磺胺嘧啶在不同病理生理狀態(tài)的藥代動力學(xué)研究及生物利用測定講課課件

教學(xué)目的及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1．了解血藥濃度測定的基本技術(shù)及程序。2．掌握藥代動力學(xué)重要參數(shù)意義及測定方法，了解藥代動力學(xué)研究在新藥研究中的作用與意義。3．學(xué)習(xí)動物試驗(yàn)基本技術(shù)—家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法4．通過觀察不同病理情況下，磺胺嘧啶藥物代謝動力學(xué)的變化，進(jìn)一步理解影響藥物體內(nèi)過程的因素。5．通過觀察NaHCO3對磺胺嘧啶體內(nèi)過程的影響，進(jìn)一步理解藥物相互作用在臨床合理用藥中的重要性。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：家兔血藥濃度測定及藥代動力學(xué)參數(shù)計(jì)算。教學(xué)目的及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1．了解血藥濃度測定的基本技術(shù)及程序。1藥代動力研究的基本內(nèi)容藥代動力學(xué)（Pharmacokenetics）是用數(shù)學(xué)方式定量地研究藥物在體內(nèi)的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機(jī)體模擬為數(shù)學(xué)模型，以藥代動力學(xué)參數(shù)反映機(jī)體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力學(xué)研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內(nèi)的變化規(guī)律，同時可指導(dǎo)新藥研究過程中先導(dǎo)化合物的設(shè)計(jì)與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導(dǎo)改進(jìn)藥物劑型。藥代動力研究的基本內(nèi)容藥代動力學(xué)（Pharmacokenet2藥代動力學(xué)重要參數(shù)（一）半衰期（halflife,T1/2）：藥物在體內(nèi)消除一半所需的時間?？赏ㄟ^測定藥物在血漿或血清中濃度的衰變求出。半衰期反映藥物自體內(nèi)消除（代謝、排泄）的快慢速度，是臨床確定給藥次數(shù)和間隔的重要依據(jù)之一。T1/2=0.693/ke（二）表觀分布容積（apparentvolumeofdistribution,Vd）：體內(nèi)藥量和血藥濃度的比值，此參數(shù)的意義在于表示藥物在組織中的分布范圍廣不廣，結(jié)合程度高不高。C越高，Vd就越低。Vd在0.14～0.29L/kg，表明藥物主要在細(xì)胞外分布，如磺胺類藥物。Vd在0.3～0.4L/kg，表明藥物主要在細(xì)胞內(nèi)分布。Vd=Dose/C（三）血藥濃度-時間曲線下面積（AUC）：指血藥濃度對時間做圖后所的曲線下面積，可用梯形法和樣條函數(shù)法計(jì)算。該參數(shù)是計(jì)算生物利用度和其他動力學(xué)參數(shù)重要的基礎(chǔ)。（四）生物利用度（bioavailability，F(xiàn)）：藥物吸收入體循環(huán)的速度及程度的量度。目前均采用血藥濃度作為生物利用度指標(biāo)，分為絕對生物利用度和相對生物利用度：絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈相對生物利用度F=AUC受試制劑/AUC標(biāo)準(zhǔn)制劑（五）清除率（clearance,CL）：單位時間內(nèi)從體內(nèi)清除的藥量CL=Vd×ke或0.693×Vd/T1/2（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內(nèi)藥物與血中濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)，Css=AUC/T(間隔時間)（七）首過效應(yīng)（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進(jìn)入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進(jìn)入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應(yīng)”。首過效應(yīng)的程度可以用Gibaldi等公式表示：藥代動力學(xué)重要參數(shù)（一）半衰期（halflife,T1/3動物試驗(yàn)基本技術(shù)

——家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法

1、2、3均為不正確的抓取方法（1．可損傷兩腎，2．可造成皮下出血，3．可傷兩耳）

4、5為正確的抓取方法。頸后部的皮厚可以抓，并用手托兔體。動物試驗(yàn)基本技術(shù)

——家兔不同給藥途徑的4靜脈注射兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內(nèi)緣靜脈深不易固定，故不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入，移動拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入（圖10），然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。靜脈注射兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內(nèi)5動物實(shí)驗(yàn)內(nèi)容------磺胺嘧啶在不同病理、生理狀態(tài)的藥代動力學(xué)研究及生物利用度測定動物實(shí)驗(yàn)內(nèi)容------磺胺嘧啶在不同病理、生理狀態(tài)的藥代動6磺胺嘧啶【劑量與用法】

口服，成人1g/次，2次/日，首次2g；兒童每日150mg/kg。治療流腦，口服，成人每日0.1g/kg，分4次服用；兒童每日0.1g～0.2g/kg；肌注，成人1g～2g/次，3～4次/日；兒童每日0.1g～0.2g/kg，分3～4次。靜注用量與肌注相當(dāng)，每日1次。

【作用于用途】

本品為治療全身感染的中效磺胺，抗菌譜廣，對大多數(shù)革蘭氏陽性菌和陰性菌均有抑制作用，對腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌淋球菌、溶血性鏈球菌的抑制作用較強(qiáng)，能通過血腦屏障滲入腦脊液。

臨床主要用于流腦，為治療流腦的首選藥，也可治療上述敏感菌所致其他感染。磺胺嘧啶【劑量與用法】

口服，成人1g/次，2次/日，首次7根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或藥代動力學(xué)研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內(nèi)的變化規(guī)律，同時可指導(dǎo)新藥研究過程中先導(dǎo)化合物的設(shè)計(jì)與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導(dǎo)改進(jìn)藥物劑型。不同病理，生理狀態(tài)的動物模型7ml的試管中，搖勻。1．了解血藥濃度測定的基本技術(shù)及程序。5．健康家兔+NaHCO3治療流腦，口服，成人每日0.抑制作用，對腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；通過血腦屏障滲入腦脊液。1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；1．了解血藥濃度測定的基本技術(shù)及程序。藥代動力學(xué)（Pharmacokenetics）是用數(shù)學(xué)方式定量地研究藥物在體內(nèi)的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機(jī)體模擬為數(shù)學(xué)模型，以藥代動力學(xué)參數(shù)反映機(jī)體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力研究的基本內(nèi)容絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈治療流腦，口服，成人每日0.根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。6．健康家兔+NaHCO3家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.不同時間點(diǎn)磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數(shù)據(jù)2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或通過血腦屏障滲入腦脊液。根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：不同時間血藥濃度OD值（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理如果有8個試驗(yàn)組，還可以統(tǒng)一上下班的數(shù)據(jù)，分析性別對藥物體內(nèi)過程的影響。（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內(nèi)藥物與血中濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)，皮厚可以抓，并用手托兔體。不同病理，生理狀態(tài)的動物模型家兔肝損傷制備方法：取家兔，以0.8ml/kg體重皮下注射50%的四氯化碳（用大豆油稀釋），正常飼養(yǎng)24h即成。家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.5ml/kg體重劑量皮下分點(diǎn)注射1%氯化汞，正常飼養(yǎng)24h即成。根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：藥代動力研究的基本內(nèi)8教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容

教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容9（一）教學(xué)分組在一個教學(xué)單元內(nèi)，根據(jù)學(xué)生人數(shù)，將學(xué)生分為4組或8組，每組2～5人。取健康家兔4只或8只，如果分為4組，最好選用同一性別家兔，以避免性別對藥代動力學(xué)的影響，如果分為8組，可分為上下半班，4個組為一個組合，家兔則雌雄各半，上班選雌性，下班選雄性，可探討性別對動力學(xué)參數(shù)的影響。（一）教學(xué)分組在一個教學(xué)單元內(nèi)，根據(jù)學(xué)生人數(shù)，將學(xué)生分為4組10（二）試驗(yàn)方案1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；2．第2組的2號健康家兔，經(jīng)口給予同等劑量的磺胺嘧啶；3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；4．第4組4號肝損傷或腎損傷家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；各組均按設(shè)計(jì)的時間點(diǎn)采血，計(jì)算藥代動力學(xué)參數(shù)。（二）試驗(yàn)方案1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射11（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。根據(jù)1號、2號家兔的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算生物利用度；根據(jù)1號、3號的數(shù)據(jù)，分析機(jī)體在病理?xiàng)l件下，對藥物代謝的影響；根據(jù)1號、4號家兔的數(shù)據(jù)，藥物是否產(chǎn)生相互作用。如果有8個試驗(yàn)組，還可以統(tǒng)一上下班的數(shù)據(jù)，分析性別對藥物體內(nèi)過程的影響。（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一12（四）試驗(yàn)藥品肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD）片，磺胺嘧啶鈉注射液，75%酒精，稀釋液（0.5%NaCl+0.4%NaOH），生理鹽水用于沖洗灌胃管，磺胺嘧啶貯備液為100μg/ml，0.1%SD標(biāo)準(zhǔn)液，7.5%三氯醋酸，0.5%亞硝酸鈉，0.5%麝香草酚（用20%NaOH配制），1000U/ml肝素生理鹽水，蒸餾水。（四）試驗(yàn)藥品肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD13（五）試驗(yàn)器材兔盒、手術(shù)刀片、抗凝離心管、5ml離心管7個/組、試管、50ml容量瓶5個/組、10ml試管架、2ml吸管、1ml微量加樣器、5ml注射器、6號針頭、7號針頭、手術(shù)燈、動脈夾，吸耳球、擦鏡紙、棉球、臺式離心機(jī)、石英比色皿、紫外分光光度計(jì)。（五）試驗(yàn)器材145．健康家兔+NaHCO38ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉(zhuǎn)/min的旋轉(zhuǎn)速度離心10min，分別取上清液。如果有8個試驗(yàn)組，還可以統(tǒng)一上下班的數(shù)據(jù)，分析性別對藥物體內(nèi)過程的影響。首過效應(yīng)的程度可以用Gibaldi等公式表示：家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或不同病理，生理狀態(tài)的動物模型2g/kg，分3～4次。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或4．第4組4號肝損傷或腎損傷家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；根據(jù)1號、2號家兔的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算生物利用度；（六）試驗(yàn)步驟1．動物及血樣處理方法：①取血：取家兔，稱重，放入兔盒內(nèi)。從一側(cè)耳緣靜脈注射給1000U/ml肝素0.5ml/kg。5min后從一側(cè)耳緣靜脈取空白血樣0.4m1，分別放入1號管（對照管）和2號管（標(biāo)準(zhǔn)管）各0.2m1，搖勻靜置。然后1、3、4組從同側(cè)耳緣靜脈注射給藥磺胺嘧啶鈉注射液（10%，2ml/kg），2組通過灌胃途徑給藥磺胺嘧啶懸濁液（10%，2ml/kg）。給藥后5、15、30、60、90、150min時分別從另一側(cè)耳緣靜脈取血0.4ml。準(zhǔn)確取血0.2ml加到含有7.5%三氯醋酸2.7ml的試管中，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)管中加入0.1％SD標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml，其余各管加蒸餾水0.1ml，搖勻。②顯色：將上述各管離心5min（1500～3000rpm），取上清液1.5m1，加入0.5%亞硝酸鈉0.5ml，搖勻，再加入0.5%麝香草酚1ml，搖勻后為橙色。③測定：于分光光度計(jì)上在525nm波長下測定各樣品管的光密度值。④計(jì)算血中藥物濃度：根據(jù)同一種溶液濃度與光密度成正比的原理，可用空白血樣標(biāo)準(zhǔn)管濃度及其光密度值求算出其他樣品管的磺胺藥物濃度。公式如下：樣品管濃度＝[樣品管光密度（OD）/標(biāo)準(zhǔn)管光密度（OD）]/標(biāo)準(zhǔn)管濃度5．健康家兔+NaHCO3（六）試驗(yàn)步驟1．動物及血樣處理方15磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標(biāo)準(zhǔn)管對照管測定管7.5%三氯醋酸ml）2.72.72.7抗凝全血血樣（ml）0.20.20.2蒸餾水（ml）0.10.1標(biāo)準(zhǔn)液（ml）0.1充分搖勻離心5min取上清夜1.5ml0.5%亞硝酸鈉ml）0.50.50.50.5%麝香草酚ml）1.01.01.0磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標(biāo)準(zhǔn)管對照管測定16（五）試驗(yàn)結(jié)果的原始記錄表2不同時間點(diǎn)磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數(shù)據(jù)編號性別不同時間血藥濃度OD值5min15min30min60min90min150min12345678（五）試驗(yàn)結(jié)果的原始記錄表2性別不同時間血藥濃度OD值5m17時間（min）5min15min30min60min90min150minOD值C血（μg/ml）表4不同給藥途徑、不同病理狀態(tài)的家兔磺胺嘧啶藥代動力學(xué)參數(shù)組別性別給藥途徑動力學(xué)參數(shù)AUCT1/2VdCmaxTmax1．健康家兔♂iv2．健康家兔♀iv3．健康家兔♂ig4．健康家兔♀ig5．健康家兔+NaHCO3♂Iv6．健康家兔+NaHCO3♀iv7．肝損傷家兔♂Iv8．肝損傷家兔♀iv時間（min）5min15min30min60min90mi18試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容及格式要求試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容及格式要求19試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容及格式要求兒童每日150mg/kg。半衰期反映藥物自體內(nèi)消除（代謝、排泄）的快慢速度，是臨床確定給藥次數(shù)和間隔的重要依據(jù)之一。（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理在一個教學(xué)單元內(nèi)，根據(jù)學(xué)生人數(shù)，將學(xué)生分為4組或8組，每組2～5人。藥代動力學(xué)（Pharmacokenetics）是用數(shù)學(xué)方式定量地研究藥物在體內(nèi)的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機(jī)體模擬為數(shù)學(xué)模型，以藥代動力學(xué)參數(shù)反映機(jī)體對藥物的處置（Disposition）。根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；根據(jù)1號、2號家兔的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算生物利用度；不同時間血藥濃度OD值家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.（七）首過效應(yīng)（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進(jìn)入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進(jìn)入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應(yīng)”。絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈不同時間點(diǎn)磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數(shù)據(jù)該參數(shù)是計(jì)算生物利用度和其他動力學(xué)參數(shù)重要的基礎(chǔ)。（一）題目根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：1．“磺胺嘧啶生物利用度研究”或2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或3．“同時給予NaHCO3對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或5．自定。試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容及格式要求（一）題目根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告20（二）研究背景及意義根據(jù)選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺胺嘧啶進(jìn)行研究，為什么要設(shè)計(jì)以上試驗(yàn)，目的及意義何在（臨床合理用藥目的、改進(jìn)制劑目的等）。（二）研究背景及意義根據(jù)選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺21（三）注意事項(xiàng)：1．取血前應(yīng)盡量剔除兔耳周圍的毛，以免引起凝血，影響采血。2．離心時應(yīng)將血管平衡后對稱置入，以免損壞離心機(jī)。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。4．每吸取一個血樣時，必須更換吸管，若只用一支吸管時，必須將其中的殘液用生理鹽水沖凈。5．將血樣加到三氯醋酸試管中應(yīng)立即搖勻，否則易出現(xiàn)血凝塊。（三）注意事項(xiàng)：1．取血前應(yīng)盡量剔除兔耳周圍的毛，以免引起凝22附：紫外分光光度法測定SD血藥濃度1．試驗(yàn)方法：動物處理及給藥方法同前。準(zhǔn)確吸取靜脈血0.2ml，加入到含有4.8ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉(zhuǎn)/min的旋轉(zhuǎn)速度離心10min，分別取上清液。2．磺胺嘧啶標(biāo)準(zhǔn)曲線測定：配制磺胺嘧啶貯備液100μg/ml，試驗(yàn)時稀釋成16、12、8、4、2μg/ml、磺胺嘧啶標(biāo)準(zhǔn)溶液。256nm波長比色測定吸光度值，以濃度與光密度值做直線回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線直線回歸方程。3．樣品血藥濃度測定：取上清液，256nm波長比色測定，利用回歸方程計(jì)算血中磺胺嘧啶濃度。(此方法對儀器與試劑的要求小，實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)自身情況選用此檢測方法)附：紫外分光光度法測定SD血藥濃度1．試驗(yàn)方法：動物處理及給23本章結(jié)束本章結(jié)束24（七）首過效應(yīng)（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進(jìn)入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進(jìn)入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應(yīng)”。（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內(nèi)藥物與血中濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)，②顯色：將上述各管離心5min（1500～3000rpm），取上清液1.絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈【作用于用途】

本品為治療全身感染的中效磺胺，抗菌家兔肝損傷制備方法：取家兔，以0.動物試驗(yàn)基本技術(shù)

——家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法根據(jù)選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺胺嘧啶進(jìn)行研究，為什么要設(shè)計(jì)以上試驗(yàn)，目的及意義何在（臨床合理用藥目的、改進(jìn)制劑目的等）。給藥后5、15、30、60、90、150min時分別從另一側(cè)耳緣靜脈取血0.給藥后5、15、30、60、90、150min時分別從另一側(cè)耳緣靜脈取血0.8ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉(zhuǎn)/min的旋轉(zhuǎn)速度離心10min，分別取上清液。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。根據(jù)1號、2號家兔的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算生物利用度；磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟1ml，其余各管加蒸餾水0.藥代動力研究的基本內(nèi)容藥代動力學(xué)（Pharmacokenetics）是用數(shù)學(xué)方式定量地研究藥物在體內(nèi)的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機(jī)體模擬為數(shù)學(xué)模型，以藥代動力學(xué)參數(shù)反映機(jī)體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力學(xué)研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內(nèi)的變化規(guī)律，同時可指導(dǎo)新藥研究過程中先導(dǎo)化合物的設(shè)計(jì)與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導(dǎo)改進(jìn)藥物劑型。（七）首過效應(yīng)（firstpasseffect）：口服給25教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容

教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容26（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。根據(jù)1號、2號家兔的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算生物利用度；根據(jù)1號、3號的數(shù)據(jù)，分析機(jī)體在病理?xiàng)l件下，對藥物代謝的影響；根據(jù)1號、4號家兔的數(shù)據(jù)，藥物是否產(chǎn)生相互作用。如果有8個試驗(yàn)組，還可以統(tǒng)一上下班的數(shù)據(jù)，分析性別對藥物體內(nèi)過程的影響。（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一27磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標(biāo)準(zhǔn)管對照管測定管7.5%三氯醋酸ml）2.72.72.7抗凝全血血樣（ml）0.20.20.2蒸餾水（ml）0.10.1標(biāo)準(zhǔn)液（ml）0.1充分搖勻離心5min取上清夜1.5ml0.5%亞硝酸鈉ml）0.50.50.50.5%麝香草酚ml）1.01.01.0磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標(biāo)準(zhǔn)管對照管測定28（五）試驗(yàn)結(jié)果的原始記錄表2不同時間點(diǎn)磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數(shù)據(jù)編號性別不同時間血藥濃度OD值5min15min30min60min90min150min12345678（五）試驗(yàn)結(jié)果的原始記錄表2性別不同時間血藥濃度OD值5m29（二）研究背景及意義根據(jù)選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺胺嘧啶進(jìn)行研究，為什么要設(shè)計(jì)以上試驗(yàn)，目的及意義何在（臨床合理用藥目的、改進(jìn)制劑目的等）。（二）研究背景及意義根據(jù)選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺30教學(xué)目的及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1．了解血藥濃度測定的基本技術(shù)及程序。2．掌握藥代動力學(xué)重要參數(shù)意義及測定方法，了解藥代動力學(xué)研究在新藥研究中的作用與意義。3．學(xué)習(xí)動物試驗(yàn)基本技術(shù)—家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法4．通過觀察不同病理情況下，磺胺嘧啶藥物代謝動力學(xué)的變化，進(jìn)一步理解影響藥物體內(nèi)過程的因素。5．通過觀察NaHCO3對磺胺嘧啶體內(nèi)過程的影響，進(jìn)一步理解藥物相互作用在臨床合理用藥中的重要性。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：家兔血藥濃度測定及藥代動力學(xué)參數(shù)計(jì)算。教學(xué)目的及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1．了解血藥濃度測定的基本技術(shù)及程序。31藥代動力研究的基本內(nèi)容藥代動力學(xué)（Pharmacokenetics）是用數(shù)學(xué)方式定量地研究藥物在體內(nèi)的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機(jī)體模擬為數(shù)學(xué)模型，以藥代動力學(xué)參數(shù)反映機(jī)體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力學(xué)研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內(nèi)的變化規(guī)律，同時可指導(dǎo)新藥研究過程中先導(dǎo)化合物的設(shè)計(jì)與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導(dǎo)改進(jìn)藥物劑型。藥代動力研究的基本內(nèi)容藥代動力學(xué)（Pharmacokenet32藥代動力學(xué)重要參數(shù)（一）半衰期（halflife,T1/2）：藥物在體內(nèi)消除一半所需的時間?？赏ㄟ^測定藥物在血漿或血清中濃度的衰變求出。半衰期反映藥物自體內(nèi)消除（代謝、排泄）的快慢速度，是臨床確定給藥次數(shù)和間隔的重要依據(jù)之一。T1/2=0.693/ke（二）表觀分布容積（apparentvolumeofdistribution,Vd）：體內(nèi)藥量和血藥濃度的比值，此參數(shù)的意義在于表示藥物在組織中的分布范圍廣不廣，結(jié)合程度高不高。C越高，Vd就越低。Vd在0.14～0.29L/kg，表明藥物主要在細(xì)胞外分布，如磺胺類藥物。Vd在0.3～0.4L/kg，表明藥物主要在細(xì)胞內(nèi)分布。Vd=Dose/C（三）血藥濃度-時間曲線下面積（AUC）：指血藥濃度對時間做圖后所的曲線下面積，可用梯形法和樣條函數(shù)法計(jì)算。該參數(shù)是計(jì)算生物利用度和其他動力學(xué)參數(shù)重要的基礎(chǔ)。（四）生物利用度（bioavailability，F(xiàn)）：藥物吸收入體循環(huán)的速度及程度的量度。目前均采用血藥濃度作為生物利用度指標(biāo)，分為絕對生物利用度和相對生物利用度：絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈相對生物利用度F=AUC受試制劑/AUC標(biāo)準(zhǔn)制劑（五）清除率（clearance,CL）：單位時間內(nèi)從體內(nèi)清除的藥量CL=Vd×ke或0.693×Vd/T1/2（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內(nèi)藥物與血中濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)，Css=AUC/T(間隔時間)（七）首過效應(yīng)（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進(jìn)入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進(jìn)入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應(yīng)”。首過效應(yīng)的程度可以用Gibaldi等公式表示：藥代動力學(xué)重要參數(shù)（一）半衰期（halflife,T1/33動物試驗(yàn)基本技術(shù)

——家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法

1、2、3均為不正確的抓取方法（1．可損傷兩腎，2．可造成皮下出血，3．可傷兩耳）

4、5為正確的抓取方法。頸后部的皮厚可以抓，并用手托兔體。動物試驗(yàn)基本技術(shù)

——家兔不同給藥途徑的34靜脈注射兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內(nèi)緣靜脈深不易固定，故不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入，移動拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入（圖10），然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。靜脈注射兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內(nèi)35動物實(shí)驗(yàn)內(nèi)容------磺胺嘧啶在不同病理、生理狀態(tài)的藥代動力學(xué)研究及生物利用度測定動物實(shí)驗(yàn)內(nèi)容------磺胺嘧啶在不同病理、生理狀態(tài)的藥代動36磺胺嘧啶【劑量與用法】

口服，成人1g/次，2次/日，首次2g；兒童每日150mg/kg。治療流腦，口服，成人每日0.1g/kg，分4次服用；兒童每日0.1g～0.2g/kg；肌注，成人1g～2g/次，3～4次/日；兒童每日0.1g～0.2g/kg，分3～4次。靜注用量與肌注相當(dāng)，每日1次。

【作用于用途】

本品為治療全身感染的中效磺胺，抗菌譜廣，對大多數(shù)革蘭氏陽性菌和陰性菌均有抑制作用，對腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌淋球菌、溶血性鏈球菌的抑制作用較強(qiáng)，能通過血腦屏障滲入腦脊液。

臨床主要用于流腦，為治療流腦的首選藥，也可治療上述敏感菌所致其他感染?；前粪奏ぁ緞┝颗c用法】

口服，成人1g/次，2次/日，首次37根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或藥代動力學(xué)研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內(nèi)的變化規(guī)律，同時可指導(dǎo)新藥研究過程中先導(dǎo)化合物的設(shè)計(jì)與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導(dǎo)改進(jìn)藥物劑型。不同病理，生理狀態(tài)的動物模型7ml的試管中，搖勻。1．了解血藥濃度測定的基本技術(shù)及程序。5．健康家兔+NaHCO3治療流腦，口服，成人每日0.抑制作用，對腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；通過血腦屏障滲入腦脊液。1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；1．了解血藥濃度測定的基本技術(shù)及程序。藥代動力學(xué)（Pharmacokenetics）是用數(shù)學(xué)方式定量地研究藥物在體內(nèi)的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機(jī)體模擬為數(shù)學(xué)模型，以藥代動力學(xué)參數(shù)反映機(jī)體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力研究的基本內(nèi)容絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈治療流腦，口服，成人每日0.根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。6．健康家兔+NaHCO3家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.不同時間點(diǎn)磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數(shù)據(jù)2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或通過血腦屏障滲入腦脊液。根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：不同時間血藥濃度OD值（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理如果有8個試驗(yàn)組，還可以統(tǒng)一上下班的數(shù)據(jù)，分析性別對藥物體內(nèi)過程的影響。（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內(nèi)藥物與血中濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)，皮厚可以抓，并用手托兔體。不同病理，生理狀態(tài)的動物模型家兔肝損傷制備方法：取家兔，以0.8ml/kg體重皮下注射50%的四氯化碳（用大豆油稀釋），正常飼養(yǎng)24h即成。家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.5ml/kg體重劑量皮下分點(diǎn)注射1%氯化汞，正常飼養(yǎng)24h即成。根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：藥代動力研究的基本內(nèi)38教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容

教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容39（一）教學(xué)分組在一個教學(xué)單元內(nèi)，根據(jù)學(xué)生人數(shù)，將學(xué)生分為4組或8組，每組2～5人。取健康家兔4只或8只，如果分為4組，最好選用同一性別家兔，以避免性別對藥代動力學(xué)的影響，如果分為8組，可分為上下半班，4個組為一個組合，家兔則雌雄各半，上班選雌性，下班選雄性，可探討性別對動力學(xué)參數(shù)的影響。（一）教學(xué)分組在一個教學(xué)單元內(nèi)，根據(jù)學(xué)生人數(shù)，將學(xué)生分為4組40（二）試驗(yàn)方案1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；2．第2組的2號健康家兔，經(jīng)口給予同等劑量的磺胺嘧啶；3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；4．第4組4號肝損傷或腎損傷家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；各組均按設(shè)計(jì)的時間點(diǎn)采血，計(jì)算藥代動力學(xué)參數(shù)。（二）試驗(yàn)方案1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射41（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。根據(jù)1號、2號家兔的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算生物利用度；根據(jù)1號、3號的數(shù)據(jù)，分析機(jī)體在病理?xiàng)l件下，對藥物代謝的影響；根據(jù)1號、4號家兔的數(shù)據(jù)，藥物是否產(chǎn)生相互作用。如果有8個試驗(yàn)組，還可以統(tǒng)一上下班的數(shù)據(jù)，分析性別對藥物體內(nèi)過程的影響。（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一42（四）試驗(yàn)藥品肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD）片，磺胺嘧啶鈉注射液，75%酒精，稀釋液（0.5%NaCl+0.4%NaOH），生理鹽水用于沖洗灌胃管，磺胺嘧啶貯備液為100μg/ml，0.1%SD標(biāo)準(zhǔn)液，7.5%三氯醋酸，0.5%亞硝酸鈉，0.5%麝香草酚（用20%NaOH配制），1000U/ml肝素生理鹽水，蒸餾水。（四）試驗(yàn)藥品肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD43（五）試驗(yàn)器材兔盒、手術(shù)刀片、抗凝離心管、5ml離心管7個/組、試管、50ml容量瓶5個/組、10ml試管架、2ml吸管、1ml微量加樣器、5ml注射器、6號針頭、7號針頭、手術(shù)燈、動脈夾，吸耳球、擦鏡紙、棉球、臺式離心機(jī)、石英比色皿、紫外分光光度計(jì)。（五）試驗(yàn)器材445．健康家兔+NaHCO38ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉(zhuǎn)/min的旋轉(zhuǎn)速度離心10min，分別取上清液。如果有8個試驗(yàn)組，還可以統(tǒng)一上下班的數(shù)據(jù)，分析性別對藥物體內(nèi)過程的影響。首過效應(yīng)的程度可以用Gibaldi等公式表示：家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或不同病理，生理狀態(tài)的動物模型2g/kg，分3～4次。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或4．第4組4號肝損傷或腎損傷家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；根據(jù)1號、2號家兔的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算生物利用度；（六）試驗(yàn)步驟1．動物及血樣處理方法：①取血：取家兔，稱重，放入兔盒內(nèi)。從一側(cè)耳緣靜脈注射給1000U/ml肝素0.5ml/kg。5min后從一側(cè)耳緣靜脈取空白血樣0.4m1，分別放入1號管（對照管）和2號管（標(biāo)準(zhǔn)管）各0.2m1，搖勻靜置。然后1、3、4組從同側(cè)耳緣靜脈注射給藥磺胺嘧啶鈉注射液（10%，2ml/kg），2組通過灌胃途徑給藥磺胺嘧啶懸濁液（10%，2ml/kg）。給藥后5、15、30、60、90、150min時分別從另一側(cè)耳緣靜脈取血0.4ml。準(zhǔn)確取血0.2ml加到含有7.5%三氯醋酸2.7ml的試管中，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)管中加入0.1％SD標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml，其余各管加蒸餾水0.1ml，搖勻。②顯色：將上述各管離心5min（1500～3000rpm），取上清液1.5m1，加入0.5%亞硝酸鈉0.5ml，搖勻，再加入0.5%麝香草酚1ml，搖勻后為橙色。③測定：于分光光度計(jì)上在525nm波長下測定各樣品管的光密度值。④計(jì)算血中藥物濃度：根據(jù)同一種溶液濃度與光密度成正比的原理，可用空白血樣標(biāo)準(zhǔn)管濃度及其光密度值求算出其他樣品管的磺胺藥物濃度。公式如下：樣品管濃度＝[樣品管光密度（OD）/標(biāo)準(zhǔn)管光密度（OD）]/標(biāo)準(zhǔn)管濃度5．健康家兔+NaHCO3（六）試驗(yàn)步驟1．動物及血樣處理方45磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標(biāo)準(zhǔn)管對照管測定管7.5%三氯醋酸ml）2.72.72.7抗凝全血血樣（ml）0.20.20.2蒸餾水（ml）0.10.1標(biāo)準(zhǔn)液（ml）0.1充分搖勻離心5min取上清夜1.5ml0.5%亞硝酸鈉ml）0.50.50.50.5%麝香草酚ml）1.01.01.0磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標(biāo)準(zhǔn)管對照管測定46（五）試驗(yàn)結(jié)果的原始記錄表2不同時間點(diǎn)磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數(shù)據(jù)編號性別不同時間血藥濃度OD值5min15min30min60min90min150min12345678（五）試驗(yàn)結(jié)果的原始記錄表2性別不同時間血藥濃度OD值5m47時間（min）5min15min30min60min90min150minOD值C血（μg/ml）表4不同給藥途徑、不同病理狀態(tài)的家兔磺胺嘧啶藥代動力學(xué)參數(shù)組別性別給藥途徑動力學(xué)參數(shù)AUCT1/2VdCmaxTmax1．健康家兔♂iv2．健康家兔♀iv3．健康家兔♂ig4．健康家兔♀ig5．健康家兔+NaHCO3♂Iv6．健康家兔+NaHCO3♀iv7．肝損傷家兔♂Iv8．肝損傷家兔♀iv時間（min）5min15min30min60min90mi48試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容及格式要求試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容及格式要求49試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容及格式要求兒童每日150mg/kg。半衰期反映藥物自體內(nèi)消除（代謝、排泄）的快慢速度，是臨床確定給藥次數(shù)和間隔的重要依據(jù)之一。（三）學(xué)生試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果處理在一個教學(xué)單元內(nèi)，根據(jù)學(xué)生人數(shù)，將學(xué)生分為4組或8組，每組2～5人。藥代動力學(xué)（Pharmacokenetics）是用數(shù)學(xué)方式定量地研究藥物在體內(nèi)的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機(jī)體模擬為數(shù)學(xué)模型，以藥代動力學(xué)參數(shù)反映機(jī)體對藥物的處置（Disposition）。根據(jù)4個組，4只家兔的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一的綜合處理與分析。1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；根據(jù)1號、2號家兔的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算生物利用度；不同時間血藥濃度OD值家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.（七）首過效應(yīng)（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進(jìn)入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進(jìn)入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應(yīng)”。絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈不同時間點(diǎn)磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數(shù)據(jù)該參數(shù)是計(jì)算生物利用度和其他動力學(xué)參數(shù)重要的基礎(chǔ)。（一）題目根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告題目擬定為：1．“磺胺嘧啶生物利用度研究”或2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或3．“同時給予NaHCO3對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學(xué)的影響”或5．自定。試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容及格式要求（一）題目根據(jù)你的理解或興趣，可將報(bào)告50（二）研究背景及意義根據(jù)選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺胺嘧啶進(jìn)行研究，為什么要設(shè)計(jì)以上試驗(yàn)，目的及意義何在（臨床合理用藥目的、改進(jìn)制劑目的等）。（二）研究背景及意義根據(jù)選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺51（三）注意事項(xiàng)：1．取血前應(yīng)盡量剔除兔耳周圍的毛，以免引起凝血，影響采血。2．離心時應(yīng)將血管平衡后對稱置入，以免損壞離心機(jī)。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。4．每吸取一個血樣時，必須更換吸管，若只用一支吸管時，必須將其中的殘液用生理鹽水沖凈。5．將血樣加到三氯醋酸試管中應(yīng)立即搖勻，否則易出現(xiàn)血凝塊。（三）注意事項(xiàng)：1．取血前應(yīng)盡量剔除兔耳周圍的毛，以免引起凝52附：紫外分光光度法測定SD血藥濃度1．試驗(yàn)方法：動物處理及給藥方法同前。準(zhǔn)確吸取靜脈血0.2ml，加入到含有4.8ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉(zhuǎn)/min的旋轉(zhuǎn)速度離心10min，分別取上清液。2．磺胺嘧啶標(biāo)準(zhǔn)曲線測定：配制磺胺嘧啶貯備液100μg