病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件

病毒感染與宿主免疫

病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)病毒感染與宿主免疫

病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)1病毒感染：病毒侵入人體并在

體內(nèi)增殖，與機(jī)體

發(fā)生相互作用的過(guò)程～。病毒感染：病毒侵入人體并在

2病毒性疾?。簷C(jī)體感染病毒后，由于入侵病毒特性、機(jī)體反應(yīng)狀態(tài)不同，引發(fā)臨床癥狀且具病毒感染特征的疾病～病毒性疾?。簷C(jī)體感染病毒3病毒感染的方式病毒感染的方式41、Horizontaltransmission（人——人）（表面接觸、血液制品）2、Verticaltransmission（親代——子代）（胎盤(pán)、產(chǎn)道）1、Horizontaltransmission5病毒的感染類(lèi)型：（一）1napparentinfection（二）apparentinfection1、acuteinfection2、persistentinfection（三）致腫瘤作用

病毒的感染類(lèi)型：6Persistentinfection：（1）latentviralinfection（2）chronicviralinfection（3）slowviralinfection（4）delayedcomplicationafteracuteviralinfectionPersistentinfection：7latentviralinfection潛伏性病毒感染：病毒感染后只是以病毒的基因或基因產(chǎn)物的形式長(zhǎng)期潛伏于組織或細(xì)胞內(nèi)，不產(chǎn)生病毒顆粒，不引發(fā)臨床癥狀。但有可能被激活組成新病毒顆粒引起致病。latentviralinfection潛伏性病毒感染：8

chronicviralinfection

慢性病毒感染：病毒感染后（顯、隱性），病毒長(zhǎng)期在體內(nèi)未被清除，可間歇性復(fù)制，持續(xù)性排毒，導(dǎo)致感染病程漫長(zhǎng)～

chronicviralinfection

慢性病毒感9

slowviralinfection

慢發(fā)病毒感染（遲發(fā)病毒感染）：病毒感染后潛伏期很長(zhǎng)（數(shù)月、數(shù)年或數(shù)十年）。此期機(jī)體無(wú)癥狀，病毒未能分離。一旦癥狀出現(xiàn)，多表現(xiàn)為亞急性進(jìn)行性，最終導(dǎo)致死亡。

slowviralinfection

慢發(fā)病毒感染（遲10

delayedcomplication

afteracuteviralinfection

急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥：急性病毒性感染后1年或數(shù)年，發(fā)生致死性的病毒病～

delayedcomplication

after11病毒致腫瘤作用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)病毒的生物學(xué)特性病毒感染與腫瘤發(fā)生、發(fā)展腫瘤組織證明病毒基因病毒致腫瘤作用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)12引起人類(lèi)惡性腫瘤的病毒病毒:逆轉(zhuǎn)錄病毒人類(lèi)嗜T淋巴細(xì)胞病毒1型（HTLV-1）DNA病毒EB病毒單純皰疹病毒Ⅱ型（HSV-2）人乳頭瘤病毒（HPV）乙型肝炎病毒（HBV）引起人類(lèi)惡性腫瘤的病毒病毒:13與病毒感染相關(guān)的腫瘤所致腫瘤:成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤Burkitts淋巴瘤鼻咽癌皮膚癌子宮頸癌肝癌與病毒感染相關(guān)的腫瘤所致腫瘤:14病毒的整合感染病毒的DNA和或逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA整合在宿主細(xì)胞染色體上，可通過(guò)其編碼蛋白引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化，發(fā)生細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，喪失其接觸抑制的特性，導(dǎo)致細(xì)胞增生，并在細(xì)胞膜上出現(xiàn)新的腫瘤移植抗原。病毒的整合感染病毒的DNA和或逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA整15病毒的致病機(jī)理（一）病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用（病毒毒性）（二）病毒感染引起的機(jī)體變化（免疫病理）病毒的致病機(jī)理（一）病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直16病毒的直接作用1、cytocidaleffect（殺細(xì)胞效應(yīng)）2、steadystateinfection（穩(wěn)定狀態(tài)感染）3、cellapotosis（細(xì)胞凋亡）4、inclusionformation（包涵體的形成）病毒的直接作用1、cytocidaleffect17病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件18病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件19steadystateinfection病毒不斷從感染細(xì)胞釋放，但細(xì)胞的新成代謝核分裂不受影響，也不改變?nèi)苊阁w膜的通透性，不引起細(xì)胞溶解或死亡。steadystateinfection病毒不斷從感染20細(xì)胞凋亡細(xì)胞凋亡以細(xì)胞質(zhì)收縮，核染色體裂解核凋亡小體形成為特征。細(xì)胞凋亡21病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件22病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件23病毒感染的間接作用1、組織器官的損傷親嗜性受染細(xì)胞膜改變受染組織細(xì)胞炎癥病毒感染的間接作用1、組織器官的損傷242、免疫病理?yè)p傷體液免疫的損傷作用循環(huán)-免疫復(fù)合物引起的～細(xì)胞免疫的～自身免疫應(yīng)答引起的～2、免疫病理?yè)p傷25宿主的抗病毒免疫（一）非特異性抗病毒免疫（二）特異性抗病毒免疫宿主的抗病毒免疫（一）非特異性抗病毒免疫26非特異性抗病毒免疫（一）先天不感受性（二）屏障作用（三）非特異性細(xì)胞作用（四）干擾素及其作用非特異性抗病毒免疫（一）先天不感受性27干擾現(xiàn)象、干擾素干擾現(xiàn)象（Interference）當(dāng)二種病毒感染同一細(xì)胞時(shí)，一種病毒可以增殖，而另一種病毒則被抑制，這種現(xiàn)象～。干擾素(Interferon,IFN)一種能干擾病毒增殖的物質(zhì)稱(chēng)為～。干擾現(xiàn)象、干擾素干擾現(xiàn)象（Interference）28干擾素的性質(zhì)和種類(lèi)性質(zhì)：由病毒或其他干擾素誘生劑（polyI：C），刺激機(jī)體多種細(xì)胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白，作用于機(jī)體細(xì)胞，表現(xiàn)抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用。干擾素的性質(zhì)和種類(lèi)性質(zhì)：29種類(lèi)：

Ⅰ型—α、β、ω。Ⅱ型—γ。α型（人白細(xì)胞）；β型（其他細(xì)胞）；ω型（白細(xì)胞）；γ型（T細(xì)胞）。種類(lèi)：30病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件31干擾素的生物效應(yīng)1、具嚴(yán)格種屬特異性2、Ⅰ型抗病毒作用強(qiáng)，具廣泛性；Ⅱ型抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)作用強(qiáng)（活化NK、Tc；增加MIC-Ⅰ類(lèi)分子；抑制DNA合成）。干擾素的生物效應(yīng)1、具嚴(yán)格種屬特異性32特異性抗病毒免疫（一）體液免疫的抗病毒作用（二）細(xì)胞免疫的抗病毒作用（三）抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時(shí)間（四）免疫病理作用特異性抗病毒免疫（一）體液免疫的抗病毒作用33體液免疫的抗病毒作用1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白IgMIgGIgA2、抗體對(duì)靶細(xì)胞的作用體液免疫的抗病毒作用1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白34中和作用和中和抗體中和作用：抗體與病毒結(jié)合，阻止病毒的吸附與穿入，保護(hù)細(xì)胞免受病毒感染，也有效防止病毒的血行播散，這種保護(hù)作用稱(chēng)～。中和作用和中和抗體中和作用：35中和抗體：機(jī)體接受病毒感染或疫苗接種后體內(nèi)出現(xiàn)的具有中和作用的特異性抗體稱(chēng)～。

中和抗體：36細(xì)胞免疫的抗病毒作用對(duì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的病毒加以清除。發(fā)揮作用細(xì)胞：遲發(fā)性超敏反應(yīng)T細(xì)胞（TH）殺傷性T細(xì)胞（Tc或CTL）。作用機(jī)制：（略）細(xì)胞免疫的抗病毒作用對(duì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的病毒加以清除。37抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時(shí)間1、病毒感染后誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生，早但維時(shí)短。特異性抗體IgM早現(xiàn)，早消；IgG隨后，維時(shí)長(zhǎng)。2、新生兒從母體獲得（經(jīng)胎盤(pán)）IgG（母乳）IgA，維時(shí)6個(gè)月。3、抗病毒免疫持續(xù)時(shí)間隨感染病毒種類(lèi)而異?？共《久庖邞?yīng)答的形成和持續(xù)時(shí)間1、病毒感染后誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生，38病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件391、殺傷靶細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞損傷，炎癥。2、抗病毒抗體親和力低、抗原-抗體比例不合適，沉積基底膜引發(fā)超敏反應(yīng)。3、受染細(xì)胞膜抗原性改變，隱蔽抗原暴露引發(fā)自身免疫病。

免疫病理作用

1、殺傷靶細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞損傷，炎

免疫病理作用

40病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)411、病毒感染實(shí)驗(yàn)室診斷的意義：指導(dǎo)臨床病毒性疾病的診斷，指導(dǎo)臨床病毒性疾病的治療，為控制病毒性疾病的流行制定有效措施。1、病毒感染實(shí)驗(yàn)室診斷的意義：422、病毒性疾病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)：病毒的分離與鑒定病毒的血清學(xué)診斷分子病毒學(xué)的檢測(cè)病毒感染的快速診斷2、病毒性疾病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)：43病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件44人類(lèi)病毒的感染途徑感染途徑:呼吸道感染消化道感染經(jīng)皮膚（蟲(chóng)媒）感染眼及泌尿生殖道感染胎內(nèi)（垂直）與產(chǎn)道感染人類(lèi)病毒的感染途徑感染途徑:45傳播方法及媒介:空氣飛沫、痰、唾液、皮屑飲食物（糞便污染）昆蟲(chóng)叮咬、動(dòng)物咬傷、注射輸血、刺破皮膚面盆、澡盆、毛巾、分娩、尿經(jīng)胎盤(pán)或出生時(shí)經(jīng)產(chǎn)道感染傳播方法及媒介:46標(biāo)本的采集、處理與運(yùn)送（一）標(biāo)本的采集、處理：采集的時(shí)間采集的種類(lèi)采集的方法采集后的處理標(biāo)本的采集、處理與運(yùn)送（一）標(biāo)本的采集、處理：47（二）標(biāo)本的運(yùn)送和保存立即送檢冷藏快送低溫暫存-70℃加DMSO/甘油

（二）標(biāo)本的運(yùn)送和保存48病毒形態(tài)學(xué)檢查（一）普通光學(xué)顯微鏡：大病毒顆粒、包涵體（二）電子顯微鏡：直接法（負(fù)染）間接法（免疫）(三)X線晶體衍射法病毒形態(tài)學(xué)檢查（一）普通光學(xué)顯微鏡：49包涵體:

含義、特征、意義。包涵體:

含義、特征、意義。50電鏡(負(fù)染)電鏡(負(fù)染)51脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩基病毒脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩基病毒52病毒顆粒大小的測(cè)定(一)電子顯微鏡直接測(cè)量(二)超過(guò)濾法(三)超速離心法病毒顆粒大小的測(cè)定53病毒的分離與鑒定(一)雞胚接種(二)組織細(xì)胞接種(三)動(dòng)物接種病毒的分離與鑒定54雞胚接種:雞胚接種:55病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件56雞胚接種途徑有：羊膜腔—流感病毒尿囊腔—流感病毒、腮腺炎病毒絨毛尿囊膜—皰疹病毒、痘病毒卵黃囊—乙型腦炎病毒雞胚接種途徑有：57組織細(xì)胞接種(1)原代和次代細(xì)胞(2)二倍體細(xì)胞：經(jīng)多次連續(xù)傳代仍保持其二倍染色體特征～(3)傳代細(xì)胞：可無(wú)限傳代～組織細(xì)胞接種(1)原代和次代細(xì)胞58病毒在細(xì)胞中增殖的指標(biāo)（1）細(xì)胞病變（CPE）（2）紅細(xì)胞吸附（3）干擾現(xiàn)象（4）細(xì)胞代謝改變病毒在細(xì)胞中增殖的指標(biāo)（1）細(xì)胞病變（CPE）59組織細(xì)胞接種:

A：正常猴腎單層上皮細(xì)胞B：繼續(xù)培養(yǎng)的正常猴腎單層上

C：MRC-5成纖維雙倍體細(xì)胞D：繼續(xù)培養(yǎng)的成纖維雙倍體細(xì)胞組織細(xì)胞接種:

A：正常猴腎單層上皮細(xì)胞B60病毒致細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)

A:正常Hep-2單層細(xì)胞B:腺病毒感染，細(xì)胞腫脹變圓，呈葡萄串狀C:副流感病毒III感染，細(xì)胞變圓呈合胞現(xiàn)象病毒致細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)

A:正常Hep-2單層細(xì)胞61病毒的數(shù)量與感染性的確定蝕斑測(cè)定：細(xì)胞準(zhǔn)備稀釋病毒相對(duì)固定記數(shù)換算病毒的數(shù)量與感染性的確定蝕斑測(cè)定：6250%感染量（ID50）或50%組織感染量（TCID50）:用使半數(shù)動(dòng)物或組織細(xì)胞感染劑量，以表示病毒感染性的強(qiáng)弱及含量。50%感染量（ID50）63動(dòng)物接種試驗(yàn)敏感動(dòng)物適宜途徑觀察指標(biāo)動(dòng)物接種試驗(yàn)敏感動(dòng)物64新分離病毒的鑒定1、病毒核酸類(lèi)型的測(cè)定2、病毒理化性狀的檢測(cè)3、病毒的血清學(xué)鑒定新分離病毒的鑒定1、病毒核酸類(lèi)型的測(cè)定65病毒的血清學(xué)檢測(cè)病毒的血清學(xué)檢測(cè)66方法：中和試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)血凝及血凝抑制試驗(yàn)?zāi)z免疫擴(kuò)散免疫組織化學(xué)法ELISA法及其他方法：67中和試驗(yàn)：原理—用特異性抗體中和病毒的致病性或感染性的試驗(yàn)。用途—鑒定病毒、分析病毒抗原的性質(zhì)、免疫血清的抗體效價(jià)、疫苗接種療效以及待檢樣本中的抗體輔助診斷。中和試驗(yàn)：68補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：原理—特異性病毒抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物時(shí)能結(jié)合補(bǔ)體。用途—流行病學(xué)調(diào)查（操作繁瑣、特異性低、維時(shí)短，呈淘汰趨勢(shì)）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：69血凝及血凝抑制試驗(yàn)：原理—某些病毒或病毒血凝素能選擇性地引起個(gè)別種類(lèi)的哺乳動(dòng)物的RBC凝集（血凝），當(dāng)加入相應(yīng)的特異性抗體時(shí)，上述凝集現(xiàn)象被抑制（血凝抑制）。用途—病毒鑒定、病毒分型、輔助診斷。血凝及血凝抑制試驗(yàn)：70機(jī)理結(jié)果機(jī)理結(jié)果71原理：結(jié)果原理：結(jié)果72凝膠免疫擴(kuò)散：原理—以半固體瓊脂糖為載體，在其上面進(jìn)行抗原、抗體的沉淀反應(yīng)。用途—病毒鑒定、輔助診斷等（被新型方法、技術(shù)替代）凝膠免疫擴(kuò)散：73病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件74相同不同交叉相同不同75免疫組織化學(xué)法：原理—利用標(biāo)記抗體直接對(duì)樣本中病毒抗原的存在與否進(jìn)行檢測(cè)；標(biāo)記抗體為特異性抗體（一抗）時(shí)，稱(chēng)直接法，標(biāo)記抗體為二抗時(shí)則稱(chēng)間接法。（熒光、酶或放射性同位素等）免疫組織化學(xué)法：76用途—檢測(cè)標(biāo)本中的病毒抗原，可對(duì)病毒抗原作定性的同時(shí)可抗原作定位和分布的分析。用途—檢測(cè)標(biāo)本中的病毒抗原，77病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件78酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：原理—用酶標(biāo)記的抗體或抗抗體（二抗）來(lái)檢測(cè)標(biāo)本中病毒抗原或血清中病毒抗體用途—檢測(cè)病毒特異性抗原或抗體，疾病輔助診斷。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：79病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件80其他：發(fā)光免疫分析技術(shù)固相放射免疫測(cè)定膠體金標(biāo)記免疫層析等等其他：81病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件82

病毒的分子生物學(xué)檢測(cè)

83分子雜交技術(shù)：原理—利用DNA雙鏈分子的堿基是互補(bǔ)的，在高溫和變性劑存在時(shí)可解鏈，遇低溫時(shí)又可復(fù)性（雙鏈）的特性，在復(fù)性時(shí)加入示蹤物～分子雜交技術(shù)：84常用的方法：斑點(diǎn)雜交固相雜交原位雜交Southern/northern印跡分支DNA技術(shù)

常用的方法：85聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）：原理—選擇特異性引物，通過(guò)多個(gè)熱變性-復(fù)性-延伸的循環(huán)過(guò)程，在體外由酶促擴(kuò)增待檢的DNA/RNA片段用途—疾病的輔助診斷、病毒的鑒定。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）：86常用技術(shù)：巢/半巢式PCR多重PCR逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）定量PCR原位PCRRNA捕獲PCR等

常用技術(shù)：87病毒感染與宿主免疫

病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)病毒感染與宿主免疫

病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)88病毒感染：病毒侵入人體并在

體內(nèi)增殖，與機(jī)體

發(fā)生相互作用的過(guò)程～。病毒感染：病毒侵入人體并在

89病毒性疾病：機(jī)體感染病毒后，由于入侵病毒特性、機(jī)體反應(yīng)狀態(tài)不同，引發(fā)臨床癥狀且具病毒感染特征的疾病～病毒性疾?。簷C(jī)體感染病毒90病毒感染的方式病毒感染的方式911、Horizontaltransmission（人——人）（表面接觸、血液制品）2、Verticaltransmission（親代——子代）（胎盤(pán)、產(chǎn)道）1、Horizontaltransmission92病毒的感染類(lèi)型：（一）1napparentinfection（二）apparentinfection1、acuteinfection2、persistentinfection（三）致腫瘤作用

病毒的感染類(lèi)型：93Persistentinfection：（1）latentviralinfection（2）chronicviralinfection（3）slowviralinfection（4）delayedcomplicationafteracuteviralinfectionPersistentinfection：94latentviralinfection潛伏性病毒感染：病毒感染后只是以病毒的基因或基因產(chǎn)物的形式長(zhǎng)期潛伏于組織或細(xì)胞內(nèi)，不產(chǎn)生病毒顆粒，不引發(fā)臨床癥狀。但有可能被激活組成新病毒顆粒引起致病。latentviralinfection潛伏性病毒感染：95

chronicviralinfection

慢性病毒感染：病毒感染后（顯、隱性），病毒長(zhǎng)期在體內(nèi)未被清除，可間歇性復(fù)制，持續(xù)性排毒，導(dǎo)致感染病程漫長(zhǎng)～

chronicviralinfection

慢性病毒感96

slowviralinfection

慢發(fā)病毒感染（遲發(fā)病毒感染）：病毒感染后潛伏期很長(zhǎng)（數(shù)月、數(shù)年或數(shù)十年）。此期機(jī)體無(wú)癥狀，病毒未能分離。一旦癥狀出現(xiàn)，多表現(xiàn)為亞急性進(jìn)行性，最終導(dǎo)致死亡。

slowviralinfection

慢發(fā)病毒感染（遲97

delayedcomplication

afteracuteviralinfection

急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥：急性病毒性感染后1年或數(shù)年，發(fā)生致死性的病毒病～

delayedcomplication

after98病毒致腫瘤作用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)病毒的生物學(xué)特性病毒感染與腫瘤發(fā)生、發(fā)展腫瘤組織證明病毒基因病毒致腫瘤作用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)99引起人類(lèi)惡性腫瘤的病毒病毒:逆轉(zhuǎn)錄病毒人類(lèi)嗜T淋巴細(xì)胞病毒1型（HTLV-1）DNA病毒EB病毒單純皰疹病毒Ⅱ型（HSV-2）人乳頭瘤病毒（HPV）乙型肝炎病毒（HBV）引起人類(lèi)惡性腫瘤的病毒病毒:100與病毒感染相關(guān)的腫瘤所致腫瘤:成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤Burkitts淋巴瘤鼻咽癌皮膚癌子宮頸癌肝癌與病毒感染相關(guān)的腫瘤所致腫瘤:101病毒的整合感染病毒的DNA和或逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA整合在宿主細(xì)胞染色體上，可通過(guò)其編碼蛋白引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化，發(fā)生細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，喪失其接觸抑制的特性，導(dǎo)致細(xì)胞增生，并在細(xì)胞膜上出現(xiàn)新的腫瘤移植抗原。病毒的整合感染病毒的DNA和或逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA整102病毒的致病機(jī)理（一）病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用（病毒毒性）（二）病毒感染引起的機(jī)體變化（免疫病理）病毒的致病機(jī)理（一）病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直103病毒的直接作用1、cytocidaleffect（殺細(xì)胞效應(yīng)）2、steadystateinfection（穩(wěn)定狀態(tài)感染）3、cellapotosis（細(xì)胞凋亡）4、inclusionformation（包涵體的形成）病毒的直接作用1、cytocidaleffect104病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件105病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件106steadystateinfection病毒不斷從感染細(xì)胞釋放，但細(xì)胞的新成代謝核分裂不受影響，也不改變?nèi)苊阁w膜的通透性，不引起細(xì)胞溶解或死亡。steadystateinfection病毒不斷從感染107細(xì)胞凋亡細(xì)胞凋亡以細(xì)胞質(zhì)收縮，核染色體裂解核凋亡小體形成為特征。細(xì)胞凋亡108病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件109病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件110病毒感染的間接作用1、組織器官的損傷親嗜性受染細(xì)胞膜改變受染組織細(xì)胞炎癥病毒感染的間接作用1、組織器官的損傷1112、免疫病理?yè)p傷體液免疫的損傷作用循環(huán)-免疫復(fù)合物引起的～細(xì)胞免疫的～自身免疫應(yīng)答引起的～2、免疫病理?yè)p傷112宿主的抗病毒免疫（一）非特異性抗病毒免疫（二）特異性抗病毒免疫宿主的抗病毒免疫（一）非特異性抗病毒免疫113非特異性抗病毒免疫（一）先天不感受性（二）屏障作用（三）非特異性細(xì)胞作用（四）干擾素及其作用非特異性抗病毒免疫（一）先天不感受性114干擾現(xiàn)象、干擾素干擾現(xiàn)象（Interference）當(dāng)二種病毒感染同一細(xì)胞時(shí)，一種病毒可以增殖，而另一種病毒則被抑制，這種現(xiàn)象～。干擾素(Interferon,IFN)一種能干擾病毒增殖的物質(zhì)稱(chēng)為～。干擾現(xiàn)象、干擾素干擾現(xiàn)象（Interference）115干擾素的性質(zhì)和種類(lèi)性質(zhì)：由病毒或其他干擾素誘生劑（polyI：C），刺激機(jī)體多種細(xì)胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白，作用于機(jī)體細(xì)胞，表現(xiàn)抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用。干擾素的性質(zhì)和種類(lèi)性質(zhì)：116種類(lèi)：

Ⅰ型—α、β、ω。Ⅱ型—γ。α型（人白細(xì)胞）；β型（其他細(xì)胞）；ω型（白細(xì)胞）；γ型（T細(xì)胞）。種類(lèi)：117病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件118干擾素的生物效應(yīng)1、具嚴(yán)格種屬特異性2、Ⅰ型抗病毒作用強(qiáng)，具廣泛性；Ⅱ型抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)作用強(qiáng)（活化NK、Tc；增加MIC-Ⅰ類(lèi)分子；抑制DNA合成）。干擾素的生物效應(yīng)1、具嚴(yán)格種屬特異性119特異性抗病毒免疫（一）體液免疫的抗病毒作用（二）細(xì)胞免疫的抗病毒作用（三）抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時(shí)間（四）免疫病理作用特異性抗病毒免疫（一）體液免疫的抗病毒作用120體液免疫的抗病毒作用1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白IgMIgGIgA2、抗體對(duì)靶細(xì)胞的作用體液免疫的抗病毒作用1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白121中和作用和中和抗體中和作用：抗體與病毒結(jié)合，阻止病毒的吸附與穿入，保護(hù)細(xì)胞免受病毒感染，也有效防止病毒的血行播散，這種保護(hù)作用稱(chēng)～。中和作用和中和抗體中和作用：122中和抗體：機(jī)體接受病毒感染或疫苗接種后體內(nèi)出現(xiàn)的具有中和作用的特異性抗體稱(chēng)～。

中和抗體：123細(xì)胞免疫的抗病毒作用對(duì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的病毒加以清除。發(fā)揮作用細(xì)胞：遲發(fā)性超敏反應(yīng)T細(xì)胞（TH）殺傷性T細(xì)胞（Tc或CTL）。作用機(jī)制：（略）細(xì)胞免疫的抗病毒作用對(duì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的病毒加以清除。124抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時(shí)間1、病毒感染后誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生，早但維時(shí)短。特異性抗體IgM早現(xiàn)，早消；IgG隨后，維時(shí)長(zhǎng)。2、新生兒從母體獲得（經(jīng)胎盤(pán)）IgG（母乳）IgA，維時(shí)6個(gè)月。3、抗病毒免疫持續(xù)時(shí)間隨感染病毒種類(lèi)而異。抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時(shí)間1、病毒感染后誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生，125病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件1261、殺傷靶細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞損傷，炎癥。2、抗病毒抗體親和力低、抗原-抗體比例不合適，沉積基底膜引發(fā)超敏反應(yīng)。3、受染細(xì)胞膜抗原性改變，隱蔽抗原暴露引發(fā)自身免疫病。

免疫病理作用

1、殺傷靶細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞損傷，炎

免疫病理作用

127病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)1281、病毒感染實(shí)驗(yàn)室診斷的意義：指導(dǎo)臨床病毒性疾病的診斷，指導(dǎo)臨床病毒性疾病的治療，為控制病毒性疾病的流行制定有效措施。1、病毒感染實(shí)驗(yàn)室診斷的意義：1292、病毒性疾病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)：病毒的分離與鑒定病毒的血清學(xué)診斷分子病毒學(xué)的檢測(cè)病毒感染的快速診斷2、病毒性疾病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)：130病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件131人類(lèi)病毒的感染途徑感染途徑:呼吸道感染消化道感染經(jīng)皮膚（蟲(chóng)媒）感染眼及泌尿生殖道感染胎內(nèi)（垂直）與產(chǎn)道感染人類(lèi)病毒的感染途徑感染途徑:132傳播方法及媒介:空氣飛沫、痰、唾液、皮屑飲食物（糞便污染）昆蟲(chóng)叮咬、動(dòng)物咬傷、注射輸血、刺破皮膚面盆、澡盆、毛巾、分娩、尿經(jīng)胎盤(pán)或出生時(shí)經(jīng)產(chǎn)道感染傳播方法及媒介:133標(biāo)本的采集、處理與運(yùn)送（一）標(biāo)本的采集、處理：采集的時(shí)間采集的種類(lèi)采集的方法采集后的處理標(biāo)本的采集、處理與運(yùn)送（一）標(biāo)本的采集、處理：134（二）標(biāo)本的運(yùn)送和保存立即送檢冷藏快送低溫暫存-70℃加DMSO/甘油

（二）標(biāo)本的運(yùn)送和保存135病毒形態(tài)學(xué)檢查（一）普通光學(xué)顯微鏡：大病毒顆粒、包涵體（二）電子顯微鏡：直接法（負(fù)染）間接法（免疫）(三)X線晶體衍射法病毒形態(tài)學(xué)檢查（一）普通光學(xué)顯微鏡：136包涵體:

含義、特征、意義。包涵體:

含義、特征、意義。137電鏡(負(fù)染)電鏡(負(fù)染)138脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩基病毒脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩基病毒139病毒顆粒大小的測(cè)定(一)電子顯微鏡直接測(cè)量(二)超過(guò)濾法(三)超速離心法病毒顆粒大小的測(cè)定140病毒的分離與鑒定(一)雞胚接種(二)組織細(xì)胞接種(三)動(dòng)物接種病毒的分離與鑒定141雞胚接種:雞胚接種:142病毒感染與宿主免疫病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)課件143雞胚接種途徑有：羊膜腔—流感病毒尿囊腔—流感病毒、腮腺炎病毒絨毛尿囊膜—皰疹病毒、痘病毒卵黃囊—乙型腦炎病毒雞胚接種途徑有：144組織細(xì)胞接種(1)原代和次代細(xì)胞(2)二倍體細(xì)胞：經(jīng)多次連續(xù)傳代仍保持其二倍染色體特征～(3)傳代細(xì)胞：可無(wú)限傳代～組織細(xì)胞接種(1)原代和次代細(xì)胞145病毒在細(xì)胞中增殖的指標(biāo)（1）細(xì)胞病變（CPE）（2）紅細(xì)胞吸附（3）干擾現(xiàn)象（4）細(xì)胞代謝改變病毒在細(xì)胞中增殖的指標(biāo)（1）細(xì)胞病變（CPE）146組織細(xì)胞接種:

A：正常猴腎單層上皮細(xì)胞B：繼續(xù)培養(yǎng)的正常猴腎單層上

C：MRC-5成纖維雙倍體細(xì)胞D：繼續(xù)培養(yǎng)的成纖維雙倍體細(xì)胞組織細(xì)胞接種:

A：正常猴腎單層上皮細(xì)胞B147病毒致細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)

A:正常Hep-2單層細(xì)胞B:腺病毒感染，細(xì)胞腫脹變圓，呈葡萄串狀C:副流感病毒III感染，細(xì)胞變圓呈合胞現(xiàn)象病毒致細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)

A:正常Hep-2單層細(xì)胞148病毒的數(shù)量與感染性的確定蝕斑測(cè)定：細(xì)胞準(zhǔn)備稀釋病毒相對(duì)固定記數(shù)換算病毒的數(shù)量與感染性的確定蝕斑測(cè)定：14950%感染量（ID50）或50%組織感染量（TCID50）:用使半數(shù)動(dòng)物或組織細(xì)胞感染劑量，以表示病毒感染性的強(qiáng)弱及含量。50%感染量（ID50）150動(dòng)物接種試驗(yàn)敏感動(dòng)物適宜途徑觀察指標(biāo)動(dòng)物接種試驗(yàn)敏感動(dòng)物151新分離病毒的鑒定1、病毒核酸類(lèi)型的測(cè)定2、病毒理化性狀的檢測(cè)3、病毒的血清學(xué)鑒定新分離病毒的鑒定1、病毒核酸類(lèi)型的測(cè)定152病毒的血清學(xué)檢測(cè)病毒的血清學(xué)檢測(cè)153方法：中和試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)血凝及血凝抑制試驗(yàn)?zāi)z免疫擴(kuò)散免疫組織化學(xué)法ELISA法及其他方法：154中和試驗(yàn)：原理—用特異性抗體中和病毒的致病性或感染性的試驗(yàn)。用途—鑒定病毒、分析病毒抗原的性質(zhì)、免疫血清的抗體效價(jià)、疫苗接種療效以及待檢樣本中的抗體輔助診斷。中和試驗(yàn)：155補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：原理—特異性病毒抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物時(shí)能結(jié)合補(bǔ)體。用途—流行病學(xué)調(diào)查（操作繁瑣、特異性低、維時(shí)短，呈淘汰趨勢(shì)）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：156血凝及血凝抑制試驗(yàn)：原理—某些病毒或病毒血