氣相色譜儀原理和使用

實(shí)驗(yàn)七氣相色譜儀原理和使用一、目的要求1、掌握氣相色譜儀結(jié)構(gòu)、工作原理和內(nèi)標(biāo)法應(yīng)用。2、熟悉氣相色譜儀的操作3、了解氣相色譜法在中藥分析中的應(yīng)用。二、基本原理儀器工作原理圖樣品測(cè)定原理牛黃解毒片由牛黃、雄黃、石膏、大黃、黃苓、桔梗、冰片、甘草組成。其中冰片為龍腦和異龍腦的混合物，具揮發(fā)性。因此本實(shí)驗(yàn)采用GC法，對(duì)牛黃解毒片中所含冰片進(jìn)行測(cè)定，并用內(nèi)標(biāo)法計(jì)算含量。三、儀器與試藥1、氣相色譜儀GC9800F（上?？苿?chuàng)色譜儀器有限公司）、微量進(jìn)樣器。2、水楊酸甲酯、乙醚、醋酸乙酯（AR）。3、冰片對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）。4、牛黃解毒片（市售品）。四、操作步驟1、講述儀器結(jié)構(gòu)：n2鋼瓶、空氣鋼瓶、氫氣發(fā)生器，氣體凈化器；進(jìn)樣器、橡膠墊片、襯管；柱溫箱、毛細(xì)管柱、分流管、尾吹管；FID檢測(cè)器2、講述儀器操作(詳見(jiàn)附錄)：順時(shí)針打開(kāi)氮?dú)夂涂諝怃撈?、接通氫氣發(fā)生器電源。接通儀器電源。設(shè)置氣化、柱箱、檢測(cè)器溫度，并運(yùn)行。確定各氣體流量。打開(kāi)FID電源，設(shè)置靈敏度和衰減。打開(kāi)電腦，打開(kāi)N2000在線，選擇通道1,設(shè)置方法、信息等。查看基線。點(diǎn)火。待基線穩(wěn)定后進(jìn)樣。進(jìn)入N2000離線，查看色譜圖和數(shù)據(jù)。記錄所需色譜峰保留時(shí)間、峰面積、分離度、塔板數(shù)、對(duì)稱因子等。利用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行樣品溶液濃度的計(jì)算。柱的老化。關(guān)機(jī)3、樣品分析色譜條件以二甲基聚硅氧烷(SE-30)為固定相；柱溫為130°C，氣化室為200S；載氣為N2；柱前壓0.06MPa；H20.03MPa(20ml/min)；空氣0.03MPa；尾吹0.03MPa；FID檢測(cè)器，控制溫度200C。校正因子測(cè)定內(nèi)標(biāo)溶液配制取水楊酸甲酯0.5g，精密稱定，置250ml量瓶中，力口乙酸乙酯至刻度，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液(2mg/ml)。(已備)對(duì)照品溶液配制取冰片對(duì)照品20mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液(2mg/ml)。(已備)測(cè)定校正因子取冰片對(duì)照品溶液1^l注入氣相色譜儀，測(cè)定3次，計(jì)算校正因子。測(cè)定法取本品6片，去薄膜衣，研細(xì)，取0.5g，精密稱定，置15ml帶塞試管中，加入乙醚10ml，密塞，冰水浴超聲提取10min。提取液分兩次轉(zhuǎn)移至8ml離心管中，離心(3000rpm，10min)，傾出上清液，沉淀用5ml乙醚洗滌1次，離心，合并上清液，揮干，殘?jiān)脙?nèi)標(biāo)溶液溶解，移置10ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.455)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。精密吸取1ul，注入氣相色譜儀，測(cè)定，按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算含量。(已備)附GC9800F氣相色譜儀的操作步驟1、打開(kāi)載氣（N2）、空氣氣瓶，減壓至0.3-0.4MPa，開(kāi)啟氫氣發(fā)生器，確認(rèn)整個(gè)氣路系統(tǒng)不漏氣。2、打開(kāi)儀器電源，從溫度控制器面板輸入柱箱（130°C）、氣化室（200°C）、檢測(cè)器溫度（200C），然后按“啟動(dòng)”鍵。3、打開(kāi)氣閥（位于溫度控制器右上方），調(diào)整載氣（N2）、空氣，氫氣的壓力和流速，（實(shí)驗(yàn)前均調(diào)好，因儀器調(diào)鈕嚴(yán)重滯后，老師學(xué)生一般實(shí)驗(yàn)時(shí)不要輕易動(dòng)調(diào)鈕）。4、打開(kāi)FID電源，選擇迎靈敏度（109Q-2檔）和信號(hào)衰減（1）5、打開(kāi)微機(jī)開(kāi)關(guān)，調(diào)用N2000氣相色譜在線分析程序，輸入相關(guān)的信息（選擇通道1、實(shí)驗(yàn)信息、方法等），進(jìn)入數(shù)據(jù)采集窗口。6、按下“查看基線”按鈕（數(shù)據(jù)采集窗口靠右側(cè)第一個(gè)按鈕），考察基線是否平穩(wěn)。7、基線平穩(wěn)后，檢測(cè)器溫度高于100C后，即可點(diǎn)火（點(diǎn)火口位于溫度控制器頂部）。點(diǎn)火后，基流變小，即基線降低。關(guān)閉點(diǎn)火開(kāi)關(guān)。8、待基線再次平穩(wěn)后，按“斜率測(cè)試”按鈕（數(shù)據(jù)采集窗口靠右側(cè)第五個(gè)按鈕），進(jìn)行斜率檢查，進(jìn)樣分析，進(jìn)樣口位于溫度控制器頂部。進(jìn)樣的同時(shí)，按下“數(shù)據(jù)采集”按鈕（數(shù)據(jù)采集窗口靠右側(cè)第二個(gè)按鈕）。9、進(jìn)入N2000離線，查看色譜圖和數(shù)據(jù)。10、記錄所需色譜峰保留時(shí)間、峰面積、分離度、塔板數(shù)、對(duì)稱因子等。11、利用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行樣品溶液濃度的計(jì)算。12、柱的老化