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文檔簡介
M:morphology,形態(tài)學(xué)
I:immunology,免疫學(xué)
C:cytogenetics,細(xì)胞遺傳學(xué)
M:molecularbiology,分子生物學(xué)
(moleculargenetics,分子遺傳學(xué))M:morphology,形態(tài)學(xué)
I:immunoloM:morphology,形態(tài)學(xué)(FAB分型)
髓系(acutenonlymphocyticleukemia,ANLL;acutemyeloidleukemia,AML)
(M0:急性髓細(xì)胞白血病微分化型) M1:急性原粒細(xì)胞白血病未分化型 M2:急性原粒細(xì)胞白血病部分分化型 M3:急性早幼粒細(xì)胞白血病 M4:急性粒-單核細(xì)胞白血病 M5:急性單核細(xì)胞白血病 M6:急性紅白血病 M7:急性巨核細(xì)胞白血病淋系(acutelymphocyticleukemia,ALL) L1:原幼淋巴細(xì)胞以小細(xì)胞為主 L2:原幼淋巴細(xì)胞以大細(xì)胞為主 L3:大細(xì)胞為主,細(xì)胞質(zhì)多,深藍(lán),蜂窩狀M:morphology,形態(tài)學(xué)(FAB分型)
髓系(acuI:immunology,免疫學(xué)I:immunology,免疫學(xué)流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件TypeofcellCDmarkersstemcellsCD34+,CD31-allleukocytegroupsCD45+GranulocyteCD45+,CD15+,CD24+,CD114+,CD182+MonocyteCD45+,CD14+,CD114+,CD11a,CD91+TlymphocyteCD45+,CD3+ThelpercellCD45+,CD3+,CD4+TregulatorycellCD4,CD25,andFoxp3CytotoxicTcellCD45+,CD3+,CD8+BlymphocyteCD45+,CD19+orCD45+,CD20+,CD24+ThrombocyteCD45+,CD61+NaturalkillercellCD16+,CD56+,CD3-,CD31,CD30TypeofcellCDmarkersstemcelC:cytogenetics,細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析(chromosomekaryotyping)C:cytogenetics,細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析(cM:molecularbiology,分子生物學(xué)
moleculargenetics,分子遺傳學(xué)基因突變(genemutations)
融合基因(fusiongenes)
BCR-ABL TEL-AML1
M:molecularbiology,分子生物學(xué)
流式細(xì)胞術(shù)FlowCytometry,F(xiàn)CM流式細(xì)胞術(shù)FlowCytometry,F(xiàn)CM檢測信號及意義:FSC/SSC二維點圖(dotplot)中性粒細(xì)胞單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞閾值細(xì)胞碎片檢測信號及意義:FSC/SSC二維點圖(dotplot)流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件二、數(shù)據(jù)解釋及報告1.定性的描述(陽性或陰性)2.評估抗原表達(dá)強度3.區(qū)分弱陽性和陰性群體運用流式分析造血細(xì)胞的抗原表達(dá)情況,遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于對形態(tài)學(xué)結(jié)果的簡單證實,能夠提供大量的信息,可能幫助形態(tài)學(xué)確認(rèn)某些診斷,也可能提出之前沒有考慮的診斷;在一些典型表現(xiàn)下,流式免疫分型可以在其他方法的輔助之下診斷疾病。
但是,流式免疫分型結(jié)果的解釋應(yīng)與臨床、形態(tài)學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)等其他方法結(jié)合使用,綜合考慮,做出疾病的診斷與分類。二、數(shù)據(jù)解釋及報告1.定性的描述(陽性或陰性)運正常血細(xì)胞發(fā)育過程的抗原表達(dá)規(guī)律按《WHO造血和淋巴組織腫瘤分類》(2008年版)正常血細(xì)胞發(fā)育過程的抗原表達(dá)規(guī)律按《WHO造血和淋巴組織腫瘤流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件WoodB,etc(2007)WoodB,etc(2007)急性白血病的免疫表型急性白血病的免疫表型流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件急性髓細(xì)胞白血病的免疫表型急性髓細(xì)胞白血病的免疫表型流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件劉艷榮,等(2010)劉艷榮,等(2010)流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件急性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型急性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件急性系列不明型白血病的免疫表型急性系列不明型白血病的免疫表型流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件慢性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型慢性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型一、CLL的免疫表型特點一、CLL的免疫表型特點二、FCM檢測CLL的預(yù)后指標(biāo)ZAP-70ZAP-70+CLL預(yù)后不好。CD38是CLL疾病侵襲的重要標(biāo)志,CD38+B-CLL患者預(yù)后不好。二、FCM檢測CLL的預(yù)后指標(biāo)ZAP-70ZAP-7三、鑒別單克隆B淋巴細(xì)胞增多癥單克隆B淋巴細(xì)胞增多癥(MBL)指健康個體外周血中存在低水平的單克隆性B淋巴細(xì)胞增多。三、鑒別單克隆B淋巴細(xì)胞增多癥單克隆B淋巴細(xì)胞增多四、鑒別診斷
CLL是以外周血及骨髓中成熟的淋巴細(xì)胞增多為主要臨床特點的惡性疾病。除了CLL,還包括其他多種生物學(xué)上完全不同的成熟B淋巴細(xì)胞腫瘤。正確鑒別將有助于預(yù)后評估和治療方案的選擇。四、鑒別診斷CLL是以外周血及骨髓中成熟的淋巴細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件免疫分型的抗體組合原則免疫分型的抗體組合原則一、常用抗體
白細(xì)胞分化抗原(leukocytedifferentiationantigen)是指血細(xì)胞在分化成熟為不同譜系、不同階段及細(xì)胞活化過程中,出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)記分子。1982年,國際統(tǒng)一使用分化群(clusterofdifferentiation,CD)作為白細(xì)胞分化抗原和相應(yīng)單克隆抗體的命名,CD分子在流式細(xì)胞術(shù)的血液學(xué)應(yīng)用中發(fā)揮著重要作用。CD1a
表達(dá)于皮質(zhì)胸腺細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和Langerhans細(xì)胞,主要用于T淋巴細(xì)胞白血病及淋巴瘤的免疫分型。表達(dá)CD1a的T-ALL為皮質(zhì)型。CD2
泛T細(xì)胞標(biāo)志,表達(dá)于T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和大多數(shù)NK細(xì)胞上。急性T淋巴細(xì)胞白血病(acuteTlymphoblasticleukemia,T-ALL)、成熟T細(xì)胞增生異常性疾病、急性雙表型白血病、原始NK細(xì)胞淋巴瘤/白血病、肥大細(xì)胞白血病及少部分急性髓細(xì)胞白血?。╝cutemyeloidleukemia,AML),尤其是變異性急性早幼粒細(xì)胞白血?。╝cutepromyelocyticleukemia,APL)中有CD2表達(dá)。CD3
表達(dá)于T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和NK細(xì)胞。是T細(xì)胞增值性疾病中最特異的標(biāo)志,在成熟和部分初始T細(xì)胞中均有表達(dá)。胞漿CD3(cCD3)在初始T細(xì)胞(前胸腺細(xì)胞)上表達(dá),胸腺細(xì)胞表達(dá)胞漿和(或)膜表面CD3(mCD3)。前體T細(xì)胞腫瘤通常不表達(dá)mCD3,但cCD3為陽性。免疫分型的抗體組合原則一、常用抗體白細(xì)胞分化抗原(leukocyteCD4
表達(dá)于輔助性T淋巴細(xì)胞、外周血單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞。大多數(shù)外周血T細(xì)胞淋巴瘤、部分AML、慢性粒單核細(xì)胞白血?。╝cutemyelomonocyticleukemia,CMML)、急性單核細(xì)胞白血?。ˋML-M4/M5)、APL和組織細(xì)胞腫瘤中伴有CD4表達(dá)。少部分T-ALL中有CD4限制性表達(dá),大多數(shù)T-ALL同時表達(dá)CD4、CD8或者兩者同時為陰性。CD5
主要表達(dá)于胸腺細(xì)胞、成熟T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞亞型。作為一個泛T細(xì)胞抗原,CD5可表達(dá)于成熟或不成熟T細(xì)胞增值性疾病中,包括T-ALL。在腫瘤性T細(xì)胞發(fā)育過程中,CD5容易丟失。正常人外周血和淋巴組織中存在CD5+B細(xì)胞,兒童及年輕患者更多見。CD5主要表達(dá)于慢性淋巴細(xì)胞白血?。˙-cellchroniclymphocyticleukemia,B-CLL)、小淋巴細(xì)胞淋巴瘤(smallcelllymphocytelymphoma,SLL)和套細(xì)胞淋巴瘤(mantlecelllymphoma,MCL)。少部分彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(diffuselargeB-celllymphoma,DLBCL)表達(dá)CD5,而且原發(fā)性CD5+DLBCL預(yù)后較CD5-DLBCL更差。CD7
主要表達(dá)于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和多能干細(xì)胞。在T細(xì)胞發(fā)育過程中,CD7是最早出現(xiàn)的T細(xì)胞標(biāo)志,且貫穿表達(dá)于整個T細(xì)胞分化發(fā)育過程中。在外周T細(xì)胞異常性疾病中,CD7通常表達(dá)異常、減弱或消失。T-ALL中CD7陰性表達(dá)者僅占2%。此外,CD7還可表達(dá)于原始NK細(xì)胞淋巴瘤/白血病和AML,而APL和B系淋巴增值性疾病中,CD7表達(dá)多為陰性。免疫分型的抗體組合原則CD4表達(dá)于輔助性T淋巴細(xì)胞、外周血單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和CD8
表達(dá)于殺傷性或抑制性T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和某些NK細(xì)胞上。大部分大顆粒T淋巴細(xì)胞白血?。═-largegranularlymphocyteleukemia,T-LGL)和腸型淋巴瘤、少部分外周T細(xì)胞增值性疾病表達(dá)CD8。極少T-ALL表達(dá)CD8,而CD4陰性。CD9
表達(dá)于單核細(xì)胞、前B細(xì)胞亞群、激活的T細(xì)胞、嗜酸與嗜堿性粒細(xì)胞、血小板,主要用于急性白血病免疫分型及微量殘留病的檢測。CD10
又名急性淋巴細(xì)胞白血病共同抗原(commonacutelymphoblasticleukemiaantigen,CALLA),表達(dá)于前B、前T淋巴細(xì)胞、生發(fā)中心B細(xì)胞和成熟粒細(xì)胞絕大多數(shù)急性B淋巴細(xì)胞白血?。˙-ALL)、少數(shù)T-ALL、多數(shù)濾泡性淋巴瘤(follicularlymphoma,F(xiàn)L)、部分DLBCL和Burkitt淋巴瘤、少數(shù)AML-M5中有CD10表達(dá)。成熟粒細(xì)胞缺乏CD10的表達(dá)常常與骨髓增生異常綜合征(myelodysplasia,MDS)相關(guān)。在FL和DLBCL中,CD10+者預(yù)后更好。CD11b
表達(dá)在單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和部分NK細(xì)胞上,成熟B和T細(xì)胞不表達(dá)。部分急性髓細(xì)胞白血病表達(dá)CD11b,常代表單核細(xì)胞的分化,AML-M0、M1和M2很少表達(dá)。APL通常也是CD11b陰性。常用CD11b觀察MDS中單核和粒細(xì)胞的發(fā)育分化。CD11c
單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞中強表達(dá),粒細(xì)胞中表達(dá)強度較低,正常激活的CD8+細(xì)胞也可表達(dá)。CD11c強表達(dá)式毛細(xì)胞白血?。╤airycellleukemia,HCL)和AML-M5的典型特征。其他惡性血液病,包括B-CLL,邊緣帶B細(xì)胞淋巴瘤(marginalzoneB-celllymphoma,MZL)、除APL外的其他AML也有CD11c的弱表達(dá)。免疫分型的抗體組合原則CD8表達(dá)于殺傷性或抑制性T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和某些NKCD13
表達(dá)于粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及其前體細(xì)胞上。CD13數(shù)全粒細(xì)胞分子,不同發(fā)育階段的所有粒系細(xì)胞均有表達(dá)。大多數(shù)AML和5%~15%ALL可表達(dá)CD13。CD14
是成熟單核細(xì)胞的最好標(biāo)志,大多數(shù)CMML和AML-M4中的單核細(xì)胞強表達(dá)CD14;AML-M5中,原單和幼單細(xì)胞通常為CD14陰性或弱表達(dá)。正常粒細(xì)胞CD14陰性,但慢性增值性疾病,如CML或真性紅細(xì)胞增多癥(polycythemiavera,PV)中的粒細(xì)胞部分有CD14的表達(dá)上調(diào)。CD15
除原粒細(xì)胞外的所有粒細(xì)胞、多數(shù)單核細(xì)胞、少數(shù)巨核細(xì)胞和組織細(xì)胞表達(dá)CD15。CML、部分AML和大多數(shù)經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤(Hodgkinlymphoma,HL)表達(dá)CD15。CD16
表達(dá)于正常的粒細(xì)胞、NK細(xì)胞和大顆粒T細(xì)胞上。T-LGL、NK細(xì)胞增生、肝脾T細(xì)胞淋巴瘤和部分單核系腫瘤中常表達(dá)CD16,而原粒細(xì)胞和典型APL細(xì)胞中CD16陰性。粒細(xì)胞發(fā)育異常時常可見CD16表達(dá)下調(diào)。CD19
表達(dá)于B系細(xì)胞核濾泡狀樹突細(xì)胞上,成熟和不成熟B系腫瘤中均表達(dá)CD19,良性漿細(xì)胞、少數(shù)惡性漿細(xì)胞也可見CD19的表達(dá),部分AML表達(dá)CD19,常與t(8;21)相關(guān)。免疫分型的抗體組合原則CD13表達(dá)于粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及其前體細(xì)胞上。CD13數(shù)CD20
表達(dá)前B細(xì)胞晚期和成熟B細(xì)胞上,但前體細(xì)胞和終末漿細(xì)胞不表達(dá)。CD20出現(xiàn)在免疫球蛋白(Ig)輕鏈基因重排和表面Ig表達(dá)之間的B細(xì)胞表面。多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)表達(dá)CD20者預(yù)后不好。CD22
為泛B細(xì)胞標(biāo)志,其表達(dá)與CD22抗體所標(biāo)記的熒光素有直接關(guān)系。利用CD22-PE抗體,可以發(fā)現(xiàn)CD22表達(dá)于B細(xì)胞分化的早期,在成熟期表達(dá)強度增加。而利用CD22-FITC抗體,只能發(fā)現(xiàn)在成熟的B細(xì)胞表面CD22陽性,此時表面CD22可與表面IgM和(或)IgD同時或提前表達(dá)。絕大多數(shù)TdT+前體B細(xì)胞呈胞漿CD22陽性;多數(shù)淋巴細(xì)胞惡性腫瘤、特別是HCL、脾MZL和幼淋巴細(xì)胞白血?。╬rolymphocyticleukemia,PLL)強表達(dá)CD22,而B-CLL中CD22表達(dá)較弱。CD23
表達(dá)在正常成熟B細(xì)胞上,大多數(shù)B-CLL/SLL強表達(dá)。CD5+CD23+是B-CLL/SLL的典型特征,而MCL為CD5+CD23-,少部分MCL表達(dá)CD23,但表達(dá)較弱。部分FL和DLBCL、少數(shù)AML-M5和CMML中表達(dá)CD23.CD25
表達(dá)于激活的T、B細(xì)胞,主要表達(dá)于HCL、成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤(adultT-cellleukemia/lymphoma,ATCL)和少數(shù)其他T、B細(xì)胞增殖異常的疾病中。變異性HCL不表達(dá)CD25,對經(jīng)典的HCL治療不敏感,生存期短。CD30
主要表達(dá)于激活的T、B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。經(jīng)典型HL和間變大細(xì)胞淋巴瘤(anaplasiclargecelllymphoma,ALCL)可伴有CD30強表達(dá),部分B系淋巴瘤又有CD30的表達(dá)。HL患者胞漿CD30水平增高時預(yù)后不良標(biāo)志。免疫分型的抗體組合原則CD20表達(dá)前B細(xì)胞晚期和成熟B細(xì)胞上,但前體細(xì)胞和終末CD33
表達(dá)髓系前體細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞,正常人的CD33的表達(dá)強度有變異。各AML亞型均有CD33的表達(dá),10%~20%的ALL也可伴CD33表達(dá)。CD34
表達(dá)于早期造血干/祖細(xì)胞,是髓系早期細(xì)胞和TdT+不成熟淋巴細(xì)胞的表面標(biāo)志。大多數(shù)ALM和前體B/T淋巴細(xì)胞白血病表達(dá)CD34,粗顆粒型APL通常不表達(dá),而細(xì)顆粒型APL往往伴有CD34部分表達(dá)。CD36
表達(dá)于單核細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞和血小板,與CD64聯(lián)合分析單核細(xì)胞的分化比CD14更敏感。CD38
表達(dá)于前體B細(xì)胞、終末分化的漿細(xì)胞、髓系祖細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞和紅系前體細(xì)胞。成熟B細(xì)胞CD38的表達(dá)減弱或消失。除漿細(xì)胞中強表達(dá)CD38外,絕大多數(shù)AML和B-ALL表達(dá)CD38,強度較漿細(xì)胞弱。CD38+B-CLL患者預(yù)后不好。CD41a和CD42b
表達(dá)與巨核細(xì)胞和血小板,常用于AML-M7的免疫分型診斷,但有時會出現(xiàn)于其他細(xì)胞,例如單核細(xì)胞的非特異性結(jié)合。CD45
有名白細(xì)胞共同抗原(leukocytecommonantigen,LCA),表達(dá)于所有造血細(xì)胞(不包括成熟紅細(xì)胞和血小板)及造血細(xì)胞的個分化亞群上。在白細(xì)胞成熟過程中,CD45的表達(dá)有區(qū)別,原始細(xì)胞表達(dá)較低,成熟髓細(xì)胞中度表達(dá),單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞表達(dá)最高。CD45陰性表達(dá)的常見腫瘤包括:MM、M6,部分B-ALL和髓外腫瘤。成熟B細(xì)胞腫瘤可能伴有CD45表達(dá)減弱。有些MM弱表達(dá)CD45,與骨髓瘤細(xì)胞的增殖率有關(guān)。免疫分型的抗體組合原則CD33表達(dá)髓系前體細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞,正常人的CDCD45RA和CD45RO
表達(dá)于B和T細(xì)胞亞群,前者主要表達(dá)在初始細(xì)胞,后者大部分表達(dá)在記憶性T細(xì)胞上。CD52
表達(dá)于所有正常T細(xì)胞、多數(shù)惡性T細(xì)胞和成熟B細(xì)胞增值性疾病中。目前免疫分型檢測的主要目的是用于抗CD52的單抗治療。CD56
表達(dá)NK細(xì)胞、部分T細(xì)胞和單核細(xì)胞,少數(shù)增生期的髓細(xì)胞也可弱表達(dá)。NK細(xì)胞白血病、部分MM、AML中常伴CD56的陽性表達(dá)。CD19和CD56共表達(dá)與伴有t(8;21)的AML相關(guān)。在伴有t(8;21)或t(15;17)的AML中,CD56的陽性表達(dá)是預(yù)后不好的因素。CD58
表達(dá)于所有造血和非造血細(xì)胞,前體細(xì)胞表達(dá)較強,成熟細(xì)胞表達(dá)強度減弱。CD58主要用于區(qū)分ALL和良性前體B細(xì)胞,可用于ALL和MRD檢測。CD61
表達(dá)與巨核細(xì)胞和血小板,常用于AML-M7的免疫分型診斷,但有時會出現(xiàn)于其他細(xì)胞,例如單核細(xì)胞的非特異性結(jié)合。與CD42b聯(lián)合應(yīng)用可以區(qū)分血小板和原始細(xì)胞。CD64
表達(dá)于單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞上,主要用于分析單核細(xì)胞的分化。CD64可表達(dá)于AML-M4/M5和CMML中的單核細(xì)胞,大多數(shù)其他類型AML中的原始細(xì)胞也表達(dá)CD64,但較單核細(xì)胞表達(dá)弱。免疫分型的抗體組合原則CD45RA和CD45RO表達(dá)于B和T細(xì)胞亞群,前者主CD71
一種轉(zhuǎn)鐵蛋白受體,通常在增殖活躍的造血細(xì)胞上表達(dá),紅系前體細(xì)胞表達(dá)較強,和可以表達(dá)與髓系、激活的淋巴增殖細(xì)胞上??设b別不成熟的紅細(xì)胞,主要用于M6和MDS的診斷。CD103
表達(dá)于B淋巴細(xì)胞亞群和粘膜固有層T淋巴細(xì)胞,在HCL中強表達(dá)。腸型T細(xì)胞淋巴瘤和MZL也可表達(dá)CD103。CD117
表達(dá)于造血祖細(xì)胞、不成熟的粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞。大多數(shù)AML中的原始細(xì)胞均有CD117表達(dá),多數(shù)M5可見CD117陰性。另外,肥大細(xì)胞增生、MM、部分T-ALL和少數(shù)CD8+成熟T淋巴細(xì)胞增殖性鑒別均可見CD117陽性表達(dá)。CD123
表達(dá)于骨髓干/祖細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和巨核細(xì)胞。漿樣樹突狀細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞中強表達(dá)。多數(shù)AML和B-ALL常伴有CD123高表達(dá)。CD138
主要表達(dá)于漿細(xì)胞,用于MM的免疫分型和殘留骨髓瘤細(xì)胞的檢測。CD200
表達(dá)于胸腺細(xì)胞、B細(xì)胞、脾濾泡樹突狀細(xì)胞和部分T細(xì)胞亞群上。有助于鑒別CLL和MCL,CLL常為CD200+,而MCL往往為CD200-。CD235a
又名GlyA表達(dá)于人紅細(xì)胞、紅系前體細(xì)胞上,主要用于識別紅細(xì)胞。免疫分型的抗體組合原則CD71一種轉(zhuǎn)鐵蛋白受體,通常在增殖活躍的造血細(xì)胞上表Bcl-2
表達(dá)于T細(xì)胞和部分B細(xì)胞上,正常生發(fā)中心細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)為陰性。主要用于鑒別CD10+的FL和Burkitt淋巴瘤,F(xiàn)L常表達(dá)Bcl-2,而Burkitt淋巴瘤為Bcl-2的表達(dá)為陰性。cIgM(cμ)
前B細(xì)胞表達(dá)的第一個免疫球蛋白重鏈,表達(dá)于部分漿細(xì)胞和成熟B細(xì)胞。常用于判斷B-ALL的分期。cyclinD1
細(xì)胞周期蛋白,多種腫瘤中高表達(dá),可作為評價預(yù)后的指標(biāo),造血系統(tǒng)腫瘤中主要應(yīng)用于CML的診斷。FMC7
表達(dá)于成熟B淋巴細(xì)胞亞群,主要用于鑒別B-CLL和其他B系增殖性腫瘤,B-CLL中FMC7表達(dá)為陰性。HLA-DR
表達(dá)于各階段的B淋巴細(xì)胞(大部分漿細(xì)胞除外)、造血祖細(xì)胞、髓系、紅系和巨核系前體細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、不成熟的T細(xì)胞及活化T細(xì)胞上。原始粒細(xì)胞表達(dá)HLD-DR,細(xì)胞成熟至早幼粒細(xì)胞時HLA-DR消失。絕大多數(shù)B-ALL和AML表達(dá)HLD-DR,但APL、MM和大部分T細(xì)胞白血病/淋巴瘤一般不表達(dá)。Igκ和Igλ
表達(dá)于正常B淋巴細(xì)胞,B系淋巴瘤中常見胞膜免疫球蛋白輕鏈的限制性表達(dá),MM中常見胞漿免疫球蛋白輕鏈的限制性表達(dá)。免疫分型的抗體組合原則Bcl-2表達(dá)于T細(xì)胞和部分B細(xì)胞上,正常生發(fā)中心MPO
髓過氧化物酶,表達(dá)于粒細(xì)胞的嗜苯胺藍(lán)顆粒中,在循環(huán)單核細(xì)胞中低密度存在。某些AML的原始細(xì)胞也有表達(dá),MPO用于髓系白血病及髓系分化的鑒別。TCRTCR分子是有α/β或γ/δ鏈組成的異二聚體,可與CD3復(fù)合物同時表達(dá)。多數(shù)胸腺細(xì)胞和成熟T細(xì)胞表達(dá)TCRα/β異二聚體,不足5%的胸腺細(xì)胞和成熟T細(xì)胞表達(dá)TCRγ/δ。主要用于成熟T淋巴系統(tǒng)腫瘤的分類。TdT
末端脫氧核酸轉(zhuǎn)移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)存在于正常胸腺和骨髓中未成熟T、B細(xì)胞的胞核中。大多數(shù)T-ALL和B-ALL、部分AML(AML-M0更多見)和少數(shù)淋巴瘤表達(dá)TdT。TCRVβT細(xì)胞受體的β鏈變異區(qū),用于鑒別T細(xì)胞的克隆性,主要應(yīng)用于成熟T細(xì)胞增殖性腫瘤的免疫分型診斷中。ZAP-70
表達(dá)于T細(xì)胞、NK細(xì)胞核前B細(xì)胞上,主要用于CLL/SLL的免疫分型。細(xì)胞內(nèi)ZAP-70的表達(dá)與IgVH基因突變狀態(tài)有關(guān),ZAP-70+CLL預(yù)后不好。免疫分型的抗體組合原則MPO髓過氧化物酶,表達(dá)于粒細(xì)胞的嗜苯胺藍(lán)顆粒中,免疫分型的抗體組合原則二、白血病免疫分型抗體組合原則(一)國際指南中抗體使用原則國際“臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會”《血液淋巴系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞的臨床流式分析指南》(第二版,2007)指出:免疫分型的一個基本原則是腫瘤性血液淋巴細(xì)胞表達(dá)正常細(xì)胞特定系列和特定成熟期的表面和細(xì)胞內(nèi)抗原,這些抗原可被適當(dāng)?shù)目贵w檢測。
較理想的組合是,實際的數(shù)量足夠識別異常細(xì)胞和標(biāo)本中存在的所有正常細(xì)胞。當(dāng)對一個已經(jīng)診斷的病例檢測以證實、分類、監(jiān)測及分期時可使用較少的抗體。在設(shè)計組合是有兩種方法:①一步法,使用足夠的試劑一次性完成惡性細(xì)胞和正常細(xì)胞的定性;②兩步法,開始使用較少的抗體,然后根據(jù)第一步的結(jié)果選擇其他的抗體。
總體來講,使用試劑越多,對異常細(xì)胞的檢測和定性的敏感性和特異性越高?;谟杏玫呐R床和形態(tài)信息,可采用“靶點”方法選用少數(shù)抗體。雖然這種方法可以減少成本,但萬一提供的臨床信息是錯誤的或缺乏的,則具有一定的風(fēng)險。根據(jù)國際上的一致意見,需要大量的試劑來完成慢性淋巴增殖性疾病、組織淋巴瘤、急性白血病和其他血液學(xué)腫瘤的免疫分型。
指南參與者認(rèn)為,至少需要20個抗體來完成急性白血病的定性,對慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病需要相似的抗體數(shù)。另外,定的表面和細(xì)胞內(nèi)抗體最近被證明具有診斷和預(yù)后意義。隨著臨床有關(guān)新抗體的認(rèn)識,原本較大的分類抗體數(shù)開可能要增加。免疫分型的抗體組合原則二、白血病免疫分型抗體組合原則(一)國免疫分型的抗體組合原則(二)國際流式細(xì)胞專家的共識2006年,國際流式專家在Bethesda對診斷血液淋巴系統(tǒng)腫瘤所需要的試劑進(jìn)行了討論達(dá)成一定共識。免疫分型的抗體組合原則(二)國際流式細(xì)胞專家的共識免疫分型的抗體組合原則(三)國內(nèi)流式細(xì)胞專家使用原則(北京大學(xué)血液病研究所)急性白血病亞型分型和MRD檢測時使用的主要抗體:急性白血病的診斷和分型抗體B-ALL:CD19、CD10、CD34、TdT、CD20、CD22、CD79a、skappa、 slambda、cμT-ALL:CD2、m/cCD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD1a、TdT、 CD34AML:CD34、CD117、CD38、HLA-DR-----干/祖細(xì)胞 CD15、CD11b、CD13、CD33、CD64、CD14、CD36、MPO-----粒
單系 CD71、GlyA-----紅系 CD41、CD61、CD42b-----巨核系MRD檢測所需的主要抗體
根據(jù)上述抗體可以達(dá)到急性白血病的診斷和分型。但如果準(zhǔn)備治療后利用FCM檢測殘留白血病細(xì)胞,則在上述抗體的基礎(chǔ)上需要適當(dāng)增加抗體。主要是增加不同系列抗原的檢測。如: B-ALL:CD58、CD123、CD38、CD13、CD33、CD56等 T-ALL:CD117、CD10、CD56等 AML:CD7、CD56、CD19、CD2、CD4、CD5等免疫分型的抗體組合原則(三)國內(nèi)流式細(xì)胞專家使用原則(北京大免疫分型的抗體組合原則兩步法進(jìn)行四色免疫分型的方法:免疫分型的抗體組合原則兩步法進(jìn)行四色免疫分型的方法:2011版《中國慢性淋巴細(xì)胞白血病診治指南》CLL免疫表型特征:
大多數(shù)CLL細(xì)胞同時表達(dá)T
細(xì)胞抗原CD5
和B
細(xì)胞抗原CD19、CD20
和CD23。
典型的CLL
免疫表型為CD5+、CD23+、CD43+/-、CD10-、D19+、CD20dim、sIgdim
和CCND1-。
部分患者可能表現(xiàn)為sIgbright、CD23-/+
、FMC7dim,由于同樣是CD5+的套細(xì)胞淋巴瘤(MCL)患者也可能表現(xiàn)為FMC7+、CD23-、sIgbright和CD20bright等,難以和CLL鑒別,因此對于免疫表型不典型的CLL(CD23dim/-
、CD20bright、sIgbright
或FMC-7
+等),特別是CLL
積分<4
時,需要進(jìn)行CCND1的免疫組化染色和(或)利用熒光原位雜交(FISH)檢測t(11;14)從而與MCL相鑒別。
最近文獻(xiàn)報道CD200、CD148對CLL與MCL有一定的鑒別診斷價值。2011版《中國慢性淋巴細(xì)胞白血病診治指南》CLL免疫表型特FCM免疫表型檢測為急性白血病診斷和分型不可缺少的工具:客觀、準(zhǔn)確、可重復(fù)性形態(tài)學(xué)不典型時,鑒別AML、ALL診斷AML-M0、AML-M7
診斷ALL:T、B、NK;亞型、分化階段診斷診斷AUL/MPAL:雙表/雙系列幫助預(yù)測遺傳學(xué)異常在慢性白血病鑒別診斷中FCM免疫表型檢測起著重要作用。FCM免疫表型檢測為急性白血病診斷和分型不可缺少的工具:在慢附錄A附錄A流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件M:morphology,形態(tài)學(xué)
I:immunology,免疫學(xué)
C:cytogenetics,細(xì)胞遺傳學(xué)
M:molecularbiology,分子生物學(xué)
(moleculargenetics,分子遺傳學(xué))M:morphology,形態(tài)學(xué)
I:immunoloM:morphology,形態(tài)學(xué)(FAB分型)
髓系(acutenonlymphocyticleukemia,ANLL;acutemyeloidleukemia,AML)
(M0:急性髓細(xì)胞白血病微分化型) M1:急性原粒細(xì)胞白血病未分化型 M2:急性原粒細(xì)胞白血病部分分化型 M3:急性早幼粒細(xì)胞白血病 M4:急性粒-單核細(xì)胞白血病 M5:急性單核細(xì)胞白血病 M6:急性紅白血病 M7:急性巨核細(xì)胞白血病淋系(acutelymphocyticleukemia,ALL) L1:原幼淋巴細(xì)胞以小細(xì)胞為主 L2:原幼淋巴細(xì)胞以大細(xì)胞為主 L3:大細(xì)胞為主,細(xì)胞質(zhì)多,深藍(lán),蜂窩狀M:morphology,形態(tài)學(xué)(FAB分型)
髓系(acuI:immunology,免疫學(xué)I:immunology,免疫學(xué)流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件TypeofcellCDmarkersstemcellsCD34+,CD31-allleukocytegroupsCD45+GranulocyteCD45+,CD15+,CD24+,CD114+,CD182+MonocyteCD45+,CD14+,CD114+,CD11a,CD91+TlymphocyteCD45+,CD3+ThelpercellCD45+,CD3+,CD4+TregulatorycellCD4,CD25,andFoxp3CytotoxicTcellCD45+,CD3+,CD8+BlymphocyteCD45+,CD19+orCD45+,CD20+,CD24+ThrombocyteCD45+,CD61+NaturalkillercellCD16+,CD56+,CD3-,CD31,CD30TypeofcellCDmarkersstemcelC:cytogenetics,細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析(chromosomekaryotyping)C:cytogenetics,細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析(cM:molecularbiology,分子生物學(xué)
moleculargenetics,分子遺傳學(xué)基因突變(genemutations)
融合基因(fusiongenes)
BCR-ABL TEL-AML1
M:molecularbiology,分子生物學(xué)
流式細(xì)胞術(shù)FlowCytometry,F(xiàn)CM流式細(xì)胞術(shù)FlowCytometry,F(xiàn)CM檢測信號及意義:FSC/SSC二維點圖(dotplot)中性粒細(xì)胞單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞閾值細(xì)胞碎片檢測信號及意義:FSC/SSC二維點圖(dotplot)流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件二、數(shù)據(jù)解釋及報告1.定性的描述(陽性或陰性)2.評估抗原表達(dá)強度3.區(qū)分弱陽性和陰性群體運用流式分析造血細(xì)胞的抗原表達(dá)情況,遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于對形態(tài)學(xué)結(jié)果的簡單證實,能夠提供大量的信息,可能幫助形態(tài)學(xué)確認(rèn)某些診斷,也可能提出之前沒有考慮的診斷;在一些典型表現(xiàn)下,流式免疫分型可以在其他方法的輔助之下診斷疾病。
但是,流式免疫分型結(jié)果的解釋應(yīng)與臨床、形態(tài)學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)等其他方法結(jié)合使用,綜合考慮,做出疾病的診斷與分類。二、數(shù)據(jù)解釋及報告1.定性的描述(陽性或陰性)運正常血細(xì)胞發(fā)育過程的抗原表達(dá)規(guī)律按《WHO造血和淋巴組織腫瘤分類》(2008年版)正常血細(xì)胞發(fā)育過程的抗原表達(dá)規(guī)律按《WHO造血和淋巴組織腫瘤流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件WoodB,etc(2007)WoodB,etc(2007)急性白血病的免疫表型急性白血病的免疫表型流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件急性髓細(xì)胞白血病的免疫表型急性髓細(xì)胞白血病的免疫表型流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件劉艷榮,等(2010)劉艷榮,等(2010)流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件急性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型急性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件急性系列不明型白血病的免疫表型急性系列不明型白血病的免疫表型流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件慢性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型慢性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型一、CLL的免疫表型特點一、CLL的免疫表型特點二、FCM檢測CLL的預(yù)后指標(biāo)ZAP-70ZAP-70+CLL預(yù)后不好。CD38是CLL疾病侵襲的重要標(biāo)志,CD38+B-CLL患者預(yù)后不好。二、FCM檢測CLL的預(yù)后指標(biāo)ZAP-70ZAP-7三、鑒別單克隆B淋巴細(xì)胞增多癥單克隆B淋巴細(xì)胞增多癥(MBL)指健康個體外周血中存在低水平的單克隆性B淋巴細(xì)胞增多。三、鑒別單克隆B淋巴細(xì)胞增多癥單克隆B淋巴細(xì)胞增多四、鑒別診斷
CLL是以外周血及骨髓中成熟的淋巴細(xì)胞增多為主要臨床特點的惡性疾病。除了CLL,還包括其他多種生物學(xué)上完全不同的成熟B淋巴細(xì)胞腫瘤。正確鑒別將有助于預(yù)后評估和治療方案的選擇。四、鑒別診斷CLL是以外周血及骨髓中成熟的淋巴細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件流式細(xì)胞術(shù)在白血病MICM分型診斷中的作用(壓縮圖片)課件免疫分型的抗體組合原則免疫分型的抗體組合原則一、常用抗體
白細(xì)胞分化抗原(leukocytedifferentiationantigen)是指血細(xì)胞在分化成熟為不同譜系、不同階段及細(xì)胞活化過程中,出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)記分子。1982年,國際統(tǒng)一使用分化群(clusterofdifferentiation,CD)作為白細(xì)胞分化抗原和相應(yīng)單克隆抗體的命名,CD分子在流式細(xì)胞術(shù)的血液學(xué)應(yīng)用中發(fā)揮著重要作用。CD1a
表達(dá)于皮質(zhì)胸腺細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和Langerhans細(xì)胞,主要用于T淋巴細(xì)胞白血病及淋巴瘤的免疫分型。表達(dá)CD1a的T-ALL為皮質(zhì)型。CD2
泛T細(xì)胞標(biāo)志,表達(dá)于T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和大多數(shù)NK細(xì)胞上。急性T淋巴細(xì)胞白血?。╝cuteTlymphoblasticleukemia,T-ALL)、成熟T細(xì)胞增生異常性疾病、急性雙表型白血病、原始NK細(xì)胞淋巴瘤/白血病、肥大細(xì)胞白血病及少部分急性髓細(xì)胞白血?。╝cutemyeloidleukemia,AML),尤其是變異性急性早幼粒細(xì)胞白血?。╝cutepromyelocyticleukemia,APL)中有CD2表達(dá)。CD3
表達(dá)于T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和NK細(xì)胞。是T細(xì)胞增值性疾病中最特異的標(biāo)志,在成熟和部分初始T細(xì)胞中均有表達(dá)。胞漿CD3(cCD3)在初始T細(xì)胞(前胸腺細(xì)胞)上表達(dá),胸腺細(xì)胞表達(dá)胞漿和(或)膜表面CD3(mCD3)。前體T細(xì)胞腫瘤通常不表達(dá)mCD3,但cCD3為陽性。免疫分型的抗體組合原則一、常用抗體白細(xì)胞分化抗原(leukocyteCD4
表達(dá)于輔助性T淋巴細(xì)胞、外周血單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞。大多數(shù)外周血T細(xì)胞淋巴瘤、部分AML、慢性粒單核細(xì)胞白血?。╝cutemyelomonocyticleukemia,CMML)、急性單核細(xì)胞白血?。ˋML-M4/M5)、APL和組織細(xì)胞腫瘤中伴有CD4表達(dá)。少部分T-ALL中有CD4限制性表達(dá),大多數(shù)T-ALL同時表達(dá)CD4、CD8或者兩者同時為陰性。CD5
主要表達(dá)于胸腺細(xì)胞、成熟T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞亞型。作為一個泛T細(xì)胞抗原,CD5可表達(dá)于成熟或不成熟T細(xì)胞增值性疾病中,包括T-ALL。在腫瘤性T細(xì)胞發(fā)育過程中,CD5容易丟失。正常人外周血和淋巴組織中存在CD5+B細(xì)胞,兒童及年輕患者更多見。CD5主要表達(dá)于慢性淋巴細(xì)胞白血病(B-cellchroniclymphocyticleukemia,B-CLL)、小淋巴細(xì)胞淋巴瘤(smallcelllymphocytelymphoma,SLL)和套細(xì)胞淋巴瘤(mantlecelllymphoma,MCL)。少部分彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(diffuselargeB-celllymphoma,DLBCL)表達(dá)CD5,而且原發(fā)性CD5+DLBCL預(yù)后較CD5-DLBCL更差。CD7
主要表達(dá)于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和多能干細(xì)胞。在T細(xì)胞發(fā)育過程中,CD7是最早出現(xiàn)的T細(xì)胞標(biāo)志,且貫穿表達(dá)于整個T細(xì)胞分化發(fā)育過程中。在外周T細(xì)胞異常性疾病中,CD7通常表達(dá)異常、減弱或消失。T-ALL中CD7陰性表達(dá)者僅占2%。此外,CD7還可表達(dá)于原始NK細(xì)胞淋巴瘤/白血病和AML,而APL和B系淋巴增值性疾病中,CD7表達(dá)多為陰性。免疫分型的抗體組合原則CD4表達(dá)于輔助性T淋巴細(xì)胞、外周血單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和CD8
表達(dá)于殺傷性或抑制性T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和某些NK細(xì)胞上。大部分大顆粒T淋巴細(xì)胞白血?。═-largegranularlymphocyteleukemia,T-LGL)和腸型淋巴瘤、少部分外周T細(xì)胞增值性疾病表達(dá)CD8。極少T-ALL表達(dá)CD8,而CD4陰性。CD9
表達(dá)于單核細(xì)胞、前B細(xì)胞亞群、激活的T細(xì)胞、嗜酸與嗜堿性粒細(xì)胞、血小板,主要用于急性白血病免疫分型及微量殘留病的檢測。CD10
又名急性淋巴細(xì)胞白血病共同抗原(commonacutelymphoblasticleukemiaantigen,CALLA),表達(dá)于前B、前T淋巴細(xì)胞、生發(fā)中心B細(xì)胞和成熟粒細(xì)胞絕大多數(shù)急性B淋巴細(xì)胞白血?。˙-ALL)、少數(shù)T-ALL、多數(shù)濾泡性淋巴瘤(follicularlymphoma,F(xiàn)L)、部分DLBCL和Burkitt淋巴瘤、少數(shù)AML-M5中有CD10表達(dá)。成熟粒細(xì)胞缺乏CD10的表達(dá)常常與骨髓增生異常綜合征(myelodysplasia,MDS)相關(guān)。在FL和DLBCL中,CD10+者預(yù)后更好。CD11b
表達(dá)在單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和部分NK細(xì)胞上,成熟B和T細(xì)胞不表達(dá)。部分急性髓細(xì)胞白血病表達(dá)CD11b,常代表單核細(xì)胞的分化,AML-M0、M1和M2很少表達(dá)。APL通常也是CD11b陰性。常用CD11b觀察MDS中單核和粒細(xì)胞的發(fā)育分化。CD11c
單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞中強表達(dá),粒細(xì)胞中表達(dá)強度較低,正常激活的CD8+細(xì)胞也可表達(dá)。CD11c強表達(dá)式毛細(xì)胞白血?。╤airycellleukemia,HCL)和AML-M5的典型特征。其他惡性血液病,包括B-CLL,邊緣帶B細(xì)胞淋巴瘤(marginalzoneB-celllymphoma,MZL)、除APL外的其他AML也有CD11c的弱表達(dá)。免疫分型的抗體組合原則CD8表達(dá)于殺傷性或抑制性T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和某些NKCD13
表達(dá)于粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及其前體細(xì)胞上。CD13數(shù)全粒細(xì)胞分子,不同發(fā)育階段的所有粒系細(xì)胞均有表達(dá)。大多數(shù)AML和5%~15%ALL可表達(dá)CD13。CD14
是成熟單核細(xì)胞的最好標(biāo)志,大多數(shù)CMML和AML-M4中的單核細(xì)胞強表達(dá)CD14;AML-M5中,原單和幼單細(xì)胞通常為CD14陰性或弱表達(dá)。正常粒細(xì)胞CD14陰性,但慢性增值性疾病,如CML或真性紅細(xì)胞增多癥(polycythemiavera,PV)中的粒細(xì)胞部分有CD14的表達(dá)上調(diào)。CD15
除原粒細(xì)胞外的所有粒細(xì)胞、多數(shù)單核細(xì)胞、少數(shù)巨核細(xì)胞和組織細(xì)胞表達(dá)CD15。CML、部分AML和大多數(shù)經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤(Hodgkinlymphoma,HL)表達(dá)CD15。CD16
表達(dá)于正常的粒細(xì)胞、NK細(xì)胞和大顆粒T細(xì)胞上。T-LGL、NK細(xì)胞增生、肝脾T細(xì)胞淋巴瘤和部分單核系腫瘤中常表達(dá)CD16,而原粒細(xì)胞和典型APL細(xì)胞中CD16陰性。粒細(xì)胞發(fā)育異常時??梢奀D16表達(dá)下調(diào)。CD19
表達(dá)于B系細(xì)胞核濾泡狀樹突細(xì)胞上,成熟和不成熟B系腫瘤中均表達(dá)CD19,良性漿細(xì)胞、少數(shù)惡性漿細(xì)胞也可見CD19的表達(dá),部分AML表達(dá)CD19,常與t(8;21)相關(guān)。免疫分型的抗體組合原則CD13表達(dá)于粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及其前體細(xì)胞上。CD13數(shù)CD20
表達(dá)前B細(xì)胞晚期和成熟B細(xì)胞上,但前體細(xì)胞和終末漿細(xì)胞不表達(dá)。CD20出現(xiàn)在免疫球蛋白(Ig)輕鏈基因重排和表面Ig表達(dá)之間的B細(xì)胞表面。多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)表達(dá)CD20者預(yù)后不好。CD22
為泛B細(xì)胞標(biāo)志,其表達(dá)與CD22抗體所標(biāo)記的熒光素有直接關(guān)系。利用CD22-PE抗體,可以發(fā)現(xiàn)CD22表達(dá)于B細(xì)胞分化的早期,在成熟期表達(dá)強度增加。而利用CD22-FITC抗體,只能發(fā)現(xiàn)在成熟的B細(xì)胞表面CD22陽性,此時表面CD22可與表面IgM和(或)IgD同時或提前表達(dá)。絕大多數(shù)TdT+前體B細(xì)胞呈胞漿CD22陽性;多數(shù)淋巴細(xì)胞惡性腫瘤、特別是HCL、脾MZL和幼淋巴細(xì)胞白血?。╬rolymphocyticleukemia,PLL)強表達(dá)CD22,而B-CLL中CD22表達(dá)較弱。CD23
表達(dá)在正常成熟B細(xì)胞上,大多數(shù)B-CLL/SLL強表達(dá)。CD5+CD23+是B-CLL/SLL的典型特征,而MCL為CD5+CD23-,少部分MCL表達(dá)CD23,但表達(dá)較弱。部分FL和DLBCL、少數(shù)AML-M5和CMML中表達(dá)CD23.CD25
表達(dá)于激活的T、B細(xì)胞,主要表達(dá)于HCL、成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤(adultT-cellleukemia/lymphoma,ATCL)和少數(shù)其他T、B細(xì)胞增殖異常的疾病中。變異性HCL不表達(dá)CD25,對經(jīng)典的HCL治療不敏感,生存期短。CD30
主要表達(dá)于激活的T、B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。經(jīng)典型HL和間變大細(xì)胞淋巴瘤(anaplasiclargecelllymphoma,ALCL)可伴有CD30強表達(dá),部分B系淋巴瘤又有CD30的表達(dá)。HL患者胞漿CD30水平增高時預(yù)后不良標(biāo)志。免疫分型的抗體組合原則CD20表達(dá)前B細(xì)胞晚期和成熟B細(xì)胞上,但前體細(xì)胞和終末CD33
表達(dá)髓系前體細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞,正常人的CD33的表達(dá)強度有變異。各AML亞型均有CD33的表達(dá),10%~20%的ALL也可伴CD33表達(dá)。CD34
表達(dá)于早期造血干/祖細(xì)胞,是髓系早期細(xì)胞和TdT+不成熟淋巴細(xì)胞的表面標(biāo)志。大多數(shù)ALM和前體B/T淋巴細(xì)胞白血病表達(dá)CD34,粗顆粒型APL通常不表達(dá),而細(xì)顆粒型APL往往伴有CD34部分表達(dá)。CD36
表達(dá)于單核細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞和血小板,與CD64聯(lián)合分析單核細(xì)胞的分化比CD14更敏感。CD38
表達(dá)于前體B細(xì)胞、終末分化的漿細(xì)胞、髓系祖細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞和紅系前體細(xì)胞。成熟B細(xì)胞CD38的表達(dá)減弱或消失。除漿細(xì)胞中強表達(dá)CD38外,絕大多數(shù)AML和B-ALL表達(dá)CD38,強度較漿細(xì)胞弱。CD38+B-CLL患者預(yù)后不好。CD41a和CD42b
表達(dá)與巨核細(xì)胞和血小板,常用于AML-M7的免疫分型診斷,但有時會出現(xiàn)于其他細(xì)胞,例如單核細(xì)胞的非特異性結(jié)合。CD45
有名白細(xì)胞共同抗原(leukocytecommonantigen,LCA),表達(dá)于所有造血細(xì)胞(不包括成熟紅細(xì)胞和血小板)及造血細(xì)胞的個分化亞群上。在白細(xì)胞成熟過程中,CD45的表達(dá)有區(qū)別,原始細(xì)胞表達(dá)較低,成熟髓細(xì)胞中度表達(dá),單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞表達(dá)最高。CD45陰性表達(dá)的常見腫瘤包括:MM、M6,部分B-ALL和髓外腫瘤。成熟B細(xì)胞腫瘤可能伴有CD45表達(dá)減弱。有些MM弱表達(dá)CD45,與骨髓瘤細(xì)胞的增殖率有關(guān)。免疫分型的抗體組合原則CD33表達(dá)髓系前體細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞,正常人的CDCD45RA和CD45RO
表達(dá)于B和T細(xì)胞亞群,前者主要表達(dá)在初始細(xì)胞,后者大部分表達(dá)在記憶性T細(xì)胞上。CD52
表達(dá)于所有正常T細(xì)胞、多數(shù)惡性T細(xì)胞和成熟B細(xì)胞增值性疾病中。目前免疫分型檢測的主要目的是用于抗CD52的單抗治療。CD56
表達(dá)NK細(xì)胞、部分T細(xì)胞和單核細(xì)胞,少數(shù)增生期的髓細(xì)胞也可弱表達(dá)。NK細(xì)胞白血病、部分MM、AML中常伴CD56的陽性表達(dá)。CD19和CD56共表達(dá)與伴有t(8;21)的AML相關(guān)。在伴有t(8;21)或t(15;17)的AML中,CD56的陽性表達(dá)是預(yù)后不好的因素。CD58
表達(dá)于所有造血和非造血細(xì)胞,前體細(xì)胞表達(dá)較強,成熟細(xì)胞表達(dá)強度減弱。CD58主要用于區(qū)分ALL和良性前體B細(xì)胞,可用于ALL和MRD檢測。CD61
表達(dá)與巨核細(xì)胞和血小板,常用于AML-M7的免疫分型診斷,但有時會出現(xiàn)于其他細(xì)胞,例如單核細(xì)胞的非特異性結(jié)合。與CD42b聯(lián)合應(yīng)用可以區(qū)分血小板和原始細(xì)胞。CD64
表達(dá)于單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞上,主要用于分析單核細(xì)胞的分化。CD64可表達(dá)于AML-M4/M5和CMML中的單核細(xì)胞,大多數(shù)其他類型AML中的原始細(xì)胞也表達(dá)CD64,但較單核細(xì)胞表達(dá)弱。免疫分型的抗體組合原則CD45RA和CD45RO表達(dá)于B和T細(xì)胞亞群,前者主CD71
一種轉(zhuǎn)鐵蛋白受體,通常在增殖活躍的造血細(xì)胞上表達(dá),紅系前體細(xì)胞表達(dá)較強,和可以表達(dá)與髓系、激活的淋巴增殖細(xì)胞上。可鑒別不成熟的紅細(xì)胞,主要用于M6和MDS的診斷。CD103
表達(dá)于B淋巴細(xì)胞亞群和粘膜固有層T淋巴細(xì)胞,在HCL中強表達(dá)。腸型T細(xì)胞淋巴瘤和MZL也可表達(dá)CD103。CD117
表達(dá)于造血祖細(xì)胞、不成熟的粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞。大多數(shù)AML中的原始細(xì)胞均有CD117表達(dá),多數(shù)M5可見CD117陰性。另外,肥大細(xì)胞增生、MM、部分T-ALL和少數(shù)CD8+成熟T淋巴細(xì)胞增殖性鑒別均可見CD117陽性表達(dá)。CD123
表達(dá)于骨髓干/祖細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和巨核細(xì)胞。漿樣樹突狀細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞中強表達(dá)。多數(shù)AML和B-ALL常伴有CD123高表達(dá)。CD138
主要表達(dá)于漿細(xì)胞,用于MM的免疫分型和殘留骨髓瘤細(xì)胞的檢測。CD200
表達(dá)于胸腺細(xì)胞、B細(xì)胞、脾濾泡樹突狀細(xì)胞和部分T細(xì)胞亞群上。有助于鑒別CLL和MCL,CLL常為CD200+,而MCL往往為CD200-。CD235a
又名GlyA表達(dá)于人紅細(xì)胞、紅系前體細(xì)胞上,主要用于識別紅細(xì)胞。免疫分型的抗體組合原則CD71一種轉(zhuǎn)鐵蛋白受體,通常在增殖活躍的造血細(xì)胞上表Bcl-2
表達(dá)于T細(xì)胞和部分B細(xì)胞上,正常生發(fā)中心細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)為陰性。主要用于鑒別CD10+的FL和Burkitt淋巴瘤,F(xiàn)L常表達(dá)Bcl-2,而Burkitt淋巴瘤為Bcl-2的表達(dá)為陰性。cIgM(cμ)
前B細(xì)胞表達(dá)的第一個免疫球蛋白重鏈,表達(dá)于部分漿細(xì)胞和成熟B細(xì)胞。常用于判斷B-ALL的分期。cyclinD1
細(xì)胞周期蛋白,多種腫瘤中高表達(dá),可作為評價預(yù)后的指標(biāo),造血系統(tǒng)腫瘤中主要應(yīng)用于CML的診斷。FMC7
表達(dá)于成熟B淋巴細(xì)胞亞群,主要用于鑒別B-CLL和其他B系增殖性腫瘤,B-CLL中FMC7表達(dá)為陰性。HLA-DR
表達(dá)于各階段的B淋巴細(xì)胞(大部分漿細(xì)胞除外)、造血祖細(xì)胞、髓系、紅系和巨核系前體細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、不成熟的T細(xì)胞及活化T細(xì)胞上。原始粒細(xì)胞表達(dá)HLD-DR,細(xì)胞成熟至早幼粒細(xì)胞時HLA-DR消失。絕大多數(shù)B-ALL和AML表達(dá)HLD-DR,但APL、MM和大部分T細(xì)胞白血病/淋巴瘤一般不表達(dá)。Igκ和Igλ
表達(dá)于正常B淋巴細(xì)胞,B系淋巴瘤中常見胞膜免疫球蛋白輕鏈的限制性表達(dá),MM中常見胞漿免疫球蛋白輕鏈的限制性表達(dá)。免疫分型的抗體組合原則Bcl-2表達(dá)于T細(xì)胞和部分B細(xì)胞上,正常生發(fā)中心MPO
髓過氧化物酶,表達(dá)于粒細(xì)胞的嗜苯胺藍(lán)顆粒中,在循環(huán)單核細(xì)胞中低密度存在。某些AML的原始細(xì)胞也有表達(dá),MPO用于髓系白血病及髓系分化的鑒別。TCRTCR分子是有α/β或γ/δ鏈組成的異二聚體,可與CD3復(fù)合物同時表達(dá)。多數(shù)胸腺細(xì)胞和成熟T細(xì)胞表達(dá)TCRα/β異二聚體,不足5%的胸腺細(xì)胞和成熟T細(xì)胞表達(dá)TCRγ/δ。主要用于成熟T淋巴系統(tǒng)腫瘤的分類。TdT
末端脫氧核酸轉(zhuǎn)移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)存在于正常胸腺和骨髓中未成熟T、B細(xì)胞的胞核中。大多數(shù)T-ALL和B-ALL、部分AML(AML-M0更多見)和少數(shù)淋巴瘤表達(dá)TdT。TCRVβT細(xì)胞受體的β鏈變異區(qū),用于鑒別T細(xì)胞的克隆性,主要應(yīng)用于成熟T細(xì)胞增殖性腫瘤的免疫分型診斷中。ZAP-70
表達(dá)于T細(xì)胞、NK細(xì)胞
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