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文檔簡介
富血小板血漿的臨床應(yīng)用唐都醫(yī)院穆士杰目錄2022/12/171
富血小板血漿概念Part1
富血小板血漿發(fā)展歷史Part2
富血小板血漿制備方法Part3
富血小板血漿成分特點(diǎn)Part4
富血小板血漿臨床應(yīng)用及研究Part5概念2022/12/172富血小板血漿富血小板血漿凝膠·Platelet-richplasma,PRP·Platelet-richplasmagel,PRG全血通過梯度離心分層后得到的富含血小板的血漿部分,它含有多種較豐富的生物活性因子。PRP被凝血酶等激活物激活后形成的膠凍狀物,它具有完整的三維結(jié)構(gòu)和良好的組織相容性的纖維蛋白支架。PRP制備方法原理
根據(jù)血液成分在離心過程中的沉降速率不同來提取。制備方法無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),都需兩次離心。全自動制備法、手工制備法。2022/12/174影響PRP血小板抗凝劑離心力離心時間離心次數(shù)凝膠激活劑濃度活性回收率PRP制備方法全自動法(血漿分離置換法)利用血成分分離耗材分離制備得到血小板血漿。特點(diǎn)自動化程度高、血小板純度濃度高2022/12/175PRP制備方法手工制備法都為兩步法,但離心力、離心時間略有不同。一般認(rèn)為初次200g離心10min,二次1200g離心10min,制備PRP中血小板計數(shù)約為全血6.17倍,效果較好。(血液離心后分3層:由下至上---紅細(xì)胞層、血小板濃縮物層、貧血小板血漿層)用中間層再次分離。2022/12/176PRP成分特點(diǎn)2022/12/177PRP纖維蛋白白細(xì)胞高濃度血小板其它PRP成分特點(diǎn)---血小板2022/12/179凝血酶血小板源性生長因子轉(zhuǎn)化生長因子胰島素樣生長因子表皮生長因子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子成纖維細(xì)胞生長因子血小板在凝血酶激活后聚集,由顆粒釋放生長因子(GF),可與目標(biāo)受體上的結(jié)合激活誘導(dǎo)蛋白再生過程,如細(xì)胞增殖、基質(zhì)形成、骨形成、膠原蛋白合成等。血小板PRP成分特點(diǎn)---血小板轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)以旁分泌或自分泌方式作用于成纖維細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、成骨前體細(xì)胞和破骨細(xì)胞。TGF免疫染色圖作用:參與體內(nèi)多種炎癥反應(yīng)和組織修復(fù),促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)分泌,提高成纖維細(xì)胞增殖能力,刺激膠原蛋白1和纖維連接蛋白的生物合成以及骨基質(zhì)的沉積,抑制破骨細(xì)胞形成和骨吸收發(fā)生。2022/12/1711PRP成分特點(diǎn)---血小板表皮生長因子(EGF)作用:新生血管重要的誘導(dǎo)因子??纱龠M(jìn)創(chuàng)口愈合、參與血管生成。刺激內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞遷移。還可增加血管通透性。2022/12/1713PRP成分特點(diǎn)---血小板血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)是高度保守的同源二聚體糖蛋白。二條分子量各為24kDa的單鏈以二硫鍵組成二聚體。作用:能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖,增加血管通透性。誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的增生和遷移,啟動血管生成反應(yīng)。2022/12/1714PRP成分特點(diǎn)---血小板成纖維細(xì)胞生長因子(FGFs)作用:參與血管形成、損傷愈合和胚胎發(fā)育等過程,是關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞最具顯著效應(yīng)的有絲分裂刺激原和形態(tài)原之一。2022/12/1715PRP成分特點(diǎn)---白細(xì)胞白細(xì)胞:參與機(jī)體免疫和防御功能幫助機(jī)體清除局部病原體、增強(qiáng)抗感染能力;幫助機(jī)體清除局部壞死組織,加快組織修復(fù)。受血小板分泌生長因子趨化,本身可分泌生長因子直接參與組織修復(fù)。2022/12/1716PRP成分特點(diǎn)---其它其它成分如:纖維連接蛋白(FN)血小板反應(yīng)蛋白(TSP)骨連接蛋白(ON)玻璃體連接蛋白(VN)作用:對傷口感染、促進(jìn)組織修復(fù)及增加新生血管內(nèi)膜的形成發(fā)揮重要作用。2022/12/1717PRP2022/12/1719優(yōu)點(diǎn)三優(yōu)點(diǎn)四含高濃度多種生長因子,且比例接近正常人,具備最佳協(xié)同效應(yīng),(避免單一因子不能良好誘導(dǎo)創(chuàng)面愈合)PRP凝膠具有極好粘附性,使用時可較好的黏附在創(chuàng)面上而不流失,避免損失,保證局部較高的生長因子濃度。PRP2022/12/1720優(yōu)點(diǎn)五優(yōu)點(diǎn)六因含有較多的白細(xì)胞和單核細(xì)胞,可起到防止感染作用。避免了異體和人工合成組織的致畸危險,同時各種因子表達(dá)良好,避免了誘導(dǎo)腫瘤形成的可能。2022/12/1722口腔頜面外科2022/12/1723實(shí)驗(yàn)方法:將患者因正畸拔出的患牙傳代培養(yǎng),取第5代細(xì)胞作為試驗(yàn)用牙周膜成纖維細(xì)胞來源;人病牙制成1mm厚根片;2次離心法制備PRP;觀察不同濃度PRP(A組10%、B組15%、C組20%、D組30%、對照組無PRP)對人牙周膜成纖維細(xì)胞在脫礦的病變牙根表面附著情況及膠原形成情況。研究一口腔頜面外科相關(guān)研究2022/12/1725Whitman用PRP聯(lián)合骨移植治療骨缺損獲得成功。Suba等應(yīng)用β磷酸三鈣復(fù)合PRP治療犬牙槽骨缺損,發(fā)現(xiàn)PRP可明顯促進(jìn)骨再生。Lekovic研究發(fā)現(xiàn)PRP能促進(jìn)牙槽骨再生。張麗等的研究證實(shí)PRP聯(lián)合植骨術(shù)治療牙周鄰面骨缺損效果優(yōu)于單純植骨術(shù)。Philippart等將PRP混合物充填于上頜竇中,6個月組織學(xué)觀察顯示有活躍的骨新生活動。Rodrignez等在上頜竇區(qū)植入PRP及種植體,移植成功率達(dá)92.9%,表明PRP可加快骨再生速度,提高骨再生質(zhì)量。頜骨相關(guān)研究牙周病上頜竇
手術(shù)2022/12/1726骨科2022/12/1727研究二方法:選擇股骨干骨不連、骨缺損≤2cm需行骨移植治療的40例患者,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(脫蛋白牛松質(zhì)骨+PRP)及對照組(脫蛋白牛松質(zhì)骨),每組20例。術(shù)后7d和1、2、3、6、12個月定期攝X線片檢查,參照Lane-Sandhu的X線評分標(biāo)準(zhǔn)評分,并比較兩組骨痂灰度、愈合情況及愈合速度。骨科相關(guān)研究2022/12/1729Marx等發(fā)現(xiàn)復(fù)合PRP的移植骨修復(fù)速度比單純用移植骨修復(fù)快1.62-2.16倍。Bielecki等用PRP經(jīng)皮注射治療骨不連取得良好療效。Drengk等研究顯示PRG作為細(xì)胞支架能明顯促進(jìn)軟骨細(xì)胞遇見充質(zhì)干細(xì)胞的增生和向軟骨細(xì)胞分化。Wu等認(rèn)為PRP可以作為軟骨細(xì)胞的載體,治療關(guān)節(jié)軟骨缺損。Bielecki的研究顯示血小板-白細(xì)胞凝膠在體外可抑制金葡、大腸桿菌生長,提示PRP可作為“生物抗菌制劑”。骨缺損修復(fù)軟骨損傷修復(fù)預(yù)防骨
感染2022/12/1730運(yùn)動醫(yī)學(xué)2022/12/1731研究三方法:患者11例跟腱有炎癥19處,每次制備患者自體PRP2ml行跟鍵周圍注射。每周1次,5次為1個療程,治療期間患者停用一切藥物及其他的藥物輔助治療?;颊唠S訪3一8個月,平均6個月,觀察療效。結(jié)果:跟腱有炎癥的地方19處,治療后痊愈5處,顯效13處,治療有效率94.74%。結(jié)論:PRP對跟腱炎療效肯定,是一種安全有效的方法。運(yùn)動損傷相關(guān)研究2022/12/1732急性運(yùn)動損傷Sanchez的研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用PRP患者在關(guān)節(jié)活動度、功能恢復(fù)及術(shù)后并發(fā)癥方面均優(yōu)于單純修復(fù)患者。耿震的研究表明PRP在改善肌腱愈合質(zhì)量的同時也加速了愈合進(jìn)程。Radice的研究顯示,應(yīng)用髕韌帶進(jìn)行前交叉韌帶重建時應(yīng)用PRP,可將韌帶成熟時間從12個月縮短到3.6個月。Sanchez等報道肌肉拉傷運(yùn)動員在超聲波引導(dǎo)下局部注射PRGF后,功能恢復(fù)時間明顯縮短,且運(yùn)動訓(xùn)練后未出現(xiàn)肌肉纖維化現(xiàn)象。運(yùn)動損傷相關(guān)研究2022/12/1733慢性運(yùn)動損傷Mishra通過對難治性肱骨外上髁炎患者注射PRP發(fā)現(xiàn),只有非激活狀態(tài)并同時含有濃縮血小板和白細(xì)胞的PRP有效。Barrett發(fā)現(xiàn)慢性跖腱膜炎患者在B超引導(dǎo)下局部注射PRP治療效果好。王虎等的研究表明,和類固醇比PRP治療跟痛癥取得了良好療效。KonE等用PRP和透明質(zhì)酸鹽對照注射入膝關(guān)節(jié)治療骨性關(guān)節(jié)炎,發(fā)現(xiàn)其療效優(yōu)于傳統(tǒng)的透明質(zhì)酸鹽。2022/12/1734普外科2022/12/1735研究四方法:抽取難愈合傷口患者靜脈血,與氯化鈣、凝血酶混合后制成PRP凝膠敷于患者創(chuàng)面,凡士林紗布填塞。每7天換1次,3次一療程。評估治療后傷口變化情況。2022/12/1736研究四結(jié)果:29例患者在三次使用PRP后傷口明顯縮小,大部分壞死組織清除,組織色澤紅潤血供良好,無明顯滲液和膿液。3例效果不明顯。治療3個月:10例傷口完全愈合,形成瘢痕組織;11例創(chuàng)面覆蓋率75%,9例50%-75%,2例<50%;治愈率31.2%,顯效率93.8%。結(jié)論:
PRP修復(fù)慢性難愈合傷口是一種有效、實(shí)用的治療方法。普外科相關(guān)研究2022/12/1737BhanotS的研究指出,PRP可加速表皮化生長,減輕創(chuàng)傷后局部腫脹和疼痛,減少術(shù)后傷口滲出。ManD將PRP凝膠用于皮瓣移植術(shù),發(fā)現(xiàn)血管創(chuàng)出血被凝膠封閉,提高了手術(shù)成功率。CarterCA等用PRP修復(fù)馬小腿傷口發(fā)現(xiàn),PRP加快上皮細(xì)胞增殖,促進(jìn)傷口膠原合成以及血管再生。郭彥杰等應(yīng)用PRP創(chuàng)面內(nèi)注射治療下肢慢性難愈合傷口,療效顯著。夏江霓等對慢性潰瘍患者應(yīng)用PRP凝膠治療,發(fā)現(xiàn)PRP能更好的促進(jìn)傷口處肉芽組織形成。Giorgio研究認(rèn)為PRP可激發(fā)細(xì)胞增殖分化和微血管的形成,增強(qiáng)局部組織自我修復(fù)能力,從而有利于切口愈合。劉曉韜的研究顯示,應(yīng)用PRP注入脂肪液化切口深部的患者愈合時間明顯減少,提示PRP可以減輕疼痛、術(shù)后出血,減少術(shù)后并發(fā)癥。急性創(chuàng)面慢性難愈合傷口手術(shù)切口脂肪液化2022/12/1738燒傷整形科2022/12/1739研究五方法:10只裸鼠隨機(jī)選擇一側(cè)背部皮下組織作為PRP組(0.5mL人顆粒脂肪+0.1mLPRP)受區(qū),一側(cè)作為對照組(0.5mL人顆粒脂肪+0.1mL磷酸鹽緩沖液)受區(qū)。于植入后10、90d處死后取出移植物進(jìn)行大體形態(tài)觀察、體積測定及組織學(xué)檢測。2022/12/1740研究五結(jié)果:術(shù)后90dPRP組移植物存留量明顯多于對照組,且周圍血供更豐富,觸之質(zhì)地較柔軟,更接近正常脂肪組織。在術(shù)后10、90d,PRP組存留體積均大于對照組。2022/12/1741研究五脂肪移植物組織結(jié)構(gòu)觀察(蘇木精-伊紅染色,X100)
對照組PRP組10d90d結(jié)果:術(shù)后10、90dPRP組脂肪細(xì)胞均維持較好形態(tài),細(xì)胞間隙保持較好,僅有少量脂肪空泡形成。對照組移植90d后組織結(jié)構(gòu)較混亂,大量結(jié)締組織及脂肪空泡形成,部分出現(xiàn)壞死,僅少量細(xì)胞能夠維持正常的形態(tài)。2022/12/1742研究五結(jié)果:定量比較發(fā)現(xiàn),在各時間點(diǎn),PRP組均比對照組具有更多正常脂肪細(xì)胞面積及微血管數(shù)量,比對照組具有更少脂肪空泡面積,說明PRP明顯改善了移植脂肪組織的組織學(xué)質(zhì)量。2022/12/1743燒傷整形科相關(guān)研究Nalbonesi等應(yīng)用PRP成功治療了14例因接受面部整形手術(shù)導(dǎo)致皮膚和軟組織損傷的患者。Hum等研究發(fā)現(xiàn),局部注射PRP療效明顯優(yōu)于抗生素軟膏好濕性敷料,可使傷口愈合率超過80%。黃云嚴(yán)的將PRP凝膠用于治療60例面部二度燒傷創(chuàng)面,發(fā)現(xiàn)在傷后早期使用PRP凝膠可使創(chuàng)面愈合速度加快、愈合率提高,減少瘢痕形成。2022/12/1744其它2022/12/1745研究六方法:健康大耳白兔10只雙側(cè)面神經(jīng)上頰支橫斷后置入硅膠神經(jīng)再生導(dǎo)管(自制),采用雙側(cè)自身對照,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)側(cè)和對照側(cè)。實(shí)驗(yàn)側(cè)注入PRP,對照側(cè)注入生理鹽水;8周后進(jìn)行相關(guān)檢測分析評價面神經(jīng)恢復(fù)再生情況。
2022/12/1746研究六2022/12/1747結(jié)果:面神經(jīng)損傷后8周兔實(shí)驗(yàn)側(cè)及對照側(cè)均能引出清晰穩(wěn)定的面神經(jīng)復(fù)合動作電位,面神經(jīng)損傷兔實(shí)驗(yàn)側(cè)動作電位潛伏期明顯短于對照側(cè),而波幅則高于對對照側(cè),說明PRP能促進(jìn)面神經(jīng)功能的恢復(fù)。研究六2022/12/1748研究六結(jié)果:顯微圖像分析也表明,面神經(jīng)損傷后8周實(shí)驗(yàn)組有髓軸突數(shù)目,直徑及面積明顯高于對照組。表明發(fā)生面神經(jīng)損傷后,早期應(yīng)用PRP有利于面神經(jīng)的修復(fù)和再生。2022/12/1749研究七方法:離心法分離兔全血獲得PRP。采用5%PRP作用于兔角膜基質(zhì)細(xì)胞,CCK-8(細(xì)胞增殖-毒性檢測試劑盒)法檢測PRP促角膜基質(zhì)細(xì)胞增殖的作用。PRP與凝血酶激活劑以9:1的比例制備富血小板凝膠,對制備的富血小板凝膠進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)、對角膜基質(zhì)細(xì)胞的作用、黏附性、生物相容性等多方面觀察與評價。2022/12/1750結(jié)果:培養(yǎng)后測定3組細(xì)胞吸光度OD值可見,對照組OD值隨培養(yǎng)時間延長而不增加,增殖基本停滯;PRP組增加速度較FBS組及對照組快。表明,PRP與FBS一樣具有促角膜基質(zhì)細(xì)胞增殖的作用。研究七2022/12/1751結(jié)果:組織學(xué)切片HE染色發(fā)現(xiàn),制備的富血小板凝膠呈典型的多孔性結(jié)構(gòu),凝膠內(nèi)大量的纖維交織,呈有序排列,形成支架,角膜
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