生物分析化學(xué)期末大綱

V:1.0精細(xì)整理，僅供參考日期：20xx年X月《生物分析化學(xué)》要點(diǎn)提綱第一章生物分析化學(xué)緒論1.分析化學(xué)主要研究?jī)?nèi)容（組成、含量、結(jié)構(gòu)）分析化學(xué)（AnalyticalChemistry）的主要任務(wù)是鑒定物質(zhì)的化學(xué)組成（元素、離子、官能團(tuán)、或化合物）、測(cè)定物質(zhì)的有關(guān)組分的含量、確定物質(zhì)的結(jié)構(gòu)（化學(xué)結(jié)構(gòu)、晶體結(jié)構(gòu)、空間分布）和存在形態(tài)（價(jià)態(tài)、配位態(tài)、結(jié)晶態(tài)）及其與物質(zhì)性質(zhì)之間的關(guān)系等。2.原位（insitu）、在體（invivo）、實(shí)時(shí)(realtime)、在線(online)在原來(lái)的，正常、自然的部位或位置在活體內(nèi)在某事發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的同一時(shí)間3.靈敏度、檢測(cè)限，回收率、相關(guān)系數(shù)、判定系數(shù)靈敏度是指某種方法對(duì)單位濃度或單位量待測(cè)物質(zhì)的變化所引起的相應(yīng)信號(hào)的變化過(guò)程。檢測(cè)率限指以適當(dāng)?shù)闹眯鸥怕时粰z出的組分的最小量或最小濃度?；厥章适欠磻?yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中損失的度量。相關(guān)系數(shù)是用來(lái)度量?jī)蓚€(gè)變量之間的線性關(guān)系強(qiáng)度的統(tǒng)計(jì)量。第二章生物光譜分析法4.光與物質(zhì)的作用（反射、透射、散射、吸收、發(fā)射）5.熒光和磷光產(chǎn)生的原理，兩者差異由第一電子激發(fā)單重態(tài)所產(chǎn)生的輻射躍遷是熒光。由最低的電子激發(fā)三重態(tài)發(fā)生的輻射躍遷是磷光。6.熒光的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、Stokes位移、熒光產(chǎn)率、熒光壽命、弛豫、淬滅熒光強(qiáng)度對(duì)激發(fā)波長(zhǎng)的圖譜成為熒光的激發(fā)光譜。熒光強(qiáng)度對(duì)發(fā)射波長(zhǎng)的圖譜稱為熒光的發(fā)射光譜。在溶液的熒光光譜中，所觀察到的熒光的波長(zhǎng)總是大于激發(fā)光的波長(zhǎng)，稱為stokes位移。熒光產(chǎn)率為熒光的物質(zhì)吸光后所發(fā)射的熒光的光子數(shù)與所吸收的激發(fā)光的光子數(shù)之比。熒光壽命是當(dāng)激發(fā)光切斷后熒光強(qiáng)度衰減至原強(qiáng)度的1/e所經(jīng)歷的時(shí)間。原子核發(fā)生磁共振達(dá)到穩(wěn)定的高能態(tài)后，恢復(fù)至發(fā)生磁共振前的磁矩狀態(tài)，叫做弛豫。在熒光過(guò)程中，光子產(chǎn)生的數(shù)量在很短的時(shí)間內(nèi)衰減或者消失。7.影響熒光強(qiáng)度的因素，如何影響，解釋原因8.熒光強(qiáng)度與濃度的關(guān)系，熒光光譜儀的結(jié)構(gòu)Ii=YfIoabc9.瑞利散射、拉曼散射、表面增強(qiáng)拉曼散射，產(chǎn)生表面增強(qiáng)拉曼散射的原因高頻率的單色激光打在分子上產(chǎn)生一種以入射頻率向所有方向散射的光，稱為瑞麗散射。瑞麗散射的同時(shí)，觀察到高于和低于入社頻率的散射光，成為拉曼散射。將試樣吸附在膠態(tài)金屬離子上或這些金屬的粗糙表面上，再按通常的方法得到表面增強(qiáng)拉曼光譜。產(chǎn)生表面增強(qiáng)拉曼光譜的原因是納米金屬離子的電磁增強(qiáng)和金屬表面的化學(xué)增強(qiáng)。第三章免疫分析法10.抗原，半抗原，抗原決定族，抗體抗原是一類能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。只具有抗原性而不具有免疫原性的物質(zhì)成為半抗原?？乖瓫Q定簇是指抗原中決定抗原特異性的特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)基團(tuán)，又稱表位?？贵w是由B細(xì)胞識(shí)別抗原后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的一類能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合，具有免疫功能的球蛋白。11.抗原抗體間結(jié)合力（靜電力、范德華力、氫鍵、疏水作用），主要的結(jié)合力，親和力和親合力疏水作用力作用很大。親和力：抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對(duì)應(yīng)的抗原決定簇之間相適應(yīng)而存在的引力。親合力：抗體與抗原之間的結(jié)合力大小。12.影響抗原抗體反應(yīng)的因素靈敏度、檢測(cè)限，回收率、相關(guān)系數(shù)、判定系數(shù)用各種標(biāo)記物檢查抗原-抗體反應(yīng)的技術(shù)叫做標(biāo)記免疫技術(shù)。酶免疫分析，熒光免疫分析，放射性免疫分析，化學(xué)發(fā)光免疫分析，電化學(xué)免疫分析。14.ELISA，ELISA特點(diǎn)，舉例說(shuō)明ELISA分析的步驟ELISA是酶免疫分析中的酶聯(lián)免疫吸附分析，測(cè)定靈敏度很高。靈敏、特意、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定、利于自動(dòng)化抗原/抗體被固定在固相載體表面固定；酶標(biāo)記的抗體/抗原和待測(cè)樣品與載體表面的抗原/抗體發(fā)生反應(yīng)，洗滌除去結(jié)合的抗體/抗原；加入第五，底物被酶催化生成有色產(chǎn)物，用光度分析法分析有色產(chǎn)物含量，并換算成待測(cè)樣品的量。15.化學(xué)發(fā)光，生物發(fā)光化學(xué)發(fā)光是分子在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時(shí)，吸收科化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的化學(xué)能而受激躍遷至激發(fā)態(tài)，當(dāng)激發(fā)態(tài)分子回到基極時(shí)，產(chǎn)生光輻射的現(xiàn)象?；瘜W(xué)發(fā)光也發(fā)生在生命體中，這種發(fā)光叫生物發(fā)光。16.化學(xué)發(fā)光免疫分析，分析過(guò)程示意圖，舉例說(shuō)明具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測(cè)定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于測(cè)定化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)分析技術(shù)。17.電化學(xué)發(fā)光免疫分析，分析過(guò)程示意圖，舉例說(shuō)明電化學(xué)發(fā)光是在一定點(diǎn)位激發(fā)下產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光過(guò)程，利用電化學(xué)發(fā)光的原理測(cè)定化學(xué)物質(zhì)18.免疫金，膠體金銀染色，舉一例說(shuō)明膠體金標(biāo)記免疫分析與抗原/抗體結(jié)合的膠體金叫做免疫金。膠體金銀染色是使已在抗原位置沉積的金顆粒發(fā)揮催化作用，促進(jìn)銀離子被氫醌還原為銀原子，后者圍繞金顆粒形成一層銀殼，利用膠體金和膠體銀的雙重標(biāo)記抗體/抗原進(jìn)行染色的方法。19.時(shí)間分辨熒光分析原理，應(yīng)用舉例利用鑭系元素標(biāo)記抗原或抗體，根據(jù)鑭系元素螯合物的發(fā)光特點(diǎn)，用時(shí)間分辨技術(shù)測(cè)量熒光，同時(shí)檢測(cè)波長(zhǎng)和時(shí)間兩個(gè)參數(shù)進(jìn)行信號(hào)分析，可有效排除非特異性熒光干擾。-2-第四章生物傳感器20.生物傳感器，舉例說(shuō)明生物傳感器是由生物活性材料與相應(yīng)的換能器的結(jié)合體，能測(cè)定特定的化學(xué)物質(zhì)。21.電化學(xué)生物傳感器原理，酶電極電化學(xué)傳感器通過(guò)與被測(cè)氣體發(fā)生反應(yīng)并產(chǎn)生與氣體濃度成正比的電信號(hào)來(lái)工作。典型的電化學(xué)傳感器由傳感電極（或工作電極）和反電極組成，并由一個(gè)薄電解層隔開(kāi)。酶電極是指電極敏感膜表面覆蓋有一層很薄的含酶凝膠或懸浮液的離子選擇電極。22.（逆）壓電效應(yīng)，常見(jiàn)壓電材料，壓電效應(yīng)的應(yīng)用壓電效應(yīng)是某些電介質(zhì)在沿一定方向上受到外力的作用而變形時(shí)，其內(nèi)部會(huì)產(chǎn)生極化現(xiàn)象，同時(shí)在他的兩個(gè)相對(duì)表面上出現(xiàn)正負(fù)相反的電荷。當(dāng)外力去掉后，它又會(huì)恢復(fù)到不帶電的狀態(tài)。23.石英晶體微天平傳感器的傳感原理將晶體置于一個(gè)振蕩電路，當(dāng)電路振蕩頻率和機(jī)械震蕩頻率接近晶體的基礎(chǔ)振動(dòng)頻率時(shí)，可以獲得共振24.Sauerbrey公式，舉例說(shuō)明石英晶體微天平傳感器的應(yīng)用25.表面等離子體共振，漸逝波/隱失波，舉例說(shuō)明表面等離子體共振傳感器的應(yīng)用物體受光波照射后，有一部分光的能量會(huì)穿過(guò)界面滲透到溶液中，平行于界面?zhèn)鞑?。這部分光是隱失波。26.分子印跡、分子信標(biāo)將各種生物大分子從凝膠轉(zhuǎn)移到另一種固定基質(zhì)上的過(guò)程叫分子印跡技術(shù)。分子信標(biāo)（molecularbeacon）是一種在5和3末端自身形成一個(gè)8個(gè)堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標(biāo)記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補(bǔ)配對(duì)，因此標(biāo)記在一端的熒光基團(tuán)與標(biāo)記在另一端的淬滅基團(tuán)緊緊靠近。并且不會(huì)產(chǎn)生熒光。熒光基團(tuán)被激發(fā)后產(chǎn)生的光子被淬滅劑淬滅，由熒光基團(tuán)產(chǎn)生的能量以紅外而不是可見(jiàn)光形式釋放出來(lái)。27.生物芯片分類，DNA芯片的分析原理，了解生物芯片的應(yīng)用（舉例）基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、細(xì)胞芯片、芯片實(shí)驗(yàn)室。第五章顯微鏡分析法28.放大倍數(shù)，分辨率，分辨率的影響因素，人眼的分辨率，普通光學(xué)顯微鏡的分辨率放大倍數(shù)是指透過(guò)顯微鏡后物體所呈現(xiàn)的映像與實(shí)物大小的比值。分辨率視光學(xué)系統(tǒng)中所能分辨的兩點(diǎn)之間的最小距離。與波長(zhǎng)、折射率、孔徑角有關(guān)。有公式人眼的分辨率是0.2mm。普通光學(xué)顯微鏡的分辨率是200nm。29.電子顯微鏡比普通光學(xué)顯微鏡具有更大放大倍數(shù)原因電子的波長(zhǎng)與能量有確定關(guān)系，能量越大波長(zhǎng)越短30.透射電鏡與掃描電鏡的差異31.隧道效應(yīng)32.掃描隧道顯微鏡的原理，原子力顯微鏡的原理探針與表面在偏壓下產(chǎn)生的的隧道電流針尖與表面原子之間的弱相互作用33.常見(jiàn)的掃描探針顯微鏡種類，舉例說(shuō)明掃描探針顯微鏡的應(yīng)用原子力顯微鏡、激光力顯微鏡、磁力顯微鏡34.掃描近場(chǎng)光學(xué)顯微鏡的放大倍數(shù)為什么比普通光學(xué)顯微鏡大得多第七章生物分