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單個(gè)核細(xì)胞分ficoll分層液(淋巴細(xì)胞分離液)作為分離液。1.090PBMC1.050~1.0771.030~1.035。1.5mlHank(稱稀釋全血4mlHank液,混勻,1000rpm10min,棄上清(該步洗滌細(xì)胞21~2×106/mlPBMC將血液進(jìn)行稀釋可降低血液黏稠度和紅細(xì)胞的,提高有核細(xì)胞的收獲量。
E花環(huán)形成實(shí)(SRBC(CD2ETTSRBC混合后,SRBC便粘附TTET細(xì)胞的數(shù)目,從而間接了解機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀態(tài),判斷疾0.2ml0.80.2ml420min0.2ml結(jié)果判斷:淋巴細(xì)胞呈藍(lán)紫色,SRBC不,凡結(jié)合3個(gè)或3個(gè)以上則為E花環(huán)形成細(xì)胞(ERFC100個(gè)淋巴細(xì)胞,求出E花環(huán)形成率。綿羊紅細(xì)胞以保存1周以內(nèi)最好,超過(guò)2與淋巴細(xì)胞結(jié)合力下降,超過(guò)5~6不SRBC與淋巴細(xì)胞混合比例以100:1~200:1為宜;淋巴細(xì)胞離后過(guò)6h,否則會(huì)影4℃取出后應(yīng)該立即計(jì)數(shù)。SRBC從淋巴細(xì)胞上脫IgG測(cè)定的方法學(xué)評(píng)IgGHBsAg測(cè)定的方法學(xué)評(píng)Pre-trigger(雙氧水)/trigger(氫氧化鈉)測(cè)定對(duì)象:抗原或抗體;各一滴(50ul50ul顯色:分別加入底物A、B3710特異抗體,參照區(qū)(R)IgGBA若出現(xiàn)兩條紅色條帶,說(shuō)明標(biāo)本HBsAg陽(yáng)性RHBsAgT區(qū)出現(xiàn),試劑條失效熒光抗體技術(shù)——抗核抗體的檢以小鼠肝細(xì)胞或HEP-2細(xì)胞等作為抗原基質(zhì)片,加待檢于基質(zhì)片上,若樣品中含有ANA結(jié)合,形成核抗原-抗核抗體-標(biāo)記抗體復(fù)合物,在熒光顯微鏡下觀察可見(jiàn)細(xì)胞核部加樣(稀釋后的標(biāo)本、溫育、沖洗(緩沖液、加樣(FITCIgG抗體、溫育、快速斑點(diǎn)免疫結(jié)合試判讀結(jié)果:在膜有清晰的淡紅色斑點(diǎn)顯示者判為陽(yáng)性反應(yīng);反之,則為反特異抗體,參照區(qū)(R)IgG。RHCGT區(qū)出現(xiàn),試劑條失效
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè) IL-雙抗體夾心法(一步法,測(cè)定IL-2的含IL-2的含量成正相關(guān)50μl,輕輕搖動(dòng)幾下,37℃×30min。15s5次,拍干。50μl50μl37℃×10min。50μl。比色:用酶標(biāo)儀OD值,波長(zhǎng)為450nm。12IL-2的濃度。30min標(biāo)準(zhǔn)品從低到高的順序加,加完之后切勿蓋錯(cuò)蓋子。洗滌要嚴(yán)格按照要求,徹底洗滌,防止假陽(yáng)性,但不可沖洗過(guò)猛過(guò)急導(dǎo)致假。
循環(huán)免疫復(fù)合物的檢CIC的相對(duì)含量。41h10min495nm下測(cè)兩管的ABBS調(diào)零。A值待測(cè)A值=測(cè)定管A值-對(duì)照管A大于正常人ACICPEG可沉淀不同分子量的免疫復(fù)合物。20g/LPEGCIC,40g/LPEG則沉淀較小的CIC,但濃度大于50g/LPEG選擇性CIC的特性即,可能導(dǎo)致假陽(yáng)
放射免疫技術(shù)測(cè)
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