牛奶成分的鑒定和質(zhì)量優(yōu)劣的比較試驗(yàn)報(bào)告

39/39牛奶成分的鑒定和質(zhì)量優(yōu)劣的比較實(shí)驗(yàn)報(bào)告生命科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)技能大賽2014年3月2日目錄研究意義實(shí)驗(yàn)?zāi)康募俺醪皆O(shè)想實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路實(shí)驗(yàn)所需器材及試劑實(shí)驗(yàn)具體操作實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與結(jié)論思考與感悟研究意義牛奶，是最古老的天然飲料之一。營養(yǎng)成份很高，牛奶中的礦物質(zhì)種類也非常豐富，除了我們所熟知的鈣以外，磷、鐵、鋅、銅、錳、鉬的含量都很多。最難得的是，牛奶是人體鈣的最佳來源，而且鈣磷比例非常適當(dāng)，利于鈣的吸收。種類復(fù)雜，至少有100多種，主要成份有水、脂肪、磷脂、蛋白質(zhì)、乳糖、無機(jī)鹽等。英國前首相丘吉爾在談到二戰(zhàn)后歐洲重建問題時(shí)，曾說過這樣一句名言：“沒有什么投資比得上向兒童提供牛奶更重要！”的確，專家研究指出，牛奶是大自然賦予人類的最有益于健康的食品。如果每天飲用400毫升牛奶，就能滿足人體一天所需的蛋白質(zhì)、熱能和鈣。鑒于牛奶營養(yǎng)的完善性，許多國家都采取措施擴(kuò)大乳制品的生產(chǎn)和消費(fèi)，世界衛(wèi)生組織也把人均乳制品列為衡量一個(gè)國家人民生活水平的主要指標(biāo)。

但是由于受傳統(tǒng)飲食習(xí)慣的影響和經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平的限制，我國現(xiàn)在的牛奶消費(fèi)量和消費(fèi)水平還很低。有統(tǒng)計(jì)資料顯示，目前中國大陸地區(qū)年人均牛奶消費(fèi)量為6.39公斤，僅為世界人均牛奶占有量的6.39%，為發(fā)達(dá)國家的2.1%。中國人每天早餐一杯奶，就算可以了，如果再吃點(diǎn)酸奶、晚上再喝一杯，那就算很多的了。隨著我國經(jīng)濟(jì)水平的提高，國民對于健康飲食的意識逐步提高，對于牛奶的消費(fèi)也日益提高。但每個(gè)人對牛奶營養(yǎng)的攝取要求不同，該如何去選擇市面上的各種類型的牛奶（如高鈣奶、牛初乳、酸奶等），如何對其標(biāo)簽注明的成分進(jìn)行鑒別，如何科學(xué)地飲用牛奶。這些都要求了解牛奶的蛋白質(zhì)、脂肪含量等各種指標(biāo)，進(jìn)而進(jìn)行科學(xué)的選用。目前市面上的牛奶成分表中所標(biāo)注出的各種營養(yǎng)成分不盡相同，本次研究在實(shí)驗(yàn)前對超過20種不同地區(qū)和品牌的牛奶成分表進(jìn)行了匯總，得出了如下的大體成分表。牛奶均值（每100克中含）成分名稱含量成分名稱含量成分名稱含量可食部100水分(克)89.8能量(千卡)54能量(千焦)226蛋白質(zhì)(克)3脂肪(克)3.2碳水化合物(克)3.4膳食纖維(克)0膽固醇(毫克)15灰份(克)0.6維生素A(毫克)24胡蘿卜素(毫克)0視黃醇(毫克)24硫胺素(微克)0.03核黃素(毫克)0.14尼克酸(毫克)0.1維生素C(毫克)1維生素E(T)(毫克)0.21a-E0.1(β-γ)-E0.07δ-E0.04鈣(毫克)104磷(毫克)73鉀(毫克)109鈉(毫克)37.2鎂(毫克)11鐵(毫克)0.3鋅(毫克)0.42硒(微克)1.94銅(毫克)0.02錳(毫克)0.03碘(毫克)1.9

根據(jù)市場調(diào)查發(fā)現(xiàn)，不同種類牛奶的某些指標(biāo)有顯著差異，主要表現(xiàn)為蛋白質(zhì)、脂質(zhì)及碳水化合物含量，而牛奶中鈣含量的高低也往往會(huì)成為衡量牛奶優(yōu)劣的一大指標(biāo)。因此，定量的檢測不同品牌不同種類牛奶中主要營養(yǎng)物的含量，進(jìn)而分析市面上出售的牛奶的質(zhì)量優(yōu)劣同時(shí)分析對于不同需求人群的不同選擇可以為消費(fèi)者在今后選購牛奶時(shí)提供參考。實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮统醪皆O(shè)想通過實(shí)驗(yàn)測定不同種類牛奶中主要成分指標(biāo)的差異，通過統(tǒng)計(jì)分析，一方面與廠家自身宣稱的指標(biāo)進(jìn)行對比，同時(shí)，在不同廠家間進(jìn)行橫向比較，參考過國家標(biāo)準(zhǔn)，確定牛奶的優(yōu)劣。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路物理性質(zhì)的檢測包括質(zhì)量、體積、PH等指標(biāo)。直觀反映不同品牌牛奶的差異。淀粉的定性檢驗(yàn)在牛奶中淀粉并非必要成分，甚至應(yīng)當(dāng)不出現(xiàn)在成品中，商家可能會(huì)利用淀粉摻入牛奶來改善提高牛奶口感，在本次試驗(yàn)中僅作定性檢驗(yàn)。蛋白質(zhì)的測定——考馬斯亮藍(lán)法考馬斯亮藍(lán)G-250（CoomassieG-250）是一種甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺酸基的藍(lán)色染料，在465nm處有最大吸收值?？捡R斯亮藍(lán)G-250能與蛋白質(zhì)通過范得華相互作用形成蛋白質(zhì)—考馬斯亮藍(lán)復(fù)合物藍(lán)色溶液，引起該染料的最大吸收λmax的位置發(fā)生紅移，在595nm處有最大吸收值。由于蛋白質(zhì)—考馬斯亮藍(lán)復(fù)合物在595nm處的光吸收遠(yuǎn)高于考馬斯亮藍(lán)在465nm處的光吸收，因此，可大大地提高蛋白質(zhì)的測定靈敏度。蛋白質(zhì)—考馬斯亮藍(lán)復(fù)合物溶液顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。利用溶液顏色的差異進(jìn)行比色測定，適合于蛋白質(zhì)類的定量分析，尤其適合于稀有蛋白質(zhì)的微量分析?？捡R斯亮藍(lán)G-250試劑呈色反應(yīng)顏色穩(wěn)定、靈敏度高，最低測試蛋白質(zhì)量在1ug左右。脂質(zhì)的測定——哥特里—羅紫法利用氨溶液使乳中酪蛋白的鈣鹽成為可溶性鈣鹽，使結(jié)合的脂肪游離，用乙醚從乳中提取脂肪，干燥至恒量，稱其質(zhì)量得乳中脂肪含量（GB/T5009.46-2003）。利用氨—乙醇溶液，破壞乳的膠體性狀及脂肪球膜，使非脂成分溶解于氨—乙醇溶液中而脂肪游離出來，再用乙醚—石油醚提出脂肪，蒸餾去除溶液后，殘留物即為乳脂。還原糖（乳糖）的測定乳糖是一種光活性物質(zhì)，利用旋光儀在波長589.3~589.4nm處測量其旋光度即可求出乳糖的含量。計(jì)算公式：牛奶中乳糖濃度(g/100ml)=**100Ca的測定——EDTA滴定法用二乙胺四乙酸二鈉鹽（EDTA）溶液滴定牛奶中的鈣。用EDTA測定鈣，一般在pH=12~13的堿性溶液中，以鈣試劑（絡(luò)藍(lán)黑R）為指示劑，與Ca2+形成粉紅色的絡(luò)合物，終點(diǎn)由粉紅色變?yōu)榧兯{(lán)色，變色敏銳，且此pH值下Mg2+沉淀不會(huì)干擾滴定結(jié)果。滴定時(shí)Fe、Al干擾用三乙醇胺掩蔽。實(shí)驗(yàn)所需器材及試劑物理指標(biāo)分析天平、量筒、密度計(jì)、PH計(jì)?；瘜W(xué)成分蛋白質(zhì)的測定試劑

1、考馬斯亮藍(lán)試劑：

考馬斯亮藍(lán)G—250100mg溶于50ml95%乙醇，加入100ml85%H3PO4，用蒸餾水稀釋至1000ml,濾紙過濾。最終試劑中含0.01%（W/V）考馬斯亮藍(lán)G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。（另可參考生化實(shí)驗(yàn)教材）

2、標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液：

純的牛血清血蛋白，預(yù)先經(jīng)微量凱氏定氮法測定蛋白氮含量，根據(jù)其純度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。（還需請教生化實(shí)驗(yàn)老師具體操作）3、蒙牛、伊利、燕塘、三種純牛奶各3盒。器材

1、722S型分光光度計(jì)使用及原理。2、1ml、5ml移液槍各三支，相應(yīng)槍頭各30個(gè)。脂質(zhì)的測定試劑

①250g/L氨水（相對密度0.91）20mL

②96%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇100mL

③乙醚：不含過氧化物200mL

④石油醚：沸程30℃~60℃。200mL器材125mL分液漏斗*6電磁加熱攪拌器*2水浴鍋100mL燒杯*61-5mL移液槍（配槍頭50支）100-1000uL移液槍（配槍頭30支）10mL移液管*425mL移液管*4電熱恒溫烘箱（80-120℃）電子天平（最小量程≤0.1mg）還原糖的測定試劑純牛奶（市售），21.9%乙酸鋅溶液10.6%亞鐵氰化鉀0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)乳糖溶液0.2%蒽酮溶液器材一支5ml移液槍，三支25ml移液管，九支250ml容量瓶，一支50ml移液管，九支10ml試管，水浴鍋，試管架，電磁加熱攪拌器，分光光度計(jì)，比色皿，dancer,擦鏡紙Ca的測定儀器：1-5ml移液槍*1、錐形瓶（250mL）*9、堿性滴定管*1，1000ml燒杯*1，分析天平（精確稱量到±0.0001g），1000ml容量瓶*1，250ml容量瓶*1，表面皿*1，25ml移液管*2藥品：EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.02mol?L）、NaOH溶液（20%）、鉻藍(lán)黑R（0.5%），30%三乙醇胺，1:1鹽酸，蒸餾水，碳酸鈣實(shí)驗(yàn)具體操作蛋白質(zhì)的測定1、標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：

1）試管編號012345678100ug/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白（ml）0.00.10.20.30.40.50.60.70.80.15mol/LNaCl（ml）10.90.80.70.60.50.40.30.2考馬斯亮藍(lán)試劑（ml）555555555搖勻，1h內(nèi)以0號管為空白對照,在595nm處比色蛋白質(zhì)濃度(μg/ml)01020304050607080A595nm2）以A595nm為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)（九個(gè)點(diǎn)為0ug、10ug、20ug、30ug、40ug、50ug、60ug、70ug、80ug），用origin作圖，測出回歸線性方程。一般相關(guān)系數(shù)應(yīng)過0.999以上，至少2個(gè)9以上。2、蛋白質(zhì)含量的測定：

1）試管編號A1A2A3B1B2B3C1C2C30.15mol/LNaCl稀釋300倍的待測樣品（ml）（具體稀釋倍數(shù)依實(shí)際而定）1考馬斯亮藍(lán)試劑（ml）5搖勻，1h內(nèi)以0號管為空白對照,在595nm處比色A595nmA595nm平均值對應(yīng)樣品蛋白質(zhì)濃度（μg/ml）其中，A、B、C分別為伊利、蒙牛、燕塘的三組平行樣本。2）利用回歸方程求出樣品蛋白質(zhì)含量。一般被測樣品的A595nm值在0.1—0.05之間，所以上述樣品如果A595nm值太大，可以稀釋后再測A595nm值，然后再計(jì)算。以下為計(jì)算公式：每種牛奶蛋白質(zhì)含量（每百毫升）=稀釋倍數(shù)*對應(yīng)樣品蛋白濃度*100/10脂質(zhì)的測定用電子天平稱量干燥的錐形瓶質(zhì)量m0吸取10.0ml試樣（質(zhì)量為m2）于100mL燒杯中，加入1.25ml0.25g/mL氨水，充分混勻。置60℃水浴中加熱5min，將液體充分轉(zhuǎn)移至分液漏斗，再振搖2min，加入10ml乙醇，充分搖勻，加入25ml乙醚振搖0.5min，再加入25ml石油醚，震蕩0.5min。靜止30min，待上層液澄清時(shí)，下層液體又下口放出，上層液體倒入干燥的錐形瓶中。將該錐形瓶置于沸水浴中加熱直至使醚和乙醇徹底揮發(fā)（此過程約0.5小時(shí)），再置75℃電熱恒溫烘箱干燥0.5h后稱量，得錐形瓶質(zhì)量加乳脂質(zhì)量m1。計(jì)算M=(m1-m0)*100式中：M—100mL中含脂質(zhì)的質(zhì)量，g；m1—錐形瓶加脂肪質(zhì)量，g；m0—錐形瓶質(zhì)量，g；還原糖的測定樣品處理：準(zhǔn)確吸取10ml新鮮牛奶于100ml容量瓶中，加20ml水，緩慢加入2ml21.9%乙酸鋅溶液及2ml10.6%亞鐵氰化鉀溶液，加水至刻度，混勻，靜置30min過濾，將濾液稀釋5倍備用。直線回歸方程的建立：取試管5支，分別加入0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)乳糖溶液0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml,再于各管補(bǔ)加蒸餾水至1.00ml，另取1支試管加蒸餾水至1.00ml作為空白管，向以上6支試管中分別加入0.2%蒽酮溶液4.00ml，混勻，沸水浴10min,取出，冷至室溫，測各管的O、D620nm，將數(shù)據(jù)作回歸處理，得出直線回歸方程。樣品測定：取試管2支，分別加入稀釋樣品液0.05ml，再于各管補(bǔ)加蒸餾水至1.00ml，另取1支試管加蒸餾水1.00ml作為空白管，向以上3支試管中分別加入0.2%蒽酮溶液4.00ml，混勻，沸水浴10min，取出，冷至室溫，測各管的O、D620nm，將數(shù)據(jù)代入直線回歸方程，即可求得測試管中乳糖質(zhì)量，再經(jīng)換算，可得樣品中乳糖的含量。Ca的測定（一）.EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置與標(biāo)定1.EDTA溶液的配制稱取8.0g乙二胺四乙酸二鈉與1000ml燒杯中，加400ml水，溫?zé)崾蛊渫耆芙?，轉(zhuǎn)入至1000ml容量瓶中，用水稀釋至1000ml，搖均。2.以CaCO3為基準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定EDTA(1).配制0.020mol/L鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱取0.5～0.55g碳酸鈣于250mL燒杯中，用少量水稀釋，蓋上表面皿，慢慢滴加1:1的HCl5ml，加少量水稀釋，定量轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。(2).EDTA溶液的標(biāo)定用移液槍移取25.00mL標(biāo)準(zhǔn)鈣溶液于250mL錐形瓶中，加入約25mL水，10mL10%NaOH溶液調(diào)pH至12~13，加入10~15滴鉻藍(lán)黑R，搖勻后，用EDTA溶液滴定至溶液從紅色變?yōu)樗{(lán)色，即為終點(diǎn)。平行測定三分。（二）.鈣含量的測定準(zhǔn)確移取每種牛奶試樣20.00mL三份分別加入250mL錐形瓶中，加入蒸餾水20mL，加入2mL20%NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至12，加入1ml三乙醇胺，搖勻、再加入10~15滴鉻藍(lán)黑R，用標(biāo)準(zhǔn)EDTA滴定至溶液由粉紅色至明顯純藍(lán)色，即為終點(diǎn)，平行測定三次，計(jì)算牛奶中的含鈣量，以每100mL牛奶含鈣的毫克數(shù)表示。重復(fù)做三次。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法因?yàn)槊總€(gè)樣品平行進(jìn)行三組實(shí)驗(yàn)，因而首先進(jìn)行計(jì)算分析，確定三組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差在可接受范圍內(nèi)。通過平均數(shù)及方差的比較，確定各項(xiàng)指標(biāo)的高低差異。繪制統(tǒng)計(jì)圖表，直觀量化。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)果蛋白質(zhì)的測定標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：試管編號012345678100ug/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白（ml）0.00.10.20.30.40.50.60.70.80.15mol/LNaCl（ml）10.90.80.70.60.50.40.30.2考馬斯亮藍(lán)試劑（ml）555555555搖勻，1h內(nèi)以0號管為空白對照,在595nm處比色蛋白質(zhì)濃度(μg/ml)01020304050607080A595nm00.0270.1030.1810.2540.3410.4180.5120.592

2）以A595nm為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)（六個(gè)點(diǎn)為10ug、20ug、30ug、40ug、50ug、60ug），用origin作圖，測出回歸線性方程。一般相關(guān)系數(shù)應(yīng)過0.999以上，至少2個(gè)9以上。得到回歸線及方程如下：回歸方程：y=0.00769x-0.03776y:A595nmx:標(biāo)準(zhǔn)蛋白濃度/(μg/ml)r22、蛋白質(zhì)含量的測定：試管編號A1A2A3B1B2B3C1C2C30.15mol/LNaCl稀釋300倍的待測樣品（ml）（具體稀釋倍數(shù)依實(shí)際而定）1考馬斯亮藍(lán)試劑（ml）5搖勻，1h內(nèi)以0號管為空白對照,在595nm處比色A595nm0.3250.3930.2750.2040.3580.2540.2860.3350.266A595nm平均值0.3310.2720.296對應(yīng)樣品蛋白質(zhì)濃度（μg/ml）47.96340.28643.411其中，A、B、C分別為伊利、蒙牛、燕塘的三組平行樣本。稀釋倍數(shù)：A（伊利）：680B（蒙牛）：620C（燕塘）：600每種牛奶蛋白質(zhì)含量計(jì)算公式：每種牛奶蛋白質(zhì)含量（g/每百毫升）=稀釋倍數(shù)*對應(yīng)樣品蛋白濃度*100/10則每種牛奶蛋白質(zhì)含量(g/每百毫升)為：A（伊利）=680*47.963*100/106B（蒙牛）=620*40.689*100/106C（燕塘）=600*43.411*100/106品牌牛奶蛋白質(zhì)含量(g/每百毫升)伊利3.26148蒙牛2.49792燕塘2.60466脂質(zhì)的測定實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象用電子天平稱量干燥的錐形瓶質(zhì)量m0——吸取10.0ml試樣（質(zhì)量為m1）于100mL燒杯中，加入1.25ml0.25g/mL氨水，充分混勻?！?0℃水浴中加熱5min，將液體充分轉(zhuǎn)移至分液漏斗，再振搖2min，加入10ml乙醇，充分搖勻，加入25ml乙醚振搖0.5min，再加入25ml石油醚，震蕩0.5min。加入乙醇后，溶液沒有發(fā)生分層，溶液依然為乳白色，加入乙醚和石油醚后，溶液有一點(diǎn)變黃，溶液分層靜止30min，待上層液澄清時(shí)，下層液體又下口放出，上層液體倒入干燥的錐形瓶中。溶液分層，上層為無色透明，下層為黃白色溶液。將該錐形瓶置于沸水浴中加熱直至使醚和乙醇徹底揮發(fā)（此過程約0.5小時(shí)），再置75℃電熱恒溫烘箱干燥0.5h后稱量，得錐形瓶質(zhì)量加乳脂質(zhì)量m1。隨著加熱進(jìn)行，有大量氣泡產(chǎn)生，最后剩余深黃棕色固體。牛奶品牌組別錐形瓶質(zhì)量m0錐形瓶加乳脂質(zhì)量m1。脂質(zhì)含量M平均含量蒙牛第一組56.567151.37703.5993.595第二組55.273854.98353.597第三組56.295656.65443.588伊利第一組55.797656.17843.8083.760第二組55.192255.55833.661第三組55.354755.91593.812燕塘第一組53.059153.44483.8573.343第二組53798654.14013.415第三組53.268153.54402.759蒙牛的脂質(zhì)平均含量測得結(jié)果為3.595g/100mL,包裝盒上為3.7g/100mL伊利的脂質(zhì)平均含量測得結(jié)果為3.760g/100mL,包裝盒上為3.9g/100mL燕塘的脂質(zhì)平均含量測得結(jié)果為3.343g/100mL,包裝盒上為3,6g/100mL(但每組之間有較大差異)還原糖的測定實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象1.樣品處理：準(zhǔn)確吸取10ml新鮮牛奶于100ml容量瓶中，加20ml水，緩慢加入2ml21.9%乙酸鋅溶液及2ml10.6%亞鐵氰化鉀溶液，加水至刻度，混勻，靜置30min過濾，將濾液稀釋5倍備用。1.樣品產(chǎn)生白色沉淀。濾液呈現(xiàn)淡黃色。2.直線回歸方程的建立：取試管5支，分別加入0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)乳糖溶液0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml,再于各管補(bǔ)加蒸餾水至1.00ml，另取1支試管加蒸餾水至1.00ml作為空白管，向以上6支試管中分別加入0.2%蒽酮溶液4.00ml，混勻，沸水浴10min,取出，冷至室溫，測各管的O、D620nm，將數(shù)據(jù)作回歸處理，得出直線回歸方程。2.沸水浴后試管中液體由黃色變綠色。3.樣品測定：取試管2支，分別加入稀釋樣品液0.05ml，再于各管補(bǔ)加蒸餾水至1.00ml，另取1支試管加蒸餾水1.00ml作為空白管，向以上3支試管中分別加入0.2%蒽酮溶液4.00ml，混勻，沸水浴10min，取出，冷至室溫，測各管的O、D620nm，將數(shù)據(jù)代入直線回歸方程，即可求得測試管中乳糖質(zhì)量，再經(jīng)換算，可得樣品中乳糖的含量。3.沸水浴后試管中液體由黃色變綠色。表乳糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立管號123456標(biāo)準(zhǔn)乳糖液/mL0.000.200.400.600.801.00O、D620nm0.0000.3300.3800.4190.4390.590圖乳糖標(biāo)準(zhǔn)曲線表樣品中乳糖含量的測定管號123456789O、D620nm0.4130.2650.0820.7880.2600.3280.3090.3310.209稀釋樣品中乳糖含量/mg*mL-10.06130.0300-0.08600.1400.02900.04330.03930.04400.0182樣品中乳糖含量/mg*mL-161.330.0-8.6014029.043.339.344.018.2該品牌牛奶樣品中乳糖的平均含量/mg*mL-127.670.833.8注：管1-3為燕塘牛奶，管4-6為蒙牛牛奶，管7-9為伊利牛奶結(jié)論本次乳糖測定實(shí)驗(yàn)僅得出一組有效數(shù)據(jù)，即第三組，其他兩組精密度太差，無法作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果。第三組為伊利牌牛奶，包裝盒上標(biāo)碳水化合物含量為為5.1克每100毫升，實(shí)測數(shù)據(jù)為3.38克每100毫升。Ca的測定實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象1.EDTA溶液的配制稱取8.0g乙二胺四乙酸二鈉與1000ml燒杯中，加400ml水，溫?zé)崾蛊渫耆芙?，轉(zhuǎn)入至1000ml容量瓶中，用水稀釋至1000ml，搖勻。實(shí)際稱取乙二胺四乙酸二鈉：8.0046g2.0.020mol/L鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取0.5～0.55g碳酸鈣于250mL燒杯中，用少量水稀釋，蓋上表面皿，慢慢滴加1:1的HCl5ml，加少量水稀釋，定量轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。實(shí)際稱取碳酸鈣：0.53603.EDTA溶液的標(biāo)定用移液槍移取25.00mL標(biāo)準(zhǔn)鈣溶液于250mL錐形瓶中，加入約25mL水，10mL10%NaOH溶液，10~15滴鉻藍(lán)黑R，搖勻后，用EDTA溶液滴定至溶液從紅色變?yōu)樗{(lán)色，即為終點(diǎn)。平行測定三次。隨著EDTA溶液的加入，溶液先由紅色逐漸變?yōu)樽仙?，再突變?yōu)樗{(lán)色，為滴定終點(diǎn)4.鈣含量的測定準(zhǔn)確移取每種牛奶試樣20.00mL三份分別加入250mL錐形瓶中，加入蒸餾水20mL，加入2mL20%NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至12，加入1ml三乙醇胺，搖勻、再加入10~15滴鉻藍(lán)黑R，用標(biāo)準(zhǔn)EDTA滴定至溶液由粉紅色至明顯純藍(lán)色，即為終點(diǎn)，平行測定三次，混合液由粉紅色變?yōu)榈仙?，再變?yōu)榈{(lán)色，為滴定終點(diǎn)。由于牛奶的白色導(dǎo)致終點(diǎn)較難判斷。5.鈣含量的計(jì)算計(jì)算牛奶中的含鈣量，以每100mL牛奶含鈣的毫克數(shù)表示。計(jì)算結(jié)果見實(shí)驗(yàn)結(jié)果（一）.EDTA溶液的標(biāo)定標(biāo)定次數(shù)123VEDTA/ml24.5024.5424.57cEDTA/(mol/L)0.021860.021820.02180cEDTA/(mol/L)0.02182單次測定偏差d/(mol/L)0.0000400.00002相對平均偏差/%0.09（二）.鈣含量的測定伊利次數(shù)樣品1樣品2樣品3VEDTA/mlcCa/(g/100ml)VEDTA/mlcCa/(g/100ml)VEDTA/mlcCa/(g/100ml)123.890.104523.820.104223.310.1019224.210.105924.600.107623.350.1021324.080.105324.850.108723.300.1019cCa(g/100ml)0.10520.10680.1020cCa(g/100ml)0.1047蒙牛次數(shù)樣品1樣品2樣品3VEDTA/mlcCa/(g/100ml)VEDTA/mlcCa/(g/100ml)VEDTA/mlcCa/(g/100ml)121.100.092323.120.101124.600.1076220.710.090624.600.107624.610.1076323.510.102823.980.104924.670.1079cCa(g/100ml)0.09520.10450.1063cCa(g/100ml)0.1020燕塘次數(shù)樣品1樣品2樣品3VEDTA/mlcCa/(g/100ml)VEDTA/mlcCa/(g/100ml)VEDTA/mlcCa/(g/100ml)118.870.082518.890.82619.280.843218.810.082218.700.81819.010.831319.220.084018.870.82518.300.800cCa(g/100ml)0.08290.08230.0825cCa(g/100ml)0.0826綜合比較伊利XXX蒙牛XXX燕塘XXXcCa(g/100ml)0.10470.10200.0826包裝盒標(biāo)識鈣含量(g/100ml)0.1100.100未標(biāo)明相對偏差/%-4.82.0物理性質(zhì)直觀性征差異顏色：對比三種牛奶，伊利金典牛奶較其他兩種顏色更白，蒙牛和燕塘純牛奶顏色均有一定泛黃。氣味：蒙牛和伊利牛奶開包裝后有濃郁的香氣，我們猜測這與牛奶中的脂質(zhì)有關(guān)，而燕塘相較之氣味就要小很多?？诟校簩Ρ热N牛奶，蒙牛的口感更加細(xì)膩，而伊利的則更為醇厚。密度：我們分別測量了三種牛奶的每百毫升質(zhì)量，并計(jì)算密度，作為其直觀的定性分析質(zhì)量的指標(biāo)，得到了以下數(shù)據(jù)結(jié)果：蒙牛伊利燕塘每百毫升質(zhì)量10.29310.31210.149每百毫升質(zhì)量10.28910.30810.150每百毫升質(zhì)量10.30110.31610.144密度1.02941.03121.0147分析與結(jié)論對實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行分析討論，承認(rèn)實(shí)驗(yàn)中方法本身存在有一定的誤差可能，主要由于樣品的選取以及配置文件題，具體體現(xiàn)為為以下幾點(diǎn)：1.在實(shí)驗(yàn)中樣品取用牛奶，本身為濁液，雖然在指標(biāo)測定前進(jìn)行了稀釋，但溶液仍然為白色，影響滴定終點(diǎn)的顏色判斷以及分光光度計(jì)的使用。2.實(shí)驗(yàn)中樣品統(tǒng)一取牛奶全液，再根據(jù)不同測定項(xiàng)目進(jìn)行稀釋，但所采取的方法為單獨(dú)某一成分的測定方法，因而并未排出各種成分之間在測定時(shí)的相互影響。尤其是牛奶中蛋白質(zhì)與脂質(zhì)結(jié)合較多，在這兩個(gè)項(xiàng)目的測定上會(huì)存在一定的相互影響，而有一定誤差。在不同的具體操作中我們再分別討論各自的優(yōu)勢以及存在的問題。蛋白質(zhì)檢測三組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有較大偏差，主要存在的問題有：1.第一組樣品取樣后放置時(shí)間較長，在測量時(shí)明顯感覺到底部有一定的沉淀，我們猜測可能是脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，因而在最終測量結(jié)果時(shí)會(huì)有明顯不同。2.在稱量時(shí)受天平精密程度的影響，會(huì)在不同組別之間產(chǎn)生不同，同時(shí)因?yàn)闃悠废♂尦潭容^大，微小的取樣質(zhì)量差異就會(huì)對于濃度產(chǎn)生較大影響，進(jìn)而影響之后的檢測結(jié)果。3.在選擇牛奶的時(shí)候，雖然做到了盡量選取同一批次統(tǒng)一生產(chǎn)日期的產(chǎn)品，但是不能夠完全排除樣品存在差異的可能。4.在牛奶放置過程中，會(huì)有一定的沉淀，在取樣時(shí)應(yīng)先震蕩搖勻再取，否則出現(xiàn)不均一的情況。脂質(zhì)檢測中三組結(jié)果均與樣品包裝上的指標(biāo)有明顯差異，主要存在的問題有：1.牛奶要經(jīng)燒杯-分液漏斗-錐形瓶，轉(zhuǎn)移過程會(huì)有一部分損失。2.由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間限制，干燥時(shí)間太短，有機(jī)物還有少量殘留。3.若為充分振搖，分液漏斗中會(huì)有少量脂質(zhì)未被有機(jī)物提取出，造成損失。Ca含量的檢測中存在如下的問題：1.牛奶粘稠度較大，用移液槍取牛奶時(shí)槍頭內(nèi)有較多殘留，造成的系統(tǒng)誤差可能導(dǎo)致鈣含量檢測值比真實(shí)值偏小。2.由于牛奶本身為白色乳濁液，對滴定終點(diǎn)判斷有一定影響。3.牛奶中鈣鹽多結(jié)合與蛋白質(zhì)上，一些平行組相對平均偏差較大亦可能是取樣時(shí)牛奶內(nèi)蛋白質(zhì)的不均勻分布造成的。乳糖含量的測定中存在如下問題：1.沉淀劑的沉淀效果對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大影響。我們采用的是國家標(biāo)準(zhǔn)中提到的沉淀劑配比，但即使所有樣品原液中加入了相同劑量的沉淀劑，同種品牌一組之中三個(gè)樣品所得濾液的體積也有明顯差別，即最終所得濾液的濃度有很大差別。由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間限制，未能嘗試其它沉淀劑的沉淀效果，應(yīng)繼續(xù)嘗試不同沉淀劑，并找出沉淀效果最佳時(shí)沉淀劑的配比。查閱文獻(xiàn)，其它沉淀劑有亞鐵氰化鉀和草酸鉀－磷酸氫二鈉溶液。2.本次實(shí)驗(yàn)中經(jīng)過稀釋等操作較多，在實(shí)驗(yàn)操作過程中難免會(huì)產(chǎn)生誤差。3.分光光度計(jì)使用時(shí)間過長，測量容易出現(xiàn)儀器誤差。4.實(shí)測數(shù)據(jù)與包裝盒上標(biāo)數(shù)據(jù)存在較大不同原因：一是包裝盒上所標(biāo)數(shù)據(jù)為碳水化合物含量，我們所測得的僅是牛奶中乳糖的含量，牛奶中還有其他多種碳水化合物，所測并非全部成分。二是在過濾時(shí)，沉淀可能夾帶一部分乳糖，未被濾出。實(shí)驗(yàn)操作中也會(huì)存在有一定的誤差,具體分析如下:1.取樣時(shí)樣品殘存于玻璃儀器壁，因稀釋，樣品中帶檢測成分本就不多，會(huì)造成很大程度的偏差。2.實(shí)驗(yàn)操作過程中，會(huì)產(chǎn)生一定的人為偏差，因而每人負(fù)責(zé)同一個(gè)實(shí)驗(yàn)，來盡量避免這種誤差影響實(shí)驗(yàn)。綜合各項(xiàng)數(shù)據(jù)我們發(fā)現(xiàn)，在蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和Ca的含量上，伊利有明顯的優(yōu)勢，在乳糖的檢測中我們未比較出三個(gè)品牌牛奶的明顯差異。為了給出較為合理的選擇策略，我們同時(shí)還綜合考慮了三種牛奶的價(jià)格因素。蒙牛伊利燕塘2.5元6元3.5元結(jié)果很明顯，伊利牛奶的質(zhì)量相對較好，其中蛋白質(zhì)和Ca的含量都很高，但是價(jià)格也明顯高于其他兩種，燕塘牛奶則顯得相對性價(jià)比不高。同時(shí)，對于不同需求的人群我們加以，應(yīng)該選擇不同種類牛奶，值得注意的是牛奶中的乳糖含量，多數(shù)亞洲人在成年后都會(huì)有不同程度的乳糖不耐受綜合征，具體表現(xiàn)為食用未經(jīng)酶處理的牛奶后出現(xiàn)脹氣、惡心等癥狀，對于這樣的患者應(yīng)該選擇乳糖水解過的牛奶（如：舒化奶），除此之外之外，希望通過控制飲食來達(dá)到減重的人也應(yīng)該慎重考慮牛奶中的脂質(zhì)含量，選擇盡量低脂或脫脂的牛奶。因此，本次實(shí)驗(yàn)基本達(dá)到了實(shí)驗(yàn)預(yù)期效果，對于市售的牛奶優(yōu)劣進(jìn)行了初步的鑒定，同時(shí)給出消費(fèi)者在選擇牛奶時(shí)的建議。（另附：三種品牌的牛奶各項(xiàng)指標(biāo)標(biāo)注）三種品牌牛奶包裝盒上不同物質(zhì)含量蛋白質(zhì)/g脂質(zhì)/g碳水化合物/g鈣/mg伊利3.43.95.1110蒙牛3.13.74.8100燕塘3.03.64.550思考與感悟本次實(shí)驗(yàn)步驟經(jīng)多次修改而成，最初的想法是根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)，檢測牛奶中各項(xiàng)指標(biāo)的含量，但是后來因?yàn)閷?shí)驗(yàn)儀器的限制，我們不斷修改自己的實(shí)驗(yàn)方案，盡量取得最好的效果，同時(shí)又不對環(huán)境造成污染。例如其中，在進(jìn)行脂質(zhì)的檢測時(shí)，提供的抽脂瓶的規(guī)格存在偏差，并且未提供蒸餾裝置，于是將抽脂瓶改為用分液漏斗分液，并用量取體積，雖然造成一定誤差，但可以保證實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)行。我們又采取旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀代替蒸餾裝置以得到最后的脂質(zhì)固體，但南苑3樓的4臺旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀均發(fā)生不同程度的損壞，于