植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課件

植物的組織培養(yǎng)技術(shù)一、菊花的組織培養(yǎng)1．植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程一、菊花的組織培養(yǎng)2．影響植物組織培養(yǎng)的因素[判斷正誤](1)菊花組織培養(yǎng)，一般選擇開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。

()(2)植物激素的濃度可影響細(xì)胞分化，但使用的先后順序及比例不影響組織培養(yǎng)的過(guò)程。

()(3)pH、溫度和光照等也影響植物組織培養(yǎng)。

()××√2．影響植物組織培養(yǎng)的因素[判斷正誤]××3．實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程滅菌(2)外植體消毒：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%無(wú)菌水3．實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程滅菌(2)外植體消毒：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%無(wú)菌(3)接種：始終在

旁進(jìn)行，對(duì)接種工具要用

滅菌。將菊花莖段插入培養(yǎng)基中時(shí)注意

。

(4)培養(yǎng)與移栽：在18℃～22℃的

中培養(yǎng)，得到

后進(jìn)行移栽。二、月季的花藥培養(yǎng)

1．被子植物的花粉發(fā)育過(guò)程酒精燈火焰火焰灼燒不要倒插無(wú)菌箱試管苗四分體時(shí)期單核期(3)接種：始終在2．產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑

3．影響花藥培養(yǎng)的因素

(1)主要因素：

和

。

(2)月季花藥培養(yǎng)一般選擇

期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期。材料的選擇培養(yǎng)基的組成單核2．產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑材料的選擇培養(yǎng)基4．實(shí)驗(yàn)操作[判斷正誤](1)在剝離花藥時(shí)，不要損傷花藥，否則接種后不能脫分化形成愈傷組織。

()(2)與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。

()(3)月季花藥培養(yǎng)得到的都是單倍體植株。

(

)×√×4．實(shí)驗(yàn)操作[判斷正誤]×√×[知識(shí)體系構(gòu)建]①脫分化②再分化③體細(xì)胞④細(xì)胞的全能性⑤細(xì)胞分裂素⑥單核期花粉[知識(shí)體系構(gòu)建]①脫分化②再分化③體細(xì)胞④細(xì)胞的全能性1．(2012·廣東卷T2A)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是植物組織培養(yǎng)。()2．(2011·上海卷T22A)外植體可以來(lái)自植物的任何細(xì)胞。()3．(2011·江蘇卷T16A)愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞。()√植物組織培養(yǎng)的過(guò)程及條件××1．(2012·廣東卷T2A)培育草莓脫毒4．[2012·山東卷T34(1)改編]由外植體經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織，由愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成胚狀體。()5．[2012·山東卷T34(3)]外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是70%。()6．(2012·山東卷T34(2))培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值高時(shí)，有利于芽的分化。()√√×4．[2012·山東卷T34(1)改編]由1．植物細(xì)胞的全能性

(1)細(xì)胞具有全能性的物質(zhì)基礎(chǔ)：生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有本物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全套基因。

(2)植物細(xì)胞只有脫離了植物體，在一定的外部因素作用下，經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂形成愈傷組織，才能表現(xiàn)出全能性。1．植物細(xì)胞的全能性2．植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中脫分化與再分化的比較過(guò)程特點(diǎn)條件脫分化外植體成為愈傷組織排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán)離體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、植物激素、其他適宜條件再分化由愈傷組織成為幼苗或胚狀體結(jié)構(gòu)有根、芽或有生根發(fā)芽的能力2．植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中脫分化與再分化的比較過(guò)程特點(diǎn)條件脫分3．影響植物組織培養(yǎng)的因素

(1)培養(yǎng)材料：①不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大，容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物也容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。②同一種植物材料，材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)培養(yǎng)也有影響。幼齡、保存時(shí)間短的植物材料容易培養(yǎng)成功。3．影響植物組織培養(yǎng)的因素(2)無(wú)菌條件：培養(yǎng)基上有細(xì)菌等微生物存在時(shí)，它們比植物細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖得更快，而且它們會(huì)產(chǎn)生毒素，使培養(yǎng)的植物細(xì)胞很快中毒死亡，因此在培養(yǎng)過(guò)程中要求進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無(wú)菌操作。

(3)植物激素：在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。其中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(2)無(wú)菌條件：①按照不同的順序使用這兩類(lèi)激素，會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(如下表)：使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用分化頻率提高①按照不同的順序使用這兩類(lèi)激素，會(huì)得到不同的②當(dāng)同時(shí)使用這兩類(lèi)激素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。

[關(guān)鍵一點(diǎn)]

無(wú)菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)獲得成功的關(guān)鍵，無(wú)菌技術(shù)包括培養(yǎng)基的滅菌、植物材料(外植體)的消毒和接種時(shí)的無(wú)菌操作。②當(dāng)同時(shí)使用這兩類(lèi)激素時(shí)，兩者用量的比例影響[典例1]

如下圖所示為胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通過(guò)無(wú)菌操作，接入試管后，在一定的條件下，形成試管苗的培育過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：[典例1]如下圖所示為胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通(1)要促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括________和小分子有機(jī)物；激素包括細(xì)胞分裂素和________兩類(lèi)植物激素。

(2)此過(guò)程依據(jù)的原理是________。A和B階段主要進(jìn)行的分裂方式是________，B階段除了細(xì)胞分裂外，還進(jìn)行細(xì)胞________等。

(1)要促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)含有營(yíng)養(yǎng)(3)此過(guò)程要無(wú)菌操作，主要是指對(duì)________進(jìn)行滅菌消毒。B階段需要光照，原因是____________________。

(4)試管苗的根細(xì)胞沒(méi)有葉綠素，而葉的葉肉細(xì)胞具有葉綠素，這是基因________的結(jié)果。

(5)將胡蘿卜組織塊接種到培養(yǎng)基上時(shí)，為防止細(xì)胞污染應(yīng)如何操作？_______________________________________________。(3)此過(guò)程要無(wú)菌操作，主要是指對(duì)_____

[答案]

(1)無(wú)機(jī)鹽生長(zhǎng)素(2)植物細(xì)胞的全能性有絲分裂分化(3)培養(yǎng)基芽發(fā)育成葉，葉肉細(xì)胞中葉綠素的合成需要光照條件(4)選擇性表達(dá)(5)接種要在酒精燈火焰旁進(jìn)行植物的組織培養(yǎng)技術(shù)月季的花藥培養(yǎng)1．(2011·上海卷·T22BC)在無(wú)菌條件下以花粉作為外植體可得到單倍體植株。()2．(2012·江蘇卷·T16B)二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株。()√×月季的花藥培養(yǎng)1．(2011·上海卷·T23．(2013·湖南32校3月聯(lián)考T42(2))確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法有醋酸洋紅法，某些植物的花粉不易著色，需采用焙花青一鉻礬法。()4．[2013·臨沂一模T34(4)]若用花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)則應(yīng)選擇花粉發(fā)育至單核期的花藥培養(yǎng)成功率最高。()√√3．(2013·湖南32校3月聯(lián)考T421．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的異同植物組織培養(yǎng)技術(shù)花藥離體培養(yǎng)技術(shù)相同點(diǎn)理論依據(jù)植物細(xì)胞的全能性基本過(guò)程影響因素選材、營(yíng)養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等不同點(diǎn)選材體細(xì)胞生殖細(xì)胞(花粉)生殖方式無(wú)性生殖有性生殖1．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的異同植物組織培養(yǎng)技術(shù)2．注意事項(xiàng)①材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝，該部分不僅分生能力強(qiáng)，而且無(wú)病毒侵染。月季花藥的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇花粉發(fā)育過(guò)程中的單核靠邊期的花藥進(jìn)行培養(yǎng)，且在花蕾期，因?yàn)榇藭r(shí)質(zhì)地幼嫩，花瓣未開(kāi)，微生物不易侵入，容易消毒。②剝離花藥時(shí)，盡量不要損傷花藥，同時(shí)還要徹底去除花絲，防止對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生干擾。③外植體消毒：所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是無(wú)菌水。④培養(yǎng)過(guò)程：在初期，菊花的組織培養(yǎng)需光照，月季的花藥培養(yǎng)不需光照，而在后期兩者均需光照。2．注意事項(xiàng)[典例3]某二倍體植物是雜合體，下圖為其花藥中未成熟花粉在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答：[典例3]某二倍體植物是雜合體，下圖為其(1)圖中①表示的是該花粉培養(yǎng)過(guò)程中的________過(guò)程，②表示的是________過(guò)程，X代表的是________，③表示的是________過(guò)程，④表示的是誘導(dǎo)________過(guò)程。

(2)圖中從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，具體通過(guò)哪一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中________的種類(lèi)及其濃度配比，最后獲得的來(lái)源于未成熟花粉的完整植株都稱(chēng)為_(kāi)_______植株(甲)。未成熟花粉經(jīng)培養(yǎng)能形成完整植株，說(shuō)明未成熟花粉具有____________。(1)圖中①表示的是該花粉培養(yǎng)過(guò)程中的___(3)對(duì)植株甲進(jìn)行____________，才能使其結(jié)實(shí)產(chǎn)生后代(乙)，否則植株甲只有通過(guò)________的方式才能產(chǎn)生后代(丙)。乙、丙兩種植株中，能產(chǎn)生可育花粉的是________植株，該植株群體中每一植株產(chǎn)生可育花粉的基因組成種類(lèi)數(shù)為_(kāi)_______種，該群體植株產(chǎn)生可育花粉的基因組成種類(lèi)數(shù)為_(kāi)_______種。花藥培養(yǎng)在育種上的特殊意義是__________________，從而開(kāi)辟育種新途徑。(3)對(duì)植株甲進(jìn)行____________[答案](1)脫分化再分化胚狀體分化(或發(fā)育)生根

(2)激素單倍體細(xì)胞的全能性

(3)染色體加倍無(wú)性繁殖乙(或經(jīng)過(guò)染色體加倍)一多縮短育種周期[答案](1)脫分化再分化胚狀體分化[高考隨堂體驗(yàn)]1．(2010·安徽高考)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代。導(dǎo)致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無(wú)病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過(guò)程如下：請(qǐng)回答：(1)微型繁殖培育無(wú)病毒草莓苗時(shí)，一般選取________作為外植體，其依據(jù)是_________________________。[高考隨堂體驗(yàn)]1．(2010·安徽高考)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁(2)在過(guò)程①中，常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和________，在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加________，有利于外植體啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后2～5d，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是____________________。

(3)在過(guò)程②中，愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是___________________________________________________________________。(2)在過(guò)程①中，常用的MS培養(yǎng)基主要成分包答案：(1)莖尖(或根尖)莖尖(或根尖)病毒極少，甚至無(wú)病毒(2)有機(jī)物植物激素外植體消毒不徹底(3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素類(lèi)物質(zhì)用量與細(xì)胞分裂素類(lèi)物質(zhì)用量的比值偏低植物的組織培養(yǎng)技術(shù)2．(2012·新課標(biāo)全國(guó)卷)為了探究6－BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6－BA和IAA，配制成四種培養(yǎng)基(見(jiàn)下表)，滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結(jié)果如下表。培養(yǎng)基編號(hào)濃度(mg·L－1)m(%)n(個(gè))6－BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.02．(2012·新課標(biāo)全國(guó)卷)為了探究6－BA和IAA對(duì)某菊回答下列問(wèn)題：(1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽的元素可分為_(kāi)___________和________兩類(lèi)。上述培養(yǎng)基中，6－BA屬于________類(lèi)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。(2)在該實(shí)驗(yàn)中，自變量是________，因變量是_________，自變量的取值范圍是________。(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是________號(hào)培養(yǎng)基。(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入________(填“6－BA”或“IAA”)。回答下列問(wèn)題：答案：(1)大量元素微量元素細(xì)胞分裂素(2)IAA濃度再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)

0～0.5mg·L－1

(3)1(4)6－BA植物的組織培養(yǎng)技術(shù)3．(2009·山東高考)人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：3．(2009·山東高考)人參是一種名貴中藥材，其有效成分主(1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行________。接種前，要對(duì)人參根進(jìn)行________。(2)用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做________。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于________污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于________污染。(3)用少量________酶處理愈傷組織，獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。(4)人參皂苷易溶于水溶性(親水性)有機(jī)溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用________方法，操作時(shí)應(yīng)采用________加熱。(1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行______答案：(1)滅菌消毒(2)外植體真菌(霉菌)細(xì)菌(3)果膠(4)萃取(浸取)水浴答案：(1)滅菌消毒植物的組織培養(yǎng)技術(shù)一、菊花的組織培養(yǎng)1．植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程一、菊花的組織培養(yǎng)2．影響植物組織培養(yǎng)的因素[判斷正誤](1)菊花組織培養(yǎng)，一般選擇開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。

()(2)植物激素的濃度可影響細(xì)胞分化，但使用的先后順序及比例不影響組織培養(yǎng)的過(guò)程。

()(3)pH、溫度和光照等也影響植物組織培養(yǎng)。

()××√2．影響植物組織培養(yǎng)的因素[判斷正誤]××3．實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程滅菌(2)外植體消毒：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%無(wú)菌水3．實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程滅菌(2)外植體消毒：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%無(wú)菌(3)接種：始終在

旁進(jìn)行，對(duì)接種工具要用

滅菌。將菊花莖段插入培養(yǎng)基中時(shí)注意

。

(4)培養(yǎng)與移栽：在18℃～22℃的

中培養(yǎng)，得到

后進(jìn)行移栽。二、月季的花藥培養(yǎng)

1．被子植物的花粉發(fā)育過(guò)程酒精燈火焰火焰灼燒不要倒插無(wú)菌箱試管苗四分體時(shí)期單核期(3)接種：始終在2．產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑

3．影響花藥培養(yǎng)的因素

(1)主要因素：

和

。

(2)月季花藥培養(yǎng)一般選擇

期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期。材料的選擇培養(yǎng)基的組成單核2．產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑材料的選擇培養(yǎng)基4．實(shí)驗(yàn)操作[判斷正誤](1)在剝離花藥時(shí)，不要損傷花藥，否則接種后不能脫分化形成愈傷組織。

()(2)與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。

()(3)月季花藥培養(yǎng)得到的都是單倍體植株。

(

)×√×4．實(shí)驗(yàn)操作[判斷正誤]×√×[知識(shí)體系構(gòu)建]①脫分化②再分化③體細(xì)胞④細(xì)胞的全能性⑤細(xì)胞分裂素⑥單核期花粉[知識(shí)體系構(gòu)建]①脫分化②再分化③體細(xì)胞④細(xì)胞的全能性1．(2012·廣東卷T2A)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是植物組織培養(yǎng)。()2．(2011·上海卷T22A)外植體可以來(lái)自植物的任何細(xì)胞。()3．(2011·江蘇卷T16A)愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞。()√植物組織培養(yǎng)的過(guò)程及條件××1．(2012·廣東卷T2A)培育草莓脫毒4．[2012·山東卷T34(1)改編]由外植體經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織，由愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成胚狀體。()5．[2012·山東卷T34(3)]外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是70%。()6．(2012·山東卷T34(2))培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值高時(shí)，有利于芽的分化。()√√×4．[2012·山東卷T34(1)改編]由1．植物細(xì)胞的全能性

(1)細(xì)胞具有全能性的物質(zhì)基礎(chǔ)：生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有本物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全套基因。

(2)植物細(xì)胞只有脫離了植物體，在一定的外部因素作用下，經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂形成愈傷組織，才能表現(xiàn)出全能性。1．植物細(xì)胞的全能性2．植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中脫分化與再分化的比較過(guò)程特點(diǎn)條件脫分化外植體成為愈傷組織排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán)離體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、植物激素、其他適宜條件再分化由愈傷組織成為幼苗或胚狀體結(jié)構(gòu)有根、芽或有生根發(fā)芽的能力2．植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中脫分化與再分化的比較過(guò)程特點(diǎn)條件脫分3．影響植物組織培養(yǎng)的因素

(1)培養(yǎng)材料：①不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大，容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物也容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。②同一種植物材料，材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)培養(yǎng)也有影響。幼齡、保存時(shí)間短的植物材料容易培養(yǎng)成功。3．影響植物組織培養(yǎng)的因素(2)無(wú)菌條件：培養(yǎng)基上有細(xì)菌等微生物存在時(shí)，它們比植物細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖得更快，而且它們會(huì)產(chǎn)生毒素，使培養(yǎng)的植物細(xì)胞很快中毒死亡，因此在培養(yǎng)過(guò)程中要求進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無(wú)菌操作。

(3)植物激素：在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。其中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(2)無(wú)菌條件：①按照不同的順序使用這兩類(lèi)激素，會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(如下表)：使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用分化頻率提高①按照不同的順序使用這兩類(lèi)激素，會(huì)得到不同的②當(dāng)同時(shí)使用這兩類(lèi)激素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。

[關(guān)鍵一點(diǎn)]

無(wú)菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)獲得成功的關(guān)鍵，無(wú)菌技術(shù)包括培養(yǎng)基的滅菌、植物材料(外植體)的消毒和接種時(shí)的無(wú)菌操作。②當(dāng)同時(shí)使用這兩類(lèi)激素時(shí)，兩者用量的比例影響[典例1]

如下圖所示為胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通過(guò)無(wú)菌操作，接入試管后，在一定的條件下，形成試管苗的培育過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：[典例1]如下圖所示為胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通(1)要促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括________和小分子有機(jī)物；激素包括細(xì)胞分裂素和________兩類(lèi)植物激素。

(2)此過(guò)程依據(jù)的原理是________。A和B階段主要進(jìn)行的分裂方式是________，B階段除了細(xì)胞分裂外，還進(jìn)行細(xì)胞________等。

(1)要促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)含有營(yíng)養(yǎng)(3)此過(guò)程要無(wú)菌操作，主要是指對(duì)________進(jìn)行滅菌消毒。B階段需要光照，原因是____________________。

(4)試管苗的根細(xì)胞沒(méi)有葉綠素，而葉的葉肉細(xì)胞具有葉綠素，這是基因________的結(jié)果。

(5)將胡蘿卜組織塊接種到培養(yǎng)基上時(shí)，為防止細(xì)胞污染應(yīng)如何操作？_______________________________________________。(3)此過(guò)程要無(wú)菌操作，主要是指對(duì)_____

[答案]

(1)無(wú)機(jī)鹽生長(zhǎng)素(2)植物細(xì)胞的全能性有絲分裂分化(3)培養(yǎng)基芽發(fā)育成葉，葉肉細(xì)胞中葉綠素的合成需要光照條件(4)選擇性表達(dá)(5)接種要在酒精燈火焰旁進(jìn)行植物的組織培養(yǎng)技術(shù)月季的花藥培養(yǎng)1．(2011·上海卷·T22BC)在無(wú)菌條件下以花粉作為外植體可得到單倍體植株。()2．(2012·江蘇卷·T16B)二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株。()√×月季的花藥培養(yǎng)1．(2011·上海卷·T23．(2013·湖南32校3月聯(lián)考T42(2))確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法有醋酸洋紅法，某些植物的花粉不易著色，需采用焙花青一鉻礬法。()4．[2013·臨沂一模T34(4)]若用花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)則應(yīng)選擇花粉發(fā)育至單核期的花藥培養(yǎng)成功率最高。()√√3．(2013·湖南32校3月聯(lián)考T421．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的異同植物組織培養(yǎng)技術(shù)花藥離體培養(yǎng)技術(shù)相同點(diǎn)理論依據(jù)植物細(xì)胞的全能性基本過(guò)程影響因素選材、營(yíng)養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等不同點(diǎn)選材體細(xì)胞生殖細(xì)胞(花粉)生殖方式無(wú)性生殖有性生殖1．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的異同植物組織培養(yǎng)技術(shù)2．注意事項(xiàng)①材料的選取：菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝，該部分不僅分生能力強(qiáng)，而且無(wú)病毒侵染。月季花藥的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇花粉發(fā)育過(guò)程中的單核靠邊期的花藥進(jìn)行培養(yǎng)，且在花蕾期，因?yàn)榇藭r(shí)質(zhì)地幼嫩，花瓣未開(kāi)，微生物不易侵入，容易消毒。②剝離花藥時(shí)，盡量不要損傷花藥，同時(shí)還要徹底去除花絲，防止對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生干擾。③外植體消毒：所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是無(wú)菌水。④培養(yǎng)過(guò)程：在初期，菊花的組織培養(yǎng)需光照，月季的花藥培養(yǎng)不需光照，而在后期兩者均需光照。2．注意事項(xiàng)[典例3]某二倍體植物是雜合體，下圖為其花藥中未成熟花粉在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答：[典例3]某二倍體植物是雜合體，下圖為其(1)圖中①表示的是該花粉培養(yǎng)過(guò)程中的________過(guò)程，②表示的是________過(guò)程，X代表的是________，③表示的是________過(guò)程，④表示的是誘導(dǎo)________過(guò)程。

(2)圖中從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，具體通過(guò)哪一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中________的種類(lèi)及其濃度配比，最后獲得的來(lái)源于未成熟花粉的完整植株都稱(chēng)為_(kāi)_______植株(甲)。未成熟花粉經(jīng)培養(yǎng)能形成完整植株，說(shuō)明未成熟花粉具有____________。(1)圖中①表示的是該花粉培養(yǎng)過(guò)程中的___(3)對(duì)植株甲進(jìn)行____________，才能使其結(jié)實(shí)產(chǎn)生后代(乙)，否則植株甲只有通過(guò)________的方式才能產(chǎn)生后代(丙)。乙、丙兩種植株中，能產(chǎn)生可育花粉的是________植株，該植株群體中每一植株產(chǎn)生可育花粉的基因組成種類(lèi)數(shù)為_(kāi)_______種，該群體植株產(chǎn)生可育花粉的基因組成種類(lèi)數(shù)為_(kāi)_______種。花藥培養(yǎng)在育種上的特殊意義是__________________，從而開(kāi)辟育種新途徑。(3)對(duì)植株甲進(jìn)行____________[答案](1)脫分化再分化胚狀體分化(或發(fā)育)生根

(2)激素單倍體細(xì)胞的全能性

(3)染色體加倍無(wú)性繁殖乙(或經(jīng)過(guò)染色體加倍)一多縮短育種周期[答案](1)脫分化再分化胚狀體分化[高考隨堂體驗(yàn)]1．(2010·安徽高考)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代。導(dǎo)致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無(wú)病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過(guò)程如下：請(qǐng)回答：(1)微型繁殖培育無(wú)病毒草莓苗時(shí)，一般選取________作為外植體，其依據(jù)是_________________________。[高考隨堂體驗(yàn)]1．(2010·安徽高考)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁(2)在過(guò)程①中，常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和________，在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加________，有利于外植體啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后2～5d，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染