筲燈分別作紫外光和可見光的光源，以棱鏡或光柵作色散元件，通過狹縫分出測定波長的單色光，由切換鏡把一定強度的紫外光或可見光引入光路，經(jīng)吸收池吸收后，透過的光被光電管檢測，轉(zhuǎn)變成電信號，有些儀器采用記錄儀記錄溶液的吸光度或透光率，同時用數(shù)字顯示，或者宜接從刻有吸光度或透光率的轉(zhuǎn)盤上讀取。主要部件.光源常用的有筲燈和氫燈或笊燈，提供連續(xù)光譜的波長范圍分別為760?400nm和400?200nm,其中H656.28nm和H486.13nm譜線常用作校正光柵或棱鏡位置，以提高分光光度計波長讀數(shù)的準確性。另外，為了獲得穩(wěn)定的具有一定強度的光