第七章微生物的遺傳變異和育種-課件

長(zhǎng)春師范學(xué)院生物系第七章

微生物的遺傳變

異

和

育

種長(zhǎng)春師范學(xué)院生物系第七章1微生物是遺傳學(xué)研究的最好材料和對(duì)象微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)體一般都是單倍體微生物繁殖速度快存在多種方式的繁殖類(lèi)型環(huán)境條件對(duì)微生物作用直接均勻易積累不同的中間及最終代謝產(chǎn)物微生物的變異易被識(shí)別參與基因工程的載體供體受體三角色微生物是遺傳學(xué)研究的最好材料和對(duì)象微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)體一般都2

遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)基因突變和誘變育種基因重組和雜交育種基因工程菌種的衰退復(fù)壯和保藏內(nèi)容提要

遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)容提要3遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)證明核酸是微生物遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)噬菌體感染實(shí)驗(yàn)植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)遺傳物質(zhì)在微生物細(xì)胞內(nèi)的存在部位和方式遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)證明核轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)噬菌體感染實(shí)驗(yàn)植4轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)Cncnc-micro材料方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)S型菌無(wú)細(xì)胞抽提液試驗(yàn)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)Cncnc-micro材料方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)S5光滑型（S）粗糙型（R）有莢膜菌落光滑分泌毒素致病無(wú)莢膜菌落粗糙無(wú)毒不致病SⅠSⅡSⅢ三個(gè)血清型RⅠRⅡRⅢ三個(gè)血清型實(shí)驗(yàn)材料：肺炎雙球菌光滑型（S）粗糙型（R）有莢膜無(wú)莢膜SⅠSⅡ6活的S菌加活R菌和熱死S菌抽血分離死加活S菌死加活R菌或死S菌活轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（1）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)活的S菌加活R菌和熱死S菌抽血分離死加活S菌死加活R菌或死S7ＳⅢ〖?xì)⑺馈?/p>

無(wú)菌落生長(zhǎng)體外培養(yǎng)

ＲⅡ〖活菌〗體外培養(yǎng)

ＲⅡ菌落

ＲⅡ菌落多ＳⅢ菌落少

體外混合培養(yǎng)ＳⅢ〖?xì)⑺馈?/p>

ＲⅡ〖活菌〗轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（2）細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)ＳⅢ〖?xì)⑺馈綗o(wú)菌落生長(zhǎng)體外培養(yǎng)ＲⅡ〖活菌〗體外培養(yǎng)8大量R菌落活R菌S菌無(wú)細(xì)胞抽提液+活R菌+S菌DNAS菌落轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（3）S型菌無(wú)細(xì)胞抽提液試驗(yàn)S菌PrS菌多糖R菌落活R菌+Cncnc-micro大量R菌落活R菌S菌無(wú)細(xì)胞抽提液+活R菌+S菌DNAS菌落轉(zhuǎn)9噬菌體感染實(shí)驗(yàn)Pr只含S不含PDNA只含P不含S原理步驟1：用含同位素Ｓ35,

P32的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌吸附10分鐘后攪動(dòng)離心上清液沉淀結(jié)果：上清液中含15%放射擊性；沉淀中含85%放射性2：讓T2感染上述大腸桿菌使其打是S35P32標(biāo)記3：噬菌體感染實(shí)驗(yàn)Pr只含S不含PDNA只含P不含S原10

植物病毒蛋白質(zhì)和RNA可以人為地分開(kāi),同時(shí)又可把它們重新組合成具感染性的病毒.植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)甲ＲＮＡ＋乙Ｐr→感染癥狀同甲病毒；分離得到甲病毒乙ＲＮＡ＋甲Ｐr→感染癥狀同乙病毒；分離得到乙病毒

Cncnc-micro植物病毒蛋白質(zhì)和RNA可以人為地分開(kāi),植物病毒的11TMVHRVHRVTMV原始株拆開(kāi)重建感染分離純化植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)TMVHRVHRVTMV原始株拆開(kāi)12遺傳物質(zhì)類(lèi)型核染色體核外染色體真核生物細(xì)胞器原核生物質(zhì)粒遺傳物質(zhì)在微生物細(xì)胞內(nèi)的存在部位和方式遺傳物核染色體核外染色體真核生物細(xì)胞器原核生物質(zhì)粒遺傳物質(zhì)在13染色體基因Ⅱ基因ⅠDNA基因是一段DNA染色體基因Ⅱ基因ⅠDNA基因是一段DNA14DNA就是脫氧核糖核酸（長(zhǎng)鏈）腺嘌呤（A）鳥(niǎo)嘌呤（G）胸腺嘧啶（T）胞嘧啶（C）ATCGAAATTTTTTAAAGGGGGCCCCCGC基因測(cè)序就是讀出A-C-G-T-G-G-A-C-G…...DNA就是脫氧核糖核酸（長(zhǎng)鏈）腺嘌呤（A）鳥(niǎo)嘌呤（G）胸腺嘧15基因控制Pr因而控制性狀GATCTAGAUDNAmRNA天冬氨酸

基因控制Pr因而控制性狀GATCT16基因是什么？基因決定生物體的生、長(zhǎng)、病、老死等一切生命現(xiàn)象基因是生命的密碼。?；蛴涗浐蛡鬟f遺傳信息。Cncnc-micro基因是什么？基因決定生物體的生、長(zhǎng)、病、老死等基因是生命的密17大腸桿菌基因組4100個(gè)基因，4.7×106bp遺傳信息的連續(xù)性功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)基因單拷貝及rRNA多拷貝基因的重復(fù)序列少而短Cncnc-micro大腸桿菌基因組4100個(gè)基因，4.7×106bp遺傳信息的連18酵母菌基因組Cncnc-micro染色體長(zhǎng)度Kb基因數(shù)12345678染色體長(zhǎng)度Kb基因數(shù)439745666107892478410929482304231738142921365732912313873345504874215714991310271310331110241622211520174酵母菌基因組Cncnc-micro染色體長(zhǎng)度Kb基因數(shù)12319原核生物基因調(diào)控系統(tǒng)操縱子RPO結(jié)構(gòu)基因啟動(dòng)基因操縱基因調(diào)節(jié)基因原核生物基因調(diào)控系統(tǒng)操縱子RPO結(jié)構(gòu)基因啟動(dòng)基因20質(zhì)粒核外環(huán)狀小型DNA獨(dú)立復(fù)制穩(wěn)定遺傳F因子與有性接合有關(guān)種類(lèi)R因子與抗藥性有關(guān)COL編碼免疫蛋白Ti質(zhì)粒誘癌質(zhì)粒降解散質(zhì)粒：編碼降解有害物質(zhì)的酶用途基因工程中作為目的基因載體質(zhì)粒原核生物遺傳物質(zhì)存在的另一種方式質(zhì)粒核外環(huán)狀小型DNA獨(dú)立復(fù)制穩(wěn)定遺傳F因子21基因突變突變與育種基因突變和誘變育種Cncnc-micro基因突變突變與育種基因突變和誘變育種Cncnc-mic22突變的特點(diǎn)

Cncnc-micro基因突變誘變機(jī)制突變率突變類(lèi)型突變的特點(diǎn)Cncnc-micro基因突變誘變機(jī)制突變率突23條件致死突變型（株）突變類(lèi)型突變株的表型選擇性突變株非選擇性突變株?duì)I養(yǎng)缺陷型（株）抗性缺陷型（株）形態(tài)突變型（株）抗原突變型（株）產(chǎn)量突變型（株）按方法分：按突變株的表型是否能在選擇性培養(yǎng)基上加以鑒別來(lái)區(qū)分。Cncnc-micro條件致死突變型（株）突變類(lèi)型突變株選擇性非24微生物突變體的主要類(lèi)型形態(tài)突變型菌落形態(tài)突變型菌體形態(tài)突變型生化突變型營(yíng)養(yǎng)突變體(營(yíng)養(yǎng)缺陷型)發(fā)酵突變體抗性突變體條件致死突變體抗原突變型產(chǎn)量突變型按突變實(shí)質(zhì)分Cncnc-micro微生物突變體的主要類(lèi)型形態(tài)突變型菌落形態(tài)突變型菌體形態(tài)突變25突變率出發(fā)菌株長(zhǎng)出突變株含誘變劑的培養(yǎng)基突變率出發(fā)菌株長(zhǎng)出突變株含誘變劑的培養(yǎng)基26突變的特點(diǎn)（證明）不對(duì)應(yīng)性自發(fā)性稀有性獨(dú)立性誘變性穩(wěn)定性可逆性Cncnc-micro突變的特點(diǎn)（證明）不對(duì)應(yīng)性自發(fā)性稀有性獨(dú)立性誘變27基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的證明變量試驗(yàn)涂布試驗(yàn)影印培養(yǎng)試驗(yàn)基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的證明變量試驗(yàn)涂布28大腸桿菌稀釋培養(yǎng)物10ml10ml(培養(yǎng)前先分成50小管)(在同一個(gè)大管中作整體培養(yǎng))3714435抗噬菌體菌落數(shù)抗噬菌體菌落數(shù)變量試驗(yàn)大腸桿菌稀釋培養(yǎng)物1010(培養(yǎng)前先分成50小管)(在同一個(gè)29涂布試驗(yàn)涂布敏感菌5×104個(gè)共12個(gè)平板5×104個(gè)菌落5000個(gè)細(xì)菌/菌落噴入T1保溫重新涂布后噴入T1保溫6個(gè)平板共353個(gè)菌落6個(gè)平板共28個(gè)菌落涂布試驗(yàn)涂布敏感菌5×104個(gè)5×104個(gè)菌落噴入T1保溫30影印培養(yǎng)無(wú)藥培養(yǎng)基含藥培養(yǎng)基影印培養(yǎng)試驗(yàn)原始敏感菌種影印培養(yǎng)無(wú)藥含藥影印培養(yǎng)試驗(yàn)原始敏31誘變機(jī)制移碼突變?nèi)旧w畸變堿基的置換Cncnc-micro誘變機(jī)制移碼突變?nèi)旧w畸變堿基的置換Cncnc-mi32堿基的置換直接引起置換的誘變劑HNO2CNH2腺嘌呤CO次黃嘌呤(Hk)A..THe..THk..

THk..

CA..THk..

CG..

CCOH次黃嘌呤(He)堿基的置換直接引起置換的誘變劑HNO2CNH2腺嘌呤CO次33間接引起置換的誘變劑堿基的置換COHT：烯醇式CT：酮式OA..TT..

AG..

CA..T酮式T..

G烯醇式間接引起置換的誘變劑堿基的置換COHT：烯醇式CT：酮34COBr5-BU:酮式COHBr5-BU:烯醇式堿基的置換間接引起置換的誘變劑COBr5-BU:酮式COHBr5-BU:烯醇式堿基的置換35堿基的置換G..

CA..BUG..

BUA..BUG..

CA..TA..TA..TA..TG..

CA..BU酮式G..BU烯醇式烯醇式酮式堿基的置換G..CA..BUG..BUA..BUG..36移碼突變ＤＮＡ分子中缺失或增加少數(shù)幾個(gè)堿基對(duì)而引起造成突變點(diǎn)以后全部遺傳密碼轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)釋發(fā)生錯(cuò)誤ABCABCABCABCABCABCABCABCAB+ABCABCCBACBACBACBACBAABCBCABCABCABCABCABCABCA增添一個(gè)堿基缺少一個(gè)堿基移碼突變ＤＮＡ分子中缺失或增加少數(shù)幾個(gè)堿基對(duì)而引起造成突變37染色體畸變

某些理化因子，如Ｘ射線，紫外線，亞硝酸等，除能引起點(diǎn)突變外，還會(huì)引起DNA分F子大損傷，包括染色體易位，倒位，缺失，重復(fù)等，即為染色體畸變。Cncnc-micro染色體畸變某些理化因子，如Ｘ射線，紫外線，亞硝Cnc38染色體畸變

紫外線誘變作用機(jī)理可使ＤＮＡ鏈裂斷，破壞核糖和磷酸間的鍵聯(lián)引起胞嘧啶和尿嘧啶產(chǎn)生水合作用造成氫鍵斷裂能使胸腺嘧啶成二聚體，使ＤＮＡ結(jié)構(gòu)發(fā)生改變Cncnc-micro染色體畸變紫外線誘變作用機(jī)理可使ＤＮＡ鏈裂斷，破壞核糖和39突變與育種Cncnc-micro自發(fā)突變與育種從生產(chǎn)中選育定向培育優(yōu)良品種誘變育種

從青霉素產(chǎn)量看誘變育種誘變育種的基本環(huán)節(jié)誘變育種的原則突變與育種Cncnc-micro自發(fā)突變與育種從生產(chǎn)中選育定40效價(jià)：指有效成分的濃度。1ug/ul稱(chēng)為1單位1945時(shí)間1943194319431947195519711977目前發(fā)酵單位(u/ml)100250500～850～850～8000～2萬(wàn)～5萬(wàn)5～10萬(wàn)

從青霉素產(chǎn)量看誘變育種效價(jià)：指有效成分的濃度。1ug/ul稱(chēng)為1單位194541誘變育種的基本環(huán)節(jié)大多死亡少數(shù)存活存活率多數(shù)未變少數(shù)突變突變率多數(shù)負(fù)變少數(shù)正變正變率多數(shù)幅度小少數(shù)幅度大高產(chǎn)率投產(chǎn)率多數(shù)不宜投產(chǎn)少數(shù)適宜投產(chǎn)出發(fā)菌株計(jì)算出誘變Cncnc-micro誘變育種的基本環(huán)節(jié)大多死亡少數(shù)存活存活率多數(shù)未變少數(shù)突變突變42誘變育種工作中應(yīng)考慮的幾個(gè)原則選優(yōu)良的出發(fā)菌株選擇簡(jiǎn)便有效的誘變劑處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液選用最適劑量設(shè)計(jì)或采用高效篩選方案或方法Cncnc-micro利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)誘變育種工作中應(yīng)考慮的幾個(gè)原則選優(yōu)良的出發(fā)菌株選擇簡(jiǎn)便有效的43選擇簡(jiǎn)便有效的誘變劑出發(fā)菌株含誘變劑的液體培養(yǎng)基接種培養(yǎng)培養(yǎng)接種分離紫外線選擇優(yōu)良突變株選擇簡(jiǎn)便有效的誘變劑出發(fā)菌株含誘變劑的液體培養(yǎng)基接種培養(yǎng)培養(yǎng)44S.t.his回變S.t.his吸入濾紙片保溫可疑“三致”試樣鼠肝勻漿（含羥化酶）陽(yáng)性陰性利用回變檢測(cè)致癌劑——艾姆斯試驗(yàn)法S.t.his回變S.t.his吸入保溫可疑“三致”試樣45挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株生產(chǎn)中用過(guò)的自發(fā)變異菌株采用具有有力性狀的菌株采用已發(fā)生其他變異的菌株采用前體或最終產(chǎn)物代謝高的菌株采用增變菌株Cncnc-micro挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株生產(chǎn)中用過(guò)的自發(fā)變異菌株采用具有有力性狀的46處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液芽孢桿菌應(yīng)處理芽孢放線菌，霉菌應(yīng)處理孢子細(xì)菌指數(shù)期，放線菌霉菌要稍加萌發(fā)后使用出發(fā)菌株應(yīng)制成均勻懸夜Cncnc-micro處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液芽孢桿菌應(yīng)處理芽孢放線菌，霉菌應(yīng)處47選用最適劑量劑量以誘變劑濃度和處理時(shí)間來(lái)表示合適劑量：能擴(kuò)大變異幅度又能促使變異移向正變范圍的劑量Cncnc-micro選用最適劑量劑量以誘變劑濃度和處理時(shí)間來(lái)表示合適劑量：能擴(kuò)大48充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)兩種或多種誘變劑先后使用同種誘變劑重復(fù)使用兩種或多種誘變劑同時(shí)使用Cncnc-micro充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)兩種或多種誘變劑先后使用同種誘變劑49利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)淀粉酶變色圈試驗(yàn)變色圈大的為淀粉酶高產(chǎn)菌落利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)淀粉酶變色圈試驗(yàn)變色圈50設(shè)計(jì)或采用高效篩選方案或方法一個(gè)出發(fā)菌株誘變劑處理選出200個(gè)單孢子菌菌株初篩（每株1瓶）選出50株復(fù)篩（每株4瓶）選出5株第一輪第二輪五個(gè)出發(fā)菌株初篩（每株1瓶）選出50株復(fù)篩（每株4瓶）選出5株40株40株40株40株40株誘變劑處理設(shè)計(jì)或采用高效篩選方案或方法一個(gè)出誘變劑處理選出200個(gè)單初51突變株的篩選方法高產(chǎn)突變菌株的篩選方法抗性突變體的篩選方法營(yíng)養(yǎng)缺陷型的的篩選方法Cncnc-micro與突變株的篩選相關(guān)的幾個(gè)概念突變株的篩選方法高產(chǎn)突變菌株的篩選方法抗性突變體的篩選方52與突變株的篩選相關(guān)的幾個(gè)概念相關(guān)培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基[-]完全培養(yǎng)基補(bǔ)充培養(yǎng)基三類(lèi)遺傳型野生型[A+B+]營(yíng)養(yǎng)缺陷型型[A+B-]原養(yǎng)型[A+B+]Cncnc-micro與突變株的篩選相關(guān)的幾個(gè)概念相關(guān)培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基[-53突變春日霉素產(chǎn)生菌的孢子懸液·高產(chǎn)突變株的篩選瓊脂塊培養(yǎng)法篩選春日霉素高產(chǎn)菌種含供試菌種（拮抗對(duì)象）的瓊脂平板突變春日霉素產(chǎn)生·高產(chǎn)突變株的篩選54抗性突變體的篩選方法青霉素濃縮法梯度培養(yǎng)皿法Cncnc-micro抗性突變體的篩選方法青霉素濃縮法梯度培養(yǎng)皿法Cncnc-mi55青霉素濃縮法培養(yǎng)基(含青霉素)

接入敏感菌液（含抗性突變株）涂布抗青霉素菌落培養(yǎng)青霉素濃縮法培養(yǎng)基(含青霉素)接入敏感菌液涂布抗青霉56梯度培養(yǎng)皿法強(qiáng)抗性中抗性弱抗性含異煙肼接敏感菌含突變株梯度培養(yǎng)皿法強(qiáng)抗性中抗性弱抗性含異煙肼接敏感菌57營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選辦法誘變劑處理淘汰野生型檢出缺陷型夾層培養(yǎng)法限量補(bǔ)充培養(yǎng)法逐漸檢出法影印接種法鑒定缺陷型Cncnc-micro菌絲過(guò)濾法營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選辦法誘變劑處理淘汰野生型檢出缺陷型夾層培養(yǎng)法58夾層培養(yǎng)法及結(jié)果小菌落是第二次長(zhǎng)起來(lái)的（營(yíng)養(yǎng)缺陷型）夾層培養(yǎng)法及結(jié)果小菌落是第二次長(zhǎng)起來(lái)的（營(yíng)養(yǎng)缺陷型）59

逐個(gè)檢出法涂布培養(yǎng)基本培養(yǎng)基上不長(zhǎng)菌落完全培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌落含誘變劑的液體培養(yǎng)基菌種營(yíng)養(yǎng)缺陷型逐個(gè)檢出法涂布培養(yǎng)基本培養(yǎng)基上不長(zhǎng)菌落完全培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌落60影印接種法完全培養(yǎng)基影印接種基本培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)缺陷型影印接種法完全培養(yǎng)基影印接種基本培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)缺陷型61限量補(bǔ)充培養(yǎng)法微量蛋白質(zhì)的完全培養(yǎng)基上小菌落是營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株限量補(bǔ)充培養(yǎng)法微量蛋白質(zhì)的完全培養(yǎng)基上62菌絲過(guò)濾法篩選營(yíng)養(yǎng)突變株基本培養(yǎng)基

接入微生物孢子（含營(yíng)養(yǎng)突變株）涂布均勻后培養(yǎng)長(zhǎng)出菌絲體（野生型）菌絲過(guò)濾得營(yíng)養(yǎng)突變株菌絲過(guò)濾法基本培養(yǎng)基接入微生物孢子涂布均勻后培養(yǎng)長(zhǎng)63細(xì)菌的基因重組真核微生物基因重組在有性繁殖過(guò)程中發(fā)生，當(dāng)合子減數(shù)分裂時(shí)，兩染色體發(fā)生交換。原核微生物通過(guò)轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)等形式進(jìn)行一部分物質(zhì)轉(zhuǎn)移和基因重組。（小結(jié)）Cncnc-micro細(xì)菌的基因重組真核微生物基因重組在有性繁殖過(guò)程中發(fā)生，當(dāng)合64Cncnc-micro轉(zhuǎn)化(transformation)幾個(gè)概念：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化因子、感受態(tài)轉(zhuǎn)化過(guò)程轉(zhuǎn)化的特點(diǎn)Cncnc-micro轉(zhuǎn)化(transformation65

轉(zhuǎn)化(transformation)

受體細(xì)胞直接吸收了來(lái)自供體細(xì)胞的DNA片斷，并把它整合到自己的基因組中，細(xì)胞部分遺傳性狀發(fā)生變化的現(xiàn)象叫轉(zhuǎn)化。Cncnc-micro轉(zhuǎn)化(transformation)Cncnc-m66轉(zhuǎn)化因子轉(zhuǎn)化是游離的ＤＮＡ片斷的轉(zhuǎn)移和重組游離的ＤＡＮ片斷叫轉(zhuǎn)化因子轉(zhuǎn)化因子由供體提供自然情況下可由細(xì)菌細(xì)胞自行裂解產(chǎn)生，實(shí)驗(yàn)室里通過(guò)提取獲得雙鏈ＤＮＡ有轉(zhuǎn)化能力，單鏈沒(méi)有，Cncnc-micro轉(zhuǎn)化因子轉(zhuǎn)化是游離的ＤＮＡ片斷的轉(zhuǎn)移和重組游離的ＤＡＮ片斷叫67受體細(xì)胞能接受轉(zhuǎn)化的生理狀態(tài)稱(chēng)為感受態(tài)，只有處于感受態(tài)的細(xì)菌才能接受轉(zhuǎn)化因子，從出現(xiàn)到消失約為４０分鐘(對(duì)數(shù)期的中期)Cncnc-micro感受態(tài)感覺(jué)態(tài)出現(xiàn)原因細(xì)菌失去部分細(xì)胞壁的結(jié)果細(xì)菌在細(xì)胞表面產(chǎn)生某種Ｅ引起Cncnc-micro感受態(tài)感覺(jué)態(tài)出現(xiàn)原因細(xì)菌失去部分細(xì)胞壁68Cncnc-micro感受態(tài)的決定決定因素細(xì)胞遺傳性決定和菌齡有關(guān)環(huán)腺苷酸Camp可提高1000倍Ca2+能促使細(xì)胞進(jìn)入感受態(tài)感受態(tài)因子是受體細(xì)胞表面上的一種蛋白質(zhì)功能使轉(zhuǎn)化因子結(jié)合在受體細(xì)胞表面Cncnc-micro感受態(tài)的決定決定因素細(xì)胞遺傳性決定和菌69每個(gè)受體細(xì)胞表面約有30

-80個(gè)轉(zhuǎn)化因子結(jié)合點(diǎn)，當(dāng)轉(zhuǎn)化因子結(jié)合到受體表面結(jié)合點(diǎn)上時(shí)，DNA一條鏈被受體細(xì)胞膜上的核酸酶分解，另一條鏈進(jìn)入受體細(xì)胞，通過(guò)整合與受體細(xì)胞進(jìn)行基因重組，有人發(fā)現(xiàn)DNA也可通過(guò)雙鏈形式進(jìn)入受體細(xì)胞形成雙倍體的轉(zhuǎn)化子。Cncnc-micro轉(zhuǎn)化過(guò)程每個(gè)受體細(xì)胞表面約有30-80個(gè)轉(zhuǎn)化因子Cncnc-mic70轉(zhuǎn)化過(guò)程轉(zhuǎn)化71轉(zhuǎn)化中基因交換過(guò)程示意圖5∕3∕abc5∕3∕3∕5∕ABCDE5∕3∕3∕5∕abcABCDE5∕3∕3∕5∕ABCDEc5∕3∕3∕5∕cABCDE5∕3∕3∕5∕cABCDE轉(zhuǎn)5∕3∕abc5∕3∕3∕5∕ABCDE5∕3∕3∕5∕a72轉(zhuǎn)化的特點(diǎn)不需兩個(gè)細(xì)胞直接接觸，供體DNA提取出來(lái)，注入受體即可。Cncnc-micro轉(zhuǎn)化的特點(diǎn)Cncnc-micro73轉(zhuǎn)導(dǎo)的種類(lèi)完全普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)流產(chǎn)普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)局限轉(zhuǎn)導(dǎo)溶源轉(zhuǎn)變低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)遺傳物質(zhì)通過(guò)噬菌體的攜帶而轉(zhuǎn)移的基因重組轉(zhuǎn)導(dǎo)的發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)Cncnc-micro轉(zhuǎn)導(dǎo)的特點(diǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)的種類(lèi)完全普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)流產(chǎn)普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)局限轉(zhuǎn)74供體A-B+完全普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(compietetransduction)A-B+A+B-少數(shù)受體A+B+經(jīng)重組形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子鼠傷寒沙門(mén)氏菌A+B-多數(shù)受體形成溶源菌A-B+色氨酸缺陷型A+B-組氨酸缺陷型供體A-B+完全普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(compietetransduc75galbiogalbio宿主基因組整合不正常切離（10-4—10-6）正常切離λ正常λλdgalλdbio低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)（LFT）裂解物的形成低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)galbiogalbio宿主基因組整合不正常切離（10-4—76高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)Cncnc-micro高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)Cncnc-micro77轉(zhuǎn)導(dǎo)的特點(diǎn)需要噬菌體做媒介，不需要細(xì)胞間直接接觸噬菌體DNA不接合到寄主染色體噬菌體蛋白質(zhì)包裹寄主任何一部分DNA片段噬菌體DNA整合到寄主染色體上噬菌體DNA與寄主染色體特定基因發(fā)生交換普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)Cncnc-micro轉(zhuǎn)導(dǎo)的特點(diǎn)需要噬菌體做媒介，不需要細(xì)胞間直接接觸噬菌體D78溶源轉(zhuǎn)變溫和噬菌體的基因整合到宿主核基因組上的現(xiàn)象溫和噬菌體并不攜帶外源供體菌的基因這種溫和噬菌體是完整的，而不是缺陷的獲得新性狀的是溶源化的宿主細(xì)胞，而不是轉(zhuǎn)導(dǎo)子獲得的性狀可隨噬菌體的消失而同時(shí)消失Cncnc-micro溶源轉(zhuǎn)變溫和噬菌體的基因整合到宿主核基因組上的現(xiàn)象溫和噬菌體79Cncnc-micro接合及其發(fā)現(xiàn)Ｆ因子和接合接合(conjugation)(雄性菌株與雌性菌株接合結(jié)果Cncnc-micro接合及其發(fā)現(xiàn)Ｆ因子和接合接80+A+B+C-D-維甲缺陷型A-B-C+D+蘇缺賴(lài)陷型接合及其發(fā)現(xiàn)A+B+C+D+通過(guò)細(xì)胞間的直接接觸能進(jìn)行大段ＤＮＡ的轉(zhuǎn)移的過(guò)程，叫接合+A+B+C-D-A-B-C+D+接合及其發(fā)現(xiàn)A+81雄性菌株Hfr菌株F??菌株Ｆ－菌株（雌株）Ｆ因子和接合F+菌株雄性菌株Hfr菌株F??菌株Ｆ－菌株（雌82F×F+F+F++F×+FFF×+FHfrHfrF（多數(shù)情況下）F×+HfrHfrHfr（少數(shù)情況下）雄性菌株與雌性菌株接合結(jié)果F×F+F+F++F×+FFF×+FHfrHfrF（多數(shù)情況83三者根本區(qū)別在于DNA轉(zhuǎn)移的方式不同轉(zhuǎn)化：供體DNA片斷→注入受體細(xì)胞，通過(guò)細(xì)胞膜接合：供體進(jìn)入受體通過(guò)性纖毛轉(zhuǎn)導(dǎo)：供體DNA片斷通過(guò)媒介－噬菌體攜帶進(jìn)入受體Cncnc-micro三者根本區(qū)別在于DNA轉(zhuǎn)移的方式不同轉(zhuǎn)化：接合：轉(zhuǎn)導(dǎo)：Cn84第七章微生物的遺傳變異和育種-課件85長(zhǎng)春師范學(xué)院生物系第七章

微生物的遺傳變

異

和

育

種長(zhǎng)春師范學(xué)院生物系第七章86微生物是遺傳學(xué)研究的最好材料和對(duì)象微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)體一般都是單倍體微生物繁殖速度快存在多種方式的繁殖類(lèi)型環(huán)境條件對(duì)微生物作用直接均勻易積累不同的中間及最終代謝產(chǎn)物微生物的變異易被識(shí)別參與基因工程的載體供體受體三角色微生物是遺傳學(xué)研究的最好材料和對(duì)象微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)體一般都87

遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)基因突變和誘變育種基因重組和雜交育種基因工程菌種的衰退復(fù)壯和保藏內(nèi)容提要

遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)容提要88遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)證明核酸是微生物遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)噬菌體感染實(shí)驗(yàn)植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)遺傳物質(zhì)在微生物細(xì)胞內(nèi)的存在部位和方式遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)證明核轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)噬菌體感染實(shí)驗(yàn)植89轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)Cncnc-micro材料方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)S型菌無(wú)細(xì)胞抽提液試驗(yàn)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)Cncnc-micro材料方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)S90光滑型（S）粗糙型（R）有莢膜菌落光滑分泌毒素致病無(wú)莢膜菌落粗糙無(wú)毒不致病SⅠSⅡSⅢ三個(gè)血清型RⅠRⅡRⅢ三個(gè)血清型實(shí)驗(yàn)材料：肺炎雙球菌光滑型（S）粗糙型（R）有莢膜無(wú)莢膜SⅠSⅡ91活的S菌加活R菌和熱死S菌抽血分離死加活S菌死加活R菌或死S菌活轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（1）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)活的S菌加活R菌和熱死S菌抽血分離死加活S菌死加活R菌或死S92ＳⅢ〖?xì)⑺馈?/p>

無(wú)菌落生長(zhǎng)體外培養(yǎng)

ＲⅡ〖活菌〗體外培養(yǎng)

ＲⅡ菌落

ＲⅡ菌落多ＳⅢ菌落少

體外混合培養(yǎng)ＳⅢ〖?xì)⑺馈?/p>

ＲⅡ〖活菌〗轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（2）細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)ＳⅢ〖?xì)⑺馈綗o(wú)菌落生長(zhǎng)體外培養(yǎng)ＲⅡ〖活菌〗體外培養(yǎng)93大量R菌落活R菌S菌無(wú)細(xì)胞抽提液+活R菌+S菌DNAS菌落轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（3）S型菌無(wú)細(xì)胞抽提液試驗(yàn)S菌PrS菌多糖R菌落活R菌+Cncnc-micro大量R菌落活R菌S菌無(wú)細(xì)胞抽提液+活R菌+S菌DNAS菌落轉(zhuǎn)94噬菌體感染實(shí)驗(yàn)Pr只含S不含PDNA只含P不含S原理步驟1：用含同位素Ｓ35,

P32的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌吸附10分鐘后攪動(dòng)離心上清液沉淀結(jié)果：上清液中含15%放射擊性；沉淀中含85%放射性2：讓T2感染上述大腸桿菌使其打是S35P32標(biāo)記3：噬菌體感染實(shí)驗(yàn)Pr只含S不含PDNA只含P不含S原95

植物病毒蛋白質(zhì)和RNA可以人為地分開(kāi),同時(shí)又可把它們重新組合成具感染性的病毒.植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)甲ＲＮＡ＋乙Ｐr→感染癥狀同甲病毒；分離得到甲病毒乙ＲＮＡ＋甲Ｐr→感染癥狀同乙病毒；分離得到乙病毒

Cncnc-micro植物病毒蛋白質(zhì)和RNA可以人為地分開(kāi),植物病毒的96TMVHRVHRVTMV原始株拆開(kāi)重建感染分離純化植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)TMVHRVHRVTMV原始株拆開(kāi)97遺傳物質(zhì)類(lèi)型核染色體核外染色體真核生物細(xì)胞器原核生物質(zhì)粒遺傳物質(zhì)在微生物細(xì)胞內(nèi)的存在部位和方式遺傳物核染色體核外染色體真核生物細(xì)胞器原核生物質(zhì)粒遺傳物質(zhì)在98染色體基因Ⅱ基因ⅠDNA基因是一段DNA染色體基因Ⅱ基因ⅠDNA基因是一段DNA99DNA就是脫氧核糖核酸（長(zhǎng)鏈）腺嘌呤（A）鳥(niǎo)嘌呤（G）胸腺嘧啶（T）胞嘧啶（C）ATCGAAATTTTTTAAAGGGGGCCCCCGC基因測(cè)序就是讀出A-C-G-T-G-G-A-C-G…...DNA就是脫氧核糖核酸（長(zhǎng)鏈）腺嘌呤（A）鳥(niǎo)嘌呤（G）胸腺嘧100基因控制Pr因而控制性狀GATCTAGAUDNAmRNA天冬氨酸

基因控制Pr因而控制性狀GATCT101基因是什么？基因決定生物體的生、長(zhǎng)、病、老死等一切生命現(xiàn)象基因是生命的密碼。。基因記錄和傳遞遺傳信息。Cncnc-micro基因是什么？基因決定生物體的生、長(zhǎng)、病、老死等基因是生命的密102大腸桿菌基因組4100個(gè)基因，4.7×106bp遺傳信息的連續(xù)性功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)基因單拷貝及rRNA多拷貝基因的重復(fù)序列少而短Cncnc-micro大腸桿菌基因組4100個(gè)基因，4.7×106bp遺傳信息的連103酵母菌基因組Cncnc-micro染色體長(zhǎng)度Kb基因數(shù)12345678染色體長(zhǎng)度Kb基因數(shù)439745666107892478410929482304231738142921365732912313873345504874215714991310271310331110241622211520174酵母菌基因組Cncnc-micro染色體長(zhǎng)度Kb基因數(shù)123104原核生物基因調(diào)控系統(tǒng)操縱子RPO結(jié)構(gòu)基因啟動(dòng)基因操縱基因調(diào)節(jié)基因原核生物基因調(diào)控系統(tǒng)操縱子RPO結(jié)構(gòu)基因啟動(dòng)基因105質(zhì)粒核外環(huán)狀小型DNA獨(dú)立復(fù)制穩(wěn)定遺傳F因子與有性接合有關(guān)種類(lèi)R因子與抗藥性有關(guān)COL編碼免疫蛋白Ti質(zhì)粒誘癌質(zhì)粒降解散質(zhì)粒：編碼降解有害物質(zhì)的酶用途基因工程中作為目的基因載體質(zhì)粒原核生物遺傳物質(zhì)存在的另一種方式質(zhì)粒核外環(huán)狀小型DNA獨(dú)立復(fù)制穩(wěn)定遺傳F因子106基因突變突變與育種基因突變和誘變育種Cncnc-micro基因突變突變與育種基因突變和誘變育種Cncnc-mic107突變的特點(diǎn)

Cncnc-micro基因突變誘變機(jī)制突變率突變類(lèi)型突變的特點(diǎn)Cncnc-micro基因突變誘變機(jī)制突變率突108條件致死突變型（株）突變類(lèi)型突變株的表型選擇性突變株非選擇性突變株?duì)I養(yǎng)缺陷型（株）抗性缺陷型（株）形態(tài)突變型（株）抗原突變型（株）產(chǎn)量突變型（株）按方法分：按突變株的表型是否能在選擇性培養(yǎng)基上加以鑒別來(lái)區(qū)分。Cncnc-micro條件致死突變型（株）突變類(lèi)型突變株選擇性非109微生物突變體的主要類(lèi)型形態(tài)突變型菌落形態(tài)突變型菌體形態(tài)突變型生化突變型營(yíng)養(yǎng)突變體(營(yíng)養(yǎng)缺陷型)發(fā)酵突變體抗性突變體條件致死突變體抗原突變型產(chǎn)量突變型按突變實(shí)質(zhì)分Cncnc-micro微生物突變體的主要類(lèi)型形態(tài)突變型菌落形態(tài)突變型菌體形態(tài)突變110突變率出發(fā)菌株長(zhǎng)出突變株含誘變劑的培養(yǎng)基突變率出發(fā)菌株長(zhǎng)出突變株含誘變劑的培養(yǎng)基111突變的特點(diǎn)（證明）不對(duì)應(yīng)性自發(fā)性稀有性獨(dú)立性誘變性穩(wěn)定性可逆性Cncnc-micro突變的特點(diǎn)（證明）不對(duì)應(yīng)性自發(fā)性稀有性獨(dú)立性誘變112基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的證明變量試驗(yàn)涂布試驗(yàn)影印培養(yǎng)試驗(yàn)基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的證明變量試驗(yàn)涂布113大腸桿菌稀釋培養(yǎng)物10ml10ml(培養(yǎng)前先分成50小管)(在同一個(gè)大管中作整體培養(yǎng))3714435抗噬菌體菌落數(shù)抗噬菌體菌落數(shù)變量試驗(yàn)大腸桿菌稀釋培養(yǎng)物1010(培養(yǎng)前先分成50小管)(在同一個(gè)114涂布試驗(yàn)涂布敏感菌5×104個(gè)共12個(gè)平板5×104個(gè)菌落5000個(gè)細(xì)菌/菌落噴入T1保溫重新涂布后噴入T1保溫6個(gè)平板共353個(gè)菌落6個(gè)平板共28個(gè)菌落涂布試驗(yàn)涂布敏感菌5×104個(gè)5×104個(gè)菌落噴入T1保溫115影印培養(yǎng)無(wú)藥培養(yǎng)基含藥培養(yǎng)基影印培養(yǎng)試驗(yàn)原始敏感菌種影印培養(yǎng)無(wú)藥含藥影印培養(yǎng)試驗(yàn)原始敏116誘變機(jī)制移碼突變?nèi)旧w畸變堿基的置換Cncnc-micro誘變機(jī)制移碼突變?nèi)旧w畸變堿基的置換Cncnc-mi117堿基的置換直接引起置換的誘變劑HNO2CNH2腺嘌呤CO次黃嘌呤(Hk)A..THe..THk..

THk..

CA..THk..

CG..

CCOH次黃嘌呤(He)堿基的置換直接引起置換的誘變劑HNO2CNH2腺嘌呤CO次118間接引起置換的誘變劑堿基的置換COHT：烯醇式CT：酮式OA..TT..

AG..

CA..T酮式T..

G烯醇式間接引起置換的誘變劑堿基的置換COHT：烯醇式CT：酮119COBr5-BU:酮式COHBr5-BU:烯醇式堿基的置換間接引起置換的誘變劑COBr5-BU:酮式COHBr5-BU:烯醇式堿基的置換120堿基的置換G..

CA..BUG..

BUA..BUG..

CA..TA..TA..TA..TG..

CA..BU酮式G..BU烯醇式烯醇式酮式堿基的置換G..CA..BUG..BUA..BUG..121移碼突變ＤＮＡ分子中缺失或增加少數(shù)幾個(gè)堿基對(duì)而引起造成突變點(diǎn)以后全部遺傳密碼轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)釋發(fā)生錯(cuò)誤ABCABCABCABCABCABCABCABCAB+ABCABCCBACBACBACBACBAABCBCABCABCABCABCABCABCA增添一個(gè)堿基缺少一個(gè)堿基移碼突變ＤＮＡ分子中缺失或增加少數(shù)幾個(gè)堿基對(duì)而引起造成突變122染色體畸變

某些理化因子，如Ｘ射線，紫外線，亞硝酸等，除能引起點(diǎn)突變外，還會(huì)引起DNA分F子大損傷，包括染色體易位，倒位，缺失，重復(fù)等，即為染色體畸變。Cncnc-micro染色體畸變某些理化因子，如Ｘ射線，紫外線，亞硝Cnc123染色體畸變

紫外線誘變作用機(jī)理可使ＤＮＡ鏈裂斷，破壞核糖和磷酸間的鍵聯(lián)引起胞嘧啶和尿嘧啶產(chǎn)生水合作用造成氫鍵斷裂能使胸腺嘧啶成二聚體，使ＤＮＡ結(jié)構(gòu)發(fā)生改變Cncnc-micro染色體畸變紫外線誘變作用機(jī)理可使ＤＮＡ鏈裂斷，破壞核糖和124突變與育種Cncnc-micro自發(fā)突變與育種從生產(chǎn)中選育定向培育優(yōu)良品種誘變育種

從青霉素產(chǎn)量看誘變育種誘變育種的基本環(huán)節(jié)誘變育種的原則突變與育種Cncnc-micro自發(fā)突變與育種從生產(chǎn)中選育定125效價(jià)：指有效成分的濃度。1ug/ul稱(chēng)為1單位1945時(shí)間1943194319431947195519711977目前發(fā)酵單位(u/ml)100250500～850～850～8000～2萬(wàn)～5萬(wàn)5～10萬(wàn)

從青霉素產(chǎn)量看誘變育種效價(jià)：指有效成分的濃度。1ug/ul稱(chēng)為1單位1945126誘變育種的基本環(huán)節(jié)大多死亡少數(shù)存活存活率多數(shù)未變少數(shù)突變突變率多數(shù)負(fù)變少數(shù)正變正變率多數(shù)幅度小少數(shù)幅度大高產(chǎn)率投產(chǎn)率多數(shù)不宜投產(chǎn)少數(shù)適宜投產(chǎn)出發(fā)菌株計(jì)算出誘變Cncnc-micro誘變育種的基本環(huán)節(jié)大多死亡少數(shù)存活存活率多數(shù)未變少數(shù)突變突變127誘變育種工作中應(yīng)考慮的幾個(gè)原則選優(yōu)良的出發(fā)菌株選擇簡(jiǎn)便有效的誘變劑處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液選用最適劑量設(shè)計(jì)或采用高效篩選方案或方法Cncnc-micro利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)誘變育種工作中應(yīng)考慮的幾個(gè)原則選優(yōu)良的出發(fā)菌株選擇簡(jiǎn)便有效的128選擇簡(jiǎn)便有效的誘變劑出發(fā)菌株含誘變劑的液體培養(yǎng)基接種培養(yǎng)培養(yǎng)接種分離紫外線選擇優(yōu)良突變株選擇簡(jiǎn)便有效的誘變劑出發(fā)菌株含誘變劑的液體培養(yǎng)基接種培養(yǎng)培養(yǎng)129S.t.his回變S.t.his吸入濾紙片保溫可疑“三致”試樣鼠肝勻漿（含羥化酶）陽(yáng)性陰性利用回變檢測(cè)致癌劑——艾姆斯試驗(yàn)法S.t.his回變S.t.his吸入保溫可疑“三致”試樣130挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株生產(chǎn)中用過(guò)的自發(fā)變異菌株采用具有有力性狀的菌株采用已發(fā)生其他變異的菌株采用前體或最終產(chǎn)物代謝高的菌株采用增變菌株Cncnc-micro挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株生產(chǎn)中用過(guò)的自發(fā)變異菌株采用具有有力性狀的131處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液芽孢桿菌應(yīng)處理芽孢放線菌，霉菌應(yīng)處理孢子細(xì)菌指數(shù)期，放線菌霉菌要稍加萌發(fā)后使用出發(fā)菌株應(yīng)制成均勻懸夜Cncnc-micro處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液芽孢桿菌應(yīng)處理芽孢放線菌，霉菌應(yīng)處132選用最適劑量劑量以誘變劑濃度和處理時(shí)間來(lái)表示合適劑量：能擴(kuò)大變異幅度又能促使變異移向正變范圍的劑量Cncnc-micro選用最適劑量劑量以誘變劑濃度和處理時(shí)間來(lái)表示合適劑量：能擴(kuò)大133充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)兩種或多種誘變劑先后使用同種誘變劑重復(fù)使用兩種或多種誘變劑同時(shí)使用Cncnc-micro充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)兩種或多種誘變劑先后使用同種誘變劑134利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)淀粉酶變色圈試驗(yàn)變色圈大的為淀粉酶高產(chǎn)菌落利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)淀粉酶變色圈試驗(yàn)變色圈135設(shè)計(jì)或采用高效篩選方案或方法一個(gè)出發(fā)菌株誘變劑處理選出200個(gè)單孢子菌菌株初篩（每株1瓶）選出50株復(fù)篩（每株4瓶）選出5株第一輪第二輪五個(gè)出發(fā)菌株初篩（每株1瓶）選出50株復(fù)篩（每株4瓶）選出5株40株40株40株40株40株誘變劑處理設(shè)計(jì)或采用高效篩選方案或方法一個(gè)出誘變劑處理選出200個(gè)單初136突變株的篩選方法高產(chǎn)突變菌株的篩選方法抗性突變體的篩選方法營(yíng)養(yǎng)缺陷型的的篩選方法Cncnc-micro與突變株的篩選相關(guān)的幾個(gè)概念突變株的篩選方法高產(chǎn)突變菌株的篩選方法抗性突變體的篩選方137與突變株的篩選相關(guān)的幾個(gè)概念相關(guān)培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基[-]完全培養(yǎng)基補(bǔ)充培養(yǎng)基三類(lèi)遺傳型野生型[A+B+]營(yíng)養(yǎng)缺陷型型[A+B-]原養(yǎng)型[A+B+]Cncnc-micro與突變株的篩選相關(guān)的幾個(gè)概念相關(guān)培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基[-138突變春日霉素產(chǎn)生菌的孢子懸液·高產(chǎn)突變株的篩選瓊脂塊培養(yǎng)法篩選春日霉素高產(chǎn)菌種含供試菌種（拮抗對(duì)象）的瓊脂平板突變春日霉素產(chǎn)生·高產(chǎn)突變株的篩選139抗性突變體的篩選方法青霉素濃縮法梯度培養(yǎng)皿法Cncnc-micro抗性突變體的篩選方法青霉素濃縮法梯度培養(yǎng)皿法Cncnc-mi140青霉素濃縮法培養(yǎng)基(含青霉素)

接入敏感菌液（含抗性突變株）涂布抗青霉素菌落培養(yǎng)青霉素濃縮法培養(yǎng)基(含青霉素)接入敏感菌液涂布抗青霉141梯度培養(yǎng)皿法強(qiáng)抗性中抗性弱抗性含異煙肼接敏感菌含突變株梯度培養(yǎng)皿法強(qiáng)抗性中抗性弱抗性含異煙肼接敏感菌142營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選辦法誘變劑處理淘汰野生型檢出缺陷型夾層培養(yǎng)法限量補(bǔ)充培養(yǎng)法逐漸檢出法影印接種法鑒定缺陷型Cncnc-micro菌絲過(guò)濾法營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選辦法誘變劑處理淘汰野生型檢出缺陷型夾層培養(yǎng)法143夾層培養(yǎng)法及結(jié)果小菌落是第二次長(zhǎng)起來(lái)的（營(yíng)養(yǎng)缺陷型）夾層培養(yǎng)法及結(jié)果小菌落是第二次長(zhǎng)起來(lái)的（營(yíng)養(yǎng)缺陷型）144

逐個(gè)檢出法涂布培養(yǎng)基本培養(yǎng)基上不長(zhǎng)菌落完全培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌落含誘變劑的液體培養(yǎng)基菌種營(yíng)養(yǎng)缺陷型逐個(gè)檢出法涂布培養(yǎng)基本培養(yǎng)基上不長(zhǎng)菌落完全培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌落145影印接種法完全培養(yǎng)基影印接種基本培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)缺陷型影印接種法完全培養(yǎng)基影印接種基本培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)缺陷型146限量補(bǔ)充培養(yǎng)法微量蛋白質(zhì)的完全培養(yǎng)基上小菌落是營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株限量補(bǔ)充培養(yǎng)法微量蛋白質(zhì)的完全培養(yǎng)基上147菌絲過(guò)濾法篩選營(yíng)養(yǎng)突變株基本培養(yǎng)基

接入微生物孢子（含營(yíng)養(yǎng)突變株）涂布均勻后培養(yǎng)長(zhǎng)出菌絲體（野生型）菌絲過(guò)濾得營(yíng)養(yǎng)突變株菌絲過(guò)濾法基本培養(yǎng)基接入微生物孢子涂布均勻后培養(yǎng)長(zhǎng)148細(xì)菌的基因重組真核微生物基因重組在有性繁殖過(guò)程中發(fā)生，當(dāng)合子減數(shù)分裂時(shí)，兩染色體發(fā)生交換。原核微生物通過(guò)轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)等形式進(jìn)行一部分物質(zhì)轉(zhuǎn)移和基因重組。（小結(jié)）Cncnc-micro細(xì)菌的基因重組真核微生物基因重組在有性繁殖過(guò)程中發(fā)生，當(dāng)合149Cncnc-micro轉(zhuǎn)化(transformation)幾個(gè)概念：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化因子、感受態(tài)轉(zhuǎn)化過(guò)程轉(zhuǎn)化的特點(diǎn)Cncnc-micro轉(zhuǎn)化(transformation150

轉(zhuǎn)化(transformation)

受體細(xì)胞直接吸收了來(lái)自供體細(xì)胞的DNA片斷，并把它整合到自己的基因組中，細(xì)胞部分遺傳性狀發(fā)生變化的現(xiàn)象叫轉(zhuǎn)化。Cncnc-micro轉(zhuǎn)化(transformation)Cncnc-m151轉(zhuǎn)化因子轉(zhuǎn)化是游離的ＤＮＡ片斷的轉(zhuǎn)移和重組游離的ＤＡＮ片斷叫轉(zhuǎn)化因子轉(zhuǎn)化因子由供體提供自然情況下可由細(xì)菌細(xì)胞自行裂解產(chǎn)生，實(shí)驗(yàn)室里通過(guò)提取獲得雙鏈ＤＮＡ有轉(zhuǎn)化能力，單鏈沒(méi)有，Cncnc-micro轉(zhuǎn)化因子轉(zhuǎn)化是游離的ＤＮＡ片斷的轉(zhuǎn)移和重組游離的ＤＡＮ片斷叫152受體細(xì)胞能接受轉(zhuǎn)化的生理狀態(tài)稱(chēng)為感受態(tài)，只有處于感受態(tài)的細(xì)菌才能接受轉(zhuǎn)化因子，從出現(xiàn)到消失約為４０分鐘(對(duì)數(shù)期的中期)Cncnc-micro感受態(tài)感覺(jué)態(tài)出現(xiàn)原因細(xì)菌失去部分細(xì)胞壁的結(jié)果細(xì)菌在細(xì)胞表面產(chǎn)生某種Ｅ引起Cncnc-micro感受態(tài)感覺(jué)態(tài)出現(xiàn)原因細(xì)菌失去部分細(xì)胞壁153Cncnc-micro感受態(tài)的決定決定因素