高中生物選修一微生物的實驗室培養(yǎng)人教版

關(guān)于高中生物選修一微生物的實驗室培養(yǎng)人教版第1頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六微生物包括哪五類：病毒細菌放線菌真菌原生動物

原核生物界

原生生物界真菌界病毒界第2頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六1、培養(yǎng)基可以分為哪兩類？2、培養(yǎng)基一般都含有哪些營養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足哪些要求？3、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？4、避免雜菌污染的方法主要包括哪四個方面5、什么是消毒、滅菌，常用方法有哪些？6、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟7、如何倒平板？第3頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六（1）按物理狀態(tài)來分：培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。（2）按功能來分，可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。（3）按成分來分，可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。1、培養(yǎng)基分類：一、培養(yǎng)基第4頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六2、選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基:

分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:

分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基:

分離固氮菌不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基:

分離自養(yǎng)型微生物加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基:

分離導入了目的基因的受體細胞第5頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六不管哪種培養(yǎng)基，一般都含有水、碳源、和氮源、無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì),例如:生長因子(即細菌生長必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。3、培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)（1）培養(yǎng)基一般都含有哪些營養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足哪些要求？第6頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六（2）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？（3）避免雜菌污染的方法主要包括哪四個方面（4）什么是消毒、滅菌，常用方法有哪些？第7頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六消毒與滅菌消毒：指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。滅菌：指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子。滅菌與消毒技術(shù)是微生物有關(guān)工作中最普通也是最重要的技術(shù)。二、無菌技術(shù)第8頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六消毒的方法：1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化學藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾滅等進行皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線或化學藥物消毒第9頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六滅菌的方法：1、灼燒滅菌2、干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸汽滅菌：100kPa、121℃下維持15-30min.第10頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六6、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟7、如何倒平板？第11頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六三、實驗操作1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基第12頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六1、培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？

答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。2、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。問題討論：第13頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六3、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4、在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。第14頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六2、純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法第15頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六

平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)畫線的操作,將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面.

在數(shù)次畫線后,可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落.第16頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六第17頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六微生物的恒溫培養(yǎng)第18頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六

1、為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？

答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。問題討論：第19頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六

2、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

3、在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？

答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。第20頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六第21頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六第22頁，共25頁，2022年，5月20日，17點41分，星期六

涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進行無菌操作？

應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。問題討論：第23頁，共25頁，202