2023年福建省龍巖市上杭縣高三下學(xué)期第一次聯(lián)考生物試卷含解析

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚，將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．已知一玉米植株的基因型為AABB，周圍雖生長有其他基因型的玉米植株，但其子代不可能出現(xiàn)的基因型是（）A．AABB B．AABb C．AaBb D．a(chǎn)aBb2．白蛋白是健康人血漿中含量最多的蛋白質(zhì)，白蛋白在肝細胞內(nèi)合成后，分泌進入血液循環(huán)而分布到身體各處。下列有關(guān)白蛋白的敘述中，正確的是A．白蛋白增多，會引起組織水腫 B．白蛋白減少，會使尿液量增多C．白蛋白減少，O2運輸能力減弱 D．白蛋白增多，機體免疫力增強3．葉綠體中存在具有編碼功能的cpDNA，這些cpDNA借助細胞核DNA編碼的酶系統(tǒng)合成多肽，用于光合作用的各個環(huán)節(jié)。下列敘述正確的是（）A．組成cpDNA的單體有5種B．葉綠體中有少量DNA，可以控制合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)C．葉綠體的功能不會受到細胞核DNA的調(diào)控D．核DNA編碼的酶不能進入葉綠體內(nèi)發(fā)揮催化作用4．如圖為受一對等位基因控制的某遺傳病的家族系譜圖。下列敘述正確的是（）A．若該病為伴X染色體隱性遺傳病，則Ⅲ代中女孩的患病率低于男孩的B．若該病為常染色體顯性遺傳病，則圖中個體共有3種基因型C．若該病為常染色體隱性遺傳病，則Ⅲ代中可能出現(xiàn)正常純合子D．若該病致病基因為位于性染色體同源區(qū)段的顯性基因，則Ⅲ代中不可能出現(xiàn)患病男孩5．“調(diào)控植物生長—代謝平衡實現(xiàn)可持續(xù)農(nóng)業(yè)發(fā)展”入選2018年度中國科學(xué)十大進展，其研究證實DELLA蛋白通過阻遏某些基因的轉(zhuǎn)錄從而抑制植物生長發(fā)育，而赤霉素能解除細胞中已經(jīng)存在的DELLA蛋白的阻遏效果。以下敘述不合理的是A．植物合成赤霉素的部位主要是未成熟的種子、幼根和幼芽B．植物生長—代謝的平衡是體內(nèi)基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果C．赤霉素通過抑制DELLA蛋白基因的表達解除其阻遏效果D．DELLA蛋白分子上可能存在具有不同生物學(xué)功能的區(qū)域6．用PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因植株是否成功導(dǎo)入目的基因時，得到以下電泳圖譜，其中1號為DNA標準樣液（Marker），10號為蒸餾水。PCR時加入的模板DNA如圖所示。據(jù)此做出分析不合理的是A．PCR產(chǎn)物的分子大小在250至500bp之間B．3號樣品為不含目的基因的載體DNAC．9號樣品對應(yīng)植株不是所需的轉(zhuǎn)基因植株D．10號的電泳結(jié)果能確定反應(yīng)體系等對實驗結(jié)果沒有干擾二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）科研小組欲將擬南芥的某種抗病基因?qū)敕鸭毎@得抗病植株。請回答：（1）利用PCR技術(shù)大量擴增擬南芥抗病基因的原理是_____________，擴增該抗病基因的前提是_____________。（2）將抗病基因插入到Ti質(zhì)粒的_____________上，通過_____________的轉(zhuǎn)化作用使抗病基因進入番茄細胞。（3）將含抗病基因的番茄細胞培育為抗病植株的原理是_____________。（4）將含目的基因的DNA探針與轉(zhuǎn)基因番茄提取出來的mRNA進行雜交，顯示出雜交帶，并不能說明轉(zhuǎn)基因番茄具有抗病特性，理由是_____________。（5）為避免抗病基因通過花粉進入其他植物而導(dǎo)致“基因污染”，應(yīng)將抗病基因?qū)氲絖____________（填“細胞核”或“細胞質(zhì)”）。8．（10分）果蠅（2n=8）羽化（從蛹變蠅）的時間約24h。已知染色體上同一位置的基因A1、A2和A3分別控制羽化時間24h、19h和29h，但無法確定這三個基因的顯隱性關(guān)系。現(xiàn)用一只羽化時間19h的雌蠅和一只羽化時間24h的雄蠅雜交，F(xiàn)1的羽化時間為24h∶19h∶29h=2∶1∶1。回答下列問題：（1）控制果蠅羽化時間的基因有A1、A2和A3三種，這說明基因突變具有_________性，這些基因遵循__________定律。（2）根據(jù)以上數(shù)據(jù)，無法確定控制羽化時間的基因是位于常染色體上，還是位于X染色體上，可通過統(tǒng)計_________________________________________________________來確定。若統(tǒng)計結(jié)果為_________________，則說明控制羽化時間的基因位于X染色體上，否則位于常染色體上。（3）若A1、A2、A3基因位于常染色體上，則它們的顯隱性關(guān)系是_________________，親本雄蠅的基因型是___________。9．（10分）類產(chǎn)堿假單胞菌殺蟲蛋白不易被蝗蟲體內(nèi)蛋白酶降解，是一種安全的細菌殺蟲蛋白。某研究小組將類產(chǎn)堿假單胞菌殺蟲蛋白基因（ppip）導(dǎo)入牧草中獲得了抗蝗蟲牧草品種。（1）ppip基因，還有一些抗病基因，抗除草劑基因等都是用來提高植物的_______能力。該研究小組檢查基因工程是否做成功的一步是_______________，其中目的基因能否在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是________。（2）下圖是該研究小組設(shè)計的T-DNA元件示意圖。①攜帶ppip的T-DNA導(dǎo)入植物細胞的方法是_____________；T-DNA發(fā)揮的功能是_____________________。②將被檢材料用含有底物（X-Gluc）的緩沖液浸泡，若組織細胞表達出GUS，該酶就可將X-Gluc水解生成藍色產(chǎn)物，從而使被檢材料顯藍色。如下圖所示。研究發(fā)現(xiàn)天然植物體內(nèi)無GUS，根據(jù)T-DNA元件示意圖，請思考gus基因（β-葡萄糖苷酸酶基因）在植物基因表達載體中作為___________；選取該基因的原理是____________________。10．（10分）請回答基因工程相關(guān)問題：（1）限制酶切割DNA分子時，斷裂的是___________鍵?為了保證目的基因與載體的正確連接，通常用兩種_________________________________不同的限制酶同時處理含目的基因的DNA片段與載體?（2）若要通過反轉(zhuǎn)錄得到胰島素基因，可從人體的___________細胞中提取mRNA?提取mRNA時，在提取液中一般要加入RNA酶抑制劑，其目的是______________________?若要在體外得到大量胰島素基因，可采用______________________技術(shù)，該技術(shù)過程中設(shè)計引物時______________________（填“需要”或“不需要”）知道胰島素基因的全部序列?（3）將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，大腸桿菌本身___________（填“含有”或“不含有”）質(zhì)粒?一般情況下不能用未經(jīng)處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是______________________。11．（15分）自2019年底被發(fā)現(xiàn)始，僅僅三個月的時間，新型冠狀病毒（2019-nCoV）迅速蔓延并已肆虐全球，嚴重威脅到人類的身體健康與生命安全。研制疫苗是預(yù)防感染新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）最為有效的解決方案，是終結(jié)疫情最有力的科技武器。經(jīng)過幾十年的努力疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代。第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗，通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；第二代疫苗又稱為亞單位疫苗，是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；第三代疫苗就是核酸疫苗，又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。分析回答下列問題。（1）從細胞的生命歷程來說，被感染的宿主細胞的清除過程屬于________，該清除過程有利于_____________________________。（2）2019-nCoV初次侵入人體后，參與該過程的免疫細胞有____________________（至少答出4種），它們直接生活的人體內(nèi)環(huán)境主要是________。當2019-nCoV再次侵入時，____________會增殖分化形成漿細胞，產(chǎn)生大量抗體予以消滅。（3）今年2月份，國家衛(wèi)健委介紹了研制新冠病毒疫苗的五條技術(shù)路線。其中腺病毒載體疫苗是將S蛋白（2019-nCoV的刺突蛋白）的基因裝入改造后無害的腺病毒，送入人體，在體內(nèi)產(chǎn)生S蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體。腺病毒載體疫苗應(yīng)屬于第______代疫苗。與第一代疫苗相比，基因疫苗的特點是_____________________。（4）DNA和mRNA能夠成為疫苗的理論基礎(chǔ)是_________________________。DNA疫苗需要經(jīng)過________才能引起免疫反應(yīng)。在基因疫苗中，________的安全性更有優(yōu)勢，它可以被正常細胞降解，不會整合到人體細胞的基因組中造成難以預(yù)料的果而備受人們青睞；另外，它的研發(fā)僅需6~8周即可進入臨床試驗，較傳統(tǒng)疫苗的5~6月的研發(fā)周期明顯縮短，對快速應(yīng)對大規(guī)模爆發(fā)性傳染疾病具有重要的意義。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

本題考查自由組合定律中的雜交組合，可以根據(jù)雜交組合中的遺傳圖解進行解答，或者根據(jù)產(chǎn)生的配子進行判斷，再根據(jù)選項進行合理的推測得出正確的答案?！驹斀狻緼、AABB×AABB→AABB，所以子代可能會出現(xiàn)AABB的基因型，A正確；

B、AABB×AAbb→AABb，所以子代可能會出現(xiàn)AABb的基因型，B正確；C、AABB×aabb→AaBb，所以子代可能會出現(xiàn)AaBb的基因型，C正確；D、由于AABB個體產(chǎn)生的配子是AB，所以后代的基因型中肯定會出現(xiàn)A和B的基因，后代不會有aaBb的個體，D錯誤。故選D。2、B【解析】

A、白蛋白增多，血漿的滲透壓增多，組織液減少，不會引起組織水腫，A錯誤；

B、白蛋白減少，血漿滲透壓下降，抗利尿激素分泌減少，尿液增多，B正確；

C、白蛋白沒有運輸氧氣的能力，C錯誤；

D、白蛋白的主要作用是維持血漿滲透壓，不參與免疫調(diào)節(jié)，D錯誤．3、B【解析】

葉綠體是具有雙層膜結(jié)構(gòu)的細胞器，其含有少量的DNA，是半自主性的細胞器，其含有的cpDNA具有編碼功能，借助細胞核DNA編碼的酶系統(tǒng)合成多肽，用于光合作用的各個環(huán)節(jié)?！驹斀狻緼、組成cpDNA的單體是四種脫氧核苷酸，A錯誤；B、葉綠體中有少量DNA，可以控制合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，B正確；C、根據(jù)以上分析可知，葉綠體的功能受自身DNA和細胞核DNA的調(diào)控，C錯誤；D、根據(jù)以上分析可知，核DNA編碼的酶能進入葉綠體內(nèi)發(fā)揮催化作用，D錯誤。故選B。4、D【解析】

遺傳規(guī)律：1、“無中生有”為隱性，隱性遺傳看女病，女病男正非伴性，為常染色體隱性遺傳；2、“有中生無”為顯性，顯性遺傳看男病，男病女正非伴性，為常染色體顯性遺傳?！驹斀狻緼、若該病為伴X染色體隱性遺傳病，在人群中女孩患病率低于男孩，但由于該家族Ⅲ代中個體數(shù)目較少，所以女孩患病率不一定低于男孩，A錯誤；B、若該病為常染色體顯性遺傳病，則圖中個體的基因型只有Aa和aa兩種，B錯誤；C、若該病為常染色體隱性遺傳病，由于Ⅱ2、Ⅱ３有病，為aa，則Ⅲ1及第三代正常個體的基因型均是Aa，一定攜帶致病基因，C錯誤；D、若該病致病基因為位于性染色體同源區(qū)段的顯性基因，由于Ⅱ2和Ⅱ3的基因型為XAYa，且正常女性的基因型為XaXa，則Ⅲ代中不可能出現(xiàn)患病男孩，D正確。故選D?！军c睛】識記幾種常見的人類遺傳病的類型及特點，能根據(jù)系譜圖推斷該遺傳病可能的遺傳方式，再結(jié)合所學(xué)的知識準確判斷各選項即可。5、C【解析】【分析】赤霉素主要是未成熟的種子、幼根和幼芽促進細胞伸長，從而引起植株增高；促進種子萌發(fā)和果實發(fā)育促進矮生性植物莖稈伸長；解除種子休眠，提早用來播種細胞分裂素主要是根尖促進細胞分裂和組織分化蔬菜貯藏中，常用它來保持蔬菜鮮綠，延長貯藏時間乙烯廣泛存在于多種植物的

組織中，成

熟的果實中

更多促進果實成熟促進香蕉、鳳梨等果實成熟脫落酸根冠、萎蔫的葉片等，

將要脫落的

器官和組織

中含量多抑制細胞分裂，抑制植物的生長，也能抑制種子的萌發(fā)；促進葉和果實的衰老和脫落落葉或棉鈴在未成熟前的大量脫落【詳解】植物合成赤霉素的部位主要是未成熟的種子、幼根和幼芽，A正確；植物生長—代謝的平衡從根本上是受到體內(nèi)基因控制調(diào)節(jié)的結(jié)果，除外還受到環(huán)境作用的影響，B正確；赤霉素能解除細胞中已經(jīng)存在的DELLA蛋白的阻遏效果?？梢姵嗝顾夭⒉荒芤种艱ELLA蛋白基因的表達，C錯誤；DELLA蛋白通過阻遏某些基因的轉(zhuǎn)錄從而抑制植物生長發(fā)育。赤霉素能解除細胞中已經(jīng)存在的DELLA蛋白的阻遏效果，可見DELLA蛋白分子上可能存在具有不同生物學(xué)功能的區(qū)域，D正確。6、B【解析】

PCR過程中，可以通過設(shè)計特定的引物來擴增特定的DNA片段。4～9號是轉(zhuǎn)基因植株，理論上應(yīng)包含目的基因。9號PCR結(jié)果不包含250～500bp片段，所以不是所需轉(zhuǎn)基因植株?！驹斀狻緼、PCR過程中，可以通過設(shè)計特定的引物來擴增特定的DNA片段。4～9號是轉(zhuǎn)基因植株，理論上應(yīng)包含目的基因，結(jié)合2號野生型和10號蒸餾水組的結(jié)果，推測包含目的基因的片段大小應(yīng)為250～500bp，A正確；

B、3號PCR結(jié)果包含250～500bp片段，應(yīng)包含目的基因，B錯誤；

C、9號PCR結(jié)果不包含250～500bp片段，所以不是所需轉(zhuǎn)基因植株，C正確；

D、10號放入蒸餾水，可排除反應(yīng)體系等對結(jié)果的干擾，由圖可知，10號的電泳結(jié)果能確定反應(yīng)體系等對實驗結(jié)果沒有干擾，D正確。

故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、DNA（雙鏈）復(fù)制要有一段已知目的基因的核苷酸序列（以便根據(jù)這一序列合成引物）（“制備相應(yīng)引物”）T-DNA農(nóng)桿菌（植物）細胞全能性需進行個體生物學(xué)水平鑒定才能確定轉(zhuǎn)基因番茄是否具有抗病特性（或DNA探針與mRNA顯示出雜交帶只能說明抗病基因轉(zhuǎn)錄出對應(yīng)的mRNA，無法說明轉(zhuǎn)基因番茄具有抗病特性，或?qū)嶒灲Y(jié)果不能說明目的基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，因此不能說明該植株是否有抗性）細胞質(zhì)【解析】

獲取目的基因的方法之一是PCR擴增，原理為DNA的復(fù)制，需要條件有模板DNA、引物、四種脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定DNA聚合酶。將目的基因?qū)氲绞荏w細胞時常常使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其過程為將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，后轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細胞，使其整合到受體細胞的染色體DNA上，最后表達?！驹斀狻浚?）PCR技術(shù)大量擴增目的基因的原理是DNA復(fù)制；使用PCR技術(shù)擴增的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；（2）使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時，一般將抗病基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上；后轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，通過其轉(zhuǎn)化作用讓抗病基因?qū)胫参锛毎?；?）將一個已經(jīng)分化的細胞培育成一個植株，利用的原理是植物細胞具有全能性；（4）目的基因的檢測中，一般需要檢測目的基因的表達產(chǎn)物，將含目的基因的DNA探針與轉(zhuǎn)基因番茄提取出來的mRNA進行雜交，若出現(xiàn)雜交帶，只能證明抗病基因轉(zhuǎn)錄出對應(yīng)的mRNA，無法說明轉(zhuǎn)基因番茄具有抗病特性，或?qū)嶒灲Y(jié)果不能說明目的基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)；（5）花粉細胞主要是植物的精子，精子中細胞質(zhì)非常少，一般精子與其它細胞融合時提供的細胞質(zhì)很少，所以為避免抗病基因通過花粉進入其他植物而導(dǎo)致“基因污染”，可以將其導(dǎo)入到細胞質(zhì)中。【點睛】該題重點考察了基因工程的相關(guān)操作，其中目的基因的檢測一般有四個層面，主要為：8、不定向性基因的分離F1中羽化時間為19h和29h的果蠅的性別比例都是雄性或（F1中羽化時間為24h的果蠅的性別比例都是雌性）A1對A2、A3顯性，A2對A3顯性A1A3【解析】

1、基因分離定律的實質(zhì)：在減數(shù)分裂形成配子的過程中，等位基因會隨同源染色體的分開而分離，分別進入到兩個配子中，獨立地隨配子遺傳給后代。2、若控制該性狀的基因位于常染色體上，則一只羽化時間為19h的雌果蠅（基因型為A2_）和一只羽化時間為24h的雄果蠅（基因型為A1_）雜交，F(xiàn)1的羽化時間為24h（基因型為A1_）∶19h（基因型為A2_）∶29h（基因型為A3_）=2∶1∶1，說明親本雄果蠅的基因型為A1A3，雌果蠅的基因型為A2A3?！驹斀狻浚?）控制果蠅羽化時間的基因有A1、A2和A3三種，這說明基因突變具有不定向性，這些等位基因位于同源染色體上，遵循基因的分離定律。（2）性狀的遺傳是否是伴性遺傳，可以通過統(tǒng)計分析子代的性別比例來判斷，如果基因位于性染色體上，表現(xiàn)為伴性遺傳，則子代中的性狀與性別有關(guān)，如果基因位于常染色體上，則子代中雌雄表現(xiàn)型是一樣的，所以通過統(tǒng)計F1中羽化時間為19h和29h的果蠅的性別比例來確定控制羽化時間的基因是位于常染色體上，還是位于X染色體上，若統(tǒng)計結(jié)果為都是雄性，則說明控制羽化時間的基因位于X染色體上，否則位于常染色體上。（3）若A1、A2、A3基因位于常染色體上，則它們的顯隱性關(guān)系是A1對A2、A3顯性，A2對A3顯性，由此可以判斷，親本雄果蠅的基因型為A1A3，雌果蠅的基因型為A2A3?！军c睛】本題考查了基因分離定律的有關(guān)知識，要求考生題干信息判斷基因的顯隱性關(guān)系以及親本的基因型，并對選項作出準確的判斷，屬于考綱識記和理解層次的考查。9、抗逆目的基因的檢測與鑒定檢測轉(zhuǎn)基因生物DNA上是否插入了目的基因農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將攜帶的ppip轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞染色體的DNA上標記基因天然植物體內(nèi)無GUS，不能催化X-Gluc產(chǎn)生藍色產(chǎn)物；若目的基因成功導(dǎo)入受體細胞，與其相連的標記基因表達的GUS可催化X-Gluc產(chǎn)生藍色產(chǎn)物。因此可以通過有無藍色產(chǎn)物來鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細胞?！窘馕觥?/p>

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得，真核基因是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。第二步：基因表達載體的構(gòu)建第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞，常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等；將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)。第四步：目的基因的檢測和表達?！驹斀狻浚?）ppip是一種殺蟲蛋白，使植株具有抗蟲的特性，和抗病基因，抗除草劑基因等都是用來提高植物的抗逆能力；基因工程是否成功的第一步是目的基因的檢測與鑒定；目的基因在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是檢測轉(zhuǎn)基因生物DNA上是否插入了目的基因。（2）①將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄍǔＪ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，T-DNA將攜帶的ppip轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞染色體的DNA上②由于GUS可以將X-Gluc水解生成藍色產(chǎn)物，所以gus基因在運載體中作為標記基因，其原因天然植物體內(nèi)無GUS，不能催化X-Gluc產(chǎn)生藍色產(chǎn)物；若目的基因成功導(dǎo)入受體細胞，與其相連的標記基因表達的GUS可催化X-Gluc產(chǎn)生藍色產(chǎn)物。因此可以通過有無藍色產(chǎn)物來鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細胞?！军c睛】本題考查基因工程的操作步驟，考生需要識記基因工程的基本操作程序，重點是對標記基因的理解。10、磷酸二酯識別序列和切割位點胰島B防止mRNA（RNA）被降解PCR不需要不含有未經(jīng)處理的大腸桿菌吸收外源DNA的能力較弱【解析】

1、限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。2、PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制，需要的條件有：模板DNA（目的基因所在的DNA片段）、原料（四種脫氧核苷酸）、一對引物（單鏈的脫氧核苷酸序列）、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）?！驹斀狻浚?）根據(jù)限制酶的作用可知，限制酶切割DNA分子時，斷裂的是磷酸二酯鍵?由于同種限制酶切割得到的目的基因或質(zhì)粒的兩端黏性末端相同，會出現(xiàn)自體相連的現(xiàn)象，所以為了保證目的基因與載體的正確連接，通常用兩種識別序列和切割位點不同的限制酶同時處理含目的基因的DNA片段與載體?（2）由于胰島素基因只在胰島B細胞中表達，所以若要通過反轉(zhuǎn)錄得到胰島素基因，可從人體的胰島B細胞中提取mRNA?提取mRNA時，在提取液中一般要加入RNA酶抑制劑，其目的是防止mRNA（RNA）被降解。可采用PCR技術(shù)在體外擴增目的基因。在利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，只需要一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，而不需要知道胰島素基因的全部序列?（3）質(zhì)粒上的抗性基因一般用作標記基因，為了便于篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，在將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，所選的大腸桿菌本身一般不含有質(zhì)粒?若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱，常用Ca2+處理使之成為易于吸收外源DNA的感受態(tài)細胞?！军c