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VITEK 全自動微生物檢測系統(tǒng)原理及其應(yīng)用最近幾年來,微生物的檢測判定技術(shù)已逐漸由手工檢測走向儀器化和電腦化,并力爭簡易、.最初進(jìn)、自動化程度最高的細(xì)菌判定儀器之一。
/藥敏剖析系統(tǒng)VITEK 是當(dāng)前生界上最近幾年來,微生物的檢測判定技術(shù)已逐漸由手工檢測走向儀器化和電腦化,并力爭簡易、迅速、正確。由生物梅里埃企業(yè)出品的全自動微生物判定 /藥敏剖析系統(tǒng)VITEK 是當(dāng)前生界上最初進(jìn)、自動化程度最高的細(xì)菌判定儀器之一。 VITEK 已被很多國家定為細(xì)菌最后判定設(shè)施,并獲美國藥品食品管理局( FDA)認(rèn)同.該系統(tǒng)有高度的特異性、敏感性和重復(fù)性 ,還具有操作簡易、檢測速度快的特色
,絕大部分細(xì)菌的判定在
2~18h 內(nèi)可得出結(jié)果?,F(xiàn)將該系統(tǒng)的工作原理、主要構(gòu)造、功能并聯(lián)合我們使用后的一些領(lǐng)會介紹以下。1 工作原理VITEK對細(xì)菌的判定是以每種細(xì)菌的微量生化反響為基礎(chǔ), 不一樣種類的 VITEK試卡(檢測卡)含有多種的生化反響孔,可達(dá) 30種.將手工分別的待檢菌的純菌落制成切合必定濁度要求的菌懸液,經(jīng)充填機(jī)將菌懸液注入試卡內(nèi) ,封口后放入讀數(shù)器/恒溫培育箱,依據(jù)試卡各生化反響孔中的生長變化狀況 ,由讀數(shù)器按光學(xué)掃描原理,準(zhǔn)時測定各生化介質(zhì)中指示劑的色(或濁度反響,而后把讀出信息輸入電腦儲藏并進(jìn)行剖析,再和預(yù)約的閾值進(jìn)行比較,判定反響,再經(jīng)過數(shù)值編碼技術(shù)與數(shù)據(jù)庫中反響文件進(jìn)行比較,動顯示)并在打印機(jī)上自動打印。2VITEK 系統(tǒng)的構(gòu)造構(gòu)成2.1 檢測卡
最后判定報告將在顯示器上自當(dāng)前VITEK系統(tǒng)的檢測卡有 14種,微生物常用的有7種,即:革蘭氏陽性菌判定卡(GPI)、革蘭氏陰性菌卡(GNI+)、非發(fā)酵菌卡(NFC)、酵母菌卡(YBC)、厭氧菌卡(ANI)、芽胞桿菌卡(BAC)、奈瑟氏菌嗜血桿菌卡(份標(biāo)本,檢測卡為一次性耗費(fèi)品。
NHI),以及藥敏檢測卡等。每張檢測卡對應(yīng)接種 12。2 充填機(jī) 將待測菌的菌懸液注入試卡內(nèi)。2。3 讀數(shù)器/恒溫箱可在培育過程中準(zhǔn)時讀出細(xì)菌在試卡內(nèi)培育基中的生長變化值。2。4 電腦主機(jī)/顯示器/鍵盤/打印機(jī) 用于儲藏和剖析資料、系統(tǒng)的操作和結(jié)果剖析判定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的自動顯示報告和打印。2.5 電源穩(wěn)壓器和UPS 在外頭斷電的狀況下供給電腦主機(jī)約3VITEK 系統(tǒng)的功能
10min連續(xù)電源??膳卸?05 種細(xì)菌此中:GPI卡可判定凝結(jié)酶陽性和陰性的葡萄球菌、腸球菌、草綠色和β溶血鏈球菌、棒狀桿菌屬以及李斯特氏菌屬和丹毒絲菌等 51種;GNI+卡可判定腸桿菌科、弧菌科和非酵菌等116種;NFC卡可判定不動桿菌、氣單胞菌、產(chǎn)堿桿菌、假單胞菌、弧菌等 42種;YBC卡可判定假絲酵母(念珠菌)、隱球菌、地霉、絲孢酵母、紅酵母等判定放線菌、擬桿菌、梭桿菌、乳桿菌、真桿菌、梭菌、消化鏈球菌等
34ANI卡可94BAC卡可鑒定芽胞桿菌21種;NHI 卡可判定奈瑟氏菌、嗜血桿菌、金氏菌、摩拉氏菌、布蘭漢氏菌等47種??蓪Τ吻逡后w中的微生物進(jìn)行計數(shù)。3。3 檢測細(xì)菌生長曲線。3。4 藥敏試驗(yàn)4 實(shí)質(zhì)應(yīng)用議論
有70多種藥物約50多種藥物組合的藥敏卡。實(shí)驗(yàn)室自引進(jìn)VITEK 系統(tǒng)后,用已知的金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、李斯特氏菌、O157∶H7、沙門氏菌、志賀氏菌、綠膿桿菌、副溶血弧菌共 8株標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行檢測,結(jié)果已知的完整符合。并且判定沙門氏菌屬只要 4h,志賀氏菌屬6h,縮短了腸道致病菌生化鑒定的時間,操作也簡易。如1999 年7月13日晚某市一大廈中心餐廳發(fā)生食品中毒,發(fā)病 49人.將可疑菌株用VITEK 儀器進(jìn)行判定,僅用13h就得出判定結(jié)果,而慣例判定章需 24h。又如1999年6月從一胖聽的入口烤鰻醬油中分別出可疑酵母菌株, VITEK 系統(tǒng)的卡判定為叢生絲孢酵母。 而慣例法判定酵母菌需配制各樣培育基 ,一般實(shí)驗(yàn)室試劑多不齊備,且判定者要有相當(dāng)?shù)墓ぷ鹘?jīng)驗(yàn) .但是在未知菌的判定中,VITEK 系統(tǒng)有時會因各種要素不可以順利獲取判定報告,或由一些特別的報告信息取代了正常的判定結(jié)果。最常有的有“ unidentified organism"(不可以鑒定的細(xì)菌).產(chǎn)生這一報告的原由有 :①待檢細(xì)菌不是單調(diào)菌株;②試卡生化小孔有氣泡嚴(yán)重擾亂比色;③菌齡太老 ;④所配制的待檢菌菌懸液濁度過高或過低;⑤待檢菌不可以平均懸于0.45%~0。5%鹽水中;⑥稀有生物新種或不典型菌株,數(shù)據(jù)庫缺少資料。VITEK的最后判定報告上,有時也會出現(xiàn)一些限制信息,這些限制信息是與判定結(jié)果同時存在的,它論述了合格判定的標(biāo)準(zhǔn).最常有的有“goodconfidencemarginalseparation ”(好的可信性但難于劃分),即生化反響結(jié)果同時相像于數(shù)據(jù)庫中兩個菌, 且產(chǎn)生可接受的絕對相像值,使兩種菌間難于劃分,需加一些試驗(yàn)方可確立其最后判定。 比如:副溶血弧菌與嗜水氣單胞菌在NFC選菌為嗜水氣單胞菌時,判定結(jié)果同時還會提示參看技術(shù)資料,技術(shù)資料則說明經(jīng)過外加VP試驗(yàn)、0% NaCl 生長試驗(yàn)、七葉苷試驗(yàn)來加以差別并判定到種 .副溶血弧菌陽性百分率均為0,嗜水氣單胞菌分別為 98%、100%和96%.有些菌的最后判定儀器不可以達(dá)成,需要血清學(xué)方法證明.比如:當(dāng)GNI+O157H7
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