DB42T1698-2021辣椒瘡痂病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSICS65.020.20CCSB05湖 北 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB42/T1698—2021辣椒瘡痂病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程Technicalregulationforevaluationofpepperresistancetobacterialspot2021-06-212021-06-212021-07-21湖北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布目 次前 言 II1范圍 12規(guī)性用件 13術(shù)和義 14接種 15抗鑒接操作 26病調(diào)方法 37抗性價(jià) 48記表格 4附錄 A（料）辣椒痂病菌生小種 6前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。本文件起草單位：湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所、湖北省蔬菜辦公室、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)。本文件實(shí)施應(yīng)用中的疑問(wèn)，可咨詢湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳，聯(lián)系電話：027-87665821798986546@辣椒瘡痂病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程范圍本文件適用于辣椒瘡痂病的抗病性鑒定。（NY/T1858.5番茄主要病害抗病性鑒定技術(shù)規(guī)程第5部分：番茄抗瘡痂病鑒定技術(shù)規(guī)程下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1感病對(duì)照disease-susceptiblecontrol為辣椒品種EarlyCalWonder（ECW，感瘡痂病品種），接種后的病情指數(shù)DI≥50。3.2抗病對(duì)照disease-resistantcontrol為辣椒材料ECW-20R（含Bs2基因），接種后的病情指數(shù)DI≤20。4接種28℃下培養(yǎng)4844.2接種體繁殖和保存4.2.1接種體繁殖用接種針挑取保存的瘡痂病菌落，在NA培養(yǎng)基的平板上劃線，置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)36h～48h，選取邊緣清晰、有光澤、粘稠狀的單菌落轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基中28℃恒溫震蕩培養(yǎng)16h，加滅菌蒸餾水配制成濃度為2×108cfu/mL的菌懸液。鑒定室鑒定室應(yīng)具備可調(diào)節(jié)溫度、濕度和光照的條件，創(chuàng)造良好的發(fā)病環(huán)境。設(shè)“ECW”辣椒為感病對(duì)照品種，“ECW-20R”辣椒為抗病對(duì)照品種；接種菌株Xcv23-1為湖北省辣椒瘡痂病優(yōu)勢(shì)菌株，鑒定為生理小種P0；辣椒-番茄瘡痂病菌模式菌株ICMP63（X.campestrispv.vesicatoria）為對(duì)照菌株（參見(jiàn)附錄A）。育苗接種接種4～6宜為2×108cfu/mL。鑒定材料隨機(jī)排列，每份鑒定材料重復(fù)3次，每次重復(fù)10株。cm～2cmICMP63按照NY/T1858.5的方法執(zhí)行。以噴灑辣椒-番茄瘡痂病菌模式菌株ICMP63為對(duì)照，噴灑滅菌水為空白對(duì)照。在鑒定材料數(shù)量較少情況下宜采用注射法，大量材料需鑒定情況下宜采用噴霧法。5.4.5接種后的管理2875～9030,000lx～40,000lxNY/T1858.5接種后1d～2d開(kāi)始調(diào)查。0級(jí)，觀察到的葉片有過(guò)敏壞死性癥狀；1級(jí)，觀察到的葉片無(wú)壞死癥狀。噴霧接種后7d開(kāi)始調(diào)查。表1辣椒瘡痂病的病情分級(jí)6.2.3病情記載調(diào)查記載每一鑒定植株的病情級(jí)別，計(jì)算病情指數(shù)（Diseaseindex:DI），并按照NY/T1858.5的方法執(zhí)行。表1辣椒瘡痂病的病情分級(jí)6.2.3病情記載調(diào)查記載每一鑒定植株的病情級(jí)別，計(jì)算病情指數(shù)（Diseaseindex:DI），并按照NY/T1858.5的方法執(zhí)行。病情分級(jí)按公式（1）計(jì)算：∑(??×??)????= ×100·····································································(1)??×??式中：DI——病情指數(shù)；sNS——最高病情級(jí)別的代表數(shù)值。病情級(jí)別病情描述0全葉無(wú)病斑1病斑占葉片面積的10%3病斑占葉片面積的11%～25%5病斑占葉片面積的26%～50%7病斑占葉片面積的≥51%7.2.2鑒定結(jié)果的有效性判別當(dāng)感病對(duì)照的病情指數(shù)DI≥50，該批次的抗瘡痂病鑒定結(jié)果即為有效。7.2.2鑒定結(jié)果的有效性判別當(dāng)感病對(duì)照的病情指數(shù)DI≥50，該批次的抗瘡痂病鑒定結(jié)果即為有效。8記載表格辣椒抗瘡痂病鑒定結(jié)果記載表3、表4。表3辣椒抗瘡痂病鑒定記載表（注射法）0級(jí)，為抗??；1級(jí)，為感病。NY/T2表2辣椒瘡痂病的抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)（DI）抗性評(píng)價(jià)DI=0免疫（I）0＜DI＜10高抗（HR）10≤DI＜30抗?。≧）30≤DI＜50中抗（MR）50≤DI＜70感?。⊿）DI≥70高感（HS）編號(hào)品種/種質(zhì)名稱來(lái)源重復(fù)序號(hào)病情分級(jí)抗性評(píng)價(jià)01IIIIII播種時(shí)間接種時(shí)間接種生育期病原物編號(hào)生理小種類型調(diào)查時(shí)間技術(shù)負(fù)責(zé)人（簽字）表4辣椒抗瘡痂病鑒定記載表（噴霧法）編號(hào)品種/種質(zhì)名稱來(lái)源重復(fù)序號(hào)病情分級(jí)病情指數(shù)平均病指抗性評(píng)價(jià)01357IIIIII播種時(shí)間接種時(shí)間接種生育期病原物編號(hào)生理小種類型調(diào)查時(shí)間技術(shù)負(fù)責(zé)人（簽字）附錄A（資料性）辣椒瘡痂病病原菌和生理小種學(xué)名和形態(tài)描述學(xué)名辣椒細(xì)菌性瘡痂病病原菌為野油菜黃單胞桿菌辣椒斑點(diǎn)病致病變種[Xanthomonascampestrispv.Vesicatoria(Doidge)Dye.]。形態(tài)特征描述(1.0～1.5)μm×(0.6～YDC5～4027℃～3059℃10min危害部位及癥狀生理小種采用的鑒別寄主國(guó)際上通用的辣椒瘡痂病菌鑒別寄主譜，共包括5個(gè)鑒別寄主，分別為：EarlyCalwonder（ECW，感瘡痂病品種）、ECW-10R（含Bs1基因）、ECW-20R（含Bs2基因）、ECW-30R（含Bs3基因）。生理小種采用的鑒別寄主國(guó)際上通用的辣椒瘡痂病菌鑒別寄主譜，共包括5個(gè)鑒別寄主，分別為：EarlyCalwonder（ECW，感瘡痂病品種）、ECW-10R（含Bs1基因）、ECW-20R（含Bs2基因）、ECW-30R（含Bs3基因）。生理小種鑒定表A.1）表A.1辣椒瘡痂病病原菌生理小種的鑒定生理小種鑒別寄主/基因型ECWNoRgeneECW-10RBs1geneECW-20RBs2geneECW-30RBs3gene辣椒生理小種0（P0）SRRR辣椒生理小種1（P1）SSRR辣椒生理小種2（P2）SRRS辣椒生理小種3（P3）SSRS辣椒生理小種4（P4）SSSR辣椒生理小種5（P5）SRSS辣椒生理小種6（P6）SSSS辣椒生理小種7（P7）SSRR生理小種鑒別寄主/基因型辣椒生理小種8（P8）SSR