微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002

12022/12/14

黃文輝青海大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化培訓(xùn)

12022/12/12微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化培訓(xùn)2022/12/142我們應(yīng)該追求：

“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”

“針對性病原學(xué)治療”

正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送，是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！

微生物讓人類步步為營!2022/12/122我們應(yīng)該追求：

“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”

2022/12/143

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和人類對疾病的不斷認(rèn)識，醫(yī)學(xué)的學(xué)科分類越來越細(xì)，疾病的分類越來越完善，而與之相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)也日趨精密復(fù)雜。在多數(shù)情況下，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)比病人的主訴敏感、準(zhǔn)確、客觀，而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對疾病的診斷和治療越來越依賴于實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果?！熬由魇?，差之毫厘，謬以千里”

——《禮記》2022/12/123

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和人類對2022/12/144良好的標(biāo)本是成功了一半！

為了取得準(zhǔn)確的、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，必須取得高質(zhì)量的標(biāo)本。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量的檢驗(yàn)的第一步。沒有高質(zhì)量的標(biāo)本，再先進(jìn)、再精密的儀器也得不出準(zhǔn)確的結(jié)果，而很多采集標(biāo)本的患者和醫(yī)務(wù)人員都有忽視了標(biāo)本的采集質(zhì)量而引起結(jié)果很大的偏差的經(jīng)歷。2022/12/124良好的標(biāo)本是成功了一半！2022/12/145標(biāo)本采集和運(yùn)送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵；但由于標(biāo)本的采集和運(yùn)送常有護(hù)士或醫(yī)生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道問題所在之處，造成的后果是？．．．．．．

臨床醫(yī)生最不能接受的問題:陽性率低、標(biāo)本污染2022/12/125標(biāo)本采集和運(yùn)送是細(xì)菌培養(yǎng)成功2022/12/146棉花纖維+竹/木條

抑菌區(qū)是因?yàn)椋褐参锓置诔鰜淼模褐舅幔粯渲?；福爾馬林；2022/12/1262022/12/147氯氣，重金屬與膠水的影響

2022/12/127氯氣，重金屬與膠水的推薦使用專業(yè)運(yùn)送培養(yǎng)基

多用途運(yùn)送系統(tǒng)–需氧+厭氧低氧化的環(huán)境–不會對標(biāo)本的微生物造成損害拭子是深入培養(yǎng)基中來保護(hù)苛養(yǎng)菌與厭氧菌兩面是以塑料密封,不透水和漏氣–減少污染和維持缺氧環(huán)境推薦使用專業(yè)運(yùn)送培養(yǎng)基多用途運(yùn)送系統(tǒng)–需氧流感嗜血桿菌在三種不

同的運(yùn)送基的存活率流感嗜血桿菌在三種不

同的運(yùn)送基的存活率2022/12/1410基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.棉拭子標(biāo)本宜用運(yùn)送培養(yǎng)基6.混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)7.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑8.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗(yàn)?zāi)康?022/12/1210基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原2022/12/1411如何提高細(xì)菌陽性檢出率？標(biāo)本采集時(shí)機(jī)標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運(yùn)送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境2022/12/1211如何提高細(xì)菌陽性檢出率？標(biāo)本采集時(shí)機(jī)2022/12/1412“正確的微生物學(xué)檢驗(yàn)始自正確的標(biāo)本采取。臨床醫(yī)師、護(hù)師及檢驗(yàn)技師都必須通曉其要領(lǐng)?！?/p>

——著名的臨床微生物檢驗(yàn)專著ManualofClinicalMicrobiology的主編PatrickMurray2022/12/1212“正確的微生物學(xué)檢驗(yàn)始自正確的標(biāo)本采細(xì)菌學(xué)試驗(yàn)的各種標(biāo)本的運(yùn)送及貯存條件

細(xì)菌學(xué)試驗(yàn)的各種標(biāo)本的運(yùn)送及貯存條件正常菌群的分布位部常見菌種皮膚表皮葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等口腔鏈球菌（甲型或乙型）、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、類白喉?xiàng)U菌等鼻咽腔甲型鏈球菌、卡他球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等眼結(jié)膜皮表葡萄球菌、結(jié)膜干燥桿菌、類白喉?xiàng)U菌等胃正常一般無菌

腸道類桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌等陰道乳酸桿菌、白色念球菌、類白喉?xiàng)U菌、大腸桿菌等

尿道表皮葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、恥垢桿菌等正常菌群的分布位部常見菌種皮膚表皮葡152022/12/14血培養(yǎng)標(biāo)本采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作152022/12/12血培養(yǎng)標(biāo)本采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1416一、血培養(yǎng)指征患者出現(xiàn)寒戰(zhàn)、體溫超過38℃或低體溫，懷疑血流感染時(shí)，尤其存在以下情況時(shí)，應(yīng)抽血做細(xì)菌和真菌培養(yǎng)：醫(yī)院內(nèi)肺炎；留置中心靜脈導(dǎo)管超過72小時(shí)；感染性心內(nèi)膜炎；骨髓炎；有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病；免疫缺陷伴全身感染癥狀；臨床醫(yī)生懷疑有血液感染可能的其他情況。2022/12/1216一、血培養(yǎng)指征2022/12/1417二、采血時(shí)機(jī)一旦懷疑有血流感染可能，應(yīng)立即采血做血培養(yǎng)，最好在抗生素使用前或停用抗生素24小時(shí)后，以寒戰(zhàn)、發(fā)熱時(shí)采集為宜。2022/12/1217二、采血時(shí)機(jī)2022/12/14182022/12/12182022/12/1419

三、采血流程㈠消毒1、培養(yǎng)瓶消毒程序：用消毒液消毒培養(yǎng)瓶橡皮塞，待干燥后使用。2、皮膚消毒程序：用消毒液從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達(dá)5cm以上，待消毒液揮發(fā)干燥后（常需30秒以上）穿刺采血。㈡靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種成人用注射器無菌穿刺取血后，排盡針頭內(nèi)空氣，直接注入血培養(yǎng)瓶，勿換針頭（如果行第二次穿刺或用頭皮針取血時(shí)，應(yīng)換針頭），先注入?yún)捬跖囵B(yǎng)瓶，避免注入空氣，然后注入需氧培養(yǎng)瓶，輕輕混勻以防血液凝固。近年來，臨床普遍采用負(fù)壓血培養(yǎng)瓶，將血從患者靜脈直接吸入血培養(yǎng)瓶，減少污染環(huán)節(jié)。2022/12/1219三、采血流程2022/12/1420㈢注意事項(xiàng)1、檢驗(yàn)單需注明抗菌藥物使用情況、血液采集時(shí)間和部位、臨床診斷等患者信息。2、采血部位通常為肘靜脈，疑為細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)以肘動脈或股動脈采血為宜，切忌在靜滴抗生素的靜脈處采血。除非懷疑有導(dǎo)管相關(guān)的血流感染，否則不應(yīng)從留置靜脈或動脈導(dǎo)管取血，因?yàn)閷?dǎo)管易被皮膚正常菌群污染。3、采血次數(shù)：對于成年患者，應(yīng)該同時(shí)分別在兩個(gè)部位采集血標(biāo)本，在兩個(gè)不同部位分離到同樣菌種才能確定是病原菌。2022/12/1220㈢注意事項(xiàng)微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件0022022/12/14224、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎：在24小時(shí)內(nèi)取血3次，每次間隔不少于30分鐘。必要時(shí)次日再做血培養(yǎng)2次。5、采血量：以培養(yǎng)基與血液之比10:1為宜，以稀釋血液中的抗菌藥物、抗體等殺菌物質(zhì)。采血量少會明顯降低陽性率。成人每次每培養(yǎng)瓶采血8~10ml，嬰幼兒每次培養(yǎng)瓶采血2ml。2022/12/12224、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎：在24小時(shí)內(nèi)取血微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002四、運(yùn)送要求1、所有標(biāo)本采集后都應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2小時(shí)內(nèi)，如果不能及時(shí)送檢，宜置于室溫環(huán)境。血培養(yǎng)瓶送到檢驗(yàn)科放入培養(yǎng)箱前，不應(yīng)暫存于冰箱內(nèi)。2、送檢標(biāo)本應(yīng)正確粘貼條形碼，注明采樣時(shí)間和送檢時(shí)間。3、安全防護(hù)：放標(biāo)本的容器必須防漏，禁止將滲漏的標(biāo)本送往實(shí)驗(yàn)室。四、運(yùn)送要求微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件0022022/12/1430尿液標(biāo)本采集和運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1230尿液標(biāo)本采集和運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1431一、采集時(shí)機(jī)宜為抗菌藥物使用前的清晨第一次尿液。二、采集方法（一）、清潔中段尿1、女性：采集前用肥皂水或0.1%的高錳酸鉀溶液等沖洗外陰，用手指分開陰唇，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10~20ml于無菌容器內(nèi)。2、男性：采集前用肥皂水或0.05%~0.1%的碘伏溶液清洗尿道口，擦干后上翻包皮，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10~20ml于無菌容器內(nèi)。（二）、恥骨上膀胱穿刺主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒，脊柱損傷患者的尿液采集。先用0.25%的碘伏消毒穿刺部位皮膚，然后使用無菌注射器直接從恥骨聯(lián)合與臍連線上高于恥骨聯(lián)合2cm處刺入膀胱吸取尿液10~20ml于無菌容器內(nèi)。2022/12/1231一、采集時(shí)機(jī)2022/12/1432（三）、導(dǎo)尿管尿1、直接導(dǎo)尿法：使用0.05%~0.1%的碘伏溶液消毒會陰局部，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，先棄其前段尿液約15ml，再留取中段尿10~20ml于無菌容器內(nèi)。2、留置導(dǎo)尿管法：醫(yī)院內(nèi)尿路感染中，臨床最常用方法。采集前先夾住導(dǎo)尿管，采集時(shí)則松管棄其前段尿液，使用0.25%~0.5%的碘伏消毒導(dǎo)尿管的采樣部位，使用無菌注射器斜刺入導(dǎo)尿管（從采樣口或靠近尿道的導(dǎo)尿管管壁）抽取10~20ml尿液于無菌容器內(nèi)。3、回腸造口導(dǎo)尿管法：摘除導(dǎo)管，棄去里面的尿液，先用0.05%~0.1%的碘伏消毒吻合口，再將導(dǎo)尿管插入到清潔的吻合口，直至筋膜的深部采集10~20ml尿液于無菌容器內(nèi)。2022/12/1232（三）、導(dǎo)尿管尿2022/12/1433（四）、小兒收集包對于無自控能力的小兒可應(yīng)用收集包采集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。如果檢驗(yàn)結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析，必要時(shí)可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M(jìn)行復(fù)檢。三、標(biāo)本運(yùn)送標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢并接種，室溫下保持時(shí)間不宜超過2小時(shí)（夏季保存時(shí)間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存）。如果不能及時(shí)運(yùn)送或接種，應(yīng)4℃冷藏。但保存時(shí)間也不應(yīng)超過8小時(shí)。2022/12/1233（四）、小兒收集包2022/12/1434四、注意事項(xiàng)1.不應(yīng)從集尿袋中采集尿液。2.尿液中不應(yīng)加防腐劑或消毒劑3.若尿液培養(yǎng)前患者曾使用抗菌藥物，應(yīng)反復(fù)多次送檢。4.多次采集或24小時(shí)尿液不應(yīng)用于尿液培養(yǎng)。5.除非進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，不應(yīng)對長期留置導(dǎo)尿管患者常規(guī)進(jìn)行尿液培養(yǎng)。6.培養(yǎng)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)、菌落計(jì)數(shù)以及微生物種類等進(jìn)行綜合判斷。2022/12/1234四、注意事項(xiàng)手術(shù)部位感染標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)化操作手術(shù)部位感染標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)化操作一、一般原則1.在抗菌藥物使用前，且僅在有臨床感染癥狀或傷口惡化或長期不能愈合時(shí)采集標(biāo)本。2.皮膚或黏膜表面的清潔。⑴閉合傷口和穿刺物標(biāo)本：消毒方法同血培養(yǎng)標(biāo)本的皮膚消毒。⑵開放傷口：無菌生理鹽水充分沖洗傷口部位，不可以用消毒劑。3.采集新鮮的感染組織，避免采集淺表的組織碎屑。4.若可以采集穿刺物或活檢標(biāo)本，應(yīng)避免拭子標(biāo)本。二、容器1.較大的標(biāo)本：含有少量生理鹽水的帶螺紋口的無菌塑料容器。2.標(biāo)本較小或拭子標(biāo)本：MW&ETRANSWAB運(yùn)輸培養(yǎng)基，適用于需氧和厭氧菌。一、一般原則三、采集方法㈠封閉性膿腫1.注射器穿刺抽取膿液。2.若無法抽到膿液，應(yīng)先皮下注射少量無菌生理鹽水，再次穿刺抽吸膿液；若膿液過多，應(yīng)先切開引流，在基底部或膿腫壁采集標(biāo)本。膿液的量以大于1ml為宜。3.排除注射器內(nèi)部及針頭的氣體，用無菌橡皮塞封閉針頭送檢；或直接打入血培養(yǎng)瓶中。疑為厭氧菌，應(yīng)迅速將膿液打入?yún)捬跹囵B(yǎng)瓶中。㈡組織和活檢標(biāo)本1.采集足夠大的組織，體積以1mm3為宜，避免在壞死區(qū)域采集。2.將小塊的組織放在運(yùn)輸培養(yǎng)基內(nèi)；較大的放在無菌容器中，并加入少量無菌生理鹽水。三、采集方法㈢開放傷口1.無菌生理鹽水徹底沖洗淺表部位，去除表面的滲出物和碎屑。2.用拭子深入傷口的基底部或傷口-正常組織邊緣部采集兩個(gè)標(biāo)本，分別用于培養(yǎng)和革蘭氏染色。四、標(biāo)本的標(biāo)識填寫患者信息、標(biāo)本類型（深部組織、表淺組織、膿腫和穿刺物等）、標(biāo)本的來源（腹腔、腿和上臂等），記錄標(biāo)本采集的日期和時(shí)間及是否在使用抗生藥物前采集，選擇檢查項(xiàng)目（需氧培養(yǎng)或厭氧培養(yǎng)）。五、標(biāo)本的送檢為了更好地分離病原菌，標(biāo)本應(yīng)在采集后的30分鐘內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，送檢時(shí)應(yīng)保持標(biāo)本的濕潤（盡量采用運(yùn)輸培養(yǎng)基，組織可以放在生理鹽水中）。在送檢前或運(yùn)送過程中，禁止將標(biāo)本放于冰箱。若不能及時(shí)送檢，運(yùn)輸培養(yǎng)基中標(biāo)本應(yīng)室溫保存。但最長不可超過24小時(shí)。㈢開放傷口2022/12/1439膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本的采

集及運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作

2022/12/1239膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本的采

2022/12/1440

(1)應(yīng)首先用無菌生理鹽水清洗膿液及病灶的雜菌，再采集標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。(2)一般用棉拭子采取膿血液及病灶的深部的分泌物，瘺管也可以無菌手續(xù)采取組織放入無菌試管內(nèi)送檢。2022/12/1240(1)應(yīng)首先用無菌生理鹽水清洗膿液2022/12/1441

(3)膿腫標(biāo)本以無菌注射器抽取為好，最好在切開排膿時(shí)，以無菌棉拭子采取，也可以將沾有膿汁的最內(nèi)層敷料放人無菌平皿中送檢。2022/12/1241(3)膿腫標(biāo)本以無菌注射器抽取為好2022/12/1442

（4）先用無菌生理鹽水棉簽擦拭切口表面2遍，去除表面的污染菌，再用含生理鹽水的無菌棉簽用力擦拭病灶邊緣或膿腔囊壁后放入無菌試管中送細(xì)菌室。厭氧培養(yǎng)時(shí)應(yīng)吸取深部標(biāo)本而不能擦拭表面。2022/12/1242（4）先用無菌生理鹽水棉簽擦拭切口2022/12/1443其他事項(xiàng)

疑有放線菌感染時(shí)選取膿液中的“硫磺樣顆?！庇跓o菌容器內(nèi)送檢當(dāng)創(chuàng)傷出血，敷用藥物2h內(nèi)及燒傷在12h內(nèi)不應(yīng)采集標(biāo)本。2022/12/1243其他事項(xiàng)疑有放線菌感染時(shí)選取膿液中2022/12/1444腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集

及運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作

2022/12/1244腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集

2022/12/1445采集時(shí)間：懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液，最是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。采集方法：無菌腰穿采集腦脊液3～5ml，分裝到3個(gè)無菌小瓶中（各1～2ml）。用于細(xì)菌和病毒檢測時(shí)腦脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml。2022/12/1245采集時(shí)間：懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊2022/12/1446標(biāo)本采集后注入無菌小瓶中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。腦膜炎奈瑟菌離體后會迅速自溶,肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌也很容易死亡,因此,標(biāo)本應(yīng)立即送檢,并注意保溫、防干燥。切不可置冰箱保存,否則會影響檢出率。2022/12/1246標(biāo)本采集后注入無菌小瓶中送檢也可將抽2022/12/1447穿刺液類標(biāo)本的采取穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本。采集時(shí)間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或在停止使用抗菌藥物之后2-3d采集標(biāo)本。2022/12/1247穿刺液類標(biāo)本的采取穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括2022/12/1448采集方法：①無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本；②標(biāo)本采集量應(yīng)＞1ml。胸腔積液、腹水可抽取10ml,心包液、關(guān)節(jié)液等可抽取2～5ml。③標(biāo)本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。2022/12/1248采集方法：①無菌操作穿刺抽取標(biāo)本2022/12/1449胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本抽取空腹胃液5ml，置無菌管內(nèi)送檢；膽汁培養(yǎng)標(biāo)本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術(shù)中留取膽汁，采集膽汁量為5ml，置無菌管內(nèi)送檢；胃液和膽汁采集后必須立即送檢。2022/12/1249胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本抽取空腹胃液5ml2022/12/1450眼.耳.鼻培養(yǎng)標(biāo)本的采取

眼、耳、鼻培養(yǎng)標(biāo)本用拭子常規(guī)采集各種標(biāo)本。標(biāo)本采集過程中應(yīng)注意避免被黏膜上的正常菌群污染，標(biāo)本采集后連同拭子一起置無菌管內(nèi)送檢。2022/12/1250眼.耳.鼻培養(yǎng)標(biāo)本的采取2022/12/1451

痰標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1251

痰標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操2022/12/1452一、采集目的一般可用于普通細(xì)菌、分枝桿菌、真菌和軍團(tuán)菌的涂片或培養(yǎng)檢測，經(jīng)氣管穿刺吸引物可用于厭氧菌的檢測。二、一般原則1、采集標(biāo)本的最佳時(shí)機(jī)應(yīng)在使用抗菌藥物之前。2、宜采集清晨第二口痰。3、對于普通細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天一次，連續(xù)2~3天。不建議24小時(shí)內(nèi)多次采集送檢，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變。4、懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。2022/12/1252一、采集目的5、如何獲得較高“質(zhì)量”的痰？

清晨頭幾口(2-3口）痰菌的陽性率高，因?yàn)楹粑纼?nèi)的分泌物經(jīng)過一夜的聚集總比白天吐的1口痰中含菌量多。如果病人痰多則以第3-4口痰為更好，這是因?yàn)轭^1-2口痰往往混有咽喉部的分泌物，而第3—4口痰來自呼吸道的深部。要想留到理想的痰標(biāo)本，病人清晨起床后先做幾次深呼吸，然后用力咳嗽以得到呼吸道深部的痰。所以在告訴病人留痰標(biāo)本時(shí)，不應(yīng)僅簡單地說一聲留早晨第一口痰就算了，而應(yīng)具體加以指導(dǎo)，不然痰培養(yǎng)的陽性率不會高。

5、如何獲得較高“質(zhì)量”的痰？

清晨頭幾口(2-3口）痰2022/12/1454三、采集方法㈠自然咳痰法與霧化導(dǎo)痰法1、用物準(zhǔn)備：無菌容器、生理鹽水（250ml或500ml）、化驗(yàn)單。2、核對患者床號、姓名等。3、無痰或痰量極少者可用3%~5%氯化鈉溶液5ml霧化吸入約5分鐘后留取痰液。4、如有可能，應(yīng)在醫(yī)護(hù)人員直視下留取清晨第二口痰。囑咐患者留取前摘去牙托、清潔口腔、如刷牙后反復(fù)生理鹽水漱口；深吸氣后用力自氣管深部咳出痰液，置無菌容器內(nèi)，應(yīng)盡可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入樣品，不應(yīng)用紙巾包裹痰液。㈡支氣管鏡法鼻或口腔插入支氣管鏡。常用采集方法有經(jīng)支氣管鏡吸引、支氣管肺泡灌洗、防污染毛刷采用或防污染支氣管肺泡灌洗等。2022/12/1254三、采集方法2022/12/1455㈢經(jīng)人工氣道吸引法1、用物準(zhǔn)備：負(fù)壓吸引器、生理鹽水、一次性吸痰管、無菌手套、無菌容器（試管）、化驗(yàn)單。2、核對患者床號、姓名等。3、將患者頭部轉(zhuǎn)向操作者一側(cè)。4、進(jìn)行手衛(wèi)生后將一次性吸痰管末端拆開，連接吸引器，調(diào)節(jié)吸引器至適宜負(fù)壓（成人：40.0~53.3kPa；小兒：＜40.0kPa）。5、將一次性吸痰管外包裝去除，戴手套持吸痰管試吸生理鹽水，檢查管道是否通暢。2022/12/1255㈢經(jīng)人工氣道吸引法2022/12/14566、折疊一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工氣道至適宜深度，放開吸痰管末端，輕柔、靈活、迅速地左右旋轉(zhuǎn)上提吸痰管吸痰。見吸痰管內(nèi)有痰液吸出，即折疊一次性吸痰管退出。將一次性吸痰管與吸引器分離（使用人工呼吸機(jī)者，一次吸痰時(shí)間不超過15秒，吸痰前后需吸入高濃度氧氣1——2分鐘）。7、將痰液注入無菌容器內(nèi)，如痰液黏稠可用一次性針筒向吸痰管末端注入少量生理鹽水，將痰液沖洗入無菌容器內(nèi)。四、運(yùn)送和保存應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，否則應(yīng)4℃冷藏，但放置時(shí)間不可超過24小時(shí)。2022/12/12566、折疊一次性吸痰管末端，插入口腔或微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件0022022/12/1458上呼吸道標(biāo)本的采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1258上呼吸道標(biāo)本的采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1459【標(biāo)本送檢指征】1病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時(shí)，懷疑為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。2細(xì)菌性咽－扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達(dá)39℃以上。3上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管－支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。2022/12/1259【標(biāo)本送檢指征】2022/12/1460【標(biāo)本的采集方法】囑患者先用清水漱口，由檢查者將其舌外拉使懸雍垂盡可能向外牽引,用壓舌板將舌向下向外壓，用無菌棉拭子越過舌根到咽后壁或懸雍垂的后側(cè),反復(fù)擦拭數(shù)次然后送檢，拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔粘膜和唾液。2022/12/1260【標(biāo)本的采集方法】2022/12/1461生殖道標(biāo)本的采集

1、男性標(biāo)本：（1）如疑為急性淋病奈瑟菌或其他化膿性細(xì)菌感染應(yīng)在清洗龜頭部后，以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒劑消毒后，擠出分泌物立即以無菌棉拭子采取，立即送檢，或以專用的細(xì)拭子插入尿道口1-2cm，停留十余秒鐘輕輕旋轉(zhuǎn)采集標(biāo)本置無菌容器。（2）如疑為前列腺炎、精囊炎的慢性淋病耐瑟菌感染應(yīng)由醫(yī)師按摩前列腺，以無菌手續(xù)自尿道口采取前列腺液送檢。2022/12/1261生殖道標(biāo)本的采集1、男性標(biāo)本：2022/12/14622、女性標(biāo)本：（1）成年婦女自宮頸采取標(biāo)本，應(yīng)在擴(kuò)陰器的支持下，選取有炎癥或分泌物部位，先以無菌棉拭子拭去表淺層分泌物，再用另一拭子取分泌物送檢。如做厭氧或真菌培養(yǎng)應(yīng)另外采取標(biāo)本。外陰糜爛：用生理鹽水清洗后用無菌棉拭子擦洗，取邊緣的分泌物至無菌容器，立即送檢。（2）如未成年幼女疑患性病傳播疾病時(shí)，不應(yīng)使用擴(kuò)陰器，以一無菌拭子在陰道口處采取分泌物送檢。2022/12/12622、女性標(biāo)本：（1）成年婦女自宮2022/12/1463糞便標(biāo)本采集2022/12/1263糞便標(biāo)本采集2022/12/1464【標(biāo)本送檢指征】1急性腹瀉：大便次數(shù)明顯增多，腹痛，里急后重，往往伴有發(fā)熱，大便性狀為粘液便或膿血便。2慢性腹瀉：大便次數(shù)多，多為稀便，伴有全身乏力等癥狀。3無痛性大量水樣便或米泔樣稀便。4先吐后瀉：惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史，多為細(xì)菌性食物中毒所致。5抗生素治療后腹瀉：常發(fā)生于長期抗生素治療后，糊狀便，排便次數(shù)增加。6高熱驚厥：通常為中毒性痢疾，多見于嬰幼兒和小兒。2022/12/1264【標(biāo)本送檢指征】2022/12/1465腸道正常菌群比較復(fù)雜，在腸道中菌群間有共生或過路、互不相干和制約關(guān)系等現(xiàn)象。一旦失去了正常生態(tài)平衡，在臨床上的一個(gè)表現(xiàn)就是菌群失調(diào)癥。如常住細(xì)菌在種群和數(shù)量上的比例失調(diào)就能引起慢性腹瀉，因此在留取糞便標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意防止細(xì)菌污染。2022/12/1265腸道正常菌群比較復(fù)雜，在腸道2022/12/1466糞便標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)挑取有膿血、粘液部分的糞便2—3g；液狀糞便取絮狀物，盛于滅菌的廣口盒中，并及時(shí)送檢和接種。在無法獲得糞便時(shí)，可用無菌生理鹽水或增菌液濕潤直腸，將棉拭子插入肛門4～5cm深處(小兒2～3cm)，輕輕轉(zhuǎn)動一周擦取直腸表面的粘液后取出，盛入無菌試管或保存液中送檢。2022/12/1266糞便標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)挑取有膿血2022/12/1467采集時(shí)間：

1.腹瀉患者于急性期，盡量在用藥前采集糞便；

2.傷寒患者于發(fā)病2w以后采集糞便；

3.懷疑霍亂時(shí)立即采集糞便送檢。2022/12/1267采集時(shí)間：2022/12/1468厭氧菌感染培養(yǎng)標(biāo)本

標(biāo)本采集1.要注意避免標(biāo)本污染和與空氣接觸，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作；2.用注射器抽取胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、膽汁、腦脊液或無菌手術(shù)抽出膿液；3.抽出液體標(biāo)本后，要盡快排除注射器內(nèi)的空氣。2022/12/1268厭氧菌感染培養(yǎng)標(biāo)本標(biāo)本采集2022/12/1469厭氧菌感染培養(yǎng)標(biāo)本

標(biāo)本運(yùn)送①標(biāo)本采集后不得冰箱儲存，必須盡快（半小時(shí)內(nèi)）送實(shí)驗(yàn)室；②運(yùn)送方法：a注射器運(yùn)送（標(biāo)本抽取后盡快排除空氣）或接種到專門的運(yùn)送培養(yǎng)基中直接運(yùn)送；b含運(yùn)送培養(yǎng)基的無氧小瓶運(yùn)送；c厭氧罐運(yùn)送（組織塊）；d大量液體標(biāo)本運(yùn)送時(shí)要裝滿標(biāo)本瓶并立即驅(qū)氧，加蓋運(yùn)送；e一般不采用棉拭子法。2022/12/1269厭氧菌感染培養(yǎng)標(biāo)本標(biāo)本運(yùn)送①標(biāo)本2022/12/1470真菌感染培養(yǎng)標(biāo)本

1）淺部真菌感染標(biāo)本采集①皮膚：常規(guī)消毒皮膚，從皮膚癬菌皮損邊緣刮取鱗屑，置無菌平皿內(nèi)送檢；皮膚潰瘍則采集病損邊緣膿汁或組織；②指（趾）指甲：消毒指（趾）指甲并去掉其表面部分，取可疑病變部分，用刀片修成小薄片5～6片，置無菌容器內(nèi)送檢；③毛發(fā)：采集根部斷折處，至少5～6根送檢。2022/12/1270真菌感染培養(yǎng)標(biāo)本1）淺部真菌感染2022/12/1471真菌感染培養(yǎng)標(biāo)本2）深部真菌感染標(biāo)本采集①血液：無菌采血8～10ml，注入未用過抗生素的或可中和抗生素的血培養(yǎng)瓶中，立刻送檢；如不能立刻送檢時(shí)血培養(yǎng)瓶應(yīng)放室溫，但不可超過8～9h；②腦脊液：采樣量不少于3～5ml，分別注入兩支無菌試管中送檢（一管做真菌培養(yǎng)和墨汁染色；一管測隱球菌抗原和其他培養(yǎng)）；③呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染標(biāo)本采集同一般菌培養(yǎng)標(biāo)本。2022/12/1271真菌感染培養(yǎng)標(biāo)本2）深部真菌感染標(biāo)本2022/12/1472小結(jié)1.申請單標(biāo)記必須清楚（姓名、性別、年齡、病例號、臨床診斷、標(biāo)本來源、采集時(shí)間、檢查項(xiàng)目、抗生素應(yīng)用情況等），以便實(shí)驗(yàn)室能夠合理選擇培養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)基。2.盡量在抗生素應(yīng)用前采集標(biāo)本，以避免漏檢和提高陽性檢出率。2022/12/1272小結(jié)1.申請單標(biāo)記必須清楚（姓名、性2022/12/14733.標(biāo)本采集應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。4.采集標(biāo)本的容器必須經(jīng)滅菌處理，但不可用消毒劑。5.標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送到微生物實(shí)驗(yàn)室。6.堅(jiān)決拒絕久置引流袋取標(biāo)本！2022/12/12733.標(biāo)本采集應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。2022/12/1474把握采集時(shí)機(jī)

盡量在抗生素使用前采集標(biāo)本，如已在院外或門診使用過抗生素，及正在使用抗生素的病人，最好在用藥間隙，病人血液中抗菌藥物濃度低峰時(shí)采集。血培養(yǎng)最好是寒戰(zhàn)時(shí)，高熱前，但要防止等待而延誤時(shí)機(jī)；2022/12/1274把握采集時(shí)機(jī)盡量在抗生素2022/12/1475

重視采集方法，靈活應(yīng)用，收集真正病灶部位的標(biāo)本，避免污染。為臨床治療提供可靠有效的抗生素應(yīng)用參考資料，提高治療效果是我們工作的目標(biāo)。2022/12/1275重視采集方法，靈活應(yīng)用，收2022/12/1476標(biāo)本在采集、保存和運(yùn)送過程中的質(zhì)量保證即使擁有再好的檢驗(yàn)人員、再好的儀器,再好的檢測方法,也難以彌補(bǔ)在采集標(biāo)本時(shí)引入的錯(cuò)誤。也就是說,標(biāo)本不合格或標(biāo)本不真實(shí),是得不到準(zhǔn)確的報(bào)告的。在這方面應(yīng)和臨床醫(yī)生、護(hù)士、患者達(dá)成共識。

2022/12/1276標(biāo)本在采集、保存和77772022/12/1478信任協(xié)作

理解溝通

2022/12/1278信任協(xié)作

理解溝通

792022/12/14

黃文輝青海大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化培訓(xùn)

12022/12/12微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化培訓(xùn)2022/12/1480我們應(yīng)該追求：

“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”

“針對性病原學(xué)治療”

正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送，是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！

微生物讓人類步步為營!2022/12/122我們應(yīng)該追求：

“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”

2022/12/1481

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和人類對疾病的不斷認(rèn)識，醫(yī)學(xué)的學(xué)科分類越來越細(xì)，疾病的分類越來越完善，而與之相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)也日趨精密復(fù)雜。在多數(shù)情況下，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)比病人的主訴敏感、準(zhǔn)確、客觀，而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對疾病的診斷和治療越來越依賴于實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果?！熬由魇?，差之毫厘，謬以千里”

——《禮記》2022/12/123

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和人類對2022/12/1482良好的標(biāo)本是成功了一半！

為了取得準(zhǔn)確的、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，必須取得高質(zhì)量的標(biāo)本。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量的檢驗(yàn)的第一步。沒有高質(zhì)量的標(biāo)本，再先進(jìn)、再精密的儀器也得不出準(zhǔn)確的結(jié)果，而很多采集標(biāo)本的患者和醫(yī)務(wù)人員都有忽視了標(biāo)本的采集質(zhì)量而引起結(jié)果很大的偏差的經(jīng)歷。2022/12/124良好的標(biāo)本是成功了一半！2022/12/1483標(biāo)本采集和運(yùn)送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵；但由于標(biāo)本的采集和運(yùn)送常有護(hù)士或醫(yī)生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道問題所在之處，造成的后果是？．．．．．．

臨床醫(yī)生最不能接受的問題:陽性率低、標(biāo)本污染2022/12/125標(biāo)本采集和運(yùn)送是細(xì)菌培養(yǎng)成功2022/12/1484棉花纖維+竹/木條

抑菌區(qū)是因?yàn)椋褐参锓置诔鰜淼模褐舅?；樹脂；福爾馬林；2022/12/1262022/12/1485氯氣，重金屬與膠水的影響

2022/12/127氯氣，重金屬與膠水的推薦使用專業(yè)運(yùn)送培養(yǎng)基

多用途運(yùn)送系統(tǒng)–需氧+厭氧低氧化的環(huán)境–不會對標(biāo)本的微生物造成損害拭子是深入培養(yǎng)基中來保護(hù)苛養(yǎng)菌與厭氧菌兩面是以塑料密封,不透水和漏氣–減少污染和維持缺氧環(huán)境推薦使用專業(yè)運(yùn)送培養(yǎng)基多用途運(yùn)送系統(tǒng)–需氧流感嗜血桿菌在三種不

同的運(yùn)送基的存活率流感嗜血桿菌在三種不

同的運(yùn)送基的存活率2022/12/1488基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.棉拭子標(biāo)本宜用運(yùn)送培養(yǎng)基6.混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)7.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑8.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗(yàn)?zāi)康?022/12/1210基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原2022/12/1489如何提高細(xì)菌陽性檢出率？標(biāo)本采集時(shí)機(jī)標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運(yùn)送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境2022/12/1211如何提高細(xì)菌陽性檢出率？標(biāo)本采集時(shí)機(jī)2022/12/1490“正確的微生物學(xué)檢驗(yàn)始自正確的標(biāo)本采取。臨床醫(yī)師、護(hù)師及檢驗(yàn)技師都必須通曉其要領(lǐng)?！?/p>

——著名的臨床微生物檢驗(yàn)專著ManualofClinicalMicrobiology的主編PatrickMurray2022/12/1212“正確的微生物學(xué)檢驗(yàn)始自正確的標(biāo)本采細(xì)菌學(xué)試驗(yàn)的各種標(biāo)本的運(yùn)送及貯存條件

細(xì)菌學(xué)試驗(yàn)的各種標(biāo)本的運(yùn)送及貯存條件正常菌群的分布位部常見菌種皮膚表皮葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等口腔鏈球菌（甲型或乙型）、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、類白喉?xiàng)U菌等鼻咽腔甲型鏈球菌、卡他球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等眼結(jié)膜皮表葡萄球菌、結(jié)膜干燥桿菌、類白喉?xiàng)U菌等胃正常一般無菌

腸道類桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌等陰道乳酸桿菌、白色念球菌、類白喉?xiàng)U菌、大腸桿菌等

尿道表皮葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、恥垢桿菌等正常菌群的分布位部常見菌種皮膚表皮葡932022/12/14血培養(yǎng)標(biāo)本采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作152022/12/12血培養(yǎng)標(biāo)本采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1494一、血培養(yǎng)指征患者出現(xiàn)寒戰(zhàn)、體溫超過38℃或低體溫，懷疑血流感染時(shí)，尤其存在以下情況時(shí)，應(yīng)抽血做細(xì)菌和真菌培養(yǎng)：醫(yī)院內(nèi)肺炎；留置中心靜脈導(dǎo)管超過72小時(shí)；感染性心內(nèi)膜炎；骨髓炎；有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾??；免疫缺陷伴全身感染癥狀；臨床醫(yī)生懷疑有血液感染可能的其他情況。2022/12/1216一、血培養(yǎng)指征2022/12/1495二、采血時(shí)機(jī)一旦懷疑有血流感染可能，應(yīng)立即采血做血培養(yǎng)，最好在抗生素使用前或停用抗生素24小時(shí)后，以寒戰(zhàn)、發(fā)熱時(shí)采集為宜。2022/12/1217二、采血時(shí)機(jī)2022/12/14962022/12/12182022/12/1497

三、采血流程㈠消毒1、培養(yǎng)瓶消毒程序：用消毒液消毒培養(yǎng)瓶橡皮塞，待干燥后使用。2、皮膚消毒程序：用消毒液從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達(dá)5cm以上，待消毒液揮發(fā)干燥后（常需30秒以上）穿刺采血。㈡靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種成人用注射器無菌穿刺取血后，排盡針頭內(nèi)空氣，直接注入血培養(yǎng)瓶，勿換針頭（如果行第二次穿刺或用頭皮針取血時(shí)，應(yīng)換針頭），先注入?yún)捬跖囵B(yǎng)瓶，避免注入空氣，然后注入需氧培養(yǎng)瓶，輕輕混勻以防血液凝固。近年來，臨床普遍采用負(fù)壓血培養(yǎng)瓶，將血從患者靜脈直接吸入血培養(yǎng)瓶，減少污染環(huán)節(jié)。2022/12/1219三、采血流程2022/12/1498㈢注意事項(xiàng)1、檢驗(yàn)單需注明抗菌藥物使用情況、血液采集時(shí)間和部位、臨床診斷等患者信息。2、采血部位通常為肘靜脈，疑為細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)以肘動脈或股動脈采血為宜，切忌在靜滴抗生素的靜脈處采血。除非懷疑有導(dǎo)管相關(guān)的血流感染，否則不應(yīng)從留置靜脈或動脈導(dǎo)管取血，因?yàn)閷?dǎo)管易被皮膚正常菌群污染。3、采血次數(shù)：對于成年患者，應(yīng)該同時(shí)分別在兩個(gè)部位采集血標(biāo)本，在兩個(gè)不同部位分離到同樣菌種才能確定是病原菌。2022/12/1220㈢注意事項(xiàng)微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件0022022/12/141004、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎：在24小時(shí)內(nèi)取血3次，每次間隔不少于30分鐘。必要時(shí)次日再做血培養(yǎng)2次。5、采血量：以培養(yǎng)基與血液之比10:1為宜，以稀釋血液中的抗菌藥物、抗體等殺菌物質(zhì)。采血量少會明顯降低陽性率。成人每次每培養(yǎng)瓶采血8~10ml，嬰幼兒每次培養(yǎng)瓶采血2ml。2022/12/12224、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎：在24小時(shí)內(nèi)取血微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002四、運(yùn)送要求1、所有標(biāo)本采集后都應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2小時(shí)內(nèi)，如果不能及時(shí)送檢，宜置于室溫環(huán)境。血培養(yǎng)瓶送到檢驗(yàn)科放入培養(yǎng)箱前，不應(yīng)暫存于冰箱內(nèi)。2、送檢標(biāo)本應(yīng)正確粘貼條形碼，注明采樣時(shí)間和送檢時(shí)間。3、安全防護(hù)：放標(biāo)本的容器必須防漏，禁止將滲漏的標(biāo)本送往實(shí)驗(yàn)室。四、運(yùn)送要求微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件002微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件0022022/12/14108尿液標(biāo)本采集和運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1230尿液標(biāo)本采集和運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/14109一、采集時(shí)機(jī)宜為抗菌藥物使用前的清晨第一次尿液。二、采集方法（一）、清潔中段尿1、女性：采集前用肥皂水或0.1%的高錳酸鉀溶液等沖洗外陰，用手指分開陰唇，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10~20ml于無菌容器內(nèi)。2、男性：采集前用肥皂水或0.05%~0.1%的碘伏溶液清洗尿道口，擦干后上翻包皮，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10~20ml于無菌容器內(nèi)。（二）、恥骨上膀胱穿刺主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒，脊柱損傷患者的尿液采集。先用0.25%的碘伏消毒穿刺部位皮膚，然后使用無菌注射器直接從恥骨聯(lián)合與臍連線上高于恥骨聯(lián)合2cm處刺入膀胱吸取尿液10~20ml于無菌容器內(nèi)。2022/12/1231一、采集時(shí)機(jī)2022/12/14110（三）、導(dǎo)尿管尿1、直接導(dǎo)尿法：使用0.05%~0.1%的碘伏溶液消毒會陰局部，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，先棄其前段尿液約15ml，再留取中段尿10~20ml于無菌容器內(nèi)。2、留置導(dǎo)尿管法：醫(yī)院內(nèi)尿路感染中，臨床最常用方法。采集前先夾住導(dǎo)尿管，采集時(shí)則松管棄其前段尿液，使用0.25%~0.5%的碘伏消毒導(dǎo)尿管的采樣部位，使用無菌注射器斜刺入導(dǎo)尿管（從采樣口或靠近尿道的導(dǎo)尿管管壁）抽取10~20ml尿液于無菌容器內(nèi)。3、回腸造口導(dǎo)尿管法：摘除導(dǎo)管，棄去里面的尿液，先用0.05%~0.1%的碘伏消毒吻合口，再將導(dǎo)尿管插入到清潔的吻合口，直至筋膜的深部采集10~20ml尿液于無菌容器內(nèi)。2022/12/1232（三）、導(dǎo)尿管尿2022/12/14111（四）、小兒收集包對于無自控能力的小兒可應(yīng)用收集包采集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。如果檢驗(yàn)結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析，必要時(shí)可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M(jìn)行復(fù)檢。三、標(biāo)本運(yùn)送標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢并接種，室溫下保持時(shí)間不宜超過2小時(shí)（夏季保存時(shí)間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存）。如果不能及時(shí)運(yùn)送或接種，應(yīng)4℃冷藏。但保存時(shí)間也不應(yīng)超過8小時(shí)。2022/12/1233（四）、小兒收集包2022/12/14112四、注意事項(xiàng)1.不應(yīng)從集尿袋中采集尿液。2.尿液中不應(yīng)加防腐劑或消毒劑3.若尿液培養(yǎng)前患者曾使用抗菌藥物，應(yīng)反復(fù)多次送檢。4.多次采集或24小時(shí)尿液不應(yīng)用于尿液培養(yǎng)。5.除非進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，不應(yīng)對長期留置導(dǎo)尿管患者常規(guī)進(jìn)行尿液培養(yǎng)。6.培養(yǎng)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)、菌落計(jì)數(shù)以及微生物種類等進(jìn)行綜合判斷。2022/12/1234四、注意事項(xiàng)手術(shù)部位感染標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)化操作手術(shù)部位感染標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)化操作一、一般原則1.在抗菌藥物使用前，且僅在有臨床感染癥狀或傷口惡化或長期不能愈合時(shí)采集標(biāo)本。2.皮膚或黏膜表面的清潔。⑴閉合傷口和穿刺物標(biāo)本：消毒方法同血培養(yǎng)標(biāo)本的皮膚消毒。⑵開放傷口：無菌生理鹽水充分沖洗傷口部位，不可以用消毒劑。3.采集新鮮的感染組織，避免采集淺表的組織碎屑。4.若可以采集穿刺物或活檢標(biāo)本，應(yīng)避免拭子標(biāo)本。二、容器1.較大的標(biāo)本：含有少量生理鹽水的帶螺紋口的無菌塑料容器。2.標(biāo)本較小或拭子標(biāo)本：MW&ETRANSWAB運(yùn)輸培養(yǎng)基，適用于需氧和厭氧菌。一、一般原則三、采集方法㈠封閉性膿腫1.注射器穿刺抽取膿液。2.若無法抽到膿液，應(yīng)先皮下注射少量無菌生理鹽水，再次穿刺抽吸膿液；若膿液過多，應(yīng)先切開引流，在基底部或膿腫壁采集標(biāo)本。膿液的量以大于1ml為宜。3.排除注射器內(nèi)部及針頭的氣體，用無菌橡皮塞封閉針頭送檢；或直接打入血培養(yǎng)瓶中。疑為厭氧菌，應(yīng)迅速將膿液打入?yún)捬跹囵B(yǎng)瓶中。㈡組織和活檢標(biāo)本1.采集足夠大的組織，體積以1mm3為宜，避免在壞死區(qū)域采集。2.將小塊的組織放在運(yùn)輸培養(yǎng)基內(nèi)；較大的放在無菌容器中，并加入少量無菌生理鹽水。三、采集方法㈢開放傷口1.無菌生理鹽水徹底沖洗淺表部位，去除表面的滲出物和碎屑。2.用拭子深入傷口的基底部或傷口-正常組織邊緣部采集兩個(gè)標(biāo)本，分別用于培養(yǎng)和革蘭氏染色。四、標(biāo)本的標(biāo)識填寫患者信息、標(biāo)本類型（深部組織、表淺組織、膿腫和穿刺物等）、標(biāo)本的來源（腹腔、腿和上臂等），記錄標(biāo)本采集的日期和時(shí)間及是否在使用抗生藥物前采集，選擇檢查項(xiàng)目（需氧培養(yǎng)或厭氧培養(yǎng)）。五、標(biāo)本的送檢為了更好地分離病原菌，標(biāo)本應(yīng)在采集后的30分鐘內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，送檢時(shí)應(yīng)保持標(biāo)本的濕潤（盡量采用運(yùn)輸培養(yǎng)基，組織可以放在生理鹽水中）。在送檢前或運(yùn)送過程中，禁止將標(biāo)本放于冰箱。若不能及時(shí)送檢，運(yùn)輸培養(yǎng)基中標(biāo)本應(yīng)室溫保存。但最長不可超過24小時(shí)。㈢開放傷口2022/12/14117膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本的采

集及運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作

2022/12/1239膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本的采

2022/12/14118

(1)應(yīng)首先用無菌生理鹽水清洗膿液及病灶的雜菌，再采集標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。(2)一般用棉拭子采取膿血液及病灶的深部的分泌物，瘺管也可以無菌手續(xù)采取組織放入無菌試管內(nèi)送檢。2022/12/1240(1)應(yīng)首先用無菌生理鹽水清洗膿液2022/12/14119

(3)膿腫標(biāo)本以無菌注射器抽取為好，最好在切開排膿時(shí)，以無菌棉拭子采取，也可以將沾有膿汁的最內(nèi)層敷料放人無菌平皿中送檢。2022/12/1241(3)膿腫標(biāo)本以無菌注射器抽取為好2022/12/14120

（4）先用無菌生理鹽水棉簽擦拭切口表面2遍，去除表面的污染菌，再用含生理鹽水的無菌棉簽用力擦拭病灶邊緣或膿腔囊壁后放入無菌試管中送細(xì)菌室。厭氧培養(yǎng)時(shí)應(yīng)吸取深部標(biāo)本而不能擦拭表面。2022/12/1242（4）先用無菌生理鹽水棉簽擦拭切口2022/12/14121其他事項(xiàng)

疑有放線菌感染時(shí)選取膿液中的“硫磺樣顆?！庇跓o菌容器內(nèi)送檢當(dāng)創(chuàng)傷出血，敷用藥物2h內(nèi)及燒傷在12h內(nèi)不應(yīng)采集標(biāo)本。2022/12/1243其他事項(xiàng)疑有放線菌感染時(shí)選取膿液中2022/12/14122腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集

及運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作

2022/12/1244腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集

2022/12/14123采集時(shí)間：懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液，最是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。采集方法：無菌腰穿采集腦脊液3～5ml，分裝到3個(gè)無菌小瓶中（各1～2ml）。用于細(xì)菌和病毒檢測時(shí)腦脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml。2022/12/1245采集時(shí)間：懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊2022/12/14124標(biāo)本采集后注入無菌小瓶中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。腦膜炎奈瑟菌離體后會迅速自溶,肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌也很容易死亡,因此,標(biāo)本應(yīng)立即送檢,并注意保溫、防干燥。切不可置冰箱保存,否則會影響檢出率。2022/12/1246標(biāo)本采集后注入無菌小瓶中送檢也可將抽2022/12/14125穿刺液類標(biāo)本的采取穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本。采集時(shí)間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或在停止使用抗菌藥物之后2-3d采集標(biāo)本。2022/12/1247穿刺液類標(biāo)本的采取穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括2022/12/14126采集方法：①無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本；②標(biāo)本采集量應(yīng)＞1ml。胸腔積液、腹水可抽取10ml,心包液、關(guān)節(jié)液等可抽取2～5ml。③標(biāo)本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。2022/12/1248采集方法：①無菌操作穿刺抽取標(biāo)本2022/12/14127胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本抽取空腹胃液5ml，置無菌管內(nèi)送檢；膽汁培養(yǎng)標(biāo)本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術(shù)中留取膽汁，采集膽汁量為5ml，置無菌管內(nèi)送檢；胃液和膽汁采集后必須立即送檢。2022/12/1249胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本抽取空腹胃液5ml2022/12/14128眼.耳.鼻培養(yǎng)標(biāo)本的采取

眼、耳、鼻培養(yǎng)標(biāo)本用拭子常規(guī)采集各種標(biāo)本。標(biāo)本采集過程中應(yīng)注意避免被黏膜上的正常菌群污染，標(biāo)本采集后連同拭子一起置無菌管內(nèi)送檢。2022/12/1250眼.耳.鼻培養(yǎng)標(biāo)本的采取2022/12/14129

痰標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1251

痰標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操2022/12/14130一、采集目的一般可用于普通細(xì)菌、分枝桿菌、真菌和軍團(tuán)菌的涂片或培養(yǎng)檢測，經(jīng)氣管穿刺吸引物可用于厭氧菌的檢測。二、一般原則1、采集標(biāo)本的最佳時(shí)機(jī)應(yīng)在使用抗菌藥物之前。2、宜采集清晨第二口痰。3、對于普通細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天一次，連續(xù)2~3天。不建議24小時(shí)內(nèi)多次采集送檢，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變。4、懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。2022/12/1252一、采集目的5、如何獲得較高“質(zhì)量”的痰？

清晨頭幾口(2-3口）痰菌的陽性率高，因?yàn)楹粑纼?nèi)的分泌物經(jīng)過一夜的聚集總比白天吐的1口痰中含菌量多。如果病人痰多則以第3-4口痰為更好，這是因?yàn)轭^1-2口痰往往混有咽喉部的分泌物，而第3—4口痰來自呼吸道的深部。要想留到理想的痰標(biāo)本，病人清晨起床后先做幾次深呼吸，然后用力咳嗽以得到呼吸道深部的痰。所以在告訴病人留痰標(biāo)本時(shí)，不應(yīng)僅簡單地說一聲留早晨第一口痰就算了，而應(yīng)具體加以指導(dǎo)，不然痰培養(yǎng)的陽性率不會高。

5、如何獲得較高“質(zhì)量”的痰？

清晨頭幾口(2-3口）痰2022/12/14132三、采集方法㈠自然咳痰法與霧化導(dǎo)痰法1、用物準(zhǔn)備：無菌容器、生理鹽水（250ml或500ml）、化驗(yàn)單。2、核對患者床號、姓名等。3、無痰或痰量極少者可用3%~5%氯化鈉溶液5ml霧化吸入約5分鐘后留取痰液。4、如有可能，應(yīng)在醫(yī)護(hù)人員直視下留取清晨第二口痰。囑咐患者留取前摘去牙托、清潔口腔、如刷牙后反復(fù)生理鹽水漱口；深吸氣后用力自氣管深部咳出痰液，置無菌容器內(nèi)，應(yīng)盡可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入樣品，不應(yīng)用紙巾包裹痰液。㈡支氣管鏡法鼻或口腔插入支氣管鏡。常用采集方法有經(jīng)支氣管鏡吸引、支氣管肺泡灌洗、防污染毛刷采用或防污染支氣管肺泡灌洗等。2022/12/1254三、采集方法2022/12/14133㈢經(jīng)人工氣道吸引法1、用物準(zhǔn)備：負(fù)壓吸引器、生理鹽水、一次性吸痰管、無菌手套、無菌容器（試管）、化驗(yàn)單。2、核對患者床號、姓名等。3、將患者頭部轉(zhuǎn)向操作者一側(cè)。4、進(jìn)行手衛(wèi)生后將一次性吸痰管末端拆開，連接吸引器，調(diào)節(jié)吸引器至適宜負(fù)壓（成人：40.0~53.3kPa；小兒：＜40.0kPa）。5、將一次性吸痰管外包裝去除，戴手套持吸痰管試吸生理鹽水，檢查管道是否通暢。2022/12/1255㈢經(jīng)人工氣道吸引法2022/12/141346、折疊一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工氣道至適宜深度，放開吸痰管末端，輕柔、靈活、迅速地左右旋轉(zhuǎn)上提吸痰管吸痰。見吸痰管內(nèi)有痰液吸出，即折疊一次性吸痰管退出。將一次性吸痰管與吸引器分離（使用人工呼吸機(jī)者，一次吸痰時(shí)間不超過15秒，吸痰前后需吸入高濃度氧氣1——2分鐘）。7、將痰液注入無菌容器內(nèi)，如痰液黏稠可用一次性針筒向吸痰管末端注入少量生理鹽水，將痰液沖洗入無菌容器內(nèi)。四、運(yùn)送和保存應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，否則應(yīng)4℃冷藏，但放置時(shí)間不可超過24小時(shí)。2022/12/12566、折疊一次性吸痰管末端，插入口腔或微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化課件0022022/12/14136上呼吸道標(biāo)本的采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/1258上呼吸道標(biāo)本的采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2022/12/14137【標(biāo)本送檢指征】1病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時(shí)，懷疑為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。2細(xì)菌性咽－扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達(dá)39℃以上。3上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管－支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。2022/12/1259【標(biāo)本送檢指征】2022/12/14138【標(biāo)本的采集方法】囑患者先用清水漱口，由檢查者將其舌外拉使懸雍垂盡可能向外牽引,用壓舌板將舌向下向外壓，用無菌棉拭子越過舌根到咽后壁或懸雍垂的后側(cè),反復(fù)擦拭數(shù)次然后送檢，拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔粘膜和唾液。2022/12/1260【標(biāo)本的采集方法】2022/12/14139生殖道標(biāo)本的采集

1、男性標(biāo)本：（1）如疑為急性淋病奈瑟菌或其他化膿性細(xì)菌感染應(yīng)在清洗龜頭部后，以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒劑消毒后，擠出分泌物立即以無菌棉拭子采取，立即送檢，或以專用的細(xì)拭子插入尿道口1-2cm，停留十余秒鐘輕輕旋轉(zhuǎn)采集標(biāo)本置無菌容器。（2）如疑為前列腺炎、精囊炎的慢性淋病耐瑟菌感染應(yīng)由醫(yī)師按摩前列腺，以無菌手續(xù)自尿道口采取前列腺液送檢。2022/12/1261生殖道標(biāo)本的采集1、男性標(biāo)本：2022/12/141402、女性標(biāo)本：（1）成年婦女自宮頸采取標(biāo)本，應(yīng)在擴(kuò)陰器的支持下，選取有炎癥或分泌物部位，先以無菌棉拭子拭去表淺層分泌物，再用另一拭子取分泌物送檢。如做厭氧或真菌培養(yǎng)應(yīng)另外采取標(biāo)本。外陰糜爛：用生理鹽水清洗后用無菌棉拭子擦洗，取邊緣的分泌物至無菌容器，立即送檢。（2）如未成年幼女疑患性病傳播疾病時(shí)，不應(yīng)使用擴(kuò)陰器，以一無菌拭子在陰道口處采