醫(yī)學(xué)檢驗方法學(xué)評價課件

檢驗醫(yī)學(xué)方法學(xué)的評價2022/12/181檢驗醫(yī)學(xué)方法學(xué)的評價2022/12/131好方法：靈敏度高重復(fù)性好特異性高準(zhǔn)確度好抗干擾強(qiáng)適用性強(qiáng)價格低概述2022/12/182好方法：靈敏度高概述2022/12/132

掌握方法學(xué)學(xué)評價是檢驗科中、高級人員的基本功之一。檢驗科要不斷引進(jìn)或建立新的診斷試驗，引進(jìn)什么試驗，對實驗結(jié)果如何解釋和如何得到有效應(yīng)用，這些都離不開對試驗的評價。然而同國外相比還存在著較大差距，今后對這方面的學(xué)習(xí)和實踐應(yīng)該加強(qiáng)。

概述2022/12/183概述2022/12/133第一節(jié)檢驗方法學(xué)評價的重要性

一、醫(yī)學(xué)檢驗方法的建立是為了診斷疾病。在建立或引進(jìn)一個新的試驗時，必須了解該試驗方法的基本性能，因此應(yīng)該進(jìn)行方法學(xué)評價。2022/12/184第一節(jié)檢驗方法學(xué)評價的重要性一、醫(yī)學(xué)檢驗方法的建立是為二、檢驗方法的評價是合理解釋實驗室數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)。檢驗科的工作目標(biāo)主要是：

1．能為臨床提供可靠的數(shù)據(jù)；

2．為臨床提供充分的檢驗項目和及時的報告；

3．為臨床能提供專業(yè)咨詢。2022/12/185二、檢驗方法的評價是合理解釋實驗室數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)。檢驗科的工作目因此在引進(jìn)新技術(shù)的同時，必須及時開展與臨床的合作和對話，以強(qiáng)化對實驗室數(shù)據(jù)的合理解釋與有效利用，及時將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為高層次的臨床判斷分析信息。因此在引進(jìn)新技術(shù)的同時，必須及時開展與臨床的6三、從醫(yī)學(xué)檢驗事業(yè)的發(fā)展要素來看，掌握檢驗方法學(xué)評價在檢驗工作中有著重要作用。檢驗科人員組成應(yīng)包括方法學(xué)家，其工作以開展新方法進(jìn)行方法學(xué)評價，提高檢驗質(zhì)量為主。2022/12/187三、從醫(yī)學(xué)檢驗事業(yè)的發(fā)展要素來看，掌握檢驗方法學(xué)評價在檢驗工第二節(jié)

評價實驗的設(shè)計及統(tǒng)計指標(biāo)的選擇

方法評價的基本內(nèi)容是通過實驗途徑,測定并評價它的準(zhǔn)確度和精密度。不論準(zhǔn)確度和精密度，都強(qiáng)調(diào)的是誤差，評價過程就是對誤差的測定。2022/12/188第二節(jié)評價實驗的設(shè)計及統(tǒng)計指標(biāo)的選擇1．預(yù)評價：主要研究候選方法的最適條件。這些條件包括：⑴、試劑的濃度；⑵、緩沖液種類；⑶、離子強(qiáng)度及pH值；⑷、標(biāo)本與試劑的容積比；一、方法學(xué)評價計劃2022/12/1891．預(yù)評價：主要研究候選方法的最適條件。這些條件包括：一、⑸、反應(yīng)溫度與時間；⑹、吸收曲線與波長選擇；⑺、線性范圍等。2022/12/1810⑸、反應(yīng)溫度與時間；2022/12/13102．初步評價：⑴、用標(biāo)準(zhǔn)液作線性及批內(nèi)重復(fù)實驗；⑵、用血清作批內(nèi)及天內(nèi)重復(fù)實驗；⑶、進(jìn)行回收實驗；⑷、進(jìn)行干擾實驗。方法學(xué)評價計劃2022/12/18112．初步評價：方法學(xué)評價計劃2022/12/13113．最后評價：⑴、作日間重復(fù)實驗；⑵、方法學(xué)比較實驗；⑶、判斷方法的可接受性；⑷、進(jìn)行臨床相關(guān)研究。方法學(xué)評價計劃2022/12/18123．最后評價：方法學(xué)評價計劃2022/12/13124．方法應(yīng)用：⑴、建立質(zhì)控系統(tǒng)；⑵、訓(xùn)練操作者；⑶、引進(jìn)常規(guī)應(yīng)用；⑷、常規(guī)性能管理。方法學(xué)評價計劃2022/12/18134．方法應(yīng)用：方法學(xué)評價計劃2022/12/1313

（一）

、方法的分級臨床生化成分的測定方法很多，根據(jù)其準(zhǔn)確度與精密度的不同可以分為三級。

二、方法的選擇2022/12/1814二、方法的選擇2022/12/13141、決定性方法（Definitivemethods）

指準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過詳細(xì)研究，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法，測定結(jié)果為“確定值”，與“真值”最接近。方法的分級2022/12/18151、決定性方法（Definitivemethods）方條件：技術(shù)要求太高且復(fù)雜，費用昂貴，儀器精密、試劑最純。用途：不能直接用于鑒定常規(guī)方法的準(zhǔn)確性，只用于發(fā)展及評價參考方法和標(biāo)準(zhǔn)品。2022/12/1816條件：技術(shù)要求太高且復(fù)雜，費用昂2022/12/13162、參考方法（Referencemethods）

指準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)充分證實的分析方法，干擾因素少，系統(tǒng)誤差很小，與重復(fù)測定的隨機(jī)誤差相比可以忽略不計，有適當(dāng)?shù)撵`敏度、特異性、直線性及較寬的分析范圍。方法的分級2022/12/18172、參考方法（Referencemethods）方法的分級條件：所需儀器的要求也較高，昂貴，試劑要求二級標(biāo)準(zhǔn)品，純度高、雜質(zhì)少，在條件優(yōu)越的實驗室可進(jìn)行常規(guī)工作。用途：主要應(yīng)用于鑒定常規(guī)方法，評價其誤差大小，干擾因素，并決定其是否可以被接受。它也用于鑒定二級標(biāo)準(zhǔn)品，為質(zhì)控血清定值，也可用于評價商品試劑盒等。

2022/12/1818條件：所需儀器的要求也較高，昂貴，試劑要求二級標(biāo)準(zhǔn)品，純度高3、常規(guī)方法（routinemethod）

性能指標(biāo)符合臨床或其它目的需要，有適當(dāng)?shù)姆治龇秶医?jīng)濟(jì)實用。常規(guī)方法分為偏差已知的方法和偏差未知的方法。條件：常規(guī)方法在作出評價以后，經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認(rèn)可，可以作為推薦方法。

用途：普通實驗室。方法的分級2022/12/18193、常規(guī)方法（routinemethod）方法的分級20臨床化學(xué)方法之間關(guān)系可見下圖。

方法的分級2022/12/1820臨床化學(xué)方法之間關(guān)系可見下圖。方法的分級2022/12/1

國際標(biāo)準(zhǔn)化委員會將標(biāo)準(zhǔn)品（參考物）的定義暫定為：它的一種或幾種物理或化學(xué)性質(zhì)已經(jīng)充分確定，被用于校正儀器或證實一種測定方法的物質(zhì)，并將其分成三級。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值結(jié)果一般表示為：標(biāo)準(zhǔn)值±總不確定度。（二）標(biāo)準(zhǔn)品的分級2022/12/1821國際標(biāo)準(zhǔn)化委員會將標(biāo)準(zhǔn)品（參考物）的定義暫定1、一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（primaryreferencematerial

）

一級標(biāo)準(zhǔn)品（原級參考物）是已經(jīng)確定的穩(wěn)定而均一的物質(zhì)，它的數(shù)值已由決定性方法確定，或由高度準(zhǔn)確的若干方法確定，所含雜質(zhì)也已經(jīng)定量。它可用于校正決定性方法，評價及校正參考方法以及為“二級標(biāo)準(zhǔn)品”定值。標(biāo)準(zhǔn)品的分級2022/12/18221、一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（primaryreferencema2、二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（secondaryreferencematerial）二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量由參考方法定值或用一級標(biāo)準(zhǔn)品比較而確定，主要用于常規(guī)方法的標(biāo)化或為控制物定值。二級標(biāo)準(zhǔn)品或是純?nèi)芤海ㄋ蛴袡C(jī)溶劑的溶液），或存在于相似基質(zhì)中。

標(biāo)準(zhǔn)品的分級2022/12/18232、二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（secondaryreferencem3、校準(zhǔn)物（calibrator）用二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)，常規(guī)方法定值。用于對常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)品的分級2022/12/18243、校準(zhǔn)物（calibrator）標(biāo)準(zhǔn)品的分級2022/4、質(zhì)控物（controlmaterial）具有與檢測過程相適應(yīng)的特性，其成份與檢測樣本的基質(zhì)相同或相似。用于質(zhì)量控制，不用于標(biāo)化。標(biāo)準(zhǔn)品的分級2022/12/18254、質(zhì)控物（controlmaterial）標(biāo)準(zhǔn)品的分國際臨床化學(xué)協(xié)會（IFCC）提出：常規(guī)方法應(yīng)具有實用性和可靠性兩方面的性能指標(biāo)，至于某一項具體分析方法所應(yīng)具有的性能標(biāo)準(zhǔn)，可由臨床實驗室根據(jù)采用這一試驗的目的決定。三、方法選擇的要求2022/12/1826國際臨床化學(xué)協(xié)會（IFCC）提出：三、方法選擇的要求20221、實用性一般應(yīng)具備：⑴、微量快速能便于急診，適合成套項目分析；⑵、費用低廉，包括勞動力與試劑、設(shè)備及一般管理費用等；⑶、方法簡便；⑷、應(yīng)用安全可靠。方法選擇的要求2022/12/18271、實用性一般應(yīng)具備：方法選擇的要求2022/12/132、可靠性一般具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，以及較大的檢測能力。⑴、精密度變異系數(shù)（CV％）一般應(yīng)小于5％。⑵、準(zhǔn)確度與特異性準(zhǔn)確度是指測定值與“真值”的符合程度。一般偏差系數(shù)（CB）應(yīng)小于5％。特異性是指只對待測物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)，不與其它結(jié)構(gòu)類似的化合物發(fā)生反應(yīng)。⑶、檢測能力即“檢測限度”，或“檢出限”。檢出限通常是指能與適當(dāng)?shù)摹翱瞻住弊x數(shù)相區(qū)別的待測物的最小值。方法選擇的要求2022/12/18282、可靠性一般具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，以及較大的檢測能（一）廣泛查閱文獻(xiàn)

根據(jù)方法選擇的要求對已發(fā)表的各種方法進(jìn)行比較與檢驗，確定哪些方法有充分的科學(xué)根據(jù)及真實的使用價值。四、方法選擇的步驟2022/12/1829（一）廣泛查閱文獻(xiàn)四、方法選擇的步驟2022/12/1329（二）選定候選方法

經(jīng)初步選定的方法稱為候選方法。候選方法確定后，應(yīng)該寫出該法的原理與參考文獻(xiàn)，所用儀器、試劑的來源、牌號、純度（或配套試劑盒），標(biāo)本收集要求，詳細(xì)的操作步驟，標(biāo)準(zhǔn)曲線和結(jié)果計算，文獻(xiàn)中列出的性能指標(biāo)，參考值與參考范圍，以及其它應(yīng)注意的事項與安全防護(hù)措施等。

方法選擇的步驟2022/12/1830（二）選定候選方法方法選擇的步驟2022/12/1330（一）、方法建立的原理確定臨床生化方法按其傳統(tǒng)分類可分為光譜法、層析法、電泳法、酶法、電化學(xué)法、分子生物學(xué)和免疫化學(xué)法等，這些方法的建立首先要根據(jù)其技術(shù)的原理和被測物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)來確定其方法建立的原理。五、方法的建立2022/12/1831（一）、方法建立的原理確定五、方法的建立2022/12/13（二）、方法建立時的條件選擇

在方法建立的原理確定后，尚需根據(jù)其原理來選擇合適的條件，以保證所建的方法可靠。下面以光度法為例介紹其條件選擇的主要環(huán)節(jié)：方法的建立2022/12/1832（二）、方法建立時的條件選擇方法的建立2022/12/133

顏色反應(yīng)是光度分析的基礎(chǔ)，因此，用作光度測定的顏色反應(yīng)至少要具備以下幾條：a、反應(yīng)有較高的特異性，從而干擾??；b、反應(yīng)產(chǎn)生的有色物質(zhì)吸光系數(shù)要大，大者靈敏度高；c、有色產(chǎn)物的離解度要小，小則穩(wěn)定；d、此外，還要求有色產(chǎn)物有恒定的組成成分，使產(chǎn)生的顏色穩(wěn)定。方法建立時的條件選擇2022/12/1833顏色反應(yīng)是光度分析的基礎(chǔ)，因此，用作光度測由于影響顏色反應(yīng)的因素很多，如溫度、pH、試劑濃度、反應(yīng)的時間等等。這些因素在建立新方法時都要逐項試驗，確定最佳實驗條件方法建立時的條件選擇2022/12/1834由于影響顏色反應(yīng)的因素很多，如溫度、pH、1、選擇合適的吸收光譜—確定波長實際上就是測定顏色反應(yīng)產(chǎn)生的光吸收曲線。方法是在整個可見光區(qū)（400-700nm）進(jìn)行波長掃描，同時，還應(yīng)以同法分別測定其空白液和標(biāo)準(zhǔn)物顏色產(chǎn)物的吸收曲線。方法建立時的條件選擇2022/12/18351、選擇合適的吸收光譜—確定波長方法建立時的條件選擇2022△A＝A標(biāo)準(zhǔn)－A空白△A最大時的波長(即干擾最小)為最適波長方法建立時的條件選擇2022/12/1836△A＝A標(biāo)準(zhǔn)－A空白方法建立時的條件選擇2022/12/13方法建立時的條件選擇2022/12/1837方法建立時的條件選擇2022/12/13372、測定方法適用的濃度范圍——線性實驗根據(jù)郎伯-比耳定律吸光度應(yīng)與溶液的濃度成正比。測定方法適用的濃度范圍是指分析的濃度范圍在直線線性段，濃度與吸光度之比為一常數(shù)，此時直線上任何一點的斜率tanθ相等，即：

tanθ＝A1/C1＝A2/C2＝A3/C3＝……＝An/Cn＝K此處K即為校正常數(shù)，可用于結(jié)果計算。方法建立時的條件選擇2022/12/18382、測定方法適用的濃度范圍——線性實驗方法建立時的條件選擇2

通常稀溶液都是符合比耳定律的，但在濃度過高和過低時往往都不呈直線（見下圖），說明低濃度部分亦有儀器的靈敏度和方法的檢測能力限制，所以，具體的測定就宜選擇在直線段濃度范圍內(nèi)進(jìn)行。方法建立時的條件選擇2022/12/1839通常稀溶液都是符合比耳定律的，但在濃度AC線性段θ方法建立時的條件選擇2022/12/1840AC線性段θ方法建立時的條件選擇2022/12/13403、觀察影響顏色反應(yīng)的因素

影響顏色反應(yīng)的主要因素有：溶液pH的影響、雜質(zhì)的影響、反應(yīng)的溫度和時間、以及顏色的穩(wěn)定性等。這些都是光度法測定誤差的主要來源。都需要通過實驗來觀察并控制在一個適宜的范圍內(nèi)。從而保證方法的準(zhǔn)確性和精密性。方法建立時的條件選擇2022/12/18413、觀察影響顏色反應(yīng)的因素方法建立時的條件選擇2022/12⑴溶液pH的影響有些溶液的顏色對pH值的改變非常靈敏。因此，在建立方法時可在不同pH值條件下（其它條件不變）令其反應(yīng)，以觀察顏色反應(yīng)的吸光度變化，從而選擇合適的pH值范圍來保證顏色反應(yīng)，以求較高的靈敏度和較好的線性。有時還需用相應(yīng)的pH緩沖液來維持反應(yīng)的pH，以利顏色反應(yīng)的正常進(jìn)行。

觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/1842⑴溶液pH的影響觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/13⑵雜質(zhì)的影響由于臨床標(biāo)本中除含待測物質(zhì)外，還含有許多非測定物質(zhì)，成分十分復(fù)雜，影響檢測結(jié)果。為此就需要進(jìn)一步改進(jìn)方法，或設(shè)立標(biāo)本空白，或?qū)?biāo)本作適當(dāng)處理，除去干擾物，或加入合適的干擾物掩蔽劑等，以提高方法的特異性。

觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/1843⑵雜質(zhì)的影響觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/1343特異性和干擾的區(qū)別：特異性是指檢測試劑只與特定的被檢測物反應(yīng)而不與其他物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，因此可疑物本身和分析試劑反應(yīng)，則方法特異性差；干擾是指某些物質(zhì)本身并不與檢測試劑反應(yīng)，但是它能影響被測定物與檢測試劑間反應(yīng)的某一步驟，從而影響檢測結(jié)果。例：血糖測定，用鄰甲苯胺試劑，半乳糖、甘露糖等也與試劑反應(yīng)，這是特異性不足，而在葡萄糖氧化酶法測定中，尿酸可與H2O2反應(yīng)，使部分H2O2不能參與過氧化物酶的第二步反應(yīng)，造成對顯色的干擾，因此，尿酸對該反應(yīng)有干擾，而本身不是被測定。觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/1844特異性和干擾的區(qū)別：觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/⑶反應(yīng)的溫度和時間有些有色物質(zhì)能迅速反應(yīng)生成，另一些有色物質(zhì)須經(jīng)過相當(dāng)長時間后反應(yīng)才能完全。提高反應(yīng)的溫度可以加速化學(xué)反應(yīng)，縮短反應(yīng)的時間。因此這可以在不同的溫度下（如25℃，30℃，37℃）令其反應(yīng)，通過檢測吸光度來觀察各自反應(yīng)終點時間（一般達(dá)到反應(yīng)終點，隨后測定的吸光度不再變化），以選定適宜臨床應(yīng)用的反應(yīng)最佳溫度和時間。觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/1845⑶反應(yīng)的溫度和時間觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/13⑷穩(wěn)定性試驗了解呈色反應(yīng)達(dá)峰值的時間，穩(wěn)定多長時間，從而確定比色時間。即刻及室溫放置不同時間，每5分鐘測定一次。根據(jù)其吸光度的變化確定方法穩(wěn)定的時間范圍。試劑空白：試劑本身是否穩(wěn)定標(biāo)準(zhǔn)：產(chǎn)物是否穩(wěn)定樣品：血清中的其它物質(zhì)是否影響反應(yīng)的穩(wěn)定性

觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/1846⑷穩(wěn)定性試驗觀察影響顏色反應(yīng)的因素2022/12/1346一、重復(fù)性試驗?zāi)康脑谟诳疾旌蜻x方法的隨機(jī)誤差，重復(fù)性試驗的方法是對同一材料分成數(shù)份試驗樣品，進(jìn)行多次分析測定。第三節(jié)、方法學(xué)評價的實驗方法及指標(biāo)2022/12/1847一、重復(fù)性試驗第三節(jié)、方法學(xué)評價的實驗方法及指標(biāo)2022/1（一）試驗形式與方法1、批內(nèi)重復(fù)性試驗：可以用同一份標(biāo)本在相當(dāng)短的時間內(nèi)，按規(guī)定的操作方法，在較穩(wěn)定的條件下，作多次（一般為20次）重復(fù)性測定。計算其X、S與CV%。不同性質(zhì)的分析對CV%值的要求不同，一般應(yīng)小于5％，精密的分析或多次平行測定，要求小于2％。重復(fù)性試驗2022/12/1848（一）試驗形式與方法重復(fù)性試驗2022/12/13482、天內(nèi)重復(fù)性試驗：在一天內(nèi)對一個或數(shù)個標(biāo)本作數(shù)批重復(fù)測定，其它條件和批內(nèi)相同，但因在一天內(nèi)重復(fù)測定幾批，所受影響因素要比批內(nèi)多，所得的CV%值可能比批內(nèi)大一些。重復(fù)性試驗2022/12/18492、天內(nèi)重復(fù)性試驗：在一天內(nèi)對一個或數(shù)個標(biāo)本作數(shù)批重3、天間重復(fù)性試驗：將同一標(biāo)本每天一次隨機(jī)插入常規(guī)標(biāo)本中測定，連續(xù)20個工作日，這樣得到的CV%值比上述批內(nèi)與天內(nèi)大，能反映實際工作的情況。重復(fù)性試驗2022/12/18503、天間重復(fù)性試驗：將同一標(biāo)本每天一次隨機(jī)插入常規(guī)標(biāo)本

4、病人標(biāo)本的平行雙份測定：如不易得到含有合適基質(zhì)的穩(wěn)定樣品（如作血液pH的重復(fù)性測定的標(biāo)本），可采用病人標(biāo)本的雙份測定來代替重復(fù)性試驗，選擇一批病人標(biāo)本（20至100份），待測物濃度應(yīng)在實驗方法的分析范圍內(nèi)，有高有低；記錄標(biāo)本的特性，如有某種藥物、混濁、溶血或有尿毒癥等，可影響其準(zhǔn)確性?？勺饕慌驇着治?，但每一標(biāo)本都平行做兩份，用雙份分析結(jié)果之差（d）來計算S（∑d/2N）作為不精密度的指標(biāo)。重復(fù)性試驗2022/12/18514、病人標(biāo)本的平行雙份測定：如不易得到含有合適基質(zhì)的（二）分析樣品的選擇作重復(fù)性試驗的樣品，應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液、控制物溶液、病人標(biāo)本或混合血清均可，視其用途而定。作批內(nèi)重復(fù)性試驗，用標(biāo)準(zhǔn)液可以得到各種不同濃度，較簡便，它代表了最好的重復(fù)性性能。若結(jié)果良好，說明方法操作是適宜的，再進(jìn)一步用其它樣品進(jìn)行測定。在進(jìn)行天間重復(fù)性試驗時，用凍干質(zhì)控血清較好，因其穩(wěn)定、方便。其它樣品進(jìn)行測定。在進(jìn)行天間重復(fù)性試驗時，用凍干質(zhì)控血清較好，因其穩(wěn)定、方便。

重復(fù)性試驗2022/12/1852（二）分析樣品的選擇重復(fù)性試驗2022/12/1352（三）析物濃度的選擇進(jìn)行重復(fù)性試驗時被測物濃度，宜選擇在醫(yī)學(xué)上具有決定性意義的濃度進(jìn)行試驗，因為這種濃度在臨床分析實驗結(jié)果時最有用處。重復(fù)性試驗2022/12/1853（三）析物濃度的選擇重復(fù)性試驗2022/12/1353所謂回收即分析方法正確測定加入常規(guī)分析樣品中的純分析物的能力。目的是測定比例系統(tǒng)誤差，以衡量候選方法的準(zhǔn)確度。二、回收試驗2022/12/1854所謂回收即分析方法正確測定加入常規(guī)分析樣品1、回收試驗的用途

⑴鑒定待測物質(zhì)損失的程度，找出樣品損失的關(guān)鍵步驟，以便改進(jìn)樣品的處理技術(shù)。⑵準(zhǔn)確測定分析方法的回收率（rateofrecovery），用以判斷候選方法的可靠性。更確切地說，回收試驗是用來發(fā)現(xiàn)方法的比例系統(tǒng)誤差的有效評價方法。比例系統(tǒng)誤差的特征是隨著分析物濃度的增加此種誤差成比例地增大，它常因樣品基質(zhì)液中的其它物質(zhì)與分析物競爭分析試劑并與之發(fā)生反應(yīng)所引起的?；厥赵囼?022/12/18551、回收試驗的用途回收試驗2022/12/13552、原理：

將被分析的純品標(biāo)準(zhǔn)液加入病人樣品中，成為分析樣品，原病人樣品加入相同量的無分析物的溶液作基礎(chǔ)樣品，然后用實驗方法分析，兩者測定結(jié)果的差值為回收量?；厥赵囼?022/12/18562、原理：回收試驗2022/12/1356

3、

回收率計算：

標(biāo)準(zhǔn)液濃度×標(biāo)準(zhǔn)液量(ml)加入濃度=

血清(ml)+標(biāo)準(zhǔn)液量(ml)

回收濃度=試驗樣品濃度－基礎(chǔ)樣品濃度回收試驗2022/12/18573、回收率計算：回收試驗2022/12/1357

回收濃度回收率(%)=━━━━━

X100%

加入濃度

回收試驗2022/12/1858回收濃度回收試驗2022/12/14、比例誤差計算：如平均回收率為95%則比例誤差為95%-100%=-5%

回收試驗2022/12/18594、比例誤差計算：回收試驗2022/12/13595、回收實驗方法：按樣品加標(biāo)準(zhǔn)液的原則,以血鈣測定為例說明如下：⑴樣品制備

1)基礎(chǔ)樣品：血清2ml＋蒸餾水0.1ml；

2)分析樣品：血清2ml＋2mmol/L鈣標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml；

3)分析樣品：血清2ml＋20mmol/L鈣標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml；上述各管，分別按血鈣測定方法，分別取樣測定?；厥赵囼?022/12/18605、回收實驗方法：按樣品加標(biāo)準(zhǔn)液的原則,以血鈣測定為例說明如⑵結(jié)果計算：

0.1第二管加入量=4x=0.19(mmol/L)2+0.10.1第三管加入量=25x=1.19(mmol/L)2+0.1回收實驗2022/12/1861⑵結(jié)果計算：回收實驗2022/12/1361本例檢測結(jié)果如下表：（mmol/L）標(biāo)本號測得濃度加入濃度回收濃度回收率

11.70------21.880.190.1894.7%32.851.191.1596.6%

平均95.7%回收試驗2022/12/1862本例檢測結(jié)果如下表：（mmol/L）回收試驗2022/12/理想的結(jié)果希望回收到100%，現(xiàn)在平均回收95.7%。有4.3%的比例誤差。它表明，一個含鈣真值為2.5mmol/L的標(biāo)本，若用該方法測定，測得值約為2.39mmol/L(2.5x95.7%)，誤差為0.11mmol/L(2.5X4.3%)?；厥赵囼?022/12/1863理想的結(jié)果希望回收到100%，現(xiàn)在平均回收95.7%。有4.6、注意事項:

①準(zhǔn)確吸量，因為被分析物的理論值是根據(jù)加入標(biāo)準(zhǔn)液體積及原樣品的體積計算所得，吸量稍有不準(zhǔn)，就會影響結(jié)果。因此，選擇經(jīng)過校準(zhǔn)的吸管，嚴(yán)格地清洗與干燥，以及按正規(guī)要求吸量均很重要。

②樣品中加入標(biāo)準(zhǔn)液后，總的濃度必須在測定方法的分析范圍內(nèi)，一般須作加入高、中、低不同濃度的回收試驗，計算平均回收率?；厥赵囼?022/12/18646、注意事項:回收試驗2022/12/1364③加入標(biāo)準(zhǔn)液后，最好使實驗樣品中被測濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)上具有決定意義的濃度。

④加入標(biāo)準(zhǔn)液的體積在整個樣品中要少，一般在10％以內(nèi)。若稀釋過大，誤差將發(fā)生改變，甚至消失。

回收試驗2022/12/1865③加入標(biāo)準(zhǔn)液后，最好使實驗樣品中被測濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)上具有決定意干擾試驗的目的也是用來衡量候選方法的準(zhǔn)確度的。在加入一定濃度的干擾物的條件下，形成的是恒定系統(tǒng)誤差。干擾物濃度不同，誤差大小也不同。

三、干擾實驗:2022/12/1866干擾試驗的目的也是用來衡量候選方法的準(zhǔn)確度的。在加入一定濃度1、方法：基本與回收試驗一樣，但是加入的是疑有干擾的物質(zhì)而不是標(biāo)準(zhǔn)液。干擾實驗:2022/12/18671、方法：干擾實驗:2022/12/13672、計算方法：

干擾物(ml)加入濃度=干擾物濃度×

血清(ml)+干擾物(ml)干擾值=試驗樣品濃度-基礎(chǔ)樣品濃度

干擾實驗:2022/12/18682、計算方法：干擾實驗:2022/12/13683、以肌酐對葡萄糖測定的干擾試驗方法及結(jié)果簡述如下：樣品制備：①血清0.9ml+蒸餾水0.1ml②血清0.9ml+442umol/L肌酐液0.1ml③血清0.9ml+884umol/L肌酐液0.1ml各管均用同一方法作雙份檢測取平均值。結(jié)果如下表：干擾實驗:2022/12/18693、以肌酐對葡萄糖測定的干擾試驗方法及結(jié)果簡述如下：干擾實驗標(biāo)本號葡萄糖測定值加入肌酐值干擾值

mmol/Lumol/Lmmol/L①5.55----②5.7744.20.0226.1688.40.061干擾實驗:2022/12/1870標(biāo)本號葡萄糖測定值加入肌酐值將②③結(jié)果平均,則每88.4umol/L肌酐干擾值為：(0.022x2+0.061)/2≈0.053mmol/L

干擾實驗:將②③結(jié)果平均,則每88.4umol/L肌酐干擾值為：干71結(jié)果說明：每88.4umol/L肌酐使血糖值增高約0.053

mmol/L,而正常人血清肌酐高限為132umol/L，帶入血糖測定誤差為0.078mmol/L，無臨床意義，但在肌酐病理值時可達(dá)884～

1786umol/L,則可使血糖增高0.52～1.11mmol/L。干擾實驗:2022/12/1872結(jié)果說明：干擾實驗:2022/12/13724、可疑干擾物的濃度：

加入可疑干擾物的濃度須達(dá)到有價值的范圍，有可能應(yīng)達(dá)到病理標(biāo)本的最高濃度值，在確證有影響后應(yīng)測定在何濃度時，產(chǎn)生的誤差在臨床上無意義，即確定使分析結(jié)果影響臨床應(yīng)用價值的最低可疑物濃度值。干擾實驗:2022/12/18734、可疑干擾物的濃度：干擾實驗:2022/12/13735、被試驗的物質(zhì)：對某一被測定物的反應(yīng)完全不受標(biāo)本中其它成分干擾的測定方法是不多的，可根據(jù)該方法的反應(yīng)原理，提示出可能的干擾物。干擾實驗:2022/12/18745、被試驗的物質(zhì)：干擾實驗:2022/12/1374一般應(yīng)考慮的是用膽紅素、溶血（血紅蛋白）、脂血、防腐劑、抗凝劑等進(jìn)行試驗。但干擾試驗有一定的局限性，因為人們只能試驗?zāi)承┪镔|(zhì)的影響，還有許多藥物和食物成分未經(jīng)試驗，亦不能認(rèn)為無關(guān)。干擾實驗:2022/12/1875一般應(yīng)考慮的是用膽紅素、溶血（血紅蛋白）、6、消除干擾的常用方法

①作空白（對照）試驗。一是試劑空白，可以校正標(biāo)本讀數(shù)中的試劑部分；另一種是標(biāo)本空白，用以補(bǔ)償標(biāo)本中被測物以外的其它物質(zhì)的影響。②采用各種物理、化學(xué)的方法、分離除去干擾物，如：PEG去蛋白，脂溶劑萃取去脂等。③近年來出現(xiàn)的由計算機(jī)控制的雙波長或多波長檢測儀器，在排除干擾因素方面既有效又簡便。干擾實驗:2022/12/18766、消除干擾的常用方法干擾實驗:2022/12/1376

對比試驗用于檢測候選方法的系統(tǒng)分析誤差，包括比例和恒定兩種系統(tǒng)誤差在內(nèi)。如果對適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)進(jìn)行分析，也可提供系統(tǒng)誤差的性質(zhì)究竟是屬恒定誤差還是比例誤差。四、方法比較實驗2022/12/1877對比試驗用于檢測候選方法的系統(tǒng)分析誤差，包括比1、方法：對一組病人的標(biāo)本用候選方法和對比方法同時進(jìn)行分析測定，最后觀察兩者之間的差異。這是考驗候選方法是否可被采用的重要措施。方法比較實驗2022/12/18781、方法：方法比較實驗2022/12/13782、比較方法的選擇：在臨床生化常規(guī)方法評價時，最好選擇參考方法作為對比方法。這樣在解釋結(jié)果時，就可把方法間的任何分析誤差都可歸于候選方法。方法比較實驗2022/12/18792、比較方法的選擇：方法比較實驗2022/12/1379⒊注意事項：①試驗樣品數(shù)：一般作40～100例，包括各種疾病的樣品，即包括在常規(guī)工作中可能遇到的整個分析范圍。

②重復(fù)分析：一般每個樣品用兩種方法各測定一次，最好各測定兩次，不是平行測定，而是分兩批進(jìn)行。

方法比較實驗2022/12/1880⒊注意事項：方法比較實驗2022/12/1380

③時間間隔：每天測定2～5個樣品，約測定20天。

。④結(jié)果的圖示：根據(jù)實驗結(jié)果作坐標(biāo)圖，比較方法所得數(shù)值為橫坐標(biāo)，候選方法所得數(shù)值為縱坐標(biāo)，用以定性地估計分析誤差。方法比較實驗③時間間隔：每天測定2～5個樣品，約測定20天。。814、統(tǒng)計處理

方法比較試驗所得的結(jié)果是配對資料，可進(jìn)行配對資料的統(tǒng)計處理，包括配對t檢驗、相關(guān)和回歸分析等。通常都選用相關(guān)回歸分析方法，因為此法可以計算出所研究濃度范圍內(nèi)任一濃度的系統(tǒng)誤差。方法比較實驗2022/12/18824、統(tǒng)計處理方法比較實驗2022/12/1382

YY=bX+a

Y=X+a

Y=bX

X

a方法比較實驗Y=XY=bX2022/12/1883a方法比較實驗Y=XY=bX2022/12/1383

從回歸方程y＝bx＋a中，可顯示出候選方法有無系統(tǒng)性誤差。這種誤差分三類：恒定系統(tǒng)誤差與比例系統(tǒng)誤差，或兩者兼有?；貧w線的截距a代表恒定誤差，回歸系數(shù)（回歸線的斜率）b代表比例誤差，相關(guān)系數(shù)r代表兩種方法的相關(guān)性是否密切。方法比較實驗2022/12/1884從回歸方程y＝bx＋a中，可顯示出候選方法可否被接受，最后根據(jù)評價實驗中的誤差結(jié)果進(jìn)行歸納，作出判斷。West-gard曾經(jīng)對醫(yī)學(xué)決定水平上的分析誤差，采用統(tǒng)計學(xué)方法制定出一套判斷指標(biāo)，首先是制定“可允許誤差的95％限度”，然后計算各項誤差并與其比較，任何一項指標(biāo)大于可允許誤差都不能被接受。第四節(jié)方法可接受性的決定2022/12/1885候選方法可否被接受，最后根據(jù)評價實驗中的誤

分析性能的評估是對檢測系統(tǒng)作病人樣品檢測時可能具有的誤差進(jìn)行估計。從質(zhì)量管理的角度，可將檢測誤差分為穩(wěn)定狀態(tài)（固有）誤差和不穩(wěn)定狀態(tài)（外加）誤差。設(shè)計各種實驗對誤差的估計，是對檢測系統(tǒng)穩(wěn)定狀態(tài)（固有）誤差的估計。一、分析誤差2022/12/1886分析性能的評估是對檢測系統(tǒng)作病人樣品

如果這類誤差過大，檢測系統(tǒng)無法被臨床接收，不能用于檢測病人標(biāo)本。實驗室一定要使用可靠的檢測系統(tǒng)用于常規(guī)工作，它的穩(wěn)定狀態(tài)誤差較小，在臨床可接收低水平之內(nèi)。這是保障檢驗結(jié)果質(zhì)量的前提。分析誤差2022/12/1887如果這類誤差過大，檢測系統(tǒng)無法被臨床接收，

從誤差的性質(zhì)上，可以將誤差分為隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差。性能評估實驗也相應(yīng)設(shè)計為了解不同性質(zhì)的誤差。最后，還需綜合起來反映總的誤差水平。分析誤差2022/12/1888從誤差的性質(zhì)上，可以將誤差分為隨機(jī)誤差和系（一）、隨機(jī)誤差（RandomError,RE）或不精密度(Imprecision)

這類誤差可正可負(fù)，亦無一定的大小，稱為隨機(jī)誤差。若將某標(biāo)本作多次檢測，用均值（X）表示這組檢測值的平均水平，標(biāo)準(zhǔn)差（s）為各檢測值對于均值的離散程度的指標(biāo)。分析誤差2022/12/1889（一）、隨機(jī)誤差（RandomError,RE）或不精密度若將某標(biāo)本作多次檢測，用均值（X）表示這組檢測值的平均水平，標(biāo)準(zhǔn)差（s）為各檢測值對于均值的離散程度的指標(biāo)。檢驗的特點是每個標(biāo)本只做一次就發(fā)出檢驗報告，因此檢驗結(jié)果Xi是對標(biāo)本作多次檢測的一個抽樣。隨機(jī)誤差2022/12/1890若將某標(biāo)本作多次檢測，用均值（X）表示這組檢測值

所有重復(fù)檢驗的Xi值以均值為中心，它們和均值的差異有大有小，方向各異；這即是隨機(jī)誤差的表現(xiàn)。臨床希望同一標(biāo)本的各次檢測值Xi重復(fù)性好，這是人們對精密度的追求。隨機(jī)誤差2022/12/1891所有重復(fù)檢驗的Xi值以均值為中心，它們和均精密度——是重復(fù)檢測值間的一致性。度量精密度好壞是不精密度。重復(fù)檢測值的s大小反映在均值下的精密度水平，也可以變異系數(shù)(CV)表示相對變異大小。

隨機(jī)誤差2022/12/1892精密度——是重復(fù)檢測值間的一致性。度量精密度好壞是不精

檢驗結(jié)果報告內(nèi)具有的隨機(jī)誤差，常以95%可能性出現(xiàn)的最大隨機(jī)誤差量表示。也即發(fā)出的報告都認(rèn)為是均值，但是實際報告值Xi和均值具有的最大差異（95%可能性）為1.96s。以這樣大小的差異量表示標(biāo)本只做一次檢驗發(fā)出的報告中具有的隨機(jī)誤差估計量。寫作RE=1.96s。

隨機(jī)誤差2022/12/1893檢驗結(jié)果報告內(nèi)具有的隨機(jī)誤差，常以95%（二）、系統(tǒng)誤差(SystematicError,SE)或不準(zhǔn)確度(Inaccuracy)

這類誤差有一定的方向和大小，稱為系統(tǒng)誤差。有系統(tǒng)誤差的結(jié)果是不準(zhǔn)確的。分析誤差2022/12/1894（二）、系統(tǒng)誤差(SystematicError,SE)或準(zhǔn)確度——檢測值和真值的一致性。但是它們之間的差異既有隨機(jī)誤差，也有系統(tǒng)誤差。檢驗中為了確切表示準(zhǔn)確度常以相對準(zhǔn)確度表示，即：檢測均值和真值的一致性。它們的差異稱為偏倚，亦即系統(tǒng)誤差。它使檢測結(jié)果偏高或偏低，有一定的大小。

度量準(zhǔn)確度以不準(zhǔn)確度即偏倚來表示。系統(tǒng)誤差2022/12/1895準(zhǔn)確度——檢測值和真值的一致性。但是它們之間的差異既造成檢測系統(tǒng)不準(zhǔn)確的因素：一是檢測系統(tǒng)自身的，如方法特異性差或嚴(yán)重的基質(zhì)效應(yīng)等；二是檢測系統(tǒng)和某一認(rèn)可的檢測系統(tǒng)或方法，同時對一批病人標(biāo)本作對比檢測，檢測結(jié)果的差異是兩個檢測系統(tǒng)間的系統(tǒng)誤差。后一種系統(tǒng)誤差更被大家重視?，F(xiàn)今，在表達(dá)檢測系統(tǒng)或方法的準(zhǔn)確度時，直接指的是檢測系統(tǒng)間或方法學(xué)比較的系統(tǒng)誤差。系統(tǒng)誤差2022/12/1896造成檢測系統(tǒng)不準(zhǔn)確的因素：系統(tǒng)誤差2022/12/1396兩個檢測系統(tǒng)對同批標(biāo)本檢測后，以公認(rèn)的檢測系統(tǒng)或方法（亦稱為比較方法，Comparativemethod）為X，被評價的檢測系統(tǒng)或方法（Testmethod）為Y。系統(tǒng)誤差2022/12/1897兩個檢測系統(tǒng)對同批標(biāo)本檢測后，以公認(rèn)的檢測系統(tǒng)或方法（亦度量系統(tǒng)誤差(SE)的方式有兩種：一是在標(biāo)本的檢測值都比較集中時，兩個系統(tǒng)檢測病人標(biāo)本的結(jié)果均值間的差，表示在X方法的均值時兩方法間具有的系統(tǒng)誤差。寫作:Y－X

（在X

時）。系統(tǒng)誤差2022/12/1898度量系統(tǒng)誤差(SE)的方式有兩種：系統(tǒng)誤差2022/12/1二是在標(biāo)本檢測值分布較寬、有較大的范圍時，如果各標(biāo)本的成對結(jié)果在坐標(biāo)紙上具有直線趨勢時，可以用直線回歸統(tǒng)計歸納。這個方式可以了解兩方法在檢測過的濃度范圍的任一處的系統(tǒng)誤差。系統(tǒng)誤差2022/12/1899二是在標(biāo)本檢測值分布較寬、有較大的范圍時，如果各系統(tǒng)誤差2022/12/18100系統(tǒng)誤差2022/12/13100a系統(tǒng)誤差YY=X+aY=bX+aXY=bX2022/12/18101a系統(tǒng)誤差YY=X+aY=bX+aXY=bX2022/12/若某醫(yī)學(xué)決定水平濃度為Xc；在回歸式Y(jié)=bX+a

上，相對與Xc的被評價方法的估計值為,Yc,Yc=bXc+a則SE= Yc-Xc=(b-1)Xc+a。系統(tǒng)誤差2022/12/18102若某醫(yī)學(xué)決定水平濃度為Xc；在回歸式Y(jié)=bX+a上，系（三）、總誤差（TotalError,TE）病人檢測結(jié)果內(nèi)含的誤差應(yīng)包括隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差。所以反映檢測系統(tǒng)穩(wěn)定狀態(tài)總誤差是隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差的加成，為TE=RE+SE。因為病人標(biāo)本的每個項目只做一次檢測，結(jié)果中的誤差有95%可能性的“最壞”表現(xiàn)即為誤差的加成,即為TE

。分析誤差2022/12/18103（三）、總誤差（TotalError,TE）分析誤差202實驗室人員習(xí)慣將誤差分別看成不精密度（隨機(jī)誤差）和不準(zhǔn)確度（偏倚），而醫(yī)生和病人關(guān)心的是總誤差有多大?？傉`差反映了客戶和消費者對檢測性能的估計，這也是判斷檢測系統(tǒng)可接受性中最重要的參數(shù)?？傉`差2022/12/18104實驗室人員習(xí)慣將誤差分別看成不精密度（隨機(jī)（一）性能標(biāo)準(zhǔn)性能標(biāo)準(zhǔn)（performancestandards，PS）也稱分析目標(biāo)，應(yīng)根據(jù)不同的應(yīng)用目的（篩選、診斷、預(yù)后、監(jiān)測）而異。由允許分析誤差（allowableanalyticalerror）和醫(yī)學(xué)決定水平（medicaldecisionlevel）這兩項內(nèi)容決定。二、方法學(xué)性能標(biāo)準(zhǔn)及其制定2022/12/18105（一）性能標(biāo)準(zhǔn)二、方法學(xué)性能標(biāo)準(zhǔn)及其制定2022/12/131、允許分析誤差用EA表示，它被規(guī)定為95％樣品的允許誤差限度，即95％的病人樣品其誤差應(yīng)小于這個限度。性能標(biāo)準(zhǔn)2022/12/181061、允許分析誤差性能標(biāo)準(zhǔn)2022/12/131062、醫(yī)學(xué)決定水平

用Xc表示，是指對臨床診治或改變診治疾病具有醫(yī)學(xué)判斷作用的臨界分析物濃度。性能標(biāo)準(zhǔn)2022/12/181072、醫(yī)學(xué)決定水平性能標(biāo)準(zhǔn)2022/12/13107EA和Xc兩項內(nèi)容，就是一個測定方法的性能指標(biāo)。但對于每一醫(yī)學(xué)決定水平都應(yīng)規(guī)定相應(yīng)的性能標(biāo)準(zhǔn)，即在一定Xc值下的EA值。性能標(biāo)準(zhǔn)2022/12/18108EA和Xc兩項內(nèi)容，就是一個測定方法的性能指標(biāo)。但對于每以血清葡萄糖測定為例。

在Xcl＝2.8mmol/L，Xc2＝6.7mmol/L，Xc3＝8.9mmol/L時，其相應(yīng)的EA均為0.56mmol/L，而在Xc4＝16.8mmol/L，其EA為1.4mmol/L。這表示當(dāng)葡萄糖濃度在2.8mmol/L、6.7mmol/L和8.9mmol/L時，95％的樣品具有的誤差不得大于0.56mmol/L，而濃度在16.8mmol/L時，95％的樣品所具有的誤差不得大于1.4mmol/L。這里指的是總誤差。

性能標(biāo)準(zhǔn)2022/12/18109以血清葡萄糖測定為例。性能標(biāo)準(zhǔn)2022/12/13109制定的性能標(biāo)準(zhǔn)，既應(yīng)反映臨床應(yīng)用與解釋結(jié)果的要求--稱為醫(yī)學(xué)效用限度（medicalusefulnesslimits），又應(yīng)基本符合實驗室所能達(dá)到的技能狀態(tài)（stateofart）。（二）性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/18110制定的性能標(biāo)準(zhǔn)，既應(yīng)反映臨床應(yīng)用與解釋結(jié)果的要求1、根據(jù)參考值與參考范圍而定的標(biāo)準(zhǔn)可允許誤差限度（%）＝±（1/4）[（參考值上界-參考值下界）/參考值均數(shù)]×100%最大的可允許誤差定為±10％，但對某些物質(zhì)（如酶）則提高到±20％。性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/181111、根據(jù)參考值與參考范圍而定的標(biāo)準(zhǔn)性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/其允許誤差以參考范圍表示，有臨床實用意義，但缺點是參考范圍的寬度與試驗本身的不精密度有關(guān)，一項不精密的方法由于測出的參考范圍較寬，以致可制定出較寬的可允許誤差限度，就會使一項性能不夠好的分析方法的應(yīng)用合法化。性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/18112其允許誤差以參考范圍表示，有臨床實用意義，2、根據(jù)臨床觀察制定的標(biāo)準(zhǔn)

這往往反映參與與制定的醫(yī)生的經(jīng)驗，綜合臨床及實驗室的意見，提出在醫(yī)學(xué)決定水平上的不精密度標(biāo)準(zhǔn)。還有不準(zhǔn)確度及綜合不精密度與不準(zhǔn)確度的標(biāo)準(zhǔn)。性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/181132、根據(jù)臨床觀察制定的標(biāo)準(zhǔn)性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/13

一般說來，在參考范圍內(nèi)的中間及很不正常的水平時，醫(yī)生允許有較大的變異系數(shù)。特別是用于診斷，而不是用于監(jiān)視療效的。但在醫(yī)學(xué)決定水平需要最嚴(yán)格的指標(biāo)。這種方法的缺點是主觀成分較大，而且收集臨床的意見也很困難，它依賴于臨床醫(yī)生對實驗室工作的充分了解。性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/18114一般說來，在參考范圍內(nèi)的中間及很不正常的水平3、根據(jù)生物學(xué)變異制定的不精密度標(biāo)準(zhǔn)生物學(xué)變異或稱生理變異（CVB）包括個體內(nèi)變異（CVI）及個體間變異（CVG），也就是通常所說的生理波動。性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/181153、根據(jù)生物學(xué)變異制定的不精密度標(biāo)準(zhǔn)性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/美國病理學(xué)會建議:

為了在人群中篩選某些疾病，不精密度（CV）應(yīng)等于或小于個體內(nèi)及個體間變異的二分之一（即≤1/2CVB）。對于個別試驗，目的在于輔助診斷或監(jiān)測治療效果，則CV應(yīng)小于或等于1/2CVI。但目前文獻(xiàn)報告的生物學(xué)變異數(shù)據(jù)不一致，由于這種方法比較好，將來可能會有更多的研究。性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/18116美國病理學(xué)會建議:性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/131164、根據(jù)實驗室技能狀態(tài)制定的標(biāo)準(zhǔn)

技能狀態(tài)是根據(jù)技術(shù)熟練而且誤差最小的一組實驗室的數(shù)據(jù)，計算出在參考范圍高限的變異系數(shù)作為標(biāo)準(zhǔn)的，這實際上是指當(dāng)前技術(shù)水平所可能達(dá)到的技能狀態(tài)。當(dāng)然，技能狀態(tài)有繼續(xù)進(jìn)步的趨勢，在沒有更好的標(biāo)準(zhǔn)以前，技能狀態(tài)還會繼續(xù)用作實驗室工作性能的標(biāo)準(zhǔn)。對于生物變異相當(dāng)大的項目，以技能狀態(tài)作為不精密度的標(biāo)準(zhǔn)更為合適。

性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/12/181174、根據(jù)實驗室技能狀態(tài)制定的標(biāo)準(zhǔn)性能標(biāo)準(zhǔn)的制定2022/1單值判斷指標(biāo)（single-valuecriteria）較簡單，在評價過程中用于初步估量。1、計算公式單值判斷指標(biāo)的計算公式見下表誤差類別判斷指標(biāo)備注隨機(jī)誤差RE1.96STM<EASTM是重復(fù)試驗確定的標(biāo)準(zhǔn)差比例誤差PER-100XC/100<EAR=平均回收率恒定誤差CEBias<EABias由干擾試驗確定的平均差系統(tǒng)誤差SE(aXC+b)-XC<EA

對比試驗回歸方程總誤差RE+SE<EA

包括隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差三、使用單值判斷指標(biāo)判斷2022/12/18118單值判斷指標(biāo)（single-valuecriteria）較2、結(jié)果判斷：單值判斷指標(biāo)是可接受性能的估計指標(biāo)。對前述各項實驗，結(jié)果經(jīng)計算得到各項誤差值后，分別與EA值比較，必須都比EA小，該方法才初步判斷為可接受，否則為不可接受，可改進(jìn)分析方法減少誤差或排除該方法。使用單值判斷指標(biāo)判斷2022/12/181192、結(jié)果判斷：單值判斷指標(biāo)是可接受性能的估計指標(biāo)。使用單

對于一個判斷為不能接受的方法，為了減少某一誤差而作了改進(jìn)，則各個評價試驗都須重新進(jìn)行做。使用單值判斷指標(biāo)判斷2022/12/18120對于一個判斷為不能接受的方法，為了減少某一誤差而單值判斷指標(biāo)雖簡單，但主要問題是各項試驗的樣品數(shù)都較小，使測定值極可能是分析誤差的不可靠測量，最后使實驗估計發(fā)生錯誤。因此，只有在假設(shè)所有實驗結(jié)果是絕對正確的前提下，才能進(jìn)行上述計算。為了在適當(dāng)?shù)臉悠窋?shù)下，能以最小的代價取得實驗誤差測定的最大可靠性，可用可信區(qū)間判斷指標(biāo)。使用單值判斷指標(biāo)判斷2022/12/18121單值判斷指標(biāo)雖簡單，但主要問題是各項試驗的可信區(qū)間判斷指標(biāo)比較復(fù)雜，但能對方法性能提供更客觀的決定，起最后判斷作用。四、使用可信區(qū)間判斷指標(biāo)判斷2022/12/18122可信區(qū)間判斷指標(biāo)比較復(fù)雜，但能對方法性能提

90％可信區(qū)間，可信上限及可信下限統(tǒng)計學(xué)的規(guī)律說明，每種測定結(jié)果的可靠性與測定次數(shù)有關(guān)，次數(shù)愈多，結(jié)果反映真實性愈強(qiáng)；但實際上，不可能進(jìn)行大量的測定。在統(tǒng)計學(xué)中為了估量分析誤差的不確定性，對于每一誤差可計算其可信區(qū)間，用可信上限與可信下限代替單值的估量，EU為誤差的可信上限，EL為誤差的可信下限。

可信區(qū)間判斷指標(biāo)2022/12/1812390％可信區(qū)間，可信上限及可信下限統(tǒng)

West-gard推薦用90％的可信區(qū)間，這樣，EU將是誤差單側(cè)的95％上限，用此判斷候選方法的可接受性比較可靠。假如，EU＜EA，則方法性能為可接受；假如EL＞EA，則方法必須改進(jìn)，以減少誤差，否則排除。假如EU＞EA，但EL＜EA，說明僅有的數(shù)據(jù)不足以作出任何有關(guān)可接受性的結(jié)論，還需繼續(xù)實驗以收集更多的數(shù)據(jù)，以便對分析誤差作出較好的估量。

可信區(qū)間判斷指標(biāo)2022/12/18124West-gard推薦用90％的可信區(qū)間，這樣，可信區(qū)間判斷指標(biāo)2022/12/18125可信區(qū)間判斷指標(biāo)2022/12/13125這些指標(biāo)在形式上與單值判斷指標(biāo)相似，最明顯的差別是對每一類型誤差用兩個判斷指標(biāo)，其一是判斷可接受性，其二是判斷排除。對RE、PE及CE的判斷指標(biāo)，僅用了誤差估量的上限和下限。可信區(qū)間判斷指標(biāo)2022/12/18126這些指標(biāo)在形式上與單值判斷指標(biāo)相似，最明顯的差別

如果候選方法被得出可接受性的結(jié)論，那么接著就要進(jìn)行評價后實施；最后進(jìn)入方法應(yīng)用階段。不要以為一經(jīng)評價合格的方法就可產(chǎn)生高質(zhì)量的結(jié)果，還須建立質(zhì)控系統(tǒng)，以便隨時發(fā)現(xiàn)合格的方法在實施過程中出現(xiàn)的問題。要善于發(fā)現(xiàn)其中還存在的不足并進(jìn)一步研究解決使其日臻完善。可信區(qū)間判斷指標(biāo)2022/12/18127如果候選方法被得出可接受性的結(jié)論，那么接著就要進(jìn)

評價實驗完成以后，應(yīng)該寫出書面報告，報告中除了敘述操作方法（包括試劑配制與所需器材）以外，應(yīng)著重寫出所選方法的各項性能指標(biāo)，要特別重視實驗數(shù)據(jù)的科學(xué)整理與客觀陳述。評價實驗的結(jié)果也可整理成論文在專業(yè)雜志上發(fā)表。五、評價報告2022/12/18128評價實驗完成以后，應(yīng)該寫出書面報告，報告中除評價報告內(nèi)容主要包括：

1、原理、儀器、試劑。2、操作方法：樣本要求、時間、溫度、波長、PH、調(diào)零、比色時間。3、評價實驗：最低檢出限、線性范圍、CV%、R。4、結(jié)論：樣本量、精密度、靈敏度、準(zhǔn)確度、是否經(jīng)濟(jì)。評價報告2022/12/18129評價報告內(nèi)容主要包括：評價報告2022/12/13129

如果候選方法被得出可接受性的結(jié)論，那么接著就要進(jìn)行評價后實施；最后進(jìn)入方法應(yīng)用階段。不要以為一經(jīng)評價合格的方法就可產(chǎn)生高質(zhì)量的結(jié)果，還須建立質(zhì)控系統(tǒng)，以便隨時發(fā)現(xiàn)合格的方法在實施過程中出現(xiàn)的問題。要善于發(fā)現(xiàn)其中還存在的不足并進(jìn)一步研究解決使其日臻完善。評價報告2022/12/18130如果候選方法被得出可接受性的結(jié)論，那么接著就第五節(jié)測量不確定度

概述測量不確定度是指“表征合理地賦予被測量之值的分散性，與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)”。測量不確定度從詞義上理解，意味著對測量結(jié)果可信性、有效性的懷疑程度或不肯定程度，是定量說明測量結(jié)果的質(zhì)量的一個參數(shù)。第五節(jié)測量不確定度

概述131概述測量不確定度就是說明被測量之值分散性的參數(shù)，它不說明測量結(jié)果是否接近真值。為了表征這種分散性，測量不確定度用標(biāo)準(zhǔn)〔偏〕差表示。概述測量不確定度就是說明被測量之值分散性的參數(shù)，它不說明測量132概述在實際使用中，往往希望知道測量結(jié)果的置信區(qū)間，因此，測量不確定度也可用標(biāo)準(zhǔn)〔偏〕差的倍數(shù)或說明了置信水準(zhǔn)的區(qū)間的半寬度表示。為了區(qū)分這兩種不同的表示方法，分別稱它們?yōu)闃?biāo)準(zhǔn)不確定度和擴(kuò)展不確定度。概述在實際使用中，往往希望知道測量結(jié)果的置信區(qū)間，因此，測量133概述在實踐中，測量不確定度可能來源于以下10個方面：(1)對被測量的定義不完整或不完善；(2)實現(xiàn)被測量的定義的方法不理想；(3)取樣的代表性不夠，即被測量的樣本不能代表所定義的被測量；(4)對測量過程受環(huán)境影響的認(rèn)識不周全，或?qū)Νh(huán)境條件的測量與控制不完善；(5)對模擬儀器的讀數(shù)存在人為偏移；(6)測量儀器的分辨力或鑒別力不夠；(7)賦與計量標(biāo)準(zhǔn)的值和參考物質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))的值不準(zhǔn)；(8)引用于數(shù)據(jù)計算的常量和其它參量不準(zhǔn)；(9)測量方法和測量程序的近似性和假定性；(10)在表面上看來完全相同的條件下，被測量重復(fù)觀測值的變化。概述在實踐中，測量不確定度可能來源于以下10個方面：134概述由此可見，測量不確定度一般來源于隨機(jī)性和模糊性，前者歸因于條件不充分，后者歸因于事物本身概念不明確。若需要表示某分量是由某原因?qū)е聲r，可以用隨機(jī)效應(yīng)導(dǎo)致的不確定度和系統(tǒng)效應(yīng)導(dǎo)致的不確定度，而不要用“隨機(jī)不確定度”和“系統(tǒng)不確定度”這兩個業(yè)已過時或淘汰的術(shù)語。概述由此可見，測量不確定度一般來源于隨機(jī)性和模糊性，前者歸因135

一、測量結(jié)果是一個區(qū)域測量的目的是為了確定被測量的量值。測量結(jié)果的品質(zhì)是量度測量結(jié)果可信程度的最重要的依據(jù)。測量不確定度就是對測量結(jié)果質(zhì)量的定量表征，測量結(jié)果的可用性很大程度上取決于其不確定度的大小。所以，測量結(jié)果表述必須同時包含賦予被測量的值及與該值相關(guān)的測量不確定度，才是完整并有意義的。

一、測量結(jié)果是一個區(qū)域測量的目的是為了確定被測量的量值。測136測量結(jié)果是一個區(qū)域由于測量不完善和人們認(rèn)識的不足，所得的被測量值具有分散性，即每次測得的結(jié)果不是同一值，而是以一定的概率分散在某個區(qū)域內(nèi)的多個值。測量結(jié)果是一個區(qū)域由于測量不完善和人們認(rèn)識的不足，所得的被測137二、不確定度與誤差測量不確定度表明賦予被測量之值的分散性，是通過對測量過程的分析和評定得出的一個區(qū)間。測量誤差則是表明測量結(jié)果偏離真值的差值。二、不確定度與誤差138三、不確定度的A類評定與B類評定A類標(biāo)準(zhǔn)不確定度：用對觀測列的統(tǒng)計分析進(jìn)行評定得出的標(biāo)準(zhǔn)不確B類標(biāo)準(zhǔn)不確定度：用不同于對觀測列的統(tǒng)計分析來評定的標(biāo)準(zhǔn)不確定度將不確定度分為“A”類與“B”類，僅為討論方便，并不意味著兩類評定之間存在本質(zhì)上的區(qū)別，A類不確定度是由一組觀測得到的頻率分布導(dǎo)出的概率密度函數(shù)得出；B類不確定度則是基于對一個事件發(fā)生的信任程度。它們都基于概率分布，并都用方差或標(biāo)準(zhǔn)差表征。兩類不確定度不存在那一類較為可靠的問題。一般來說，A類比B類較為客觀，并具有統(tǒng)計學(xué)上的嚴(yán)格性。測量的獨立性、是否處于統(tǒng)計控制狀態(tài)和測量次數(shù)決定A類不確定度的可靠性。三、不確定度的A類評定與B類評定A類標(biāo)準(zhǔn)不確定度：用對觀測列139不確定度的A類評定與B類評定“A”、“B”兩類不確定度與“隨機(jī)誤差”與“系統(tǒng)誤差”的分類之間不存在簡單的對應(yīng)關(guān)系?！半S機(jī)”與“系統(tǒng)”表示誤差的兩種不同的性質(zhì)，“A”類與“B”類表示不確定度的兩種不同的評定方法。隨機(jī)誤差與系統(tǒng)誤差的合成是沒有確定的原則可遵循的，造成對實驗結(jié)果處理時的差異和混亂。而A類不確定度與B類不確定度在合成時均采用標(biāo)準(zhǔn)不確定度，這也是不確定度理論的進(jìn)步之一。

不確定度的A類評定與B類評定“A”、“B”兩類不確定度與“隨140第六節(jié)量值溯源通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測量結(jié)果或測量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)(通常是國家計量基準(zhǔn)或國際計量基準(zhǔn))聯(lián)系起來的特性，稱為量值溯源。第六節(jié)量值溯源通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使141量值溯源量值溯源等級圖，也稱為量值溯源體系表，它是表明測量儀器的計量特性與給定量的計量基準(zhǔn)之間關(guān)系的一種代表等級順序的框圖。它對給定量及其測量儀器所用的比較鏈進(jìn)行量化說明，以此作為量值溯源性的證據(jù)。量值溯源量值溯源等級圖，也稱為量值溯源體系表，它是表明測量儀142醫(yī)學(xué)檢驗方法學(xué)評價課件143謝謝!2022/12/18144謝謝!2022/12/13144檢驗醫(yī)學(xué)方法學(xué)的評價2022/12/18145檢驗醫(yī)學(xué)方法學(xué)的評價2022/12/131好方法：靈敏度高重復(fù)性好特異性高準(zhǔn)確度好抗干擾強(qiáng)適用性強(qiáng)價格低概述2022/12/18146好方法：靈敏度高概述2022/12/132

掌握方法學(xué)學(xué)評價是檢驗科中、高級人員的基本功之一。檢驗科要不斷引進(jìn)或建立新的診斷試驗，引進(jìn)什么試驗，對實驗結(jié)果如何解釋和如何得到有效應(yīng)用，這些都離不開對試驗的評價。然而同國外相比還存在著較大差距，今后對這方面的學(xué)習(xí)和實踐應(yīng)該加強(qiáng)。

概述2022/12/18147概述2022/12/133第一節(jié)檢驗方法學(xué)評價的重要性

一、醫(yī)學(xué)檢驗方法的建立是為了診斷疾病。在建立或引進(jìn)一個新的試驗時，必須了解該試驗方法的基本性能，因此應(yīng)該進(jìn)行方法學(xué)評價。2022/12/18148第一節(jié)檢驗方法學(xué)評價的重要性一、醫(yī)學(xué)檢驗方法的建立是為二、檢驗方法的評價是合理解釋實驗室數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)。檢驗科的工作目標(biāo)主要是：

1．能為臨床提供可靠的數(shù)據(jù)；

2．為臨床提供充分的檢驗項目和及時的報告；

3．為臨床能提供專業(yè)咨詢。2022/12/18149二、檢驗方法的評價是合理解釋實驗室數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)。檢驗科的工作目因此在引進(jìn)新技術(shù)的同時，必須及時開展與臨床的合作和對話，以強(qiáng)化對實驗室數(shù)據(jù)的合理解釋與有效利用，及時將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為高層次的臨床判斷分析信息。因此在引進(jìn)新技術(shù)的同時，必須及時開展與臨床的150三、從醫(yī)學(xué)檢驗事業(yè)的發(fā)展要素來看，掌握檢驗方法學(xué)評價在檢驗工作中有著重要作用。檢驗科人員組成應(yīng)包括方法學(xué)家，其工作以開展新方法進(jìn)行方法學(xué)評價，提高檢驗質(zhì)量為主。2022/12/18151三、從醫(yī)學(xué)檢驗事業(yè)的發(fā)展要素來看，掌握檢驗方法學(xué)評價在檢驗工第二節(jié)

評價實驗的設(shè)計及統(tǒng)計指標(biāo)的選擇

方法評價的基本內(nèi)容是通過實驗途徑,測定并評價它的準(zhǔn)確度和精密度。不論準(zhǔn)確度和精密度，都強(qiáng)調(diào)的是誤差，評價過程就是對誤差的測定。2022/12/18152第二節(jié)評價實驗的設(shè)計及統(tǒng)計指標(biāo)的選擇1．預(yù)評價：主要研究候選方法的最適條件。這些條件包括：⑴、試劑的濃度；⑵、緩沖液種類；⑶、離子強(qiáng)度及pH值；⑷、標(biāo)本與試劑的容積比；一、方法學(xué)評價計劃2022/12/181531．預(yù)評價：主要研究候選方法的最適條件。這些條件包括：一、⑸、反應(yīng)溫度與時間；⑹、吸收曲線與波長選擇；⑺、線性范圍等。2022/12/18154⑸、反應(yīng)溫度與時間；2022/12/13102．初步評價：⑴、用標(biāo)準(zhǔn)液作線性及批內(nèi)重復(fù)實驗；⑵、用血清作批內(nèi)及天內(nèi)重復(fù)實驗；⑶、進(jìn)行回收實驗；⑷、進(jìn)行干擾實驗。方法學(xué)評價計劃2022/12/181552．初步評價：方法學(xué)評價計劃2022/12/13113．最后評價：⑴、作日間重復(fù)實驗；⑵、方法學(xué)比較實驗；⑶、判斷方法的可接受性；⑷、進(jìn)行臨床相關(guān)研究。方法學(xué)評價計劃2022/12/181563．最后評價：方法學(xué)評價計劃2022/12/13124．方法應(yīng)用：⑴、建立質(zhì)控系統(tǒng)；⑵、訓(xùn)練操作者；⑶、引進(jìn)常規(guī)應(yīng)用；⑷、常規(guī)性能管理。方法學(xué)評價計劃2022/12/181574．方法應(yīng)用：方法學(xué)評價計劃2022/12/1313

（一）

、方法的分級臨床生化成分的測定方法很多，根據(jù)其準(zhǔn)確度與精密度的不同可以分為三級。

二、方法的選擇2022/12/18158二、方法的選擇2022/12/13141、決定性方法（Definitivemethods）

指準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過詳細(xì)研究，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法，測定結(jié)果為“確定值”，與“真值”最接近。方法的分級2022/12/181591、決定性方法（Definitivemethods）方條件：技術(shù)要求太高且復(fù)雜，費用昂貴，儀器精密、試劑最純。用途：不能直接用于鑒定常規(guī)方法的準(zhǔn)確性，只用于發(fā)展及評價參考方法和標(biāo)準(zhǔn)品。2022/12/18160條件：技術(shù)要求太高且復(fù)雜，費用昂2022/12/13162、參考方法（Referencemethods）

指準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)充分證實的分析方法，干擾因素少，系統(tǒng)誤差很小，與重復(fù)測定的隨機(jī)誤差相比可以忽略不計，有適當(dāng)?shù)撵`敏度、特異性、直線性及較寬的分析范圍。方法的分級2022/12/181612、參考方法（Referencemethods）方法的分級條件：所需儀器的要求也較高，昂貴，試劑要求二級標(biāo)準(zhǔn)品，純度高、雜質(zhì)少，在條件優(yōu)越的實驗室可進(jìn)行常規(guī)工作。用途：主要應(yīng)用于鑒定常規(guī)方法，評價其誤差大小，干擾因素，并決定其是否可以被接受。它也用于鑒定二級標(biāo)準(zhǔn)品，為質(zhì)控血清定值，也可用于評價商品試劑盒等。

2022/12/18162條件：所需儀器的要求也較高，昂貴，試劑要求二級標(biāo)準(zhǔn)品，純度高3、常規(guī)方法（routinemethod）

性能指標(biāo)符合臨床或其它目的需要，有適當(dāng)?shù)姆治龇秶医?jīng)濟(jì)實用。常規(guī)方法分為偏差已知的方法和偏差未知的方法。條件：常規(guī)方法在作出評價以后，經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認(rèn)可，可以作為推薦方法。

用途：普通實驗室。方法的分級2022/12/181633、常規(guī)方法（routinemethod）方法的分級20臨床化學(xué)方法之間關(guān)系可見下圖。

方法的分級2022/12/18164臨床化學(xué)方法之間關(guān)系可見下圖。方法的分級2022/12/1

國際標(biāo)準(zhǔn)化委員會將標(biāo)準(zhǔn)品（參考物）的定義暫定為：它的一種或幾種物理或化學(xué)性質(zhì)已經(jīng)充分確定，被用于校正儀器或證實一種測定方法的物質(zhì)，并將其分成三級。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值結(jié)果一般表示為：標(biāo)準(zhǔn)值±總不確定度。（二）標(biāo)準(zhǔn)品的分級2022/12/18165國際標(biāo)準(zhǔn)化委員會將標(biāo)準(zhǔn)品（參考物）的定義暫定1、一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（primaryreferencematerial

）

一級標(biāo)準(zhǔn)品（原級參考物）是已經(jīng)確定的穩(wěn)定而均一的物質(zhì)，它的數(shù)值已由決定性方法確定，