Waters報(bào)錯(cuò)解析附圖

儀器總共有6個(gè)進(jìn)液管：一根綠色管是進(jìn)液洗針，一根白色管是進(jìn)液在線洗泵，另外四個(gè)進(jìn)液管是流動(dòng)相的四個(gè)通道。 一切準(zhǔn)備工作就緒，儀器開(kāi)始工作了，以前總是不知道新儀器里面是空的怎么弄，今天總算見(jiàn)識(shí)了。拿水和甲醇灌吧，把所有管路灌滿，多灌幾分鐘，壓力穩(wěn)定就可以了。安裝完畢，儀器驗(yàn)收，合同上的項(xiàng)目有：如泵有流量設(shè)定范圍、 流量準(zhǔn)確度、流量精度；自動(dòng)進(jìn)樣器有進(jìn)樣量重現(xiàn)性、 交叉污染、進(jìn)樣量準(zhǔn)確性、反復(fù)進(jìn)樣次數(shù)等；柱溫箱有溫度范圍、溫度控制精度、紫外檢測(cè)器有波長(zhǎng)范圍、帶寬、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、波長(zhǎng)重現(xiàn)性、噪聲、漂移等等。介紹下如何驗(yàn)收指標(biāo)：.流量準(zhǔn)確度：設(shè)置流量為 1.0mL/min,用一個(gè)干燥的10mL容量瓶(稱重好的)接留出液，一接開(kāi)始記時(shí)，準(zhǔn)確裝滿10mL停止。再去稱量，得到水的重量。水的重量除時(shí)間即是流量準(zhǔn)確度。.流量精度：照流量準(zhǔn)確度連續(xù)測(cè)定幾次，計(jì)算RSD.檢測(cè)器基線噪聲：停留流動(dòng)相一個(gè)小時(shí)，選擇 響應(yīng)最大的峰為結(jié)果.檢測(cè)器基線漂移：停留流動(dòng)相一個(gè)小時(shí)，從開(kāi)始到結(jié)束看上下 漂移最大的為結(jié)果.重現(xiàn)性：做整臺(tái)儀器的重現(xiàn)性，用甲醇做流動(dòng)相，工程師帶的色譜柱、標(biāo)準(zhǔn)品，反復(fù)進(jìn)樣幾次測(cè)試峰面積的 RSD.進(jìn)樣量準(zhǔn)確度：分別進(jìn)20、40、60、80、100uL看線性.交叉污染：進(jìn)一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品后再進(jìn)個(gè)空白看污染情況RSD值的學(xué)名是relativestandarddeviation(相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差)，也稱變異系數(shù)coefficientofvariation,CV.Excel中公式如下：RSD=STDEV()/AVERAGE()*100假設(shè)是這五個(gè)數(shù)據(jù)0.100,0.0999,0.0996,0.1002,0.100。用excel算他們的平均值是0.09994他們的STDEV算出來(lái)是0.000219,RSD=STDEV/平均值*100=0.2192?，F(xiàn)在不流行用RSDT,改用“不確定度”來(lái)表示分析結(jié)果的“可靠程度”。液相報(bào)錯(cuò) "plungerhomingoverpress ”如何處理：今天開(kāi)儀器，2695打開(kāi)以后進(jìn)入自檢，突然聽(tīng)到報(bào)警聲，過(guò)去一看，出現(xiàn)了一個(gè)報(bào)錯(cuò)提示，"plungerhomingoverpress 。”按確認(rèn)后又繼續(xù)自檢，然后還是出現(xiàn)一樣的報(bào)錯(cuò)。只好去查看儀器報(bào)錯(cuò)的說(shuō)明了。說(shuō)明是這樣寫(xiě)的： PlungerhomingoverpressureAlarmHomingRestrictionThesolventdeliverysystemdetectedexcessivepressurewhilemovingthe plunger活塞forwardtoitshomeregistrationposition.Thisconditionmaybecausedby:@Failuretoremovethepin栓plug塞子，栓restrictor;@Clogged堵塞in-linefilteratthesolventdeliverysystem;@Blockageinthewasteline;@Excessiverestrictionbetweenthesolventdeliverysystemandthesampleloop;@Failureofthesamplelooptovent出口thesolventdeliverysystemtoatmospherebyopeningvalvesV1,V2andV3.我看了信息之后，回頭想了想，也許是最近樣品量大，儀器臟了。既然是 overpress,肯定是哪里超過(guò)了自檢壓力,應(yīng)該是 @Excessiverestrictionbetweenthesolventdeliverysystemandthesampleloop; 可能性最大。既然是超過(guò)了自檢壓力，泄壓應(yīng)該可以自檢通過(guò)吧。我根據(jù)流路，看到泵后的第一個(gè)保護(hù)柱。如下圖照片紅色標(biāo)記:inlineinline于是我拿扳手?jǐn)Q開(kāi)了左邊進(jìn)口泄壓 ，再重新自檢，自檢通過(guò)。原來(lái)就是這個(gè)在線過(guò)濾器filter臟了，拆下來(lái)洗吧。拆了后打開(kāi)在線過(guò)濾器，構(gòu)造如圖：把中間的柱芯用甲醇超聲清洗干凈，再安裝上去就可以了（安裝有方向）。電腦控制出了問(wèn)題：今天打開(kāi)儀器，開(kāi)電腦后出現(xiàn)了一個(gè)界面，提示如下：RuntimeError!WDHCPServerSvc.exeThisapplicationhasrequestedtheRuntimetoterminateitinanunusualway.Pleasecontacttheapplication'ssupportteamformoreinformation.從字面意思來(lái)看，是某程序終止了運(yùn)行。我也不知道是什么，提示是工作站 Empower下面的程序，應(yīng)該跟工作站有關(guān)系，先不管吧。然后點(diǎn) 確定”后運(yùn)行工作站，進(jìn)入后點(diǎn)運(yùn)行樣品測(cè)定界面再次出現(xiàn)這個(gè)錯(cuò)誤提示 ，且出現(xiàn)了一次提示連不上 Bucelace板（該板是Waters公司用來(lái)控制儀器，安裝在電腦上的控制板），然后無(wú)法控制儀器。打電話一問(wèn)，原來(lái)是時(shí)區(qū)的原因（各國(guó)的時(shí)區(qū)不一樣造成的系統(tǒng)安裝問(wèn)題） 。按照工程師的吩咐，點(diǎn)控制面板，在管理工具中打開(kāi)服務(wù)程序， 把一個(gè)名為“WatersDHCP的文件設(shè)置為禁用就可以了。 一個(gè)問(wèn)題，對(duì)我來(lái)說(shuō)很棘手，對(duì)工程師來(lái)說(shuō)，見(jiàn)怪不怪，幾分鐘就解決了問(wèn)題。自動(dòng)進(jìn)樣器出了問(wèn)題：今天早上，我還是跟往常一樣，把檢測(cè)完的色素樣品從自動(dòng)進(jìn)樣器中拿了出來(lái)準(zhǔn)備清洗，發(fā)現(xiàn)樣品盤上有幾個(gè)樣品瓶蓋上有水珠， 也沒(méi)在意，認(rèn)為是自己不小心弄到的吧。 下午，我再把處理好的樣品放入樣品盤中， 準(zhǔn)備檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣品盤中有水珠的樣品瓶數(shù)量比早上更多了。我感覺(jué)到了儀器出了問(wèn)題， 哪里來(lái)的這么多水珠呢？我把樣品盤拿了出來(lái)， 全都看了一遍，甚至還檢查了自動(dòng)進(jìn)樣器的其他地方， 結(jié)果只發(fā)現(xiàn)樣品瓶蓋上有水珠， 其他地方?jīng)]有。電話后工程師又下了結(jié)論：自動(dòng)進(jìn)樣器中 SealWash（洗針）中的密封墊出了問(wèn)題 。如圖紅色標(biāo)記位置而后我回頭想想，自動(dòng)進(jìn)樣器密封墊出問(wèn)題通常都是跟樣品有關(guān)系 ，難道是我的樣品沒(méi)用0.45um的微膜過(guò)濾造成的？（因?yàn)樯睾康?，我定容?2mL,采用了高速離心機(jī)離心后上儀器測(cè)定。）還好在保修期內(nèi)出現(xiàn)的這個(gè)問(wèn)題，儀器公司給解決的這個(gè)問(wèn)題，以后可不能馬虎了，這次的教訓(xùn)也讓我變的更加細(xì)心。流動(dòng)相走光情況一：由于樣品量大，晚上儀器也在工作，下班之前就設(shè)置好了進(jìn)樣的序列且設(shè)置了自動(dòng)停泵。第二天早上來(lái)，聽(tīng)到儀器一直在鳴笛報(bào)警，過(guò)去一看，原來(lái)是沒(méi)壓力了，流速也停了。我在儀器上檢查了一下，原來(lái)是流動(dòng)相走空了。明明設(shè)置了程序停泵，怎么沒(méi)停呢？檢查了下程序，發(fā)現(xiàn)是程序設(shè)置錯(cuò)誤。我想流動(dòng)相走空了，也沒(méi)什么大不了，換上水，用儀器的程序灌泵吧。我換上水灌泵后，結(jié)果問(wèn)題來(lái)了： 發(fā)現(xiàn)沒(méi)有廢液排出來(lái)，壓力也顯示沒(méi)壓力。因?yàn)閮x器急著用，只好打電話問(wèn)工程師了，得到了答案：這個(gè)現(xiàn)象通常都是因?yàn)闅馀莼蚴请s質(zhì)進(jìn)入了單向閥造成，這樣我們就要拆開(kāi)泵單向閥，把單向閥取出來(lái) ，拆出來(lái)后把單向閥搖晃幾下（能聽(tīng)見(jiàn)寶石的聲音）或是超聲再安裝上去即可（注意方向） 。照著工程師的方法，儀器問(wèn)題很快就解決了。情況二：我們也經(jīng)常沒(méi)注意就讓流動(dòng)相走沒(méi)有，如果單用一種流動(dòng)相還好，泵會(huì)自動(dòng)停下來(lái)；若果是混合流動(dòng)相，而其中一種用完了，泵不會(huì)停，直接帶著氣泡走下去。等我們發(fā)現(xiàn)時(shí)，一般處理是：先關(guān)泵，再用注射器把管路中的氣泡抽出來(lái)，在開(kāi)泵，用流動(dòng)相猛沖，直至把柱子里、檢測(cè)器里的氣泡沖出來(lái)為止（根據(jù)基線的狀態(tài)來(lái)判斷） 。這樣做一般也沒(méi)出過(guò)什么問(wèn)題， 儀器等平衡好還是很好用的。至于單向閥，從來(lái)沒(méi)想到那頭如果有液體流出來(lái)，就不用拆單向閥，按照 情況二處理即可?？诒冗寮姿徙懙臏y(cè)定:今天，我用NY/T916-2004標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定飼料添加劑口比咤甲酸銘，按下面這個(gè)方法（從標(biāo)準(zhǔn)上截下來(lái)的）配制了標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，□比唳甲酸珞標(biāo)準(zhǔn)貯備液準(zhǔn)魄稱取0.口5月此喧甲酸輅標(biāo)注品｛格確至ILOOHIR）.置于100mL奔!it瓶中,加人卻n也甲靜,超聲配mim用中解橘幫至刻度.溫勻,他亳升含噬咬甲檢嵇50山收色箭液於41下保存，毗娓甲酸格標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制吸球Iml/lt虎甲酸珞標(biāo)準(zhǔn)曠備液（4J」,3）用水稀釋定容至50mL.再準(zhǔn)確嗷取該溶液25川??卻gLJOOpl^lSO］山2中產(chǎn)1“用水稀稀定容至10mL.該系列溶液的濃度為0.025圈,niLO.flSO網(wǎng)卉wL,1）J00圈/1川.。150陛小山、。.2）0曄八必以吐鴕甲族常標(biāo)施系列溶液色滑峰而枳為縱坐標(biāo).標(biāo)港系則溶液濃度為植量昧繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線因?yàn)闆](méi)做過(guò)，不知道吸光度高不高，就直接先進(jìn)了標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 ，結(jié)果卻得到一個(gè)這樣的色譜圖（下圖）。開(kāi)始只是以為儀器沒(méi)平衡好，再進(jìn)，可是連續(xù) 3針都是這樣。到底哪出了問(wèn)題呢？ 1.標(biāo)準(zhǔn)沒(méi)問(wèn)題。2.檢查了儀器正常。3.色譜柱上次用都好的，應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題。難道是儲(chǔ)備液濃度過(guò)高，可是高了也不會(huì)出現(xiàn)這個(gè)形狀啊。我再仔細(xì)看了下標(biāo)準(zhǔn)， 看到了用水定容。再上儀器，結(jié)果出來(lái)了（見(jiàn)下圖）。

一個(gè)物質(zhì)在甲醇中溶解，后用水稀釋測(cè)定，怎么會(huì)有這么大變化呢？我就繼續(xù)用甲醇稀釋做線性，結(jié)果還是跟第一個(gè)色譜圖一樣，舌L! !!這是溶劑效應(yīng)。溶解樣品的溶劑和流動(dòng)相的強(qiáng)弱有差異，導(dǎo)致的有些樣品分子溶解在強(qiáng)溶劑隨著強(qiáng)溶劑流過(guò)柱子， 而有些則溶解在流動(dòng)相中，導(dǎo)致峰分叉。溶劑效應(yīng)解決之法：用流動(dòng)相做溶劑或用比流動(dòng)相極性稍強(qiáng)的溶劑（反相柱）。圖10

畫(huà)融及樣品耐液的商樣品滔靦的海加MOTZ1KTime（min） Time：（min^色蕾柱：3QRBM：SB-C8,4.& 150mm等虐彖伸二rz*KOh】測(cè)ACTT電抬修現(xiàn)-3。Hl Hf-m；VLSS棄鼻；i.痂啡固2.靠械獻(xiàn)感樣品萃取中的一個(gè)小技巧在檢測(cè)食品中維生素A、維生素E的時(shí)，皂化后有一個(gè)萃取的樣品處理過(guò)程。用乙醛萃取樣品3次，然后再用水洗乙醛至中性。以前習(xí)慣了萃取振搖， 怕萃取不充分。我想這個(gè)也一樣吧?？赡闹垒p輕搖了幾下樣品就乳化了 （郁悶），那就等分層吧。10分鐘、20分鐘、30分鐘過(guò)去了，確也不見(jiàn)改善。只好又重新實(shí)驗(yàn)，再皂化。這次我學(xué)怪了，搖分液漏斗不振搖，而是轉(zhuǎn)動(dòng)搖，效果好多了。經(jīng)驗(yàn)總結(jié)：乙醛萃取皂化后樣品易乳化， 不可劇烈振搖，水洗乙醛至中性也易乳化，不可劇烈振搖，乳化后可加少量乙醇加速分層。Waters474熒光檢測(cè)器的一個(gè)小問(wèn)題：今天用熒光檢測(cè)器做樣品，遇到個(gè)小問(wèn)題。以前也沒(méi)遇到過(guò)， 對(duì)新手也有一定的價(jià)值，也分享下吧。我同時(shí)做了3個(gè)不同的樣品，前面2個(gè)正常，峰也很漂亮?？墒堑搅说?個(gè)樣品，開(kāi)始正常，做到半路殺出了個(gè)程咬金：檢測(cè)器報(bào)錯(cuò)，顯示W(wǎng)ARNING,AUTOZE