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尿液干化學(xué)及沉渣鏡檢原理、影響因素和臨床意義尿液干化學(xué)及沉渣鏡檢原理、影響因素和臨床意義1一尿干化學(xué)概述1956年美國人發(fā)明了以葡萄糖氧化酶和過氧化物酶為基礎(chǔ)檢測葡萄糖的第一條“浸入即讀”的干化學(xué)試紙。發(fā)展到今天已經(jīng)成為一次可以測十幾個項目的多聯(lián)試紙帶。檢測手段也由目測發(fā)展到半自動、全自動。具有快速、簡便、用量少的優(yōu)點,但是同時也存在著影響因素多,檢測不精確等缺點。一尿干化學(xué)概述1956年美國人發(fā)明了以葡萄糖氧化酶和過氧化物2一、尿液酸堿度PH
原理:采用酸堿指示劑法。尿中pH可使試紙測定區(qū)中的甲基紅和溴麝香草酚藍兩種指示劑發(fā)生顏色改變,可表達pH5(黃色)~pH7(綠色)~pH9(藍色)的變色范圍。參考范圍PH4.5-8.0(隨機尿)方法學(xué)評價:尿標本必須新鮮,時間過長的尿液可滋生細菌,如變形桿菌等,可分解尿素產(chǎn)生氨,使尿液變堿;含過多碳酸氫鹽時并放置時間過久也可導(dǎo)致?lián)]發(fā),使酸度增高。測定具有一定的局限性:結(jié)果間隔大,每級間隔0.5;測定范圍小,從pH5~pH9,不適宜精確測定尿的酸堿度。但因攜帶方便,無需設(shè)備,檢查方便且便于實現(xiàn)自動化,適合于過篩試驗。一、尿液酸堿度PH
原理:采用酸堿指示劑法。尿中pH可使試紙3二、尿比重SG原理:采用多聚電解質(zhì)離子解離法。高分子電解質(zhì)—甲基乙烯基醚和順丁烯二酸的共聚體是弱酸性(—COOH基)離子交換體,而尿中含有以Nacl為主的電解質(zhì),在水中解離為Na+和cl-,可與離子交換體中的氫離子(H+)置換,在水溶液中放出H+。隨著尿液中不斷增加的H+濃度,使得指示劑溴麝香草酚藍的顏色發(fā)生改變。參考范圍:1.015-1.025方法學(xué)評價:其優(yōu)點是不受高濃度的葡萄糖、尿素、放射造影劑的影響,該方法靈敏度略低,只能按0.005的梯度色階表達結(jié)果,精密度差,測試范圍窄,并且受強酸強堿性尿和高蛋白質(zhì)尿的影響,不適宜小兒及腎臟濃縮稀釋功能嚴重減低者使用。不能作為評價腎功能變化的指標。二、尿比重SG4三、尿蛋白PRO原理:采用PH指示劑蛋白質(zhì)誤差的原理。在一定條件下(3.2時),由于蛋白質(zhì)離子對帶相反電荷指示劑(溴酚藍)離子吸引而造成溶液中指示劑進一步電離,當超越緩沖范圍時,可使指示劑改變顏色。方法學(xué)評價:對清蛋白的敏感性明顯高于球蛋白,不與血紅蛋白,本周蛋白和黏蛋白反應(yīng),因此陰性的結(jié)果并不能排除這些蛋白質(zhì)的存在。對清蛋白測定的敏感性約在0.15~0.30g/L?;鞚崮虿挥绊憸y定結(jié)果和判斷,但肉眼血尿、血紅蛋白尿、黃疸尿等顯著異常的尿色會影響到對結(jié)果的判別。該試驗方法對標本的酸堿性非常敏感。強酸性(pH<3)強堿性(PH>9),前者導(dǎo)致假陰性后者導(dǎo)致假陽性。含高濃度青霉素,慶大霉素、磺胺、含碘造影劑導(dǎo)致假陰性。如服用奎寧和嘧啶等藥物時,尿液可呈強堿性,超出了試劑帶本身的緩沖能力,可造成干化學(xué)法假陽性。含非那吡啶、聚乙烯吡咯酮、有機碘造影劑的尿樣、被某些清潔劑和消毒劑污染的尿標本會出現(xiàn)假陽性。三、尿蛋白PRO5四、葡萄糖
GLU原理:采用葡萄糖-過氧化酶法。尿中葡萄糖在試紙上的葡萄糖氧化酶催化下,與O2生成葡萄糖酸內(nèi)脂和過氧化氫,試紙上的過氧化物酶進一步將過氧化氫分解為水并放出新生態(tài)氧使色素原氧化產(chǎn)生顏色的變化,顏色深淺與葡萄糖濃度成正比。方法學(xué)評價:葡萄糖氧化酶法具有特異性強,靈敏度高(1.67~2.78mmol/L)。適用于常規(guī)及過篩檢查尿中的葡萄糖。而對乳糖、半乳糖、果糖等其他還原糖不發(fā)生反應(yīng)。高比重尿液可使尿葡萄糖反應(yīng)性減低。低糖高維C時,維C與試劑發(fā)生競爭性抑制反應(yīng),造成假陰性,如果使用了大劑量維生素治療,5h內(nèi)最好不要做尿糖檢查。尿酮體過高>500ml/L,尿液擱置時間過長,細菌分解也會引起假陰性。一些強氧化性物質(zhì)(漂白粉、次亞氯酸等)或尿比重過低時,會導(dǎo)致假陽性。四、葡萄糖
GLU原理:采用葡萄糖-過氧化酶法。尿中葡萄糖在6五、尿酮體KET原理:采用亞硝基鐵氰化鈉法。尿中的丙酮或乙酰乙酸與試紙上的亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng),產(chǎn)生淺紫色到深紫色變化。方法學(xué)評價:對乙酰乙酸的靈敏度為100ml/L,對丙酮的靈敏度為700ml/L,與B-羥丁酸不反應(yīng)。早期酮癥排出的B羥丁酸占酮體總量的78%,因而對早期酮癥檢出不敏感。由于丙酮和乙酰乙酸具有揮發(fā)性,故標本應(yīng)新鮮,最好在采集后30內(nèi)測定。肉眼血尿等有明顯顏色變異的尿和含大量左旋多巴代謝物、肌酐、肌酸的標本可出現(xiàn)假陽性。五、尿酮體KET7六、膽紅素BIL原理:以偶氮反應(yīng)為基本原理。在強酸介質(zhì)中膽紅素與重氮鹽發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),生成紅色偶氮化合物。方法學(xué)評價:過量的維c和亞硝酸鹽可抑制偶氮反應(yīng)而呈假陰性,而大量的氯丙嗪和高濃度的鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物在酸性條件下會呈假陽性反應(yīng)。尿標本保存不當,尿膽紅素遇光分解。六、膽紅素BIL8七、尿膽原URO原理:采用改良Ehrlich醛反應(yīng)法。在強酸性條件下,尿膽原與試紙中二氯苯胺重氮鹽產(chǎn)生偶聯(lián)反應(yīng),生成櫻紅色縮合物,試劑模塊發(fā)生黃色到紅色的改變。方法學(xué)評價:尿膽原排出后很容易氧化為尿膽素,故應(yīng)盡快測定。應(yīng)用大量抗生素、維生素和尿中含有高濃度亞硝酸鹽或甲醛時容易抑制試驗,出現(xiàn)假陰性結(jié)果。使用氯噻嗪類、非那吡啶類、對-氨基硫酸和磺胺等藥物時,可出現(xiàn)假陽性。七、尿膽原URO9八、亞硝酸鹽NIT原理:采用亞硝酸鹽還原法。尿中含有的亞硝酸鹽在酸性環(huán)境中先與對氨基苯磺酸反應(yīng),形成重氮鹽,再與α-萘胺結(jié)合而產(chǎn)生粉紅色偶氮化合物。方法學(xué)評價:尿液必須新鮮,無外界污染,最好用晨尿或在膀胱中潴留4h以上的尿液。出現(xiàn)陽性結(jié)果意味著尿液中細菌數(shù)量在10萬/ml以上。陰性結(jié)果并不表明尿液中無細菌,可能為非硝酸鹽還原性細菌引起的尿道感染;也可能為尿液在膀胱中潴留不足4h或飲食中缺乏硝酸鹽等情況。高比密尿液或含有大量維c的標本可減低反應(yīng)的敏感性。
八、亞硝酸鹽NIT10九、血紅蛋白BLD原理:采用紅細胞類過氧化物酶法。血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有過氧化物酶樣作用,可以催化過氧化氫放出新生態(tài)氧,進一步氧化指示劑而產(chǎn)生顏色變化。方法學(xué)評價:高濃度維c對試驗有抑制作用,導(dǎo)致結(jié)果偏低或假陰性;濃縮尿或高蛋白尿也可減低反應(yīng)的敏感性。清洗劑如次氯酸鹽和尿道中細菌產(chǎn)生的過氧化氫酶可能引起假陽性結(jié)果。試紙法可檢出微量血紅蛋白和破壞的紅細胞,而鏡檢法可能為“陰性”。結(jié)果配合顯微鏡檢查結(jié)果,并結(jié)合臨床資料進行分析,更有價值。
九、血紅蛋白BLD11十、白細胞LEU
原理:采用粒細胞酯酶法。中性粒細胞特異性地含有一種酯酶,而這種酯酶在紅細胞、淋巴細胞、血小板、血清、腎臟及上皮細胞中均不存在。試紙反應(yīng)基質(zhì)是吲哚酚酯,在酯酶作用下將其轉(zhuǎn)變?yōu)檫胚岱?再與重氮鹽發(fā)生反應(yīng),形成紫色縮合物。方法學(xué)評價:該試驗僅與尿液中的粒細胞反應(yīng),既可與完整的粒細胞反應(yīng),也可與膿細胞反應(yīng)以及破壞后的粒細胞所釋放出的酯酶成分反應(yīng)。當尿中出現(xiàn)以淋巴細胞或單核細胞為主的白細胞時,可呈陰性。尿中白細胞少于10~25/ul;尿中出現(xiàn)過高的葡萄糖、蛋白質(zhì)或高比重尿會造成反應(yīng)的敏感性減低或出現(xiàn)假陰性。尿中的先鋒霉素類藥物、乙哚酸、高濃度草酸、四環(huán)素等藥物都可使反應(yīng)的敏感性減低或出現(xiàn)假陰性。尿標本被陰道分泌物污染,或者尿中污染甲醛、在酸性尿環(huán)境中呈紅色或深色的藥物、食物。十、白細胞LEU
原理:采用粒細胞酯酶法。中性粒細胞特異性地12十一、維生素C維C具有1,2-烯二醇還原性基團,在酸性條件下將氧化態(tài)粉紅色的2,6二氯酚靛酚還原為無色的2,6-二氯二對酚胺。顏色由綠或深藍至粉紅。主要對隱血(≥90mg/L)膽紅素(≥250mg/L)亞硝酸鹽(≥250mg/L)葡萄糖(≥500mg/L)也會使白細胞檢測產(chǎn)生假陰性十一、維生素C維C具有1,2-烯二醇還原性基團,在酸性條件下13臨床意義目前尿液干化學(xué)分析一般都可同時獲得十幾項參數(shù)的結(jié)果??梢詫⒛承╉椖窟M行簡單組合,用于快速分析患者的尿檢情況,并根據(jù)出現(xiàn)陽性結(jié)果的具體內(nèi)容,初步判別患者的疾病情況。臨床意義目前尿液干化學(xué)分析一般都可同時獲得十幾項參數(shù)的結(jié)果。14比重、蛋白質(zhì)、紅細胞、白細胞一般會涉及泌尿系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)的疾病,這些項目中的一項或多項結(jié)果出現(xiàn)陽性,特別是蛋白質(zhì)和紅細胞同時出現(xiàn)陽性時,常見于一些與腎臟疾病有關(guān)的病理改變。如各種急慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎、各種病因造成的腎損傷、泌尿系腫瘤、結(jié)核,還可能與多發(fā)性骨髓瘤、自身免疫病、溶血疾病、高熱、中毒等有關(guān)。比重、蛋白質(zhì)、紅細胞、白細胞一般會涉及泌尿系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)的疾15白細胞、紅細胞、亞硝酸鹽主要涉及泌尿生殖系統(tǒng)的疾病。當白細胞或紅細胞出現(xiàn)陽性結(jié)果,或者亞硝酸出現(xiàn)陽性時,一般與泌尿系統(tǒng)感染及鄰近器官疾病有關(guān)。比如膀胱炎、腎盂腎炎、尿路結(jié)石、前列腺炎、尿道炎、盆腔炎、創(chuàng)傷等。白細胞、紅細胞、亞硝酸鹽主要涉及泌尿生殖系統(tǒng)的疾病。當白細胞16比重、葡萄糖、酮體這三項結(jié)果出現(xiàn)陽性,可能與內(nèi)泌系統(tǒng)疾病有關(guān),如糖尿病、腎性糖尿病、糖尿病酮癥、妊娠嘔吐、腹瀉、腦血管意外等。比重、葡萄糖、酮體這三項結(jié)果出現(xiàn)陽性,可能與內(nèi)泌系統(tǒng)疾病有關(guān)17膽紅素、尿膽原一項或兩項結(jié)果出現(xiàn)陽性,一般表示肝膽系統(tǒng)疾病,如病毒性肝炎、肝硬化、溶血性疾病膽石癥、膽管癌等。另外還可用于黃疸型疾病的鑒別斷:肝細胞性黃疸尿膽紅素和尿膽原都為陽性;而溶血黃疸只有尿膽原為陽性;阻塞性黃疸只有尿膽紅素呈性。膽紅素、尿膽原一項或兩項結(jié)果出現(xiàn)陽性,一般表示肝膽系統(tǒng)疾病,18PH、比重、維生素這三個項目不能單獨用于診斷但是可作為許多疾病的過篩試驗,臨床診斷價值不大。重要的是,它們可以對干化學(xué)試驗進行監(jiān)測。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時,有可能干擾尿蛋白、葡萄糖、紅細胞和白細胞測定的敏感性。檢驗人員在簽發(fā)檢驗結(jié)果時,應(yīng)注這些指標,是不是對測定的標本產(chǎn)生了干擾;如有干擾,要想辦法排除,并進行復(fù)查。PH>9:蛋白質(zhì)假陽性,PH<3:蛋白質(zhì)假陰性VitC(>500mg/L):可致葡萄糖假陰性,尿潛血假陰性,亞硝酸鹽假陰性,白細胞酯酶假陰性(具有抗VitC能力的試紙除外)比重:高比重尿會使尿亞硝酸鹽反應(yīng)敏感性降低,會使白細胞酯酶假陰性高蛋白尿(4+):可使白細胞酯酶假陰性PH、比重、維生素這三個項目不能單獨用于診斷但是可作為許多疾19二尿沉渣鏡檢
即尿液有形成分顯微鏡檢查二尿沉渣鏡檢20鏡檢方法用較弱光線,以低倍鏡將涂片全貌觀察一遍,然后,計數(shù)20個低倍視野所見的管型,10個高倍視野所見的各類細胞鏡檢方法用較弱光線,以低倍鏡將涂片全貌觀察一遍,然后,計數(shù)221報告方式1.分數(shù)報告法細胞成分:最低~最高/HPF管型成分:最低~最高/LPF2.加號報告法以有形成分占視野面積來判定,1/4視野為+,滿視野為++++。多用于細胞數(shù)極多和結(jié)晶、粘液絲、脂肪滴、細菌等的報告。3.定量報告法(/ml/ul)報告方式1.分數(shù)報告法2.加號報告法3.定量報告法(22鏡檢內(nèi)容細胞(RBC、WBC、上皮細胞、吞噬細胞)管型透明管型、細胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、結(jié)晶管型、細胞管型等結(jié)晶(常見結(jié)晶、病理性結(jié)晶)鏡檢內(nèi)容細胞(RBC、WBC、上皮細胞、吞噬細胞)23鏡檢內(nèi)容:紅細胞在未經(jīng)染色的新鮮尿沉渣中,紅細胞呈淡黃色,輕度反光,雙凹盤樣。在濃縮的高滲尿液中,紅細胞皺縮、變小、呈棘形。在稀釋或低滲尿液中,血紅蛋白逸出,紅細胞腫脹呈影細胞。鏡檢內(nèi)容:紅細胞在未經(jīng)染色的新鮮尿沉渣中,紅細胞呈淡黃色,輕24尿液干化學(xué)檢查分析課件25尿液干化學(xué)檢查分析課件26尿沉渣紅細胞參考值及血尿定義正常人:4~7/HPF可偶見一個紅細胞。肉眼血尿:每升尿液中含血量超過1ml,肉眼可見到不同程度混濁紅色的尿液。顯微鏡血尿:血液含量在0.1%以下,外觀無血色,鏡下紅細胞平均≥3/HPF的尿液。尿沉渣紅細胞參考值及血尿定義正常人:4~7/HPF可偶見一個27血尿分類均一紅細胞血尿:RBC外形及大小正常,形態(tài)較為一致。非均一紅細胞血尿:RBC大小不等,呈兩種以上的多形性變化。混合性血尿:以上兩組血尿的混合。血尿分類均一紅細胞血尿:RBC外形及大小正常,形態(tài)較為一致。28鏡檢內(nèi)容:白細胞白細胞:體積較RBC為大,呈圓球形,外形完整、無明顯退行性變,胞漿清楚、細胞漿內(nèi)顆粒清晰可見,常分散存在。膿細胞:死亡的中性粒細胞,外形不規(guī)則,結(jié)構(gòu)模糊,漿內(nèi)充滿粗大顆粒,核不清楚,細胞常粘連成團,細胞間界限不明顯。鏡檢內(nèi)容:白細胞白細胞:體積較RBC為大,呈圓球形,外形完整29尿液干化學(xué)檢查分析課件30尿液干化學(xué)檢查分析課件31尿沉渣白細胞參考值正常尿液中可偶然見到1~2個WBC/HPF,如每個高倍視野見到5個或5個以上白細胞為增多。尿沉渣白細胞參考值正常尿液中可偶然見到1~2個WBC/HPF32鏡檢內(nèi)容:上皮細胞來源:腎小管、腎盂、輸尿管、膀胱、尿道等處上皮細胞脫落。類型: 立方上皮細胞——腎小管 移行上皮細胞——腎盂、腎盞、輸尿管、膀胱及部分尿道 假復(fù)層柱狀上皮細胞——尿道中段 復(fù)層鱗狀上皮細胞——尿道外口、陰道鏡檢內(nèi)容:上皮細胞來源:腎小管、腎盂、輸尿管、膀胱、尿道等處33尿液干化學(xué)檢查分析課件34尿液干化學(xué)檢查分析課件35鱗狀上皮細胞鱗狀上皮細胞36鏡檢內(nèi)容:管型管型是在腎小管管腔內(nèi)形成的。當腎小球濾過膜通透性增強時,腎小管內(nèi)大量的蛋白質(zhì)不能完全重吸收。當?shù)鞍踪|(zhì)到達遠端腎小管及集合管時,由于水分的吸收,酸度的增加及軟骨素硫酸脂的存在,促使蛋白質(zhì)凝固形成管型,即透明管型。鏡檢內(nèi)容:管型管型是在腎小管管腔內(nèi)形成的。當腎小球濾過膜通透37管型基本形態(tài):兩邊平行,兩端鈍圓的長條形圓柱體。長短、粗細取決于形成部位腎小管的直徑和條件,也取決于腎小管上皮細胞的狀態(tài)。管型基本形態(tài):兩邊平行,兩端鈍圓的長條形圓柱體。38管型形成機理:1)原尿中含有一定量的蛋白質(zhì),尤T-H 糖蛋白(腎小管分泌)2)腎小管有使尿液濃縮和酸化的能力 濃縮:提高蛋白質(zhì)的含量,提高鹽類的濃度 酸化:能促進蛋白的沉淀3)有可供交替使用的腎單位管型形成機理:1)原尿中含有一定量的蛋白質(zhì),尤T-H39管型分類透明管型顆粒管型脂肪管型腎衰竭管型血紅蛋白管型蠟樣管型細胞管型管型分類透明管型40尿液干化學(xué)檢查分析課件41尿液干化學(xué)檢查分析課件42尿液干化學(xué)檢查分析課件43尿內(nèi)常見的結(jié)晶磷酸鹽類結(jié)晶--無色透明閃光,呈屋頂形或棱柱形。草酸鈣結(jié)晶--無色方形閃爍發(fā)光的八面體,有兩條對角線相互交叉,有時呈菱形。尿酸結(jié)晶--目視類似紅砂細粒,常沉積在容器底層。鏡下呈黃色或暗棕紅色的棱形、三棱形、長方形、斜方形、薔薇花瓣形的結(jié)晶體。尿內(nèi)常見的結(jié)晶磷酸鹽類結(jié)晶--無色透明閃光,呈屋頂形或棱柱形44尿液干化學(xué)檢查分析課件45尿液干化學(xué)檢查分析課件46尿液干化學(xué)檢查分析課件47病理性結(jié)晶胱氨酸結(jié)晶--無色、六邊形,邊緣清晰、折光性強的薄片狀結(jié)晶。亮氨酸結(jié)晶--淡黃色小球形油滴狀,折光性強,并有輻射及同心紋。酪氨酸結(jié)晶--呈無色細針狀或略帶黑色的細針狀結(jié)晶,常成束成團,堆積組合在一塊。
膽固醇結(jié)晶--為缺角的長方形或方形,無色透明。病理性結(jié)晶胱氨酸結(jié)晶--無色、六邊形,邊緣清晰、折光性強的薄48尿液干化學(xué)檢查分析課件49尿液干化學(xué)檢查分析課件50尿液干化學(xué)檢查分析課件51尿液干化學(xué)檢查分析課件52尿液干化學(xué)及沉渣鏡檢原理、影響因素和臨床意義尿液干化學(xué)及沉渣鏡檢原理、影響因素和臨床意義53一尿干化學(xué)概述1956年美國人發(fā)明了以葡萄糖氧化酶和過氧化物酶為基礎(chǔ)檢測葡萄糖的第一條“浸入即讀”的干化學(xué)試紙。發(fā)展到今天已經(jīng)成為一次可以測十幾個項目的多聯(lián)試紙帶。檢測手段也由目測發(fā)展到半自動、全自動。具有快速、簡便、用量少的優(yōu)點,但是同時也存在著影響因素多,檢測不精確等缺點。一尿干化學(xué)概述1956年美國人發(fā)明了以葡萄糖氧化酶和過氧化物54一、尿液酸堿度PH
原理:采用酸堿指示劑法。尿中pH可使試紙測定區(qū)中的甲基紅和溴麝香草酚藍兩種指示劑發(fā)生顏色改變,可表達pH5(黃色)~pH7(綠色)~pH9(藍色)的變色范圍。參考范圍PH4.5-8.0(隨機尿)方法學(xué)評價:尿標本必須新鮮,時間過長的尿液可滋生細菌,如變形桿菌等,可分解尿素產(chǎn)生氨,使尿液變堿;含過多碳酸氫鹽時并放置時間過久也可導(dǎo)致?lián)]發(fā),使酸度增高。測定具有一定的局限性:結(jié)果間隔大,每級間隔0.5;測定范圍小,從pH5~pH9,不適宜精確測定尿的酸堿度。但因攜帶方便,無需設(shè)備,檢查方便且便于實現(xiàn)自動化,適合于過篩試驗。一、尿液酸堿度PH
原理:采用酸堿指示劑法。尿中pH可使試紙55二、尿比重SG原理:采用多聚電解質(zhì)離子解離法。高分子電解質(zhì)—甲基乙烯基醚和順丁烯二酸的共聚體是弱酸性(—COOH基)離子交換體,而尿中含有以Nacl為主的電解質(zhì),在水中解離為Na+和cl-,可與離子交換體中的氫離子(H+)置換,在水溶液中放出H+。隨著尿液中不斷增加的H+濃度,使得指示劑溴麝香草酚藍的顏色發(fā)生改變。參考范圍:1.015-1.025方法學(xué)評價:其優(yōu)點是不受高濃度的葡萄糖、尿素、放射造影劑的影響,該方法靈敏度略低,只能按0.005的梯度色階表達結(jié)果,精密度差,測試范圍窄,并且受強酸強堿性尿和高蛋白質(zhì)尿的影響,不適宜小兒及腎臟濃縮稀釋功能嚴重減低者使用。不能作為評價腎功能變化的指標。二、尿比重SG56三、尿蛋白PRO原理:采用PH指示劑蛋白質(zhì)誤差的原理。在一定條件下(3.2時),由于蛋白質(zhì)離子對帶相反電荷指示劑(溴酚藍)離子吸引而造成溶液中指示劑進一步電離,當超越緩沖范圍時,可使指示劑改變顏色。方法學(xué)評價:對清蛋白的敏感性明顯高于球蛋白,不與血紅蛋白,本周蛋白和黏蛋白反應(yīng),因此陰性的結(jié)果并不能排除這些蛋白質(zhì)的存在。對清蛋白測定的敏感性約在0.15~0.30g/L?;鞚崮虿挥绊憸y定結(jié)果和判斷,但肉眼血尿、血紅蛋白尿、黃疸尿等顯著異常的尿色會影響到對結(jié)果的判別。該試驗方法對標本的酸堿性非常敏感。強酸性(pH<3)強堿性(PH>9),前者導(dǎo)致假陰性后者導(dǎo)致假陽性。含高濃度青霉素,慶大霉素、磺胺、含碘造影劑導(dǎo)致假陰性。如服用奎寧和嘧啶等藥物時,尿液可呈強堿性,超出了試劑帶本身的緩沖能力,可造成干化學(xué)法假陽性。含非那吡啶、聚乙烯吡咯酮、有機碘造影劑的尿樣、被某些清潔劑和消毒劑污染的尿標本會出現(xiàn)假陽性。三、尿蛋白PRO57四、葡萄糖
GLU原理:采用葡萄糖-過氧化酶法。尿中葡萄糖在試紙上的葡萄糖氧化酶催化下,與O2生成葡萄糖酸內(nèi)脂和過氧化氫,試紙上的過氧化物酶進一步將過氧化氫分解為水并放出新生態(tài)氧使色素原氧化產(chǎn)生顏色的變化,顏色深淺與葡萄糖濃度成正比。方法學(xué)評價:葡萄糖氧化酶法具有特異性強,靈敏度高(1.67~2.78mmol/L)。適用于常規(guī)及過篩檢查尿中的葡萄糖。而對乳糖、半乳糖、果糖等其他還原糖不發(fā)生反應(yīng)。高比重尿液可使尿葡萄糖反應(yīng)性減低。低糖高維C時,維C與試劑發(fā)生競爭性抑制反應(yīng),造成假陰性,如果使用了大劑量維生素治療,5h內(nèi)最好不要做尿糖檢查。尿酮體過高>500ml/L,尿液擱置時間過長,細菌分解也會引起假陰性。一些強氧化性物質(zhì)(漂白粉、次亞氯酸等)或尿比重過低時,會導(dǎo)致假陽性。四、葡萄糖
GLU原理:采用葡萄糖-過氧化酶法。尿中葡萄糖在58五、尿酮體KET原理:采用亞硝基鐵氰化鈉法。尿中的丙酮或乙酰乙酸與試紙上的亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng),產(chǎn)生淺紫色到深紫色變化。方法學(xué)評價:對乙酰乙酸的靈敏度為100ml/L,對丙酮的靈敏度為700ml/L,與B-羥丁酸不反應(yīng)。早期酮癥排出的B羥丁酸占酮體總量的78%,因而對早期酮癥檢出不敏感。由于丙酮和乙酰乙酸具有揮發(fā)性,故標本應(yīng)新鮮,最好在采集后30內(nèi)測定。肉眼血尿等有明顯顏色變異的尿和含大量左旋多巴代謝物、肌酐、肌酸的標本可出現(xiàn)假陽性。五、尿酮體KET59六、膽紅素BIL原理:以偶氮反應(yīng)為基本原理。在強酸介質(zhì)中膽紅素與重氮鹽發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),生成紅色偶氮化合物。方法學(xué)評價:過量的維c和亞硝酸鹽可抑制偶氮反應(yīng)而呈假陰性,而大量的氯丙嗪和高濃度的鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物在酸性條件下會呈假陽性反應(yīng)。尿標本保存不當,尿膽紅素遇光分解。六、膽紅素BIL60七、尿膽原URO原理:采用改良Ehrlich醛反應(yīng)法。在強酸性條件下,尿膽原與試紙中二氯苯胺重氮鹽產(chǎn)生偶聯(lián)反應(yīng),生成櫻紅色縮合物,試劑模塊發(fā)生黃色到紅色的改變。方法學(xué)評價:尿膽原排出后很容易氧化為尿膽素,故應(yīng)盡快測定。應(yīng)用大量抗生素、維生素和尿中含有高濃度亞硝酸鹽或甲醛時容易抑制試驗,出現(xiàn)假陰性結(jié)果。使用氯噻嗪類、非那吡啶類、對-氨基硫酸和磺胺等藥物時,可出現(xiàn)假陽性。七、尿膽原URO61八、亞硝酸鹽NIT原理:采用亞硝酸鹽還原法。尿中含有的亞硝酸鹽在酸性環(huán)境中先與對氨基苯磺酸反應(yīng),形成重氮鹽,再與α-萘胺結(jié)合而產(chǎn)生粉紅色偶氮化合物。方法學(xué)評價:尿液必須新鮮,無外界污染,最好用晨尿或在膀胱中潴留4h以上的尿液。出現(xiàn)陽性結(jié)果意味著尿液中細菌數(shù)量在10萬/ml以上。陰性結(jié)果并不表明尿液中無細菌,可能為非硝酸鹽還原性細菌引起的尿道感染;也可能為尿液在膀胱中潴留不足4h或飲食中缺乏硝酸鹽等情況。高比密尿液或含有大量維c的標本可減低反應(yīng)的敏感性。
八、亞硝酸鹽NIT62九、血紅蛋白BLD原理:采用紅細胞類過氧化物酶法。血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有過氧化物酶樣作用,可以催化過氧化氫放出新生態(tài)氧,進一步氧化指示劑而產(chǎn)生顏色變化。方法學(xué)評價:高濃度維c對試驗有抑制作用,導(dǎo)致結(jié)果偏低或假陰性;濃縮尿或高蛋白尿也可減低反應(yīng)的敏感性。清洗劑如次氯酸鹽和尿道中細菌產(chǎn)生的過氧化氫酶可能引起假陽性結(jié)果。試紙法可檢出微量血紅蛋白和破壞的紅細胞,而鏡檢法可能為“陰性”。結(jié)果配合顯微鏡檢查結(jié)果,并結(jié)合臨床資料進行分析,更有價值。
九、血紅蛋白BLD63十、白細胞LEU
原理:采用粒細胞酯酶法。中性粒細胞特異性地含有一種酯酶,而這種酯酶在紅細胞、淋巴細胞、血小板、血清、腎臟及上皮細胞中均不存在。試紙反應(yīng)基質(zhì)是吲哚酚酯,在酯酶作用下將其轉(zhuǎn)變?yōu)檫胚岱?再與重氮鹽發(fā)生反應(yīng),形成紫色縮合物。方法學(xué)評價:該試驗僅與尿液中的粒細胞反應(yīng),既可與完整的粒細胞反應(yīng),也可與膿細胞反應(yīng)以及破壞后的粒細胞所釋放出的酯酶成分反應(yīng)。當尿中出現(xiàn)以淋巴細胞或單核細胞為主的白細胞時,可呈陰性。尿中白細胞少于10~25/ul;尿中出現(xiàn)過高的葡萄糖、蛋白質(zhì)或高比重尿會造成反應(yīng)的敏感性減低或出現(xiàn)假陰性。尿中的先鋒霉素類藥物、乙哚酸、高濃度草酸、四環(huán)素等藥物都可使反應(yīng)的敏感性減低或出現(xiàn)假陰性。尿標本被陰道分泌物污染,或者尿中污染甲醛、在酸性尿環(huán)境中呈紅色或深色的藥物、食物。十、白細胞LEU
原理:采用粒細胞酯酶法。中性粒細胞特異性地64十一、維生素C維C具有1,2-烯二醇還原性基團,在酸性條件下將氧化態(tài)粉紅色的2,6二氯酚靛酚還原為無色的2,6-二氯二對酚胺。顏色由綠或深藍至粉紅。主要對隱血(≥90mg/L)膽紅素(≥250mg/L)亞硝酸鹽(≥250mg/L)葡萄糖(≥500mg/L)也會使白細胞檢測產(chǎn)生假陰性十一、維生素C維C具有1,2-烯二醇還原性基團,在酸性條件下65臨床意義目前尿液干化學(xué)分析一般都可同時獲得十幾項參數(shù)的結(jié)果??梢詫⒛承╉椖窟M行簡單組合,用于快速分析患者的尿檢情況,并根據(jù)出現(xiàn)陽性結(jié)果的具體內(nèi)容,初步判別患者的疾病情況。臨床意義目前尿液干化學(xué)分析一般都可同時獲得十幾項參數(shù)的結(jié)果。66比重、蛋白質(zhì)、紅細胞、白細胞一般會涉及泌尿系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)的疾病,這些項目中的一項或多項結(jié)果出現(xiàn)陽性,特別是蛋白質(zhì)和紅細胞同時出現(xiàn)陽性時,常見于一些與腎臟疾病有關(guān)的病理改變。如各種急慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎、各種病因造成的腎損傷、泌尿系腫瘤、結(jié)核,還可能與多發(fā)性骨髓瘤、自身免疫病、溶血疾病、高熱、中毒等有關(guān)。比重、蛋白質(zhì)、紅細胞、白細胞一般會涉及泌尿系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)的疾67白細胞、紅細胞、亞硝酸鹽主要涉及泌尿生殖系統(tǒng)的疾病。當白細胞或紅細胞出現(xiàn)陽性結(jié)果,或者亞硝酸出現(xiàn)陽性時,一般與泌尿系統(tǒng)感染及鄰近器官疾病有關(guān)。比如膀胱炎、腎盂腎炎、尿路結(jié)石、前列腺炎、尿道炎、盆腔炎、創(chuàng)傷等。白細胞、紅細胞、亞硝酸鹽主要涉及泌尿生殖系統(tǒng)的疾病。當白細胞68比重、葡萄糖、酮體這三項結(jié)果出現(xiàn)陽性,可能與內(nèi)泌系統(tǒng)疾病有關(guān),如糖尿病、腎性糖尿病、糖尿病酮癥、妊娠嘔吐、腹瀉、腦血管意外等。比重、葡萄糖、酮體這三項結(jié)果出現(xiàn)陽性,可能與內(nèi)泌系統(tǒng)疾病有關(guān)69膽紅素、尿膽原一項或兩項結(jié)果出現(xiàn)陽性,一般表示肝膽系統(tǒng)疾病,如病毒性肝炎、肝硬化、溶血性疾病膽石癥、膽管癌等。另外還可用于黃疸型疾病的鑒別斷:肝細胞性黃疸尿膽紅素和尿膽原都為陽性;而溶血黃疸只有尿膽原為陽性;阻塞性黃疸只有尿膽紅素呈性。膽紅素、尿膽原一項或兩項結(jié)果出現(xiàn)陽性,一般表示肝膽系統(tǒng)疾病,70PH、比重、維生素這三個項目不能單獨用于診斷但是可作為許多疾病的過篩試驗,臨床診斷價值不大。重要的是,它們可以對干化學(xué)試驗進行監(jiān)測。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時,有可能干擾尿蛋白、葡萄糖、紅細胞和白細胞測定的敏感性。檢驗人員在簽發(fā)檢驗結(jié)果時,應(yīng)注這些指標,是不是對測定的標本產(chǎn)生了干擾;如有干擾,要想辦法排除,并進行復(fù)查。PH>9:蛋白質(zhì)假陽性,PH<3:蛋白質(zhì)假陰性VitC(>500mg/L):可致葡萄糖假陰性,尿潛血假陰性,亞硝酸鹽假陰性,白細胞酯酶假陰性(具有抗VitC能力的試紙除外)比重:高比重尿會使尿亞硝酸鹽反應(yīng)敏感性降低,會使白細胞酯酶假陰性高蛋白尿(4+):可使白細胞酯酶假陰性PH、比重、維生素這三個項目不能單獨用于診斷但是可作為許多疾71二尿沉渣鏡檢
即尿液有形成分顯微鏡檢查二尿沉渣鏡檢72鏡檢方法用較弱光線,以低倍鏡將涂片全貌觀察一遍,然后,計數(shù)20個低倍視野所見的管型,10個高倍視野所見的各類細胞鏡檢方法用較弱光線,以低倍鏡將涂片全貌觀察一遍,然后,計數(shù)273報告方式1.分數(shù)報告法細胞成分:最低~最高/HPF管型成分:最低~最高/LPF2.加號報告法以有形成分占視野面積來判定,1/4視野為+,滿視野為++++。多用于細胞數(shù)極多和結(jié)晶、粘液絲、脂肪滴、細菌等的報告。3.定量報告法(/ml/ul)報告方式1.分數(shù)報告法2.加號報告法3.定量報告法(74鏡檢內(nèi)容細胞(RBC、WBC、上皮細胞、吞噬細胞)管型透明管型、細胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、結(jié)晶管型、細胞管型等結(jié)晶(常見結(jié)晶、病理性結(jié)晶)鏡檢內(nèi)容細胞(RBC、WBC、上皮細胞、吞噬細胞)75鏡檢內(nèi)容:紅細胞在未經(jīng)染色的新鮮尿沉渣中,紅細胞呈淡黃色,輕度反光,雙凹盤樣。在濃縮的高滲尿液中,紅細胞皺縮、變小、呈棘形。在稀釋或低滲尿液中,血紅蛋白逸出,紅細胞腫脹呈影細胞。鏡檢內(nèi)容:紅細胞在未經(jīng)染色的新鮮尿沉渣中,紅細胞呈淡黃色,輕76尿液干化學(xué)檢查分析課件77尿液干化學(xué)檢查分析課件78尿沉渣紅細胞參考值及血尿定義正常人:4~7/HPF可偶見一個紅細胞。肉眼血尿:每升尿液中含血量超過1ml,肉眼可見到不同程度混濁紅色的尿液。顯微鏡血尿:血液含量在0.1%以下,外觀無血色,鏡下紅細胞平均≥3/HPF的尿液。尿沉渣紅細胞參考值及血尿定義正常人:4~7/HPF可偶見一個79血尿分類均一紅細胞血尿:RBC外形及大小正常,形態(tài)較為一致。非均一紅細胞血尿:RBC大小不等,呈兩種以上的多形性變化。混合性血尿:以上兩組血尿的混合。血尿分類均一紅細胞血尿:RBC外形及大小正常,形態(tài)較為一致。80鏡檢內(nèi)容:白細胞白細胞:體積較RBC為大,呈圓球形,外形完整、無明顯退行性變,胞漿清楚、細胞漿內(nèi)顆粒清晰可見,常分散存在。膿細胞:死亡的中性粒細胞,外形不規(guī)則,結(jié)構(gòu)模糊,漿內(nèi)充滿粗大
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