骨髓干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死研究

骨髓干細(xì)胞移植治療

急性心肌梗死研究

武警北京總隊(duì)醫(yī)院賀延第1頁，共29頁。急性心肌梗死（AMI）是冠狀動(dòng)脈閉塞，血流中斷，以致梗死區(qū)心肌細(xì)胞因嚴(yán)重的持久性缺血、缺氧而發(fā)生壞死為特征的疾病。心肌細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，故心肌損傷后不能通過細(xì)胞再生獲得修復(fù)，而是形成纖維化瘢痕、室壁瘤、心力衰竭、心源性死亡。第2頁，共29頁。目前藥物治療（抗凝、溶栓）、冠狀動(dòng)脈內(nèi)介入治療和冠狀動(dòng)脈旁路搭橋雖能改善癥狀，使閉塞血管再通，卻不能再生心肌。隨著干細(xì)胞技術(shù)的出現(xiàn)與成熟，人們在這一領(lǐng)域，取得了前所未有的進(jìn)步，干細(xì)胞移植為病損心肌的細(xì)胞重建及衰竭心臟功能恢復(fù)提供了一種全新的治療策略。第3頁，共29頁。細(xì)胞療法以外來具有功能的組織替代損壞心肌層作為前提，此概念的提出是基于全世界多個(gè)實(shí)驗(yàn)室研究證明的結(jié)果，即通過冠狀動(dòng)脈輸入或在受損心肌周邊注入干/祖細(xì)胞能使梗死心肌再生，減少瘢痕形成及纖維化，提高AMI后心臟功能，目前研究正處于從動(dòng)物試驗(yàn)到臨床Ⅰ期試驗(yàn)階段。第4頁，共29頁。第5頁，共29頁。第6頁，共29頁。

EPS生物學(xué)已涉及心臟病學(xué)

從骨髓動(dòng)員到外周循環(huán)整合入損傷部位心肌缺血、壞死，心臟歸巢第7頁，共29頁。目前研究中能用于移植的細(xì)胞類型很多，動(dòng)物試驗(yàn)中常用胚胎干細(xì)胞,多種亞型的骨髓來源干細(xì)胞包括造血干細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞等;而在臨床研究中常用骨髓單個(gè)核細(xì)胞(mononuclearbonemarrowcells,BMC),循環(huán)血前體細(xì)胞及骨骼肌原細(xì)胞等。移植細(xì)胞的種類第8頁，共29頁。第9頁，共29頁。2001年日本Hamano和德國Straller等率先將骨髓單個(gè)核細(xì)胞群移植應(yīng)用于臨床，因?yàn)樵摷?xì)胞具有容易采集、操作簡單和不存在免疫排斥反應(yīng)等優(yōu)勢。迄今已有多種干細(xì)胞用動(dòng)物和患者心血管疾病治療，但哪種最佳尚無定論。第10頁，共29頁。第11頁，共29頁。將干細(xì)胞移植到心臟途徑：①開胸直接注射術(shù)，但創(chuàng)傷大，危險(xiǎn)性大，不適合單獨(dú)使用。②經(jīng)冠狀動(dòng)脈移植方法可以與經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)（PCI）一起完成。③經(jīng)導(dǎo)管心內(nèi)膜注射的方法可確切的判斷梗死區(qū)，更準(zhǔn)確將干細(xì)胞注射到心肌缺血組織，但易損傷心肌，誘發(fā)室性早搏。④靜脈回輸干細(xì)胞簡單易行，但浪費(fèi)大，療效不肯定。移植途徑第12頁，共29頁。⑤多細(xì)胞動(dòng)員：注射生長因子（SCF）或粒細(xì)胞刺激因子（G-SCF）能使造血干細(xì)胞（HSC）提高250倍。HSC衍生心肌細(xì)胞有絲分裂活躍，HSC注射后，可提高心功能。目前部分研究結(jié)果，經(jīng)冠狀動(dòng)脈注入干細(xì)胞比經(jīng)靜脈或經(jīng)心內(nèi)膜下注入可以更好的改善左室功能，但需進(jìn)一步證實(shí)。第13頁，共29頁。第14頁，共29頁。第15頁，共29頁。第16頁，共29頁。第17頁，共29頁。第18頁，共29頁。移植時(shí)機(jī)干細(xì)胞移植時(shí)機(jī)、移植數(shù)目，對急性心肌梗死來說，回輸干細(xì)胞太早，干細(xì)胞可參與體內(nèi)炎癥反應(yīng)，存活率低；移植太晚，肌性血管形成，內(nèi)皮細(xì)胞遷移困難。REPAIR研究，204例患者在AMI后平均第4天輸入骨髓干細(xì)胞，隨訪4個(gè)月射血分?jǐn)?shù)值凈增加6%（P=0.021）。第19頁，共29頁。移植數(shù)目移植干細(xì)胞濃度也很難把握，移植濃度太低，細(xì)胞量不足，達(dá)不到治療效果；移植濃度太高，粘度高，易形成血栓。國內(nèi)高連如等研究采用BM-MNCs細(xì)胞總數(shù)（5.0±0.7）×107。游慶年等治療采用細(xì)胞總數(shù)4.5×107。第20頁，共29頁。有效性在動(dòng)物研究基礎(chǔ)上，2001年開始了使用干細(xì)胞移植治療心臟疾病的Ⅰ期臨床研究。首例報(bào)道來自Strauer等的試驗(yàn)，選取20例急性AMI后常規(guī)冠狀動(dòng)脈再通支架植入治療的患者，通過冠狀動(dòng)脈輸入自體骨髓干細(xì)胞，移植后3個(gè)月隨訪，發(fā)現(xiàn)梗死面積較治療前明顯下降（由30%±13%降至12%±7%），左室射血分?jǐn)?shù)提高與對照組有顯著差異第21頁，共29頁。不同觀點(diǎn)2006年相繼有研究報(bào)道不同的結(jié)果，Linde等將AMI后ST段抬高的患者行PCI移植自體BMC治療后提示：治療組與對照組心功能改變無差異，干細(xì)胞移植對左室舒張末期容積、梗死面積及心肌不可逆損傷方面均無改善作用。Janssens等研究結(jié)果與Lunde部分相似第22頁，共29頁。本課題研究內(nèi)容本課題正是基于移植干細(xì)胞使梗死心肌再生的背景，由干細(xì)胞移植治療冠心病的問題而切入的，選擇新型的干細(xì)胞移植技術(shù)，經(jīng)冠狀動(dòng)脈注入治療AMI，入選60例AMI患者，分2組（治療組，n﹦30；對照組，n﹦30）。治療組采用梯度密度法分離BM-MNCs，對PCI術(shù)后3-5天內(nèi)的患者行冠狀動(dòng)脈超選擇性注入BM-MNCs；對照組除細(xì)胞移植外，其他治療均同治療組。第23頁，共29頁。治療前后隨訪觀察臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、二維超聲心動(dòng)圖、ECT、Holter、BNP指標(biāo)，觀察術(shù)后病人在不同時(shí)間是否有不良反應(yīng)，心功能是否改善，梗死心肌面積是否縮小，旨在評估治療的有效性、安全性及不良反應(yīng)。為將來臨床推廣應(yīng)用，做一點(diǎn)研究工作，探討一點(diǎn)治療經(jīng)驗(yàn)。

第24頁，共29頁。謝謝?。。?/p>

第25頁，共29頁。該課題采用骨髓干細(xì)胞移植方法治療急性心肌梗死（AMI），并觀察治療的有效性（梗死面積縮小及心功能恢復(fù)情況）。將入選AMI患者60例分為2組，治療組（細(xì)胞移植組，n=30）和對照組（常規(guī)治療組，n=30），兩組治療前后隨訪觀察臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、二維超聲心動(dòng)圖、核素心肌灌注顯像（ECT）、心電監(jiān)護(hù)、動(dòng)態(tài)心電圖監(jiān)測（Holter）、血漿腦鈉肽（BNP）指標(biāo)干細(xì)胞移植具體內(nèi)容第26頁，共29頁。方法：治療組采用梯度密度法分離BM-MNCs，對PCI術(shù)后3-5天內(nèi)的患者行冠狀動(dòng)脈選擇性注入BM-MNCs。對照組除細(xì)胞移植外，其他治療均同治療組。數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，觀察術(shù)后病人是否有不適反應(yīng)，心電監(jiān)護(hù)48小時(shí)、Holter在7天、3個(gè)月是否出現(xiàn)心律失常，7天、3個(gè)月NYHA心功能分級是否改善，第27頁，共29頁。左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）是否增加，14天、3個(gè)月ECT顯示梗死心肌面積是否縮小，3天、7天及3個(gè)月血漿BNP是否降低。旨在探討一種干細(xì)胞移植方法（移植途徑、細(xì)胞種類、劑量及時(shí)機(jī)）的可行性，發(fā)現(xiàn)并解決一些問題，積累一點(diǎn)干細(xì)胞移植治療AMI的方法經(jīng)驗(yàn)，評價(jià)骨髓干細(xì)胞移植治療AMI的有效性、安全性及不良反應(yīng)。第28頁，共29頁。內(nèi)容梗概骨髓干細(xì)胞移植治療

急性心肌梗死研究。心肌細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，故心肌損傷后不能通過細(xì)胞再生獲得修復(fù)，而是形成纖維化瘢痕、室壁瘤、心力衰竭、心源性死亡。將干細(xì)胞移植到心臟途徑：①開胸直接注射術(shù)，但創(chuàng)傷大，危險(xiǎn)性大，不適合單獨(dú)使用。④靜脈回輸干細(xì)胞簡單易行，但浪費(fèi)大，療效不肯定。HSC衍生心肌細(xì)胞有絲分裂活躍，HSC注射后，可提高心功能。移植太晚，肌性血管形成，內(nèi)皮細(xì)胞遷移困難。REPAIR研究，204例患者在AMI后平均第4天輸入骨髓干細(xì)胞，隨訪4個(gè)月射血分?jǐn)?shù)值凈增加6%（P=0.021）。移植濃度太高，粘度高，易形成血栓。治療前后隨訪觀察臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、二維超聲心動(dòng)圖、ECT、Holter、BNP指標(biāo)，觀察術(shù)后病人在不同時(shí)間是否有不良反應(yīng)，心功能是否改善，梗死心肌面積是否縮小，旨在評估治療