檢驗(yàn)方法管理程序

再傳必究檢驗(yàn)方法管理程序1目的對(duì)選用的檢驗(yàn)方法采用同行公認(rèn)的確認(rèn)、驗(yàn)證及評(píng)審，以保證所選用的檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)程序能滿足臨床和患者的需求，確認(rèn)其符合相應(yīng)的用途。2范圍適用于實(shí)驗(yàn)室開展的所有檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證工作。3職責(zé)3.1科主任：負(fù)責(zé)比對(duì)實(shí)驗(yàn)方法的批準(zhǔn)和審核。3.2質(zhì)量技術(shù)負(fù)責(zé)人：負(fù)責(zé)比對(duì)試驗(yàn)的組織和管理。3.3各專業(yè)組長(zhǎng)：負(fù)責(zé)檢驗(yàn)方法的日常監(jiān)督。4要求4.1檢測(cè)方法的選擇實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用滿足臨床需要并適用于所進(jìn)行的檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)方法。當(dāng)臨床所指定的檢測(cè)方法不合適或已過(guò)期，應(yīng)通知臨床并說(shuō)明理由。當(dāng)臨床未指定所采用的方法時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)優(yōu)先選擇標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法。若無(wú)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)首先使用在已出版的公認(rèn)或權(quán)威教科書中、經(jīng)同行評(píng)議的書刊或雜志中，或國(guó)際、國(guó)家或地區(qū)的法規(guī)中所明確的程序（方法）.。如果應(yīng)用的是內(nèi)部的規(guī)程，則應(yīng)確認(rèn)其符合相應(yīng)的用途并形成文件。實(shí)驗(yàn)室所采用的檢測(cè)方法應(yīng)保持最新有效版本，并現(xiàn)行受再傳必究控。4.2方法的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室采用非標(biāo)準(zhǔn)方法時(shí)，應(yīng)對(duì)所選用的方法采取以下措施之一或其組合進(jìn)行證實(shí)和確認(rèn)：使用參考標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行校準(zhǔn)；與其它方法所得的結(jié)果進(jìn)行比較；實(shí)驗(yàn)室之間的比對(duì)；對(duì)影響結(jié)果的因素作系統(tǒng)評(píng)審；根據(jù)對(duì)方法的理論和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的科學(xué)理解，對(duì)所得結(jié)果不確定度進(jìn)行的評(píng)定。4.3精密度核實(shí)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求做精密度試驗(yàn)用的樣品一定要穩(wěn)定；它的基本組成應(yīng)盡可能相似于實(shí)際檢測(cè)的病人標(biāo)本；樣品中的分析物含量應(yīng)在該項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平處，或者在有臨床意義的水平。有可能的haunted，做2個(gè)水平的精密度實(shí)驗(yàn)?？梢允褂玫臉悠钒刂破罚ū仨毢蛯?shí)驗(yàn)中進(jìn)行每天質(zhì)量控制用控制品時(shí)兩個(gè)不同的樣品）、校準(zhǔn)品、已經(jīng)檢測(cè)過(guò)的患者標(biāo)本、或具有血清基質(zhì)的定值材料。如果對(duì)公司的檢測(cè)系統(tǒng)作實(shí)驗(yàn)證實(shí)或核實(shí)，則選取的樣品分析物含量應(yīng)盡量與公司對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)性能評(píng)估是采用的含量一致，便于比較。采用冰凍保存的樣品一定要注意內(nèi)含分析物的穩(wěn)定和瓶間差，要嚴(yán)格控制每次復(fù)溶凍干品時(shí)使用的復(fù)溶液的質(zhì)量、開瓶要小心謹(jǐn)慎、加液準(zhǔn)確、控制使凍干塊侵潤(rùn)并復(fù)溶的時(shí)間，注意混勻的操作手法等。實(shí)驗(yàn)時(shí)按照廠商操作規(guī)程要求做好校準(zhǔn)，，常規(guī)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制。每次實(shí)驗(yàn)時(shí)，只使用在控的數(shù)據(jù)為核實(shí)實(shí)驗(yàn)原始再傳必究資料。出現(xiàn)失控時(shí)，必須重做核實(shí)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)安排20天，每天做2個(gè)濃度水平。批內(nèi)時(shí)將評(píng)價(jià)樣品隨機(jī)插入病人標(biāo)本中被檢測(cè)，一批內(nèi)連做20次；天間時(shí)每天做一次評(píng)價(jià)樣品，累計(jì)20次結(jié)果。43.35收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。從CLIA788允許誤差表中查閱評(píng)價(jià)的該項(xiàng)目允許誤差范圍。1/4CLIA’88允許誤差范圍為批內(nèi)不精密度判斷限，1/3CLIA’88允許誤差范圍為天間不精密度判斷限。也可根據(jù)生物學(xué)變異確定的不精密度作為天間不精密度判斷限（I<0.5CVI）。小于或等于判斷限的，監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的不精密度屬可接受；大于判斷限的，表示精密度不符合要求。如果在一個(gè)分析系統(tǒng)上可以做多個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)，千萬(wàn)不可用一個(gè)項(xiàng)目組成的檢測(cè)系統(tǒng)被評(píng)價(jià)資料，認(rèn)可分析系統(tǒng)所有項(xiàng)目檢測(cè)系統(tǒng)的性能。4.4準(zhǔn)確度核實(shí)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備用一個(gè)新的檢測(cè)系統(tǒng)或測(cè)定方法（或新的試劑盒、新儀器）進(jìn)行病人標(biāo)本測(cè)定前，應(yīng)與原有的檢測(cè)系統(tǒng)或公認(rèn)的參考方法一起檢測(cè)一批病人標(biāo)本，從測(cè)定結(jié)果的差異了解新檢測(cè)系統(tǒng)或方法引入后的偏倚。如果偏倚在允許的誤差范圍內(nèi)，說(shuō)明新檢測(cè)系統(tǒng)或方法替代原有檢測(cè)系統(tǒng)或方法不會(huì)對(duì)臨床引起明顯偏倚。4.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)與要求進(jìn)行可報(bào)告范圍實(shí)驗(yàn)的樣品必須與真實(shí)標(biāo)本盡可能相再傳必究似，也要與真實(shí)標(biāo)本具有相同的基體狀態(tài)。最好有五個(gè)或以上的系列濃度的實(shí)驗(yàn)樣品，濃度范圍遍及整個(gè)預(yù)期可報(bào)告范圍。最高濃度的樣品應(yīng)達(dá)到可報(bào)告范圍的上限。各實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)分析物濃度呈等比例關(guān)系，不要呈倍比關(guān)系。若能收到含低濃度分析物的病人樣品（如血清），將外觀澄清的混合樣品離心，一分為二。在一份混合樣品中加入高濃度分析物貯存液，加入體積不得超過(guò)混合樣品體積體積的1/10，但又可使樣品中分析物濃度達(dá)到高限，充分混勻后為高值（H）樣品。在另一份混合樣品中加入配制分析物貯存液的溶劑，加入量等于前一份樣品中加入的貯存液體積，充分混勻后低值（L）樣品。將H和L。樣品按;5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H關(guān)系各自配制混合，形成系列評(píng)價(jià)樣品。若收不到低值樣品，可收集高值樣品，用生理鹽水作系列不同程度稀釋，形成系列評(píng)價(jià)樣品。4.5.1.6一天內(nèi)做兩次實(shí)驗(yàn)，第一次實(shí)驗(yàn)由低到高重復(fù)測(cè)定3次，第二次實(shí)驗(yàn)由高到低重復(fù)測(cè)定3次，即每個(gè)實(shí)驗(yàn)品做6次重復(fù)測(cè)定。綜合所有結(jié)果作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。判斷可報(bào)告范圍的統(tǒng)計(jì)處理監(jiān)測(cè)系統(tǒng)或測(cè)定方法經(jīng)校準(zhǔn)后，對(duì)可報(bào)告范圍的低、高限值樣品做多次測(cè)定，以均值表示該2個(gè)樣品測(cè)定結(jié)果。依照其他可報(bào)告范圍實(shí)驗(yàn)樣品配制稀釋關(guān)系，可以計(jì)算出各實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)含分析物的濃度，為這些樣品的預(yù)期值。將這些樣品再經(jīng)檢測(cè)系統(tǒng)或再傳必究測(cè)定方法檢測(cè)，得到各檢測(cè)值。按試驗(yàn)要求，每個(gè)樣品做6次重復(fù)測(cè)定，得6個(gè)實(shí)測(cè)值，它們和預(yù)期值形成6對(duì)預(yù)期值、實(shí)測(cè)值。4.5.2.2在坐標(biāo)紙上，以X表示各樣品的預(yù)期值，以Y表示各樣品的實(shí)測(cè)值，將所在實(shí)驗(yàn)結(jié)果點(diǎn)在圖上。若所有實(shí)驗(yàn)點(diǎn)在坐標(biāo)紙上呈明顯直線趨勢(shì)，用直線回歸對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，得直線回歸y=bX+a,若b在0.97?1.03范圍內(nèi)，a接近于0，則可直接判斷測(cè)定方法可報(bào)告范圍在實(shí)驗(yàn)已涉及濃度。若b不在0.97?1.03范圍內(nèi)，a較大，試著舍去某組數(shù)據(jù)，另作回歸統(tǒng)計(jì)。若縮小分析范圍后，回歸式有明顯改善，若b接近于1，a趨于0.此時(shí)，縮小的分析范圍是真實(shí)的可報(bào)告范圍。4.6分析靈敏度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求分析靈敏度分為具有定性含義的檢測(cè)底限和具有定量含義的生物檢測(cè)限及功能靈敏度?？瞻讟悠返臏?zhǔn)備：理想的空白樣品應(yīng)具有與檢驗(yàn)的病人標(biāo)本相同的基本。常使用監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的系列校準(zhǔn)品中的“零標(biāo)準(zhǔn)”作為空白。對(duì)某些項(xiàng)目，可使用術(shù)后已無(wú)某疾病的病人樣品（如前列腺腫瘤術(shù)后病人的無(wú)PSA血清）為空白樣品。檢測(cè)限樣品的準(zhǔn)備：在證實(shí)某方法的靈敏度性能是，對(duì)空白樣品加入分析物配制成檢測(cè)限樣品。加入的分析物量應(yīng)是廠商說(shuō)明的檢測(cè)限濃度。在建立檢測(cè)限濃度時(shí)，根據(jù)需要有必要制備多份檢測(cè)限樣品（如6份會(huì)更多），各檢測(cè)限樣品內(nèi)分析物濃度呈倍再傳必究比關(guān)系或等比例關(guān)系。它們的濃度應(yīng)界于預(yù)期檢測(cè)限度高低一些的范圍內(nèi)。重復(fù)檢測(cè)次數(shù)：沒有具體規(guī)定，但常推薦做20次，符合臨床檢驗(yàn)對(duì)重復(fù)實(shí)驗(yàn)的要求。實(shí)驗(yàn)需要的時(shí)間：如果主要從空白樣品的重復(fù)性了解檢測(cè)低限，常常就做批內(nèi)或短期實(shí)驗(yàn)。如果主要從“檢測(cè)限”樣品的重復(fù)性了解定量的檢測(cè)限，推薦作較長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)，代表天間檢測(cè)性能。實(shí)際就做10次檢測(cè)（10）。求檢測(cè)低限（LLD）:將空白樣品重復(fù)20次（不低于10次）作批內(nèi)測(cè)定，計(jì)算空白（響應(yīng)量）均值（空白）和標(biāo)準(zhǔn)差（S空白）。通常估計(jì)95%或99.7%的兩種可能性。95%可能性為：LLD一空白+2?S空白：99.7%可能性為L(zhǎng)LD-j空白+3?S空白。如果該方法在測(cè)定物質(zhì)與吸光度間呈線性，則可求出LLD濃度.檢測(cè)系統(tǒng)或方法對(duì)小于或等于檢測(cè)低限的分析物量只能報(bào)告“無(wú)分析物檢出”。求生物檢測(cè)限（BLD）：對(duì)多個(gè)近于檢測(cè)限濃度的樣品（肯定不是空白樣品）作無(wú)間重復(fù)檢測(cè)20次（不低于10次），計(jì)算扣除空白響應(yīng)量后的樣品檢測(cè)響應(yīng)量的均值（A）、標(biāo)準(zhǔn)差（s｛疊測(cè)限樣品）和變異系數(shù)（cv），。按正態(tài)分布規(guī)律，95%的BLD可能性為：BLD=LLD+2?S檢測(cè)限樣品；99.7&的BLD可能性為：BLD=LLD+3>S檢測(cè)限樣品。求功能靈敏度（FS）：根據(jù)多個(gè)近于檢測(cè)限濃度的樣品作無(wú)間重復(fù)檢測(cè)扣除空白響應(yīng)量后的樣品檢測(cè)響應(yīng)量的變異系數(shù)再傳必究（CV）,從中選擇具有或最近于20%CV的對(duì)應(yīng)濃度，即為FS。4.7分析干擾評(píng)級(jí)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求第一種方法：將陽(yáng)性干擾物加入臨床標(biāo)本的混合液（干擾測(cè)定樣品）中，與不加的同一混合液（干擾對(duì)照樣品）組比較有無(wú)偏倚，稱為“配對(duì)差異”試驗(yàn)?；旌弦旱母蓴_物濃度應(yīng)具臨床決定性水平，根據(jù)分析物情況應(yīng)做幾個(gè)臨床決定性水平濃度處的實(shí)驗(yàn)。一般最有效的方法是在較高濃度下對(duì)系列可能的干擾物做初步篩選。如果沒有發(fā)現(xiàn)具臨床顯著意義，則該物質(zhì)不是干擾物，沒有必要進(jìn)一步做實(shí)驗(yàn)。反之，具臨床顯著意義的，應(yīng)進(jìn)一步作評(píng)價(jià)以確定干擾物濃度與干擾程度間的關(guān)系，這類實(shí)驗(yàn)稱“劑量響應(yīng)”系列。第一種人為加入方法的局限性有：在臨床標(biāo)本中的真實(shí)干擾物可能不是原來(lái)的藥物，而是代謝產(chǎn)物；實(shí)驗(yàn)標(biāo)本基體并不代表典型的有問(wèn)題的臨床標(biāo)本；加入的物質(zhì)與臨床標(biāo)本中的干擾物不相同，例如，蛋白結(jié)合、沉淀，或不均一性（異質(zhì)性）；可能實(shí)驗(yàn)水平選擇得太高或太低以至不真實(shí)。第二種方法：從被選擇的病人標(biāo)本組中尋找不準(zhǔn)確的結(jié)果。選擇原則：（a）疾?。ɡ纾瑏?lái)自心臟病、肝病或腎病病人的標(biāo)本）；（b）藥物（例如，使用過(guò)某種想了解的藥物的病人標(biāo)本）；（c）其他不正常組分（例如，具不正常膽紅素、脂質(zhì)、血紅蛋白或蛋白的標(biāo)本）；該方法需要參考方法，即具低干擾性的良好特異性的方法，已確定在比較研究中的“真值”。第二種方法的局限性主要是對(duì)實(shí)驗(yàn)變異缺乏控制對(duì)照：本方法并不能確定原因與作用的再傳必究關(guān)系，它只能說(shuō)明偏倚與估計(jì)的干擾物的某水平的相對(duì)關(guān)系；如果標(biāo)本不新鮮，將會(huì)失去某些易變組分（例如，乙酰乙酸）；病人通常用多種藥物，因此，難于證實(shí)何種藥物的干擾作用；按疾病和用藥對(duì)病人分類，不說(shuō)不可能，至少對(duì)許多實(shí)驗(yàn)而言非常困難；實(shí)驗(yàn)是一種機(jī)遇，成功取決于在監(jiān)測(cè)的病人人群的標(biāo)本中是否有此干擾存在；很少有公認(rèn)的參考方法，有的參考方法難以在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室中使用，另外，參考方法可能也同樣的被干擾。以上兩種方法評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)或分析方法對(duì)干擾的靈敏性都有內(nèi)在局限性，建議一起使用以相互補(bǔ)充。第二種方法是唯一可檢出藥物代謝產(chǎn)物干擾作用的方法，它也是可肯定在真實(shí)標(biāo)本中有干擾的一種方法。4.8參考區(qū)間評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求當(dāng)檢驗(yàn)科用一個(gè)新的檢測(cè)系統(tǒng)或新的測(cè)定方法測(cè)定病人標(biāo)本，如果檢驗(yàn)科有理由可以相信某一特定參考區(qū)間對(duì)參考人群不再適用，則需對(duì)生物參考區(qū)間進(jìn)行評(píng)審。參考區(qū)間評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求參照《檢驗(yàn)項(xiàng)目參考范圍管理程序》。5相關(guān)文件《實(shí)驗(yàn)室對(duì)比控制程序》《美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)》《檢驗(yàn)項(xiàng)目參考范圍管理程序》6附則《新檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)表》再傳必究《新檢測(cè)方法評(píng)審表》急診檢驗(yàn)管理制度1目的確定急診檢驗(yàn)項(xiàng)目和報(bào)告時(shí)間，詭誕急診檢驗(yàn)的申請(qǐng)、標(biāo)本采集、運(yùn)輸及報(bào)告等行為，確保急診檢驗(yàn)及時(shí)性和準(zhǔn)確性。2范圍3職責(zé)3.1實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量技術(shù)負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織相關(guān)專業(yè)租人員會(huì)同醫(yī)務(wù)部、臨床醫(yī)生共同制定急診檢驗(yàn)項(xiàng)目?jī)?nèi)容及報(bào)告時(shí)間。3.2醫(yī)務(wù)部批轉(zhuǎn)急診檢驗(yàn)項(xiàng)目?jī)?nèi)容及報(bào)告時(shí)間。3.3臨床科室負(fù)責(zé)開具急診檢驗(yàn)申請(qǐng)，標(biāo)本采集及急診結(jié)果接收、分析、處理。3.4中央配送中心負(fù)責(zé)運(yùn)輸標(biāo)本。3.5實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)急診標(biāo)本的及時(shí)檢驗(yàn)和報(bào)告。4要求4.1急診檢驗(yàn)項(xiàng)目及報(bào)告時(shí)間的確定實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量技術(shù)負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織相關(guān)專業(yè)組人員會(huì)同醫(yī)務(wù)部、臨床醫(yī)生共同制定急診檢驗(yàn)項(xiàng)目?jī)?nèi)容及報(bào)告時(shí)間。4.2急診檢驗(yàn)申請(qǐng)各臨床醫(yī)師根據(jù)患者病情需要，在急診檢驗(yàn)?zāi)K開具急診檢驗(yàn)申請(qǐng)單，如需中央配送，同時(shí)通知中央配送中心工作人員運(yùn)輸標(biāo)本。再傳必究4.3標(biāo)本采集在臨床科室采集的標(biāo)本，由采集人員及時(shí)采集，在開具醫(yī)囑后10分鐘內(nèi)完成，開單醫(yī)生應(yīng)監(jiān)督病人標(biāo)本采集的及時(shí)性。如果需要實(shí)驗(yàn)室人員采集標(biāo)本的，立即通知實(shí)驗(yàn)室工作人員采集，并由采集人員自行運(yùn)輸標(biāo)本回實(shí)驗(yàn)室。如果需要患者到采集點(diǎn)由患者自行到采集窗采集，必要時(shí)由導(dǎo)醫(yī)或護(hù)士帶領(lǐng)患者進(jìn)行交費(fèi)、采集等工作，凡持急診申請(qǐng)單的患者在交費(fèi)、采集等工作時(shí)可不用排隊(duì)，綠色通道病人可以先采集后交費(fèi)。標(biāo)本采集完成后交待患者不需在實(shí)驗(yàn)室等到紙質(zhì)報(bào)告，盡快回到診室或病房等待結(jié)果，如果需要紙質(zhì)報(bào)告單的患者，可在病情處理完后再取報(bào)告單。如果需要患者自行留取標(biāo)本的（如大小便等），等患者留取后，交給臨床科室醫(yī)護(hù)人員，由醫(yī)護(hù)人員通知中央配送中心，交其人員統(tǒng)一運(yùn)輸。4.4標(biāo)本的運(yùn)輸中央配送中心工作在接到通知后，立即調(diào)配人員（10分鐘內(nèi)）前往臨床。標(biāo)本采集后，由醫(yī)護(hù)人員與中央配送人員共同核對(duì)標(biāo)本，并同時(shí)掃描條碼確認(rèn)。配送人員運(yùn)輸標(biāo)本應(yīng)按急診優(yōu)先原則，嚴(yán)格按照標(biāo)本運(yùn)輸要求，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)（10分鐘內(nèi)）送往實(shí)驗(yàn)室。由實(shí)驗(yàn)室人員采集的標(biāo)本，自行運(yùn)輸。再傳必究4.5標(biāo)本簽收配送人員標(biāo)本送達(dá)實(shí)驗(yàn)室后，標(biāo)本簽收人員應(yīng)優(yōu)先簽收急診標(biāo)本。標(biāo)本簽收人員與配送人員共同核對(duì)，簽收成功后方可離開，如果標(biāo)本不合格，按《標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)》執(zhí)行。由實(shí)驗(yàn)室人員采集的標(biāo)本，回到實(shí)驗(yàn)室后，首先進(jìn)行標(biāo)本簽收。標(biāo)本簽收合格后