巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜藥物的

藥物分析主講:羅容珍PharmaceuticalAnalysis第十章:巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析12/14/2022Contents基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)1鑒別試驗(yàn)2特殊雜質(zhì)檢查3含量測(cè)定412/14/2022一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)環(huán)狀丙二酰脲類化合物(一)基本結(jié)構(gòu)12/14/2022一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)環(huán)狀丙二酰脲類化合物(一)基本結(jié)構(gòu)12/14/2022一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)典型藥物(Phenylbarbital)(barbital)12/14/2022一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)(Secobarbital)戊巴比妥(Pentobarbital)12/14/2022一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)12/14/2022一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)(二)主要性質(zhì)性狀——白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末溶解度——微溶或極微溶于水，易溶于乙醇等有機(jī)溶劑鈉鹽易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑1.弱酸性(pKa:7.3～8.4)＋12/14/2022一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一級(jí)電離二級(jí)電離烯醇互變12/14/2022一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)2.水解反應(yīng)R2紅色石蕊試紙變藍(lán)12/14/2022一、基本結(jié)結(jié)構(gòu)與主要要性質(zhì)巴比妥鈉注注射液不能能預(yù)先配制制進(jìn)行加熱熱滅菌，須須制成粉針針劑，臨用用時(shí)溶解。。12/8/2022一、基本結(jié)結(jié)構(gòu)與主要要性質(zhì)3.與金屬屬離子反應(yīng)應(yīng)a.與銀鹽鹽的反應(yīng)5,5－取代的巴比妥類藥物＋AgNO3Na2CO3可溶性的一銀鹽AgNO3二銀鹽白色沉淀巴比妥類藥藥物分子結(jié)結(jié)構(gòu)中含有有酰亞胺基基團(tuán),在碳碳酸鈉溶液液中生成鈉鈉鹽而溶解解,因而可可與硝酸銀銀反應(yīng)12/8/2022白色色難難溶溶性性二二銀銀鹽鹽AgNO3Na2CO3滴加AgNO3Ag與銀銀鹽鹽的的反反應(yīng)應(yīng)用這這種種形形式式表表示示也也是是一一樣樣的的12/8/2022一、、基基本本結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)與與主主要要性性質(zhì)質(zhì)3.與與金金屬屬離離子子反反應(yīng)應(yīng)b.與與銅銅鹽鹽的的反反應(yīng)應(yīng)巴比比妥妥類類藥藥物物在在吡吡啶啶溶溶液液中中生生成成烯烯醇醇式式異異構(gòu)構(gòu)體體,可可與與吡吡啶啶試試劑劑反反應(yīng)應(yīng)形形成成穩(wěn)穩(wěn)定定的的配配位位化化合合物物,產(chǎn)產(chǎn)生生類類似似雙雙縮縮脲脲的的呈呈色色反反應(yīng)應(yīng)12/8/2022一、、基基本本結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)與與主主要要性性質(zhì)質(zhì)3.與與金金屬屬離離子子反反應(yīng)應(yīng)b.與與銅銅鹽鹽的的反反應(yīng)應(yīng)巴比比妥妥類類＋銅吡吡啶啶顯色色巴比比妥妥類類————紫紫色色或或紫紫色色沉沉淀淀硫巴巴比比妥妥類類————綠綠色色12/8/2022水吡啶啶部分分離離子子化化＋有色色配配位位化化合合物物與銅銅鹽鹽的的反反應(yīng)應(yīng)用這這種種形形式式表表示示也也是是一一樣樣的的12/8/2022一、、基基本本結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)與與主主要要性性質(zhì)質(zhì)c.與與鈷鈷鹽鹽的的反反應(yīng)應(yīng)Co(NO3)2、CoO、、Co(Ac)2異丙丙胺胺無(wú)水水甲醇醇或或乙乙醇醇12/8/2022d.與與汞汞鹽鹽的的反反應(yīng)應(yīng)一、、基基本本結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)與與主主要要性性質(zhì)質(zhì)巴比比妥妥類類藥藥物物+汞汞鹽鹽→→白白色色↓↓（（可可溶溶于于氨氨試試液液））12/8/2022一、、基基本本結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)與與主主要要性性質(zhì)質(zhì)4.香香草草醛醛反反應(yīng)應(yīng)(Vanillin)戊巴巴比比妥妥鑒鑒別別：：取戊戊巴巴比比妥妥10mg，加加香香草草醛醛約約10mg和硫硫酸酸2ml，混混合合后后在在水水浴浴上上加加熱熱2min，顯顯棕棕紅紅色色。。放放冷冷，，小小心心加加入入乙乙醇醇5ml，即即顯顯紫紫色色并并變變成成藍(lán)藍(lán)色色。。12/8/2022一、基本本結(jié)構(gòu)與與主要性性質(zhì)5.紫外外吸收光光譜特征征λ(nm)2902702502300.51.01.5A巴比妥類藥物的紫外吸收光譜ABC240nm255nmA.H2SO4液(0.05mol/L,未未電離)B.pH9.9緩沖液液(一級(jí)級(jí)電離)C.pH13NaOH液(1mol/L,二級(jí)電電離)1,5,5-三三取代巴巴比妥類類藥物不不存在二二級(jí)電離離，最大大吸收波波長(zhǎng)不變變。12/8/2022一、基本本結(jié)構(gòu)與與主要性性質(zhì)3202802402000.80.50.2λ(nm)A238287304硫代巴比比妥的紫紫外吸收收光譜A.HCl液(0.1mol/L)B.NaOH液液(0.1mol/L)6.薄層層色譜行行為特征征12/8/20227.顯微微結(jié)晶一、基本本結(jié)構(gòu)與與主要性性質(zhì)藥物本身身晶形反應(yīng)產(chǎn)物物晶形12/8/2022二、鑒鑒別試試驗(yàn)(一)丙二二酰脲脲類的的鑒別別試驗(yàn)驗(yàn)取供試試品約約0.1g，加加碳酸酸鈉試試液1ml與水水10ml，振振搖2min，，濾過(guò)過(guò)，濾濾液中中逐滴滴加入入硝酸酸銀試試液，，即生生成白色沉沉淀，振搖搖，沉沉淀即即溶解解；繼繼續(xù)滴滴加過(guò)過(guò)量的的硝酸酸銀試試液，，沉淀不不再溶溶解。取供試試品約約50mg，加加吡啶啶溶液液(1→10)5ml，溶溶解后后，加加銅吡吡啶試試液1ml，即即顯紫色色或生生成紫紫色沉沉淀。銀鹽反反應(yīng)銅鹽反反應(yīng)12/8/2022(二)測(cè)定定熔點(diǎn)二、鑒別試試驗(yàn)巴比妥類的的鈉鹽＋酸酸→游游離巴比妥妥類藥物↓↓→過(guò)過(guò)濾→洗洗滌→→干燥→→測(cè)熔點(diǎn)點(diǎn)(三)利用用特殊取代代基或元素素的鑒別試試驗(yàn)利用不飽和取代代基的鑒別試驗(yàn)驗(yàn)(司可巴比妥妥鈉)利用芳環(huán)取代基基的鑒別試驗(yàn)驗(yàn)(苯巴比妥鈉鈉)硫色素反應(yīng)(硫代巴比妥妥類)12/8/2022二、鑒別試試驗(yàn)1.司可巴巴比妥鈉的的鑒別I2褪色Br2KMnO412/8/2022二、鑒別試驗(yàn)驗(yàn)2.苯巴比妥妥的鑒別a.硝硝化反反應(yīng)b.硫酸-亞硝硝酸鈉鈉反應(yīng)應(yīng)苯巴比比妥與與NaNO2-H2SO4反應(yīng)生生成橙黃色色→橙紅色色c.甲醛醛-硫硫酸反反應(yīng)苯巴比比妥與與甲醛醛-H2SO4反應(yīng)生生成玫瑰紅紅色環(huán)環(huán)區(qū)分苯苯巴比比妥與與不含含芳環(huán)環(huán)取代代的巴巴比妥妥類藥藥物。。12/8/2022二、鑒別試試驗(yàn)3.硫代巴巴比妥類的的鑒別———硫色素反反應(yīng)硫代巴比妥妥類與巴比比妥類的區(qū)區(qū)別以前12/8/2022三、特殊殊雜質(zhì)試試驗(yàn)(一)苯苯巴比妥妥ⅠⅡⅢ12/8/2022三、特殊雜質(zhì)質(zhì)試驗(yàn)12/8/2022三、特殊雜質(zhì)質(zhì)試驗(yàn)1.酸度中間體Ⅱ乙酰酰化不完全時(shí)時(shí)，Ⅱ與尿素素縮合產(chǎn)生的的雜質(zhì)Ⅱ苯基丙二酰脲脲酸性較強(qiáng)檢查方法取本品0.20g，加水水10ml，，煮沸攪拌1min，放放冷，濾過(guò)后后，取濾液5ml，加甲甲基橙指示液液1滴，不得顯紅色12/8/20222.乙醇溶液澄清清度三、特殊雜質(zhì)質(zhì)試驗(yàn)檢查中間體Ⅰ等乙醇中不溶溶物。取本品1.0g，加乙醇醇5ml，加加熱回流3min，溶液液應(yīng)澄清3.中性或堿性物物質(zhì)(提取重重量法,溶解度差異)副產(chǎn)物：2-苯基丁酰(胺)脲或分分解產(chǎn)物不溶于NaOHT.S.而溶于乙醚分液漏斗NaOHT.S.乙醚H2O過(guò)濾干燥濾紙蒸發(fā)皿105℃1hr<3mg取本品1.0g乙醚，H2O洗3次濾液蒸干殘?jiān)?2/8/2022銀量法巴比妥類藥物物在適當(dāng)?shù)膲A堿性溶液中,易與重金屬屬離子反應(yīng),并可定量地地形成鹽,因因而可用銀量量法進(jìn)行滴定定。在滴定過(guò)程中中,可以通過(guò)過(guò)生成沉淀進(jìn)進(jìn)產(chǎn)生的混濁濁指示滴定終終點(diǎn).但容易易出現(xiàn)誤差。。改用甲醇及3%的無(wú)水碳碳酸鈉溶劑系系統(tǒng),采用Ag-玻璃電電極系統(tǒng)電位位法指示終點(diǎn)點(diǎn),方法改善善,為chp2010所所用。四、含量測(cè)定定12/8/2022四、含量測(cè)定定(一)銀量量法(Argentometry)0.2g甲醇

40ml異戊巴比妥測(cè)定3%無(wú)水碳酸鈉電位滴定法(AgNO3)指示電極(Ag)參比電極(玻璃/甘汞汞)12/8/2022四、含量測(cè)測(cè)定(二)溴溴量法:溴過(guò)量,再再用KI反反應(yīng),再用用硫代硫酸酸鈉滴定.司可巴比妥妥鈉測(cè)定取本品約0.1g，精密稱定定，置250ml碘瓶中，加加水10ml，振搖使溶溶解，精密密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞塞并振搖1min，在暗處?kù)o置15min后，注意微微開(kāi)瓶塞，，加碘化鉀試液10ml，立即密塞塞，搖勻后后，用硫代代硫酸鈉滴滴定液（0.05mol/L）滴定，至至近終點(diǎn)時(shí)時(shí)，加淀粉粉指示液，，繼續(xù)滴定定至藍(lán)色消消失，并將將滴定結(jié)果果用空白試驗(yàn)校校正。每1ml溴滴定液（（0.05mo1/L）相當(dāng)于13.01mg的C12H17N2NaO3。12/8/2022四、含量測(cè)測(cè)定(三)酸酸堿滴定法法(Acid-basetitrationmethod)水-乙醇混混合溶劑中中滴定膠束束水水溶溶液液中中滴滴定定非水水滴滴定定法法12/8/2022四、、含含量量測(cè)測(cè)定定異戊巴比妥水—醇溶解麝香草酚酞NaOH淡藍(lán)色1.水水-乙乙醇醇混混合合溶溶液液12/8/20222.膠膠束束水水溶溶液液四、、含含量量測(cè)測(cè)定定正膠束反膠束H2O溴化化十十六六烷烷基基三三甲甲基基芐芐銨銨Cetyltrimethylbenzylammoniumbromide，CTMA氯化化四四癸癸基基二二甲甲基基芐芐銨銨Tetradecyldimethylbenzylammoniumchloride，TDBA巴比妥類表面活性劑溶解麝香草酚酞指示劑NaOH滴定12/8/2022四、、含含量量測(cè)測(cè)定定3.非非水水滴滴定定法法溶劑劑：二二甲甲基基甲甲酰酰胺胺、、甲甲醇醇、、丙丙酮酮、、三三氯氯甲甲烷烷、、無(wú)無(wú)水水乙乙醇醇、、苯苯、、吡吡啶啶、、甲甲醇醇-苯苯、、乙乙醇醇-三三氯氯甲甲烷烷滴定定劑劑：甲甲醇醇鈉鈉（（鉀鉀））、、氫氫氧氧化化四四丁丁基基胺胺指示示劑劑：麝麝香香草草酚酚藍(lán)藍(lán),也也可可以以用用電電位位法法指指示示終終點(diǎn)點(diǎn)12/8/2022四、含含量測(cè)測(cè)定(四)紫紫外分分光光光度法法直接測(cè)測(cè)定的的UV法提取分分離后后的UV法法12/8/2022四、含含量測(cè)測(cè)定注射用用硫噴噴妥鈉鈉含量量測(cè)定定取裝量量差異異項(xiàng)下下的內(nèi)內(nèi)容物物，混混合均均勻，，精密密稱取取適量(約相當(dāng)當(dāng)于硫硫噴妥妥鈉0.25g)，置置500ml量瓶中中，搖搖勻，，量取取此溶溶液用用0.4%NaOH溶液定定量稀稀釋制制成每每1ml中約含含5μg的溶液液；另取硫噴妥妥對(duì)照品品，精密密稱定定，加加0.4%NaOH溶液溶溶解并并定量量稀釋釋制成成每1ml中約含含5μg的溶液液。用1cm吸收池池，于于304nm波長(zhǎng)處處分別別測(cè)定定吸收收度，，以0.4%NaOH溶液作作空白白。根根據(jù)每每支的的平均均裝量量計(jì)算算。每每1mg的的硫噴噴妥鈉鈉相當(dāng)當(dāng)于1.091mg的C11H19N2NaO2S12/8/2022四、含量測(cè)測(cè)定USP24法測(cè)定苯苯巴比妥含含量巴比妥類藥藥物適量，，加水使其其溶解后，，加酸酸化化，用三氯氯甲烷提取取巴比妥類類藥物，三三氯甲烷提提取液加入入pH7.2～7.5的緩沖沖液，振搖搖，分離棄棄去水相緩緩沖液層，，再用氫氧氧化鈉自三三氯甲烷中中提取巴比比妥類藥物物，調(diào)節(jié)堿堿提取液的的pH值，，然后選用用相應(yīng)的吸吸收波長(zhǎng)進(jìn)進(jìn)行測(cè)定。。提取后的UV分光光光度法,消消除干擾12/8/2022(五)HPLC法法五、體內(nèi)藥藥物分析12/8/2022第二節(jié)苯苯并二氮氮雜卓類藥藥物的分析析NNClH3CO1234567892’地西泮(diazepam)七元亞胺內(nèi)內(nèi)酰胺環(huán)奧普唑侖奧沙西泮(Oxazepam)氯氮卓(Chlordiazepoxide)NNNCH3OClH12/8/2022理化性質(zhì)通常為白色色或微黃色色結(jié)晶或結(jié)結(jié)晶性粉末末；具有一一定的熔點(diǎn)點(diǎn)。一般不溶或或極微溶于于水，溶于于丙酮或三三氯甲烷等等有機(jī)溶劑劑。具有弱堿性性；水解性性；UV吸吸收特性。。12/8/2022一、鑒別試試驗(yàn)(一)化化學(xué)鑒別別試驗(yàn)1.沉淀反反應(yīng)氯氮卓橙紅色沉淀阿普唑侖＋KBiI4鹽酸氟西泮泮生生成成橙紅色沉淀氯硝西泮放置后，沉沉淀顏色變變深因此可以相相互區(qū)別。。阿普唑侖+硅鎢鎢酸白白色沉沉淀，藥典典中也用于于鑒別。鑒別試驗(yàn)12/8/20222.水解后呈呈芳伯胺反應(yīng)應(yīng)氯氮卓和奧沙沙西泮的鹽酸酸溶液(1→→2)，緩緩緩加熱煮沸，，放冷，加亞亞硝酸鈉和堿堿性β-萘酚酚試液，生成成橙紅色沉淀淀，后者放置置后顏色變暗暗。3.分解產(chǎn)物物的反應(yīng)有機(jī)氯化合物物，氧瓶燃燒燒法破壞，生生成HCl，，以5%氫氧氧化鈉溶液吸吸收，硝酸酸酸化，顯氯化化物反應(yīng)。鑒別試驗(yàn)12/8/20224.硫酸－熒熒光反應(yīng)：苯并二氮雜卓卓類藥物溶于于硫酸/稀硫硫酸在紫外光光(365nm)下顯不不同的顏色。。藥物硫酸稀硫酸地西泮黃綠色黃色氯氮卓黃色紫色艾司唑侖亮綠色天藍(lán)色硝西泮淡藍(lán)色藍(lán)綠色鑒別試驗(yàn)12/8/2022(二)UV藥物溶劑C(μg/ml)λmax(nm)A地西泮0.5%硫酸甲醇溶液5242約0.51282約0.23366－氯氮卓鹽酸(9→1000)7245、3080.65阿普唑侖鹽酸(9→1000)12264－鹽酸氟西泮硫酸甲醇(1→36)10239±2、284±2比值1.95~2.50362±2－氯硝西泮0.5%硫酸甲醇溶液10239±2，307±2－奧沙西泮乙醇10229，315±2(較弱)鑒別試驗(yàn)12/8/2022(三)TLC硅膠G薄層板板，苯－丙酮酮(3:2)為展開(kāi)劑，，稀硫酸噴霧霧，105℃℃干燥30min，紫外外燈下檢視熒熒光斑點(diǎn)藥物Rf值斑點(diǎn)顏色*單一點(diǎn)樣混合點(diǎn)樣自然光254nm365nm地西泮0.800.78無(wú)色黃色(m)黃色(m)氯氮卓0.340.34無(wú)色藍(lán)紫色(s)藍(lán)紫色(w)艾司唑侖0.220.20無(wú)色灰紫色(m)藍(lán)紫色(m)硝西泮0.720.72黃色紫色(w)紫色(w)奧沙西泮0.490.52黃色亮灰藍(lán)色(s)亮灰藍(lán)色(s)*s,m,w分別表表示熒光的強(qiáng)強(qiáng)、中、弱鑒別試驗(yàn)12/8/2022二、、有有關(guān)關(guān)物物質(zhì)質(zhì)檢檢查查T(mén)LCHPLCGC雜質(zhì)質(zhì)檢檢查查12/8/2022含量量測(cè)測(cè)定定非水水溶溶液液滴滴定定法法非水水酸酸量量法法非水水堿堿量量法法紫外外分分光光光光度度法法對(duì)照照品品比比較較法法吸收收系系數(shù)數(shù)法法高效效液液相相色色譜譜法法12/8/2022一、、非非水水溶溶液液滴滴定定法法當(dāng)HA酸酸性性較較強(qiáng)強(qiáng)時(shí)時(shí)，，反反應(yīng)應(yīng)不不能能定定量量完完成成，，必必須須除除去去或或降降低低HA的的酸酸性性，，使使反反應(yīng)應(yīng)順順利利地地完完成成。。BH+