2023屆陜西省韓城市司馬遷中學(xué)生物高二第二學(xué)期期末復(fù)習檢測模擬試題（含解析）

2023學(xué)年高二年級下學(xué)期生物模擬測試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．對某種動物的肝腫瘤細胞進行細胞培養(yǎng)，下列說法錯誤的是A．在利用肝組織塊制備細胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清、血漿等天然成分C．為了防止動物細胞培養(yǎng)過程中的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素D．動物細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%C02的恒溫培養(yǎng)箱中進行，C02的作用是刺激細胞呼吸2．下列關(guān)于生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的敘述，錯誤的是A．在一塊牧草地上播種雜草形成雜草地后，其抵抗力穩(wěn)定性提高B．在一塊牧草地上通過管理提高某種牧草的產(chǎn)量后，其抵抗力穩(wěn)定性提高C．在一塊牧草地上栽種喬木形成樹林后，其恢復(fù)力穩(wěn)定性下降D．一塊棄耕后的牧草地上形成灌木林后，其抵抗力穩(wěn)定性提高3．下列關(guān)于人體的穩(wěn)態(tài)與調(diào)節(jié)的敘述中，正確的是A．穩(wěn)態(tài)是指人體內(nèi)環(huán)境中的化學(xué)成分保持相對穩(wěn)定的狀態(tài)B．內(nèi)環(huán)境中HCO3-參與維持pH的穩(wěn)定C．機體大量出汗，下丘腦分泌的抗利尿激素減少D．胰島素和胰高血糖素的分泌只受血糖濃度調(diào)節(jié)4．下列關(guān)于體液的敘述，錯誤的是A．細胞外液包括血漿、組織液和淋巴 B．消化道內(nèi)的消化液屬于體液C．體液包括細胞內(nèi)液和細胞外液 D．細胞內(nèi)液含量多于細胞外液5．進行正常光合作用的葉片，如果在葉綠體中[H]的含量相對穩(wěn)定，在a點時突然停止供給CO2，能表示葉綠體中[H]含量的變化曲線是()A． B．C． D．6．人類免疫缺陷病毒（HIV）有高度變異性，感染機體后可損傷多種免疫細胞，并通過多種機制逃避免疫系統(tǒng)識別和攻擊。下列相關(guān)敘述錯誤的是A．HIV感染人群比健康人群更易患甲型H1N1流感B．HIV的高度變異性，致使疫苗效果難以持久C．被HIV感染的細胞表面沒有HIV蛋白，利于病毒逃避免疫系統(tǒng)識別和攻擊D．HIV破壞免疫系統(tǒng)，機體無體液免疫，不能通過檢測抗體來診斷HIV感染二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）回答基因工程中的有關(guān)問題：Ⅰ.限制酶是基因工程中的重要工具酶，下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖甲、圖乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：（1）一個圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割后，會增加___________個游離的磷酸基團。（2）與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止________________________________。Ⅱ.原核生物(如大腸桿菌)是基因工程中較理想的受體細胞，它們具有一些其他生物沒有的特點：①繁殖快，②多為單細胞，③_______________等優(yōu)點。大腸桿菌細胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用__________處理細胞，使之成為感受態(tài)細胞，然后完成轉(zhuǎn)化。Ⅲ.植物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細胞最常用的方法是__________，且一般將目的基因插入Ti質(zhì)粒的________中形成重組Ti質(zhì)粒，這樣可將目的基因整合到受體細胞的染色體上，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)：這樣得到的轉(zhuǎn)基因植株，其目的基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律，則該轉(zhuǎn)基因植株一般為雜合子。若要避免基因污染，一般需將目的基因?qū)胫参锛毎腳_______DNA中。8．（10分）回答下列與蛋白質(zhì)相關(guān)的問題：（1）生物體中組成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，在細胞中合成蛋白質(zhì)時，肽鍵是在________這一細胞器上形成的。合成的蛋白質(zhì)中有些是分泌蛋白，如______（填“胃蛋白酶”“逆轉(zhuǎn)錄酶”或“酪氨酸酶”）。分泌蛋白從合成至分泌到細胞外需要經(jīng)過高爾基體，此過程中高爾基體的功能是________________。（2）通常，細胞內(nèi)具有正常生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)需要有正確的氨基酸序列和______結(jié)構(gòu)，某些物理或化學(xué)因素可以導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，通常，變性的蛋白質(zhì)易被蛋白酶水解，原因是____________。（3）如果DNA分子發(fā)生突變，導(dǎo)致編碼正常血紅蛋白多肽鏈的mRNA序列中一個堿基被另一個堿基替換，但未引起血紅蛋白中氨基酸序列的改變，其原因可能_____________。9．（10分）仔細觀察如圖所示各種結(jié)構(gòu)模式圖，據(jù)圖回答問題:（1）上述各結(jié)構(gòu)中共有的物質(zhì)是___________。甲、乙、丙共有的細胞器是________。（2）圖甲是剛剛發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞，據(jù)圖判斷能進行的生命活動有______。①光合作用②細胞呼吸③細胞增殖④信息交流⑤細胞分化（3）若用纖維素酶處理甲、乙、丙三種細胞，則圖中________細胞外層會發(fā)生明顯變化。（4）圖甲所示的細胞質(zhì)壁分離復(fù)原后，若在離體條件下脫分化后，增殖過程中會周期性消失的結(jié)構(gòu)有___________(寫結(jié)構(gòu)名稱)。（5）上述4個結(jié)構(gòu)所代表的生物體中，________肯定不遵守孟德爾的遺傳規(guī)律。10．（10分）許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ′基因（內(nèi)含EcoRⅠ的酶切位點），其編碼的產(chǎn)物β—半乳糖苷酶在X—gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色?；蚬こ讨谐＠迷撛韽膶?dǎo)入質(zhì)粒的受體細胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細胞，過程如下圖所示。請據(jù)圖回答：（1）獲取目的基因時，可以從____________中直接提取。（2）限制酶EcoRⅠ的識別序列和酶切位點是-G↓AATTC-，SmaⅠ的識別序列和酶切位點是-CCC↓GGG-。圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相成的末端，連接的末端序列是______。（3）在構(gòu)建基因表達載體的過程中，除了目的基因外，還必須有_________和_________、復(fù)制原點和標記基因等。（4）轉(zhuǎn)化過程中，大腸桿菌應(yīng)先用____________處理，使其成為____________細胞。（5）菌落①②③中顏色為白色的是____________（填序號），原因是_______________。（6）菌落③中的目的基因是否表達，可采用的分子檢測辦法是____________。11．（15分）以現(xiàn)有大豆品種作為受體材料，利用基因工程技術(shù)，獲得轉(zhuǎn)基因植株，分析其對疫霉根腐病的抗病性，篩選出抗病大豆新株（品）系。請據(jù)此回答問題：（1）基因工程的核心技術(shù)是_________，該過程用到的酶有________。（2）在用土壤農(nóng)桿菌介導(dǎo)時往往要用_________處理土壤農(nóng)桿菌，使之成為_________細胞，然后將它們在緩沖液中混合培養(yǎng)以完成轉(zhuǎn)化過程。（3）抗性植株的分子生物學(xué)檢測是基因工程成功與否的重要一環(huán)，其中檢測目的基因是否表達的方法是__________，其個體生物學(xué)水平的檢測方法為_______________。（4）轉(zhuǎn)基因大豆細胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因大豆植株，需要通過的過程是____________，依據(jù)的原理是________。

參考答案（含答案詳細解析）一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【答案解析】

動物細胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）溫度和PH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（CO2的作用是維持培養(yǎng)液的PH）。【題目詳解】在利用肝組織塊制備細胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以消化組織細胞間的蛋白質(zhì)，得到單個細胞，A正確；合成培養(yǎng)基的成分包括糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，通常需加入血清、血漿等天然成分，B正確；為了保證細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，應(yīng)對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染，C正確；細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，D錯誤。【答案點睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握動物細胞培養(yǎng)的過程，識記動物細胞培養(yǎng)需要滿足的幾個條件，進而根據(jù)選項內(nèi)容分析答題。2、B【答案解析】

一般地說，生態(tài)系統(tǒng)的成分越單純，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)越簡單，自動調(diào)節(jié)能力就越小，抵抗力穩(wěn)定性就越低。相反，生態(tài)系統(tǒng)中各個營養(yǎng)級的生物種類越多，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，自動調(diào)節(jié)能力就越大，抵抗力穩(wěn)定性就越高。抵抗力穩(wěn)定性和恢復(fù)力穩(wěn)定性一般呈相反的關(guān)系。牧草地上通過管理提高某種牧草的產(chǎn)量，可能會使雜草等其他植物的種類和數(shù)量減少，導(dǎo)致抵抗力穩(wěn)定性降低。故選B。3、B【答案解析】

內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指內(nèi)環(huán)境的各種化學(xué)成分和理化性質(zhì)保持相對穩(wěn)定的狀態(tài)；血漿的pH之所以能保持相對穩(wěn)定是因為血液中存在對酸堿度起緩沖的物質(zhì)，如：H2CO3/NaHCO3，NaH2PO4/Na2HPO4等；大量出汗后，細胞外液滲透壓升高，刺激下丘腦滲透壓感受器興奮，下丘腦合成的抗利尿激素增多，并由垂體釋放；胰島素和胰高血糖素的分泌直接受血糖濃度調(diào)節(jié)，也受神經(jīng)調(diào)節(jié)?！绢}目詳解】A.穩(wěn)態(tài)是指內(nèi)環(huán)境的各種化學(xué)成分和理化性質(zhì)保持相對穩(wěn)定的狀態(tài)，A錯誤；B.血漿中的HCO3-進行酸堿中和，參與維持血漿pH的穩(wěn)定，B正確；C.大量出汗后，下丘腦合成的抗利尿激素增多，經(jīng)垂體后葉分泌，C錯誤；D.血糖直接作用于胰島B細胞和胰島A細胞調(diào)節(jié)胰島素和胰高血糖素的分泌，胰島素和胰高血糖素的分泌也受神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，D錯誤。【答案點睛】本題考查人體生命活動調(diào)節(jié)的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力，解答本題需要學(xué)生正確理解穩(wěn)態(tài)的概念，水鹽平衡調(diào)節(jié)和血糖調(diào)節(jié)的過程。4、B【答案解析】

體液是指體內(nèi)的大量以水為基礎(chǔ)的液體；體液包括細胞內(nèi)液和細胞外液，細胞內(nèi)液存在于細胞內(nèi)，約占體液的2/3，細胞外液約占體液的1/3；細胞外液又叫內(nèi)環(huán)境，主要包括血漿、組織液和淋巴?！绢}目詳解】細胞外液包括血漿、組織液和淋巴，A正確；消化道與外界相通，其內(nèi)的消化液不屬于體液，B錯誤；體液包括細胞內(nèi)液和細胞外液，C正確；細胞內(nèi)液占2/3，細胞外液占1/3，即細胞內(nèi)液的含量多于細胞外液，D正確。5、B【答案解析】二氧化碳進入細胞與五碳化合物形成三碳化合物，三碳化合物在ATP和[H]的條件下進行還原。如果突然停止二氧化碳供應(yīng)，三碳化合物降低，利用的ATP和[H]減少，那么在細胞中[H]的含量應(yīng)是上升的，A、C錯誤。但上升后不會一直上升而會維持在相對穩(wěn)定范圍內(nèi)，B正確，D錯誤。點睛：光合作用中改變某種條件物質(zhì)變化的規(guī)律如下：條件光照由強到弱，CO2供應(yīng)不變光照由弱到強，CO2供應(yīng)不變CO2供應(yīng)由充足到不足，光照不變CO2供應(yīng)由不足到充足，光照不變C3含量增加減少減少增加C5含量減少增加增加減少[H]和ATP的含量減少或沒有增加增加減少(CH2O)的合成量減少增加減少增加6、D【答案解析】HIV感染人群的免疫能力降低，因此他們比健康人群更易患腫瘤，A正確；HIV的高度變異性，致使研制具有持久效果的疫苗很難成功，B正確；被HIV潛伏感染的細胞表面沒有HIV蛋白，利于病毒逃避免疫系統(tǒng)識別和攻擊，C正確；HIV主要攻擊T細胞，導(dǎo)致體液免疫能力降低，因此機體仍存在部分體液免疫應(yīng)答，能通過檢測抗體來診斷HIV感染，D錯誤?！敬鸢更c睛】關(guān)于“艾滋病”，可從以下幾方面把握：(1)艾滋病的中文名稱是獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS），其病原體是人類免疫缺陷病毒（HIV）。(2)艾滋病的致病原理：HIV病毒進入人體后，與人體的T淋巴細胞結(jié)合，破壞T淋巴細胞，使免疫調(diào)節(jié)受到抑制，使人的免疫系統(tǒng)癱瘓，最后使人無法抵抗其他細菌、病毒的入侵，讓人死亡。(3)艾滋病的傳播途徑包括：血液傳播、性傳播、母嬰傳播。二、綜合題：本大題共4小題7、2質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化遺傳物質(zhì)相對較少Ca2+農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法T-DNA細胞質(zhì)（線粒體、葉綠體）【答案解析】

基因工程是指按照人們的愿望，進行嚴格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進行設(shè)計和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。(1)限制酶是一類酶，而不是一種酶。(2)限制酶的成分為蛋白質(zhì)，其作用的發(fā)揮需要適宜的理化條件，高溫、強酸或強堿均易使之變性失活。(3)在切割目的基因和載體時要求用同一種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端。(4)獲取一個目的基因需限制酶剪切兩次，共產(chǎn)生4個黏性末端或平末端。(5)不同DNA分子用同一種限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端都相同，同一個DNA分子用不同的限制酶切割，產(chǎn)生的黏性末端一般不相同。(6)限制酶切割位點應(yīng)位于標記基因之外，不能破壞標記基因，以便于進行檢測。(7)基因工程中的載體與細胞膜上物質(zhì)運輸?shù)妮d體不同?；蚬こ讨械妮d體是DNA分子，能將目的基因?qū)胧荏w細胞內(nèi)；膜載體是蛋白質(zhì)，與細胞膜的通透性有關(guān)。(8)基因工程中有3種工具，但工具酶只有2種?！绢}目詳解】I（1）圖中質(zhì)粒有一個SmaⅠ切割位點，切割前因為是環(huán)狀沒有游離的磷酸基團，切割后成為鏈狀DNA，有2個游離的磷酸基團。（2）兩種限制酶切，因為堿基互補配對原則可以防止單酶切后的質(zhì)粒和目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化現(xiàn)象。II原核生物遺傳物質(zhì)相對較少，大腸桿菌首先要用鈣離子處理使其成為感受態(tài)細胞。III植物導(dǎo)入方法最常用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，主要是Ti質(zhì)粒中的T-DNA中形成重組質(zhì)?？梢哉系街参锸荏w細胞的染色體上，如果要避免基因污染應(yīng)將其導(dǎo)入到細胞質(zhì)基因中，可將基因?qū)氲郊毎|(zhì)DNA中，因為細胞質(zhì)基因不會隨花粉進行傳播?！敬鸢更c睛】注意：獲取一個目的基因需限制酶剪切兩次，共產(chǎn)生4個黏性末端或平末端。8、核糖體胃蛋白酶對蛋白質(zhì)進行加工、分類和包裝空間蛋白質(zhì)變性使肽鍵暴露，暴露的肽鍵易與蛋白酶接觸，使蛋白質(zhì)降解遺傳密碼具有簡并性【答案解析】

1、構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，每種氨基酸分子至少都含有一個氨基和一個羧基連接在同一個碳原子上，這個碳原子還連接一個氫和一個R基，氨基酸的不同在于R基的不同。2、氨基酸在核糖體中通過脫水縮合形成多肽鏈，而脫水縮合是指一個氨基酸分子的羧基（-COOH）和另一個氨基酸分子的氨基（-NH2）相連接，同時脫出一分子水的過程。3、分泌蛋白的合成、加工和運輸過程：最初是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體中由氨基酸形成肽鏈，肽鏈進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行加工，形成有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，在到高爾基體，高爾基體對其進行進一步加工，然后形成囊泡分泌到細胞外。該過程消耗的能量由線粒體提供?！绢}目詳解】（1）生物體中組成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，在細胞中合成蛋白質(zhì)時，肽鍵是在核糖體上通過脫水縮合方式形成的。合成的蛋白質(zhì)中有些是分泌蛋白，如胃蛋白酶；有的是胞內(nèi)蛋白，如逆轉(zhuǎn)錄酶、酪氨酸酶等。分泌蛋白從合成至分泌到細胞外需要經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，此過程中高爾基體的功能是對有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)進行再加工、分類和包裝，然后形成囊泡分泌到細胞外。（2）通常，細胞內(nèi)具有正常生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)需要有正確的氨基酸序列和空間結(jié)構(gòu)。某些物理或化學(xué)因素可以破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，使肽鍵暴露，暴露的肽鍵易與蛋白酶接觸，從而使蛋白質(zhì)易被蛋白酶水解。（3）由于遺傳密碼具有簡并性，不同的密碼子有可能翻譯出相同的氨基酸，所以DNA分子發(fā)生突變，導(dǎo)致編碼正常血紅蛋白多肽鏈的mRNA序列中一個堿基被另一個堿基替換，但未引起血紅蛋白中氨基酸序列的改變?！敬鸢更c睛】本題主要考查了蛋白質(zhì)變性的主要因素，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的綜合，細胞器之間的協(xié)調(diào)配合，基因突變的特征，熟記知識點結(jié)合題意回答問題。9、蛋白質(zhì)和核酸核糖體②④甲核膜、核仁甲、乙生物體中的細胞質(zhì)基因（或甲生物體中線粒體與葉綠體中基因、乙中線粒體中基因）、丙和丁生物體中的所有基因【答案解析】

甲具有細胞壁和大液泡，為處于質(zhì)壁分離狀態(tài)的成熟植物細胞；乙中同源染色體分離，且細胞質(zhì)均等分裂，應(yīng)為初級精母細胞；丙沒有核膜包圍得細胞核，為原核細胞，丁沒有細胞結(jié)構(gòu)，為病毒?！绢}目詳解】（1）病毒結(jié)構(gòu)最為簡單，含有蛋白質(zhì)和核酸兩種成分，圖示各結(jié)構(gòu)中共有的物質(zhì)是蛋白質(zhì)和核酸。原核細胞唯一的細胞器是核糖體，甲、乙、丙共有的細胞器是核糖體。（2）甲為成熟的植物細胞，但不一定含有葉綠體，不一定能進行光合作用；成熟細胞不再分裂和分化，但一定可以進行②細胞呼吸和④信息交流，從而使細胞生命活動正常進行。（3）植物細胞壁的成分為纖維素和果膠，若用纖維素酶處理甲、乙、丙三種細胞，則圖中甲細胞外層會發(fā)生明顯變化。（4）植物有絲分裂過程中，核膜、核仁在前期消失，在末期重新出現(xiàn)，在細胞周期中表現(xiàn)為周期性的消失和出現(xiàn)。（5）孟德爾遺傳定律適用于真核生物的核基因遺傳，圖示4個結(jié)構(gòu)所代表的生物體中，甲、乙生物體中的細胞質(zhì)基因（或甲生物體中線粒體與葉綠體中基因、乙中線粒體中基因）、丙和丁生物體中的所有基因不遵守孟德爾的遺傳規(guī)律?！敬鸢更c睛】原核細胞與真核細胞的比較比較項目原核細胞真核細胞本質(zhì)區(qū)別無以核膜為界限的細胞核有以核膜為界限的細胞核細胞壁主要成分為肽聚糖植物細胞細胞壁的主要成分是纖維素和果膠細胞質(zhì)有核糖體，無其他細胞器有核糖體和其他細胞器細胞核擬核，無核膜和核仁有核膜和核仁10、基因文庫-TTAA啟動子終止子Ca2+感受態(tài)③lacZ′標記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達出β-半乳糖苷酶，故菌落為白色抗原-抗體雜交【答案解析】

分析題圖，目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識別序列，右側(cè)是限制酶SmaI的識別序列，而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識別序列，則需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒，用限制酶EcoRI和SmaI來切割含有目的基因的外源DNA分子，而這樣會使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接，所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端，即-TTAA；用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時，會破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因，但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后，lacZ'基因又被修復(fù)，能表達產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，所以菌落①②呈現(xiàn)藍色；菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒，其lacZ'基因被破壞，不能表達產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，菌落顏色為白色?！绢}目詳