實(shí)驗(yàn)六 蛙心灌流課件

實(shí)驗(yàn)八

蛙心灌流(perfusionoffrog’sheart)【復(fù)習(xí)理論內(nèi)容】1.心臟的生理特性?2.心肌收縮的特點(diǎn)？3.心臟的神經(jīng)支配及作用？【實(shí)驗(yàn)原理】

心臟的自動(dòng)節(jié)律性活動(dòng)，需要有一個(gè)合適的理化環(huán)境。蛙心臟離體后，用任氏液灌流，心臟在一定時(shí)間內(nèi)可保持節(jié)律性收縮與舒張。改變灌流液的成分，心臟跳動(dòng)的頻率和幅度會(huì)隨之發(fā)生改變?！緦?shí)驗(yàn)對(duì)象】BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)張力換能器、蛙心夾蛙心插管、試管夾縫合線、雙凹夾萬(wàn)能支臺(tái)蛙類(lèi)手術(shù)器械滴管兩只【實(shí)驗(yàn)器材和藥品】任氏液0.65％NaCll％KCl3％CaC12l：10,000El：10,000ACh3％乳酸2.5％NaHCO3【實(shí)驗(yàn)步驟】

一、離體牛蛙心臟制備

1.取蟾蜍一只，破壞腦和脊髓。2.打開(kāi)胸腔，暴露心臟。（腹面）

（背面）?在主A干下穿一線打一松結(jié)；在左主A下再穿一線結(jié)扎。?在A圓錐、左主A根部剪口，將蛙心插管插入心室內(nèi)。插管插入心室標(biāo)志見(jiàn)血液涌入插管內(nèi)，并隨心跳上下波動(dòng)。

3.蛙心插管二、連接實(shí)驗(yàn)裝置換能器1.用試管夾將蛙心插管固定在萬(wàn)能支臺(tái)上2.把張力換能器固定在萬(wàn)能支臺(tái)上，在心室舒張期將與換能器相連的蛙心夾夾在心尖上。*換能器的連線應(yīng)與插管中軸在同一直線上，即與地面垂直啟動(dòng)BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)“循環(huán)實(shí)驗(yàn)”“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”“蛙心灌流”描記蛙心收縮曲線順序觀察項(xiàng)目藥量心肌(率、力)變化任氏液灌流0.65%NaCl灌流3%CaCl21～2滴1～2滴1%KCl1:10000E1:10000Ach3%乳酸2.5%NaHCO31滴1滴2～4滴1～2滴（二）離子和藥物的影響*【注意事項(xiàng)】?當(dāng)每種化學(xué)藥物作用已明顯時(shí)，應(yīng)立即將蛙心插管內(nèi)液體吸出而換上任氏液數(shù)次，以免心肌受損。?須待心跳恢復(fù)正常后，才能進(jìn)行下一實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。?每次換液時(shí)，蛙心插管內(nèi)液面應(yīng)保持相同高度。?吸管使用要分開(kāi)，不可混淆。順序觀察項(xiàng)目藥量心肌(率、力)變化任氏液灌流0.65%NaCl灌流3%CaCl22～4滴2～4滴1%KCl1:10000E1:10000Ach5%NaCl2～4滴2-4滴正常力↓力↑，舒張不完全力↓心率↑力↑，心率↑力↓，心率↓2～4滴【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】【結(jié)果分析】任氏液：正常對(duì)照2.0.65%NaCl灌流0.65%NaCl灌流→Ca2+內(nèi)流↓興奮-收縮耦聯(lián)↓收縮力↓[Ca2+]i↓【結(jié)果分析】任氏液：正常對(duì)照4.1%KCl（1滴）AP平臺(tái)期縮短

Ca2+內(nèi)流↓興奮-收縮耦聯(lián)↓收縮力↓【結(jié)果分析】任氏液：正常對(duì)照5.1:10000E（1～2滴）Ca2+內(nèi)流↑肌漿網(wǎng)釋放Ca2+↑E-C耦聯(lián)↑收縮力↑與心肌β1受體結(jié)合cAMP4期If、ICaT通道↑4期自動(dòng)去極速度↑自律性↑心率↑