細(xì)菌的形態(tài)與染色課件

實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的形態(tài)與染色一.錄像：微生物學(xué)發(fā)展史二.實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）三.細(xì)菌形態(tài)示教及示教操作四.學(xué)生操作：革蘭染色法（Gramstain)五.作業(yè)實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的形態(tài)與染色一.錄像：微生物學(xué)發(fā)展史實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）牢固樹立“有菌觀念”嚴(yán)格執(zhí)行“無菌操作”嚴(yán)防“雜菌污染”實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）牢固樹立“有菌觀念”實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）一.安全使用水、電、煤二.保持實(shí)驗(yàn)室安靜有序、愛護(hù)實(shí)驗(yàn)器材三.培養(yǎng)良好習(xí)慣，樹立自我保護(hù)意識(shí)穿實(shí)驗(yàn)服不在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吃東西不將任何實(shí)驗(yàn)材料（如細(xì)菌涂片、細(xì)菌培養(yǎng)物）攜帶出實(shí)驗(yàn)室

實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）一.安全使用水、電、煤實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）

若有傳染性材料污染桌面、地面、書、衣物或人體，應(yīng)立即報(bào)告教師，并在教師指導(dǎo)下進(jìn)行消毒處理實(shí)驗(yàn)用過的物品歸還原處，帶有傳染性的吸管、玻片等，必須放在指定地點(diǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清洗消毒（0.1%新潔爾滅溶液中浸泡）雙手后方可離開四.做好實(shí)驗(yàn)室清潔衛(wèi)生工作實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）若有傳染細(xì)菌形態(tài)示教及示教操作細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)細(xì)菌的大小及排列細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)莢膜、鞭毛、菌毛、芽孢3.細(xì)菌的染色檢查法細(xì)菌形態(tài)示教及示教操作細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)細(xì)菌形態(tài)示教——

莢膜肺炎球菌莢膜（capsule）細(xì)菌形態(tài)示教——莢膜肺炎球菌莢膜（c細(xì)菌形態(tài)示教——

鞭毛、菌毛菌毛pilus電鏡下變形桿菌周身鞭毛flagellum

光學(xué)顯微鏡下細(xì)菌形態(tài)示教——鞭毛、菌毛菌毛pilus變形桿菌周身鞭毛細(xì)菌形態(tài)示教——

芽孢破傷風(fēng)桿菌芽孢endosporeofC.tetani光學(xué)顯微鏡下形態(tài)電子顯微鏡下形態(tài)細(xì)菌形態(tài)示教——芽孢破傷風(fēng)桿菌芽孢endosp

G+菌G-菌等電點(diǎn)PI2~3PI4~5

帶負(fù)電荷多帶負(fù)電荷少通透性低高肽聚糖多，脂質(zhì)少肽聚糖少，脂質(zhì)多

酒精不易進(jìn)入酒精易進(jìn)入Gramstain原理G+菌Gramstain意義1.

鑒別細(xì)菌：分成G+菌和G－菌2.選擇藥物：

G+菌和G－菌對(duì)抗菌藥物敏感性不一樣3.與致病性有關(guān)：

G+菌產(chǎn)生外毒素

G－菌產(chǎn)生內(nèi)毒素Gramstain意義1.

鑒別細(xì)菌：分成革蘭染色法Gramstain

學(xué)生操作：兩人一組材料：兩人一組菌種：表皮葡萄球菌及大腸桿菌斜面各一支玻片每人1張革蘭染色液一套接種環(huán)每人一支革蘭染色法Gramstain學(xué)生操作：兩人一組革蘭染色法Gramstain

基本過程：涂片干燥固定4.染色革蘭染色法Gramstain基本過程：接種棒冷卻事先加好NS量少接種棒冷卻事先加好NS革蘭染色法Gramstain1.涂片制備：按下圖分別加生理鹽水各一滴，再按下圖分別加菌研勻

菌1菌1+菌2菌2革蘭染色法Gramstain1.涂片制備：按下圖分別加革蘭染色法Gramstain制備一張好涂片的基本要素：1.玻片不含油脂(若有油脂可用卷筒紙蘸95%酒精擦干凈)。2.生理鹽水應(yīng)盡量少加。3.取菌不宜過多。革蘭染色法Gramstain制備一張好涂片的基本要素：2.干燥：自然干燥或烘干（標(biāo)本面朝上）3.固定：熱固定（火焰上來回通過3次固定）目的：1.使細(xì)胞質(zhì)凝固,以固定細(xì)胞形態(tài),并使之牢固附著在載玻片上。2.殺死細(xì)菌，操作更安全

2.干燥：自然干燥或烘干（標(biāo)本面朝上）目的：涂片結(jié)晶紫初染1min

碘液媒染1min95%酒精脫色30s復(fù)紅復(fù)染30s水洗，干革蘭染色全過程示意圖（紫碘酒紅，11半半，每次水洗，陽紫陰紅。）水洗，干烘干,油鏡檢水洗，干水洗，干水洗，干涂片結(jié)晶紫初染1min碘液媒染1min95%酒精脫色30s實(shí)驗(yàn)報(bào)告（格式）一.目的二.材料與方法三.結(jié)果（需用彩筆畫示意圖）四.分析與討論

作為平時(shí)成績記入總成績實(shí)驗(yàn)報(bào)告（格式）一.目的作為平時(shí)成績記入總成革蘭染色影響因素分析

脫色是關(guān)鍵菌液涂片不能太厚3.細(xì)菌生長周期的影響革蘭染色影響因素分析脫色是關(guān)鍵細(xì)菌形態(tài)示教（革蘭染色）Streptococcus鏈球菌streptococcus

鏈球菌Staphylococcus葡萄球菌E.Coli大腸桿菌細(xì)菌形態(tài)示教（革蘭染色）Streptococcus細(xì)菌形態(tài)示教美藍(lán)染色奈瑟染色腦脊液標(biāo)本涂片中的腦膜炎雙球菌

細(xì)菌形態(tài)示教美藍(lán)染色奈瑟染1.分成10組，每組2~3人，每組成員參與討論1次，以小組計(jì)成績，占總成績的10%。2.評(píng)價(jià)指標(biāo)包括以下5個(gè)方面（每個(gè)指標(biāo)2分）：

A.主題明確，講解思路清晰并能即興回答提問

B.口頭表達(dá)能力強(qiáng)，語言生動(dòng)流暢，能吸引學(xué)生的注意力

C.PPT制作精美，重點(diǎn)突出并與講解內(nèi)容協(xié)調(diào)

D.資料準(zhǔn)備翔實(shí)，數(shù)據(jù)可靠

E.有良好的團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神討論課基本要求1.分成10組，每組2~3人，每組成員參與討論1次，以小組討論課安排消毒與滅菌（實(shí)驗(yàn)二）奈瑟菌（實(shí)驗(yàn)三）細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷（實(shí)驗(yàn)四）微小桿菌等（實(shí)驗(yàn)七）梅毒螺旋體（實(shí)驗(yàn)八）鉤端螺旋體（實(shí)驗(yàn)八）立克次體（實(shí)驗(yàn)八）支原體（實(shí)驗(yàn)八）衣原體（實(shí)驗(yàn)八）真菌（實(shí)驗(yàn)九）由專人負(fù)責(zé)安排討論課討論課安排消毒與滅菌（實(shí)驗(yàn)二）由專人負(fù)責(zé)安排討論課討論課提綱：消毒與滅菌1、何為消毒、滅菌、防腐、無菌？2、你認(rèn)為在哪些情況下常會(huì)使用到消毒與滅菌技術(shù)？3、消毒與滅菌通常可使用哪些方法？4、濕熱的滅菌效果為什么比干熱要好？5、當(dāng)對(duì)某一件器物既可用物理方法也可用化學(xué)方法進(jìn)行消毒滅菌時(shí)，你認(rèn)為應(yīng)該優(yōu)先選哪一種方法較好？為什么？6、你認(rèn)為物理或化學(xué)方法可導(dǎo)致微生物或感染因子滅活或死亡的機(jī)理是什么？

注：講解時(shí)間必須控制在20min之內(nèi)，留5min

讓其他同學(xué)或老師提問？要求講解者及其同小組同學(xué)答疑。討論課提綱：消毒與滅菌1、何為消毒、滅菌、防腐、無菌？實(shí)驗(yàn)二細(xì)菌培養(yǎng)與消毒滅菌實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1.錄像：消毒與滅菌2.討論課：消毒與滅菌3.培養(yǎng)基與細(xì)菌生長狀況示教4.學(xué)生操作：細(xì)菌接種－平板分區(qū)劃線法

實(shí)驗(yàn)二細(xì)菌培養(yǎng)與消毒滅菌實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的形態(tài)與染色一.錄像：微生物學(xué)發(fā)展史二.實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）三.細(xì)菌形態(tài)示教及示教操作四.學(xué)生操作：革蘭染色法（Gramstain)五.作業(yè)實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的形態(tài)與染色一.錄像：微生物學(xué)發(fā)展史實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）牢固樹立“有菌觀念”嚴(yán)格執(zhí)行“無菌操作”嚴(yán)防“雜菌污染”實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）牢固樹立“有菌觀念”實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）一.安全使用水、電、煤二.保持實(shí)驗(yàn)室安靜有序、愛護(hù)實(shí)驗(yàn)器材三.培養(yǎng)良好習(xí)慣，樹立自我保護(hù)意識(shí)穿實(shí)驗(yàn)服不在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吃東西不將任何實(shí)驗(yàn)材料（如細(xì)菌涂片、細(xì)菌培養(yǎng)物）攜帶出實(shí)驗(yàn)室

實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）一.安全使用水、電、煤實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）

若有傳染性材料污染桌面、地面、書、衣物或人體，應(yīng)立即報(bào)告教師，并在教師指導(dǎo)下進(jìn)行消毒處理實(shí)驗(yàn)用過的物品歸還原處，帶有傳染性的吸管、玻片等，必須放在指定地點(diǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清洗消毒（0.1%新潔爾滅溶液中浸泡）雙手后方可離開四.做好實(shí)驗(yàn)室清潔衛(wèi)生工作實(shí)驗(yàn)室規(guī)則介紹（生物安全）若有傳染細(xì)菌形態(tài)示教及示教操作細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)細(xì)菌的大小及排列細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)莢膜、鞭毛、菌毛、芽孢3.細(xì)菌的染色檢查法細(xì)菌形態(tài)示教及示教操作細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)細(xì)菌形態(tài)示教——

莢膜肺炎球菌莢膜（capsule）細(xì)菌形態(tài)示教——莢膜肺炎球菌莢膜（c細(xì)菌形態(tài)示教——

鞭毛、菌毛菌毛pilus電鏡下變形桿菌周身鞭毛flagellum

光學(xué)顯微鏡下細(xì)菌形態(tài)示教——鞭毛、菌毛菌毛pilus變形桿菌周身鞭毛細(xì)菌形態(tài)示教——

芽孢破傷風(fēng)桿菌芽孢endosporeofC.tetani光學(xué)顯微鏡下形態(tài)電子顯微鏡下形態(tài)細(xì)菌形態(tài)示教——芽孢破傷風(fēng)桿菌芽孢endosp

G+菌G-菌等電點(diǎn)PI2~3PI4~5

帶負(fù)電荷多帶負(fù)電荷少通透性低高肽聚糖多，脂質(zhì)少肽聚糖少，脂質(zhì)多

酒精不易進(jìn)入酒精易進(jìn)入Gramstain原理G+菌Gramstain意義1.

鑒別細(xì)菌：分成G+菌和G－菌2.選擇藥物：

G+菌和G－菌對(duì)抗菌藥物敏感性不一樣3.與致病性有關(guān)：

G+菌產(chǎn)生外毒素

G－菌產(chǎn)生內(nèi)毒素Gramstain意義1.

鑒別細(xì)菌：分成革蘭染色法Gramstain

學(xué)生操作：兩人一組材料：兩人一組菌種：表皮葡萄球菌及大腸桿菌斜面各一支玻片每人1張革蘭染色液一套接種環(huán)每人一支革蘭染色法Gramstain學(xué)生操作：兩人一組革蘭染色法Gramstain

基本過程：涂片干燥固定4.染色革蘭染色法Gramstain基本過程：接種棒冷卻事先加好NS量少接種棒冷卻事先加好NS革蘭染色法Gramstain1.涂片制備：按下圖分別加生理鹽水各一滴，再按下圖分別加菌研勻

菌1菌1+菌2菌2革蘭染色法Gramstain1.涂片制備：按下圖分別加革蘭染色法Gramstain制備一張好涂片的基本要素：1.玻片不含油脂(若有油脂可用卷筒紙蘸95%酒精擦干凈)。2.生理鹽水應(yīng)盡量少加。3.取菌不宜過多。革蘭染色法Gramstain制備一張好涂片的基本要素：2.干燥：自然干燥或烘干（標(biāo)本面朝上）3.固定：熱固定（火焰上來回通過3次固定）目的：1.使細(xì)胞質(zhì)凝固,以固定細(xì)胞形態(tài),并使之牢固附著在載玻片上。2.殺死細(xì)菌，操作更安全

2.干燥：自然干燥或烘干（標(biāo)本面朝上）目的：涂片結(jié)晶紫初染1min

碘液媒染1min95%酒精脫色30s復(fù)紅復(fù)染30s水洗，干革蘭染色全過程示意圖（紫碘酒紅，11半半，每次水洗，陽紫陰紅。）水洗，干烘干,油鏡檢水洗，干水洗，干水洗，干涂片結(jié)晶紫初染1min碘液媒染1min95%酒精脫色30s實(shí)驗(yàn)報(bào)告（格式）一.目的二.材料與方法三.結(jié)果（需用彩筆畫示意圖）四.分析與討論

作為平時(shí)成績記入總成績實(shí)驗(yàn)報(bào)告（格式）一.目的作為平時(shí)成績記入總成革蘭染色影響因素分析

脫色是關(guān)鍵菌液涂片不能太厚3.細(xì)菌生長周期的影響革蘭染色影響因素分析脫色是關(guān)鍵細(xì)菌形態(tài)示教（革蘭染色）Streptococcus鏈球菌streptococcus

鏈球菌Staphylococcus葡萄球菌E.Coli大腸桿菌細(xì)菌形態(tài)示教（革蘭染色）Streptococcus細(xì)菌形態(tài)示教美藍(lán)染色奈瑟染色腦脊液標(biāo)本涂片中的腦膜炎雙球菌

細(xì)菌形態(tài)示教美藍(lán)染色奈瑟染1.分成10組，每組2~3人，每組成員參與討論1次，以小組計(jì)成績，占總成績的10%。2.評(píng)價(jià)指標(biāo)包括以下5個(gè)方面（每個(gè)指標(biāo)2分）：

A.主題明確，講解思路清晰并能即興回答提問

B.口頭