圖解抗原抗體反應(yīng)類型和原理課件

研究生課程抗原抗體反應(yīng)類型(antigen–antibodyreaction)抗原抗體反應(yīng):指抗原與相應(yīng)抗體之間

所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。體內(nèi)：體液免疫應(yīng)答的效應(yīng)作用體外：各種免疫學(xué)檢測技術(shù)包括本章講述的抗原抗體反應(yīng)，主要是指抗原和抗體在體外結(jié)合所表現(xiàn)的反應(yīng)第一節(jié)抗原抗體反應(yīng)的原理一、抗原抗體的親和力和親合力*親和力（affinity）：是抗體分子上一個抗原結(jié)合點與相應(yīng)的抗原決定簇之間的相適應(yīng)而結(jié)合的強度，是抗原與抗體間固有的結(jié)合力。親和常數(shù)（K）：K值越大?抗體的親和力越高?與抗原結(jié)合越牢固抗體與抗原結(jié)合是可逆的反應(yīng)，在平衡時其不形成牢固的共價鍵，通過非共價鍵結(jié)合這種弱的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力二、抗原抗體的結(jié)合力1、靜電引力2、范德華引力3、氫鍵4、疏水作用力

二、范德華引力概念：抗原和抗體相互接近時，各自所攜帶的原子與原子、分子與分子由于分子極化作用而出現(xiàn)的引力。

結(jié)合力的大小與兩個相互作用基團(tuán)的極化程度的乘積成正比、與它們之間距離的7次方成反比。

作用力最小

作用大小取決于二者分子空間構(gòu)型的互補性

概念：供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力。

三、氫鍵結(jié)合力

供氫體：－COOH、－NH2和－OH

受氫體：氧、氮

氫鍵結(jié)合力與供氫體和受氫體之間距離的6次方成反比。最具特異性（必須供氫體和受氫體互補才能實現(xiàn)氫鍵的結(jié)合）四、疏水作用力（疏水鍵）

概念：兩個疏水基團(tuán)在水溶液中相互接觸時，由于對水分子排斥而趨向聚集的力。

抗原決定簇與抗體上的結(jié)合點靠近，互相間正、負(fù)極性消失，親水層立即失去。

結(jié)合力最強，約占總結(jié)合力的50％。親水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化NaCl可見反應(yīng)血清學(xué)反應(yīng)條件下，抗原抗體均帶負(fù)電荷，使極化的水分子在其周圍形成水化層，成為親水膠體。

當(dāng)抗原與抗體結(jié)合使表面電荷減少，水化層變薄，失去親水性能，抗原抗體復(fù)合物成為疏水膠體在電解質(zhì)作用下，中和膠體粒子表面的電荷，使各疏水膠體之間靠攏，形成可見的抗原抗體復(fù)合物三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體

第二節(jié)抗原抗體反應(yīng)的特點1.特異性2.比例性3.可逆性4.階段性2、決定因素：由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補性決定的。3、應(yīng)用：由于抗原抗體反應(yīng)具有高度特異性，故可用已知的抗原（抗體）來檢測相應(yīng)未知的抗體（或抗原）。概念：兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng)。4、交叉反應(yīng)（crossreactions）抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖B4、決定抗原抗體解離的因素（1）抗體與相應(yīng)抗原的親合力。親合力低的抗體與抗原形成的復(fù)合物較易解離。（2）環(huán)境因素對復(fù)合物的影響。

PH過高或過低、增加離子強度均可破壞靜電引力，使抗原抗體結(jié)合力下降，促使其解離。注意：解離后的抗原或抗體仍然保持其原有生物活性三、比例性（proportionality）1、比例性是指抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)遵循一定的量比關(guān)系。2、以絮狀沉淀實驗為例，受抗原抗體比例性的影響非常明顯。3、根據(jù)所形成的沉淀物及抗原抗體比例關(guān)系繪制反應(yīng)曲線。最適比(optimalratio)：是指形成沉淀物最多，上清液清晰，幾乎無游離抗原或抗體的抗原抗體濃度比。等價帶(equivalencezone)：形成沉淀物最多的抗原與抗體分子比例合適的范圍。帶現(xiàn)象：在等價帶前后，由于抗體和抗原過量，形成的沉淀物少，上清液中可測出游離的抗體或抗原的現(xiàn)象。前帶(prozone)抗體過量時稱為。后代(postzone）抗原過量時稱為。5、一組概念帶現(xiàn)象包括四、階段性第一階段：抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合階段特點：反應(yīng)快第二階段：反應(yīng)可見階段特點：反應(yīng)時間較長2、酸堿度：一般抗原抗體反應(yīng)以pH6～9為宜，有補體參與的反應(yīng)以pH7.2～7.4為宜。二、環(huán)境因素：1、電解質(zhì)：（1）作用：中和抗原抗體復(fù)合物表面電荷，使其靠攏聚集成出現(xiàn)大塊聚集復(fù)合物。（2）常用電解質(zhì)：0.85%NaCl、各種緩沖液3、溫度：一般抗原抗體反應(yīng)以15～40℃為宜，最適溫度為37℃。4、適當(dāng)?shù)恼駬u或攪拌。

第四節(jié)抗原抗體反應(yīng)類型1.沉淀反應(yīng)2.凝集反應(yīng)3.補體參與的反應(yīng)4.中和反應(yīng)5.標(biāo)記免疫反應(yīng)反應(yīng)類型實驗技術(shù)結(jié)果判斷凝集反應(yīng)直接凝集試驗觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗同上抗球蛋白試驗同上沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗觀察沉淀，檢測濁度免疫電泳技術(shù)觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補體參與的反應(yīng)補體溶血試驗觀察測定溶血現(xiàn)象補體結(jié)合試驗同上反應(yīng)類型實驗技術(shù)結(jié)果判