《生物材料檢測(cè)》課件

生物材料檢測(cè)生物材料檢測(cè)一、基本術(shù)語

生物材料是生物體的體液(血液)、排泄物(尿液、呼出氣)、毛發(fā)和試驗(yàn)動(dòng)物臟器組織的總稱。

生物材料檢驗(yàn)是研究生物材料中化學(xué)物質(zhì)或其代謝產(chǎn)物或生物化學(xué)指標(biāo)的分析測(cè)定方法的科學(xué)。

生物監(jiān)測(cè)是指定期(有計(jì)劃)地檢測(cè)人體生物材料中化學(xué)物質(zhì)或其代謝產(chǎn)物的含量或由它們所導(dǎo)致的無害生物效應(yīng)水平，以評(píng)價(jià)人體接觸化學(xué)物質(zhì)的程度及對(duì)健康的影響。一、基本術(shù)語生物材料是生物體的體液(血液)、排泄物(正常值是指正常人(無明顯肝、腎及血液系統(tǒng)疾病，無職業(yè)有害因素接觸史)的生物樣品中某種成分的含量或生化指標(biāo)值。常通過對(duì)某地區(qū)的正常人抽樣調(diào)查所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，取95%上限值(職業(yè)接觸只引起升高的時(shí)候)或97.5%上下限之間值(過高或過低均有一定的危害的時(shí)候)。正常值是指正常人(無明顯肝、腎及血液系統(tǒng)疾病，無職業(yè)有害因素生物接觸限值是為保護(hù)作業(yè)人員健康，對(duì)生物材料(尿、血、呼出氣)中污染物或其代謝產(chǎn)物所規(guī)定的最高容許濃度，或某些生物效應(yīng)指標(biāo)改變所容許的范圍。其值相當(dāng)于健康工人吸入或接觸最高容許濃度的毒物時(shí)，生物材料中被測(cè)物的水平。生物接觸限值是為保護(hù)作業(yè)人員健康，對(duì)生物材料(尿、血、呼出氣二、生物材料檢驗(yàn)的意義為職業(yè)中毒診斷和治療效果觀察提供重要的參考指標(biāo)，為地方病和營(yíng)養(yǎng)素缺乏病的診斷防治提供依據(jù)，亦為制訂衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、正常值或生物接觸限值提供資料。二、生物材料檢驗(yàn)的意義為職業(yè)中毒診斷和治療效果觀察提供重要的三、生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)及選擇1．生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)主要有以下三個(gè)方面：(1)生物材料中化學(xué)物質(zhì)的檢驗(yàn)：如尿中Pb、Hg、Cd、Cr、Ni、V、Se、As、F、I、五氯酚、殺蟲脒的檢驗(yàn)，血中Pb、Cr、Se、Zn、Cu、Fe、Ca、Mg的檢驗(yàn)，呼出氣中苯、甲苯、氯乙烯、三氯乙烯等的檢驗(yàn)；三、生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)及選擇1．生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)生物材料檢(2)生物材料中化學(xué)物質(zhì)代謝產(chǎn)物的檢驗(yàn)：化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后，在體內(nèi)被吸收、代謝產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，需要對(duì)生物材料中某些代謝產(chǎn)物進(jìn)行檢驗(yàn)。如尿中酚、馬尿酸、甲基馬尿酸、硫撐雙乙酸、三氯乙酸的檢驗(yàn)，血中25-羥維生素D3，1,25-二羥維生素D3的測(cè)定等。(2)生物材料中化學(xué)物質(zhì)代謝產(chǎn)物的檢驗(yàn)：化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后(3)生物效應(yīng)指標(biāo)的檢驗(yàn)：化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后，在體內(nèi)引起某些生化、生理行為或其他方面的改變?？梢赃x擇適當(dāng)?shù)男?yīng)指標(biāo)作為接觸有毒物質(zhì)的檢測(cè)指標(biāo)。如鉛吸收或鉛中毒時(shí)，尿中d-氨基乙酰丙酸(d-ALA)↑、紅細(xì)胞中游離原卟啉(FEP)↑、血中鋅原卟啉(ZPP)↑；有機(jī)磷農(nóng)藥中毒時(shí)，全血膽堿酯酶活性降低。(3)生物效應(yīng)指標(biāo)的檢驗(yàn)：化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后，在體內(nèi)引起某2．生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)的選擇原則以化學(xué)物質(zhì)的代謝動(dòng)力學(xué)和監(jiān)測(cè)目的為基礎(chǔ)，根據(jù)其在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄情況選擇指標(biāo)，要求所選擇的指標(biāo)有一定的特異性和靈敏度，與接觸劑量有較好的相關(guān)關(guān)系。2．生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)的選擇原則以化學(xué)物質(zhì)的代謝動(dòng)力學(xué)和監(jiān)測(cè)目四、生物材料檢驗(yàn)結(jié)果的判定

目前多采用與正常值或生物接觸限值相比較進(jìn)行判定。由于受地理?xiàng)l件、環(huán)境污染情況及不同測(cè)定方法結(jié)果間差異等因素的影響，同一成分的正常值可因地區(qū)、方法的不同而不同。因此，在選用正常值時(shí)，應(yīng)注意所采用的測(cè)定方法和地區(qū)差異。某些成分的含量除受職業(yè)接觸的影響外，還與受檢者的年齡、性別、生理狀態(tài)、飲食和用藥情況等因素有關(guān)，判定結(jié)果時(shí)應(yīng)加以注意。四、生物材料檢驗(yàn)結(jié)果的判定目前多采用與正常值或生物接五、生物樣品的收集和保存生物樣品的采集和保存是整個(gè)生物材料檢驗(yàn)的重要操作步驟，必須注意選擇適當(dāng)?shù)纳飿悠贩N類和采樣時(shí)間，使生物材料檢驗(yàn)的結(jié)果能反映真實(shí)情況；采用正確的采樣和保存方法，防止樣品在采樣、運(yùn)輸及保存過程中變質(zhì)、受污染，待測(cè)成分損失，保證測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。五、生物樣品的收集和保存生物樣品的采集和保存是整個(gè)生物材料檢1．樣品的種類生物樣品的種類較多，尿液、血液、呼出氣、胃液、膽汁、汗液、唾液、乳汁、糞便、毛發(fā)、指甲、骨以及動(dòng)物臟器組織等均可作為不同檢驗(yàn)?zāi)康牡臉悠?。在選擇生物材料的種類時(shí)，要求：(1)

選用的生物材料中被測(cè)物的濃度與環(huán)境接觸水平、或與健康效應(yīng)有劑量反應(yīng)關(guān)系；(2)樣品和待測(cè)成分(指標(biāo))足夠穩(wěn)定以便于運(yùn)輸和保存；1．樣品的種類生物樣品的種類較多，尿液、血液、呼出氣、胃液、(3)采集生物樣品對(duì)人體無損害，能為受檢者所接受。目前用得最多的生物材料是尿液，其次是血液和呼出氣。頭發(fā)生長(zhǎng)非常緩慢，所采集的樣品實(shí)際上是不同時(shí)期的混合樣，因此，其測(cè)定值與接觸劑量的關(guān)系無法確定，這就失去了作為生物監(jiān)測(cè)樣品的意義，主要用作代謝極慢金屬的定性檢驗(yàn)。(3)采集生物樣品對(duì)人體無損害，能為受檢者所接受。2．樣品的采集和保存(1)采樣時(shí)間：在很多情況下，生物材料中待測(cè)物的濃度會(huì)隨時(shí)間的伸延而變化，變化的快慢與物質(zhì)在體內(nèi)的代謝過程有關(guān)。半衰期短(幾分鐘~幾小時(shí))的待測(cè)物在各種組織中的水平變化很快，因此對(duì)采用時(shí)間有嚴(yán)格規(guī)定；半衰期長(zhǎng)(幾十小時(shí)以上)的毒物或代謝產(chǎn)物，它們?cè)诟鞣N組織中的濃度反映較長(zhǎng)時(shí)間的接觸程度，所以對(duì)采樣時(shí)間的限制就不必太嚴(yán)格。2．樣品的采集和保存(1)采樣時(shí)間：在很多情況下，生物材料中班前：進(jìn)入工作崗位前1h班中：開始工作后2h至下班前1h班末：下班前1h之內(nèi)班后：下班后1h之內(nèi)班前：進(jìn)入工作崗位前1h(2)采樣環(huán)境采樣時(shí)，工人應(yīng)離開生產(chǎn)崗位，脫去工作服，洗凈手、臉及取樣部位，在清潔、無污染的場(chǎng)所取樣。(2)采樣環(huán)境采樣時(shí)，工人應(yīng)離開生產(chǎn)崗位，脫去工作服，洗凈手(3)采樣用的容器根據(jù)待測(cè)成分、樣品種類及保存條件選擇容器。對(duì)無機(jī)金屬化合物，可選用高壓聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯、石英、硬質(zhì)玻璃等材料制成的容器，在采樣前，將容器用酸液浸泡24h，洗凈晾干；如測(cè)定有機(jī)化合物，采樣用的容器應(yīng)選用玻璃或聚乙烯制品，避免使用橡膠和添加有染料的制品。(3)采樣用的容器根據(jù)待測(cè)成分、樣品種類及保存條件選擇容器。(4)樣品的保存采得的樣品應(yīng)盡快分析測(cè)定。在樣品貯存及運(yùn)輸時(shí)，除要防止樣品變質(zhì)、不引進(jìn)干擾物質(zhì)外，還要避免樣品中待測(cè)物質(zhì)的揮發(fā)和在容器上吸留損失。樣品的保存方法要與分析方法相配合。尿樣一般在4℃下可保存2周，在-20℃下一般至少可保存2月。所有樣品最好是在冷藏條件下運(yùn)輸及保存。注意需要冷凍保存的樣品，不宜用玻璃瓶盛裝，以免凍裂。(4)樣品的保存采得的樣品應(yīng)盡快分析測(cè)定。在樣品貯存及運(yùn)輸時(shí)(5)采樣記錄采樣后應(yīng)立即填寫采樣記錄，填寫的項(xiàng)目應(yīng)包括：樣品的編號(hào)，受試者的姓名、性別、年齡、工種、職業(yè)史、個(gè)人生活習(xí)慣飲食、飲酒、吸煙等，采樣時(shí)間、地點(diǎn)、環(huán)境、方法，采樣人等。同時(shí)在樣品瓶是貼上標(biāo)簽。(5)采樣記錄采樣后應(yīng)立即填寫采樣記錄，填寫的項(xiàng)目應(yīng)包括：樣六、常見檢驗(yàn)樣品

（一）尿樣

多數(shù)物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物在尿中的含量與其在血中的濃度有較好的相關(guān)，尿中的含量可以較好的反映血液中物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物的濃度，尿樣收集比較方便，因此，常采用尿液進(jìn)行檢驗(yàn)。為使收集的尿樣具有代表性，使分析結(jié)果能較好地反映實(shí)際情況，用尿液作為生物監(jiān)測(cè)樣品時(shí)須注意以下幾點(diǎn)：六、常見檢驗(yàn)樣品

（一）尿樣多數(shù)物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物在尿1．尿樣的收集(1)某些物質(zhì)隨尿液排出無規(guī)律性，一日間不同時(shí)間尿中排出的量波動(dòng)較大，在實(shí)際工作中，可根據(jù)測(cè)定目的、要求和條件，收集隨機(jī)尿樣、晨尿或全天(24小時(shí))尿樣進(jìn)行分析；1．尿樣的收集(1)某些物質(zhì)隨尿液排出無規(guī)律性，一日間不同時(shí)l

隨機(jī)尿樣：收取方便，但由于尿中待測(cè)物的濃度波動(dòng)較大，分析結(jié)果往往不能反映實(shí)際情況；l

24小時(shí)尿樣：收集全天24小時(shí)尿液混勻后，取適量進(jìn)行分析，計(jì)算時(shí)以24小時(shí)排出某成分的總量計(jì)，故所得結(jié)果不受某些成分排出無規(guī)律的影響，也不受飲水和排汗的影響，但收集24小時(shí)尿樣較麻煩，在夏天尿樣易腐?。籰晨尿：收集受檢者早晨起床后的第一次尿樣進(jìn)行分析，對(duì)多數(shù)測(cè)定能反映實(shí)際情況，收集方便，應(yīng)用最多。l隨機(jī)尿樣：收取方便，但由于尿中待測(cè)物的濃度波動(dòng)較大，分析(2)某些有毒有害物質(zhì)的排泄速度快，當(dāng)停止接觸后，尿中被檢物質(zhì)的含量顯著降低，欲了解機(jī)體接觸該物質(zhì)的情況，宜在工作班前、班中、班末或班后分別留取尿樣進(jìn)行分析。(2)某些有毒有害物質(zhì)的排泄速度快，當(dāng)停止接觸后，尿中被檢物2．尿樣的保存

通常將隨機(jī)一次尿樣或晨尿收集于清洗干凈的500m1硬質(zhì)玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶中；24小時(shí)尿樣收集于清潔的2L硬質(zhì)玻璃瓶中。尿樣的保存應(yīng)根據(jù)測(cè)定項(xiàng)目選擇條件，若測(cè)定金屬元素如鉛、汞等的尿樣，可在1L尿樣中加入5ml硝酸，以防腐，防止金屬鹽類沉淀、汞揮發(fā)及容器壁吸附，收集尿樣后如不能及時(shí)分析，應(yīng)將尿樣貯于冰箱內(nèi)，并根據(jù)需要加入適當(dāng)試劑以增加待測(cè)成分的穩(wěn)定性。2．尿樣的保存通常將隨機(jī)一次尿樣或晨尿收集于清洗干凈3．測(cè)定結(jié)果的校正尿中待測(cè)成分的測(cè)定結(jié)果一般以mg/L表示，但這種結(jié)果表示方法易受排尿量的影響，排尿量又與飲水量和排汗量有關(guān)，為了減少飲水量和排汗量的影響，使一次尿樣和24小時(shí)尿樣的結(jié)果較接近，需對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行校正。校正方法有比重校正法和肌酐校正法兩種。

(1)比重校正法：將尿中被測(cè)物濃度校正為標(biāo)準(zhǔn)比重(我國(guó)規(guī)定尿樣的標(biāo)準(zhǔn)比重為1.020))下的濃度，校正公式為：3．測(cè)定結(jié)果的校正尿中待測(cè)成分的測(cè)定結(jié)果一般以mg/L表示，式中C校--經(jīng)校正后尿中待測(cè)成分的濃度(mg/L)；

C--測(cè)得的尿中待測(cè)成分的濃度(mg/L)；

1.020--為我國(guó)采用的尿的標(biāo)準(zhǔn)比重；’

d--實(shí)際測(cè)得的尿樣比重；

K--校正尿比重到1.020的系數(shù)。式中C校--經(jīng)校正后尿中待測(cè)成分的濃度(mg/L)；(2)肌酐校正法

在一般情況下飲食、飲水量和利尿劑對(duì)肌酐的排出率沒有太大影響，健康人一天排尿所排出的肌酐量變化很小，一般在1．8g左右。因此，可用經(jīng)尿液排出1g肌酐所相應(yīng)的待測(cè)成分的量來表示尿中待測(cè)物的濃度或經(jīng)尿液排出1.8g肌酐所相應(yīng)的待測(cè)成分的量來代表全天尿中待測(cè)成分的含量。校正公式為：(2)肌酐校正法在一般情況下飲食、飲水量和利尿劑《生物材料檢測(cè)》課件（二）、血液

1.血作為生物檢測(cè)樣品

毒物無論從何種途徑進(jìn)入機(jī)體內(nèi)，都要被吸收入血液，然后分布全身各器官或被解毒代謝、或排出體外，檢測(cè)血液中毒物或其代謝產(chǎn)物的濃度可反映機(jī)體接觸該毒物的程度，并與體內(nèi)毒物吸收的量呈正相關(guān)。血樣有待測(cè)成分的含量較穩(wěn)定，個(gè)體差異小，取樣污染機(jī)會(huì)少，不受腎功能影響等優(yōu)點(diǎn)。因此，測(cè)定血液中毒物或代謝產(chǎn)物的含量更有意義。但靜脈取血手續(xù)煩瑣，受檢者不易接受，在實(shí)際工作中，血樣不如尿樣應(yīng)用普遍。近年來，隨著分析技術(shù)的不斷發(fā)展，方法靈敏度的提高，減少了血樣的用量，以耳垂取血代替靜脈取血，既易為受檢者所接受，也給采血工作帶來了方便。（二）、血液

1.血作為生物檢測(cè)樣品毒物無論從何種途2.血樣的采集和采樣注意事項(xiàng)

血樣可用全血、血漿或血清。全血：用注射器或取血管采集血液注入有抗凝劑的試管中，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)使血液與抗凝劑充分混勻。血漿和紅細(xì)胞：將血液緩慢注入有抗凝劑的試管中，室溫下放置或離心，分離后的上清液即為血漿，沉淀的紅色部分為紅細(xì)胞。血清：將血液緩慢注入干燥試管中，室溫下放置15~30min，離心，分離后的上清液即為血清。2.血樣的采集和采樣注意事項(xiàng)血樣可用全血、血漿或血清。在采集靜脈血時(shí)要避免污染，防止溶血，對(duì)采血部位的皮膚應(yīng)先用水洗凈。采集末梢血時(shí)，不得用力擠壓采血部位，要盡量讓其自然流出，并棄去第一滴血，避免因組織液滲出將血液稀釋。在采集靜脈血時(shí)要避免污染，防止溶血，對(duì)采血部位的皮膚應(yīng)先用水（三）、呼出氣

1.呼出氣作為生物檢測(cè)樣品

揮發(fā)性毒物經(jīng)呼吸道進(jìn)人機(jī)體后，在肺泡氣與肺部血液之間達(dá)到血?dú)鈨上嗥胶?，即揮發(fā)性物質(zhì)在肺泡氣相的分壓和在肺末端毛細(xì)血管血液中的分壓是相等的。因此，對(duì)呼出氣或肺泡氣中揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行分析，可反映人體的攝入水平和環(huán)境空氣中的水平。（三）、呼出氣

1.呼出氣作為生物檢測(cè)樣品揮發(fā)性毒物呼出氣作為評(píng)價(jià)接觸揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)的生物監(jiān)測(cè)樣品，其優(yōu)點(diǎn)是樣品收集方便，可以連續(xù)采樣，樣品中干擾物質(zhì)少，易為受試者所接受。呼出氣樣品有混合呼出氣和終末呼出氣兩種。盡力吸氣后用最大力量呼氣至不能再呼氣為止所呼出的全部呼出氣為混合呼出氣；先盡力吸氣，在平和呼氣后，再盡力呼氣至不能呼氣為止的最后一段呼出氣為終末呼出氣。呼出氣作為評(píng)價(jià)接觸揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)的生物監(jiān)測(cè)樣品，其優(yōu)點(diǎn)是樣品2.樣品的采集(1)采樣袋或注射器直接采樣法，操作簡(jiǎn)便，適用于高含量樣品，所采樣品不便保存。

(2)活性炭吸附管在低溫下吸附采樣法，采樣過程中待測(cè)物質(zhì)被吸附而濃集在活性炭上，適用于較低含量樣品，所采樣品可以保存1周。2.樣品的采集(1)采樣袋或注射器直接采樣法，操作簡(jiǎn)便，適3.采集呼出氣時(shí)注意事項(xiàng)(1)所用的采樣器對(duì)被測(cè)物的吸附小，在室溫下的密封性好；

(2)從揮發(fā)性物質(zhì)的呼吸排出曲線可以看出，在停止接觸后，呼出氣中物質(zhì)的量(肺排泄率)與脫離接觸后的時(shí)間呈指數(shù)關(guān)系，也就是初始肺排泄率很高，隨脫離接觸后時(shí)間的延長(zhǎng)而迅速下降，因此應(yīng)在接觸期間或接觸后短期內(nèi)采樣。3.采集呼出氣時(shí)注意事項(xiàng)(1)所用的采樣器對(duì)被測(cè)物的

七生物樣品的預(yù)處理

生物樣品的成分復(fù)雜，在分析前需對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，以除去雜質(zhì)，濃集待測(cè)成分，分離或消除干擾物質(zhì)。在測(cè)定金屬和非金屬成分時(shí)，需將樣品經(jīng)過無機(jī)化處理，使其中的有機(jī)物完全破壞，待測(cè)成分轉(zhuǎn)變成為某一價(jià)態(tài)；當(dāng)待測(cè)成分與干擾成分共存時(shí)，或待測(cè)成分的含量較低時(shí)，需通過溶劑萃取、揮發(fā)和蒸餾、共沉淀或采取固相萃取等方法將待測(cè)成分與干擾物質(zhì)相分離，達(dá)到分離、凈化和濃縮的目的。

七生物樣品的預(yù)處理

生物樣品的成分復(fù)雜，在分析前需對(duì)（一）、無機(jī)化方法破壞生物樣品中有機(jī)物的方法有濕消化法和干灰化法，可根據(jù)樣品及待測(cè)元素的性質(zhì)選用。（一）、無機(jī)化方法破壞生物樣品中有機(jī)物的方法有濕消化法和干灰1.濕消化法用強(qiáng)氧化性酸和其他氧化劑，結(jié)合加熱，使樣品中所有有機(jī)物破壞，待測(cè)成分變成易溶的鹽類。常用的氧化性酸有硝酸、硫酸和高氯酸，氧化劑有高錳酸鉀和過氧化氫等。(1)硝酸-高氯酸法：氧化能力強(qiáng)，反應(yīng)速度快，消化溫度低，揮發(fā)損失小。由于硝酸和高氯酸的沸點(diǎn)均較低，過量的酸液容易揮發(fā)除去。(2)硝酸-高氯酸-鹽酸法：本法用于示波極譜法測(cè)定尿中鉛鎘等元素的測(cè)定。加入鹽酸的目的是與錫生成氯化物蒸發(fā)除去，消除錫對(duì)極譜測(cè)定的干擾。1.濕消化法用強(qiáng)氧化性酸和其他氧化劑，結(jié)合加熱，使樣品中所有(3)硝酸-高氯酸-硫酸法：是應(yīng)用最廣泛的一種有機(jī)物破壞方法，適用于除揮發(fā)性元素外的金屬毒物測(cè)定時(shí)，各種生物樣品的處理。加入硫酸后，可適當(dāng)?shù)靥岣呦瘻囟龋浞职l(fā)揮硝酸和高氯酸的氧化作用，防止燒干。(1)

硫酸-高錳酸鉀法：利用高錳酸鉀-硫酸在低溫下氧化尿中有機(jī)物，再用鹽酸羥胺或過氧化氫將過量的高錳酸鉀褪色，此法專用于分析尿汞時(shí)樣品的消化。(3)硝酸-高氯酸-硫酸法：是應(yīng)用最廣泛的一種有機(jī)物破壞方法2．干灰化法干灰化法操作簡(jiǎn)便，加入試劑少，空白值低，特別適用于大批樣品的處理。但干灰化法使用的溫度高，待測(cè)成分易揮發(fā)損失，同時(shí)待測(cè)成分被坩堝材料吸留，難于溶出，使回收率降低。為了幫助灰化，降低待測(cè)成分的揮發(fā)和吸留損失，可加入適當(dāng)?shù)闹一瘎?，如硝酸、硫酸、硝酸鎂和氧化鎂、氫氧化鉀等。2．干灰化法干灰化法操作簡(jiǎn)便，加入試劑少，空白值低，特別適用（二）、分離方法

1．

溶劑萃取法利用待測(cè)成分或待測(cè)成分與螯合劑形成的螯合物在兩種互不相溶的溶劑中溶解度不同，也即是在兩相問的分配系數(shù)不同，通過萃取使待測(cè)成分(或螯合物)進(jìn)入有機(jī)相，干擾成分仍留在水相，而達(dá)到分離、凈化和濃縮目的。該法所需設(shè)備簡(jiǎn)單，應(yīng)用十分廣泛，但該法需使用的有機(jī)溶劑易揮發(fā)、易燃、有毒，對(duì)操作者的健康有一定影響。（二）、分離方法

1．

溶劑萃取法利用待測(cè)成分或待測(cè)成分2．揮發(fā)法和蒸餾法這是一類利用物質(zhì)的揮發(fā)性來進(jìn)行分離分析的方法。(1)擴(kuò)散法：在塑料擴(kuò)散小盒盒底外層的一邊加樣品，另一邊加釋放劑，內(nèi)層加吸收液，然后加蓋，旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)小盒，使外層液體接觸混勻，置小盒于30℃擴(kuò)散數(shù)小時(shí)，取吸收液作分析。此法可用于尿氟的測(cè)定。2．揮發(fā)法和蒸餾法這是一類利用物質(zhì)的揮發(fā)性來進(jìn)行分離分析的方(2)靜式頂空分析法：將樣品裝入帶密封蓋的小瓶中，立即蓋嚴(yán)，將小瓶置加熱器內(nèi)于60~80℃下保溫一定時(shí)間，使瓶中氣液兩相達(dá)到平衡，再用注射器抽取瓶中氣體注入氣相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。此法比較簡(jiǎn)便，干擾少，適合于生物樣品中揮發(fā)性有機(jī)物的分析。(3)動(dòng)式頂空法：取少量樣品放在一個(gè)密閉的容器中，適當(dāng)加熱并向液體中連續(xù)吹人氮?dú)?，將易揮發(fā)性的成分吹出帶入另一個(gè)盛有吸收液的吸收管中，或在冷阱中冷凝下來，然后進(jìn)行分析。此法對(duì)樣品中待測(cè)成分的分離較徹底，并有一定的富集作用。(2)靜式頂空分析法：將樣品裝入帶密封蓋的小瓶中，立即蓋嚴(yán)，(4)氫化物發(fā)生法：在酸性條件下，待測(cè)成分被新生態(tài)氫(可由鋅粒或硼氫化鈉與酸反應(yīng)產(chǎn)生)還原生成氣體氫化物，將氫化物用吸收液吸收顯色后分光光度法測(cè)定，或直接導(dǎo)入原子化器中原子化進(jìn)行原子吸收分光光度測(cè)定。此法可以去除大量干擾物質(zhì)，已廣泛用于鍺、錫、鉛、砷、銻、鉍、硒和碲等元素的分離分析。(1)

蒸餾法：通過加熱蒸餾或水蒸氣蒸餾，使樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)隨水蒸氣一起被帶出來，收集一定的餾出液進(jìn)行分析。(4)氫化物發(fā)生法：在酸性條件下，待測(cè)成分被新生態(tài)氫(可由鋅3．固相萃取法(solidphaseextraction，SPE)是一類基于液相色譜分離原理的樣品制備技術(shù)。當(dāng)樣品溶液通過預(yù)先填充有吸著劑的小柱時(shí)，待測(cè)成分被吸著劑截留，經(jīng)適當(dāng)?shù)娜軇┫礈斐タ赡芪降臉悠坊w，然后用一種選擇性的溶劑將待測(cè)成分洗脫，達(dá)到分離、凈化和濃縮的目的。這類方法簡(jiǎn)便快速有效，使用有機(jī)溶劑少，在痕量分析中得到了廣泛應(yīng)用。(1)吸附SPE：此法是根據(jù)待測(cè)成分和樣品基體在吸附劑上的吸附能力不同進(jìn)行分離的，常用的固體吸附劑有硅膠、氧化鋁、活性炭、硅鎂吸附劑及聚苯乙烯樹脂。3．固相萃取法(solidphaseextraction(2)分配SPE：是根據(jù)物質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑間分配系數(shù)不同來實(shí)現(xiàn)分離。將適當(dāng)?shù)囊后w涂漬或鍵合到載體上制成固相材料，目前使用最多的是硅膠鍵合材料，如C18鍵合硅膠、C8鍵合硅膠、氰基丙基鍵合硅膠及氨基鍵合硅膠等。(3)離子交換SPE：是利用不溶的固體離子交換劑與溶液中帶相同電荷離子間的交換勢(shì)不同來進(jìn)行分離的。(2)分配SPE：是根據(jù)物質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑間分配系數(shù)不(4)凝膠過濾SPE：凝膠是高分子物質(zhì)的溶液在一定條件下形成的半固體胨狀物，它具有多孔性的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。分子大小不同物質(zhì)的溶液通過凝膠時(shí)，大分子物質(zhì)被排阻，流出速度快，而小分子物質(zhì)自由擴(kuò)散于凝膠顆粒的孔穴中，流出速度慢。(4)凝膠過濾SPE：凝膠是高分子物質(zhì)的溶液在一定條件下形成(6)螯合SPE：通過反應(yīng)將螯合劑偶聯(lián)到載體上制成螯合離子交換劑，如用巰基乙酸對(duì)棉花纖維素的羥基進(jìn)行多相酯化反應(yīng)，而將巰基連接在纖維素分子上制成巰基棉，利用巰基與不同離子形成螯合物的穩(wěn)定性差異，可以用于Se、As、Hg、Sn、Cu、Pb、Cd、Co、Ni等離子的分離和富集。巰基棉的制備簡(jiǎn)單、操作方便、富集元素多、富集倍數(shù)大、吸附解析性能好、通過控制溶液的酸度或pH，可有很好的選擇性(6)螯合SPE：通過反應(yīng)將螯合劑偶聯(lián)到載體上制成螯合離子交(6)親和色譜法：將對(duì)待測(cè)成分特異的抗體偶聯(lián)到載體上制成親和材料，當(dāng)樣品溶液通過親和材料時(shí)，待測(cè)成分與抗體發(fā)生特異性反應(yīng)被截留，與雜質(zhì)相分離，然后用適當(dāng)?shù)娜軇┫疵摯郎y(cè)成分。此法的特異性高，凈化和濃縮效果好。(6)親和色譜法：將對(duì)待測(cè)成分特異的抗體偶聯(lián)到載體上制成親和(三)制備分析樣液1.稀釋：以適當(dāng)溶液稀釋樣品后直接測(cè)定。它主要用于液體樣品，也可用于固體樣品。本法的特點(diǎn)是不需進(jìn)行化學(xué)處理，大大簡(jiǎn)化了分析流程，減小了沾污危險(xiǎn)，基體干擾嚴(yán)重。合理的稀釋比取決于樣品中待測(cè)元素的含量、測(cè)定方法的檢出限以及樣品組成的復(fù)雜程度。在靈敏度滿足分析要求的前提下，可選擇較高的稀釋比。(三)制備分析樣液1.稀釋：以適當(dāng)溶液稀釋樣品后直接測(cè)定。它

常用的稀釋劑有水、稀酸溶液、含表面活性劑（如曲通x-100）或有機(jī)溶劑（如正丁醇、乙酸乙酯）的水溶液、基體改進(jìn)劑的水溶液。為了減緩基體效應(yīng)，多用標(biāo)準(zhǔn)加入法定量。例如：血清可用水、1%硝酸、6%正丁醇等稀釋后以FAAS法測(cè)定其中的金屬含量；全血多用含曲通x-100的水溶液稀釋；毛發(fā)、骨、指甲等可先用四甲基氫氧化銨溶解，再適當(dāng)稀釋后測(cè)定。常用的稀釋劑有水、稀酸溶液、含表面活性劑（如曲通2.提取法：用酸或其他化學(xué)試劑直接從樣品中提取待測(cè)元素。本法的突出優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便快速，缺點(diǎn)是有時(shí)提取不完全。使用本法時(shí)應(yīng)注意：元素提取效率是否滿足分析要求，共存有機(jī)物對(duì)測(cè)定是否有影響。3.加壓分解：密閉容器中的濕分解方法。其特點(diǎn)有（1）提高了酸利用率；（2）有效防止了易揮發(fā)元素的揮發(fā)損失；（3）降低了試劑空白和減少了沾污危險(xiǎn)；（4）對(duì)樣品的粒徑要求不嚴(yán)，通常<1mm即可；（5）可能分解不完全；（6）樣品處理量小，通常<0.5g；6）容器密封性有待改進(jìn)，溫度<150℃

。2.提取法：用酸或其他化學(xué)試劑直接從樣品中提取待測(cè)元素。本法4.微波分解：用微波爐進(jìn)行樣品分解。其特點(diǎn)是（1）處理時(shí)間短；（2）樣品分解完全；（3）試劑用量少；（4）沾污危險(xiǎn)小。

4.微波分解：用微波爐進(jìn)行樣品分解。其特點(diǎn)是（1）處理時(shí)間短微波是指頻率為300~300000MHz的電磁波。微波在傳送中遇到金屬等導(dǎo)體會(huì)發(fā)生反射作用，遇到絕緣體則主要發(fā)生穿透作用，介電物質(zhì)則位于兩者之間，對(duì)微波具有吸收、穿透和反射作用。樣品、溶劑（水、酸等）或脂肪是吸收微波的介質(zhì)。微波穿透容器直接輻射到樣品和溶劑中，使分子極化，高頻輻射又使極化分子快速轉(zhuǎn)動(dòng)，產(chǎn)生猛烈的摩擦、碰撞、振動(dòng)和撕裂，從而使溫度急劇上升，并不斷更新樣品與溶液的接觸界面，劇烈攪拌溶液，加速了樣品的分解破壞微波是指頻率為300~300000MHz的電磁波。微波在傳送

微波溶樣的設(shè)備由微波爐、溶樣器皿及通風(fēng)、排氣防腐等組成。微波爐由磁控管、加熱腔體、可旋轉(zhuǎn)的負(fù)載盤和控制功率、時(shí)間等電子元件組成。操作時(shí)切忌放入金屬器皿，以免損壞微波爐，也不應(yīng)在負(fù)載很小或空載下使用微波爐，否則微波反射回磁控管使其發(fā)熱而縮短壽命，必要時(shí)可在爐內(nèi)放一個(gè)盛有50~100ml水的燒杯吸收過剩的能量。

微波溶樣的設(shè)備由微波爐、溶樣器皿及通風(fēng)、排氣

進(jìn)行微波溶樣時(shí)，應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)優(yōu)化所需的時(shí)間和功率；分解富含有機(jī)物的樣品時(shí)，可讓易氧化的物質(zhì)先分解后再用微波爐分解，或用小功率遞增多步加熱的方式分解，以免反應(yīng)劇烈。進(jìn)行微波溶樣時(shí)，應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)優(yōu)化所需的時(shí)間和功5.酶分解：利用酶使樣品分解。本法特別適于生物樣品，其突出之處是作用條件溫和，因而能有效防止揮發(fā)損失，他還可維持金屬離子的價(jià)態(tài)，特別適于形態(tài)分析。例如將胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草蛋白酶的混合物與肉作用，于pH7.8和37℃下水解蛋白，可分別測(cè)定樣品中的Cr(IV)和Cr(III)；枯草桿菌蛋白酶可從蛋白質(zhì)中釋放出與蛋白質(zhì)結(jié)合的化合物而又不完全溶解蛋白質(zhì)，枯草桿菌蛋白酶可從豬腎中釋放出5mg

/kg水平的黃曲霉毒素。5.酶分解：利用酶使樣品分解。本法特別適于生物樣品，其突出之八檢驗(yàn)項(xiàng)目示例根據(jù)元素在機(jī)體內(nèi)的含量，可分成宏量元素和微量元素，凡含量為機(jī)體總重量1/10000者稱為宏量元素，<1/10000者為微量元素；根據(jù)微量元素在機(jī)體中的作用，又可分成必需的、治療用和有毒的三類，有關(guān)微量元素與人體健康關(guān)系的研究已成為一個(gè)活躍領(lǐng)域。經(jīng)常進(jìn)行檢驗(yàn)的無機(jī)元素有鉛、鎘、汞、錳、砷、氟、碘，其次為釩、鉻、鎳、鋅、硒等。八檢驗(yàn)項(xiàng)目示例根據(jù)元素在機(jī)體內(nèi)的含量，可分成宏量元素和微量

（—）

尿鉛和血鉛的測(cè)定

（—）尿鉛和血鉛的測(cè)定

1.接觸機(jī)會(huì)：鉛的工業(yè)用途很廣，主要用于制造合金、鉛管、鉛箔、鉛板、蓄電池、印刷鑄字、X射線和g射線的防護(hù)等；鉛的氧化物多用于生產(chǎn)油漆、顏料、玻璃、陶釉、防銹劑、橡膠硫化促進(jìn)劑等；四乙基鉛用作汽油防爆劑。接觸鉛及其化合物的機(jī)會(huì)多，主要有含鉛金屬的冶煉，鉛礦的開采提煉，造船工業(yè)的風(fēng)割電焊，蓄電池鉛網(wǎng)格板、油漆、顏料的制造，印刷鑄字、電纜制造等工業(yè)，均可長(zhǎng)期接觸鉛及其化合物的粉塵、煙霧或蒸氣。在日常生活中接觸鉛及其化合物的機(jī)會(huì)亦多，如罐頭食品、化妝品、某些藥物、釉瓷容器等，城市大氣的污染也使接觸鉛的機(jī)會(huì)增加。1.接觸機(jī)會(huì)：鉛的工業(yè)用途很廣，主要用于制造合金、鉛管、鉛箔2.毒性、代謝和監(jiān)測(cè)指標(biāo)鉛及其無機(jī)化合物主要以粉塵、煙、蒸氣形式經(jīng)呼吸道進(jìn)人人體，亦可經(jīng)消化道吸收；四乙基鉛主要以蒸氣形式經(jīng)呼吸道進(jìn)入人體，也可經(jīng)皮膚、粘膜及消化道吸收。2.毒性、代謝和監(jiān)測(cè)指標(biāo)鉛及其無機(jī)化合物主要以粉塵、煙、蒸氣鉛及其無機(jī)化合物的毒作用主要是造成神經(jīng)、造血、消化等系統(tǒng)和腎臟的損害。四乙基鉛在肝內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)槿一U，抑制腦中葡萄糖的代謝，導(dǎo)致腦組織缺氧，造成彌漫性腦損傷。吸收的鉛進(jìn)入血液后，有95％與紅細(xì)胞結(jié)合被輸送到人體的各部位。一部分蓄積在肝、腦、腎、肌肉及血液中。體內(nèi)的鉛約有75%~80%隨尿排出，約15％經(jīng)糞便排出。鉛及其無機(jī)化合物的毒作用主要是造成神經(jīng)、造血、消化等系統(tǒng)和腎尿鉛可以反映鉛從體內(nèi)排出情況，能間接反映機(jī)體吸收鉛的量。但由于尿鉛排出受許多因素的影響，有時(shí)體內(nèi)雖有大量鉛蓄積，尿鉛排出量并不高，經(jīng)驅(qū)鉛試驗(yàn)才明顯增高，因此尿鉛是鉛中毒的輔助診斷指標(biāo)。血鉛能直接反映近期機(jī)體吸收鉛的量，與空氣鉛濃度密切相關(guān)，被認(rèn)為是目前最好的鉛接觸監(jiān)測(cè)指標(biāo)。鉛對(duì)許多酶系統(tǒng)有不利的影響，造成體內(nèi)物質(zhì)代謝改變，如接觸鉛后，尿中d-氨基乙酰丙酸(d-ALA)、紅細(xì)胞中游離原卟啉(FEP)和血中鋅原卟啉(ZPP)會(huì)增多，測(cè)定它們的含量，均有助于鉛吸收和鉛中毒的診斷。尿鉛可以反映鉛從體內(nèi)排出情況，能間接反映機(jī)體吸收鉛的量。但由3.檢驗(yàn)方法

生物材料中鉛的測(cè)定方法較多，主要有雙硫腙比色法、原子吸收光譜法、示波極譜法等，也有用陽極溶出伏安法和電位溶出法。雙硫腙比色法是測(cè)定尿鉛的經(jīng)典分析方法，該法靈敏度較低，干擾較多，操作復(fù)雜費(fèi)時(shí)，而且使用的氰化鉀、三氯甲烷等試劑毒性較大，對(duì)人體健康有影響。但該法試劑易得，不需要特殊儀器設(shè)備，目前仍為基層單位廣泛采用。3.檢驗(yàn)方法

生物材料中鉛的測(cè)定方法較多，主要有雙硫腙比色法原子吸收光譜法包括萃取-火焰原子吸收光譜法、氫化物發(fā)生-原子吸收光譜法和石墨爐原子吸收光譜法。使用萃取-火焰原子吸收光譜法時(shí)，樣品經(jīng)過消化后，鉛離子與吡咯烷二硫代氨基甲酸銨(APDC)形成配合物，再用甲基異丁酮(MIBK)進(jìn)行萃取，取有機(jī)相測(cè)定；氫化物發(fā)生-原子吸收光譜法通過生成氫化物將鉛與樣品機(jī)體分離，用電熱石英管原子化，該法的靈敏度高，操作簡(jiǎn)便快速，干擾少；石墨爐原子吸收光譜法的最大優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高，血樣、尿樣不需消化，經(jīng)適當(dāng)稀釋或加入基體改進(jìn)劑后即可測(cè)定。示波極譜法靈敏度較高，采用國(guó)產(chǎn)示波極譜儀，價(jià)格便宜，易于普及。原子吸收光譜法包括萃取-火焰原子吸收光譜法、氫化物發(fā)生-原子4.雙硫腙比色法測(cè)定尿鉛（1）.原理：用硝酸-高氯酸破壞尿中有機(jī)物，使鉛轉(zhuǎn)變?yōu)殡x子狀態(tài)，然后在pH8.5~11.0的條件下，讓鉛離子與雙硫腙反應(yīng)生成紅色螯合物，萃取后根據(jù)顏色深淺比色定量。4.雙硫腙比色法測(cè)定尿鉛（1）.原理：用硝酸-高氯酸破壞尿中(2)雙硫腙的溶解性：溶劑溶解度(g/L)溶液顏色水5x10-6

堿性水溶液>20橙黃乙醇0.3藍(lán)綠四氯化碳0.64綠色三氯甲烷17.8藍(lán)綠雙硫腙易溶于三氯甲烷等有機(jī)溶劑，難溶于水；在堿性條件下雙硫腙生成鹽而易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。利用此性質(zhì)，可進(jìn)行萃取液中過量雙硫腙的洗除。(2)雙硫腙的溶解性：(3)雙硫腙易受鹵素、高價(jià)金屬離子(如Fe3+)、過氧化氫等氧化劑氧化，生成黃色的二苯硫代偕二腙，干擾測(cè)定，反應(yīng)式為：(3)雙硫腙易受鹵素、高價(jià)金屬離子(如Fe3+)、過氧化氫等日光、高溫會(huì)加速此氧化過程，所以雙硫腙應(yīng)避光貯存在陰涼處。雙硫腙的氧化產(chǎn)物不能與金屬離子配位，也失去了酸性，不能與堿作用生成鹽，即不溶于堿性水溶液，易溶于有機(jī)溶劑，而雙硫腙能溶于堿性水，根據(jù)此性質(zhì)可進(jìn)行雙硫腙的提純。為了防止消化尿樣殘?jiān)懈邇r(jià)金屬離子及其他氧化性物質(zhì)氧化雙硫腙，應(yīng)先在消化液中加入鹽酸羥胺等還原劑使這些物質(zhì)還原。日光、高溫會(huì)加速此氧化過程，所以雙硫腙應(yīng)避光貯存在陰涼處。(4)雙硫腙是一種廣泛的配位劑，除能與鉛配位外．還能與20余種金屬離子配位。在測(cè)定鉛時(shí)，應(yīng)設(shè)法避免其它金屬離子的干擾，提高方法的選擇性。常采用的方法是：①加入掩蔽劑：加入氰化鉀與Cu2+、Ag+、Au+、Zn2+、Cd2+、Hg2+、Fe2+、Co2+、Ni2+等離子生成配位化合物，作掩蔽劑，降低干擾；加入檸檬酸銨與Ca2+、Mg2+、A13+等離子作用，防止其在堿性條件下生成沉淀吸附Pb2+；注意：在加入氰化鉀前，應(yīng)先將溶液調(diào)為堿性，以免氰化鉀在酸性條件下放出劇毒的氰化氫氣體。(4)雙硫腙是一種廣泛的配位劑，除能與鉛配位外．還能與20余《生物材料檢測(cè)》課件②控制溶液pH：利用金屬離子在不同pH下萃取率的差異來分離除去干擾離子。如Ag+、Hg2+、Sn2+、Bi3+等離子與雙硫腙的配位能力強(qiáng)，在pH＜4的條件下也能配位完全，并被三氯甲烷萃取，此時(shí)Pb2+不被萃取仍然留在水相?？梢酝ㄟ^在酸性條件下預(yù)萃取的方法除去干擾，亦可以先在弱堿性溶液中將Pb2+與干擾離子一起萃取入三氯甲烷中，然后用稀硝酸反萃取Pb2+，此時(shí)Ag+、Hg2+、Sn2+、Bi3+等離子仍留在有機(jī)相而達(dá)到分離的目的。②控制溶液pH：利用金屬離子在不同pH下萃取率的差異來分離除③改變離子的價(jià)態(tài)：低價(jià)的T1+和Sn2+離子在弱堿性條件下能與雙硫腙配位、但經(jīng)消化后、T1+和Sn2+被氧化成Tl3+和Sn4+。高價(jià)的Tl3+和Sn4+離子在弱堿性條件下不與雙硫腙配位而避免了干擾。③改變離子的價(jià)態(tài)：低價(jià)的T1+和Sn2+離子在弱堿性條件下能(2)比色方法：用雙硫腙比色法測(cè)定鉛時(shí)，可用混色法、單色法和回返法。

①混色法：Pb2+與雙硫腙配位后，用三氯甲烷萃取，則Pb2+-雙硫腙配合物和部分雙硫腙被同時(shí)萃取入有機(jī)相，利用雙硫腙鉛配合物在510nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而雙硫腙本身在此波長(zhǎng)下有最小吸收，可直接在510nm處測(cè)定雙硫腙鉛的吸光度。此法較簡(jiǎn)便，但各管間雙硫腙濃度差異大時(shí)會(huì)造成比色誤差。(2)比色方法：用雙硫腙比色法測(cè)定鉛時(shí)，可用混色法、單色法和《生物材料檢測(cè)》課件②單色法：利用雙硫腙能溶于稀堿的特性，用10g／L氰化鉀溶液或稀氨水將萃取入三氯甲烷中的雙硫腙洗去，使混色中的藍(lán)綠色成分除去，而保留雙硫腙鉛的紅色，目視比色或在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。單色法的靈敏度較高，加入雙硫腙的量不需嚴(yán)格控制。②單色法：利用雙硫腙能溶于稀堿的特性，用10g／L氰化鉀溶液③回返法：雙硫腙的三氯甲烷溶液在620nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而在此波長(zhǎng)下雙硫腙鉛配合物幾乎無吸收。可先在620nm測(cè)定萃取液中雙硫腙的吸光度，然后加無機(jī)酸將Pb2+離子反萃取入水相，再在620nm處測(cè)定加入無機(jī)酸使雙硫腙鉛配合物解離釋放出的雙硫腙和原有雙硫腙的總吸光度，增加的吸光度系釋放出的雙硫腙產(chǎn)生，與尿樣中鉛的含量成正比。③回返法：雙硫腙的三氯甲烷溶液在620nm波長(zhǎng)處有最大吸收，5.說明(1)尿樣的采集時(shí)間不限，但采樣時(shí)必須避免來自現(xiàn)場(chǎng)環(huán)境、工作服及接觸部位等的鉛塵污染；(2)雙硫腙的純度如不夠，應(yīng)進(jìn)行提純，方法是：取O.05g雙硫腙，溶于三氯甲烷中，如有不溶物應(yīng)過濾，將溶液轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用100m1稀氨水溶液(1%)分4次提取雙硫腙，合并氨提取液于另一個(gè)分液漏斗中，用稀鹽酸酸化至有雙硫腙沉淀析出，用三氯甲烷萃取2~3次，每次20m1，此時(shí)雙硫腙進(jìn)入三氯甲烷層；5.說明(1)尿樣的采集時(shí)間不限，但采樣時(shí)必須避免來自現(xiàn)場(chǎng)環(huán)用蒸餾水洗滌三氯甲烷萃取液2次，棄去洗滌液；加三氯甲烷至100m1，使成為約0.5g／L的雙硫腙三氯甲烷液，放棕色瓶中，貯于冰箱內(nèi)。亦可將雙硫腙配制成0.5g兒的三氯甲烷貯備液。臨用前，取一定體積的雙硫腙貯備液與等體積的1％氨水于具塞棕色瓶中振搖，靜置分層后，取上層溶液使用。用蒸餾水洗滌三氯甲烷萃取液2次，棄去洗滌液；加三氯甲烷至10(3)三氯甲烷應(yīng)不合氧化物，檢查方法是；取三氯甲烷10m1加新鮮煮沸的水25m1，振搖3min，靜置分層后取水溶液10ml，加100g／L碘化鉀溶液和5g/L淀粉溶液各數(shù)滴，振搖后應(yīng)不顯藍(lán)色。(4)測(cè)鉛所用試劑，如鹽酸羥胺、檸檬酸銨等，應(yīng)不含干擾金屬離子，否則應(yīng)預(yù)先提純。方法是：取試劑20g，加50ml水溶解，加酚紅指示劑2滴，用(1+1)氨水調(diào)節(jié)pH至8.5~9.0(指示劑由黃色變?yōu)榧t色)，用雙硫腙三氯甲烷溶液提取，至三氯甲烷層綠色不變?yōu)橹?，再用三氯甲烷洗?次，棄去三氯甲烷層，水層加水稀釋至100ml。(3)三氯甲烷應(yīng)不合氧化物，檢查方法是；取三氯甲烷10m1加

氫化物發(fā)生-原子吸收光譜法

1.原理：尿液經(jīng)硝酸-高氯酸-硫酸消化破壞有機(jī)物后，鉛以二價(jià)離子形式存在。在一定濃度的硫酸和鐵氰化鉀介質(zhì)中，以硼氫化鉀作還原劑，將鉛還原成鉛化氫，被氮?dú)饬鲙腚姛崾⒐苤性踊?，?83.3nm波長(zhǎng)處進(jìn)行原子吸收光譜測(cè)定，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。

氫化物發(fā)生-原子吸收光譜法

1.原理：尿液經(jīng)硝酸-2.測(cè)定方法(1)樣品處理：吸取10ml混勻尿樣于錐形瓶中，加入2.5m1硝酸-高氯酸+硫酸(9+9+2)混合消化液，在電熱板上加熱消化至透明或白色殘?jiān)?，繼續(xù)加熱至高氯酸分解完全，瓶?jī)?nèi)出現(xiàn)三氧化硫白煙，取下放冷。用20ml水溶解三角瓶?jī)?nèi)容物，并定量轉(zhuǎn)入25ml比色管中，加2.5m1100g/L鐵氰化鉀溶液，加水稀釋至刻度，混勻備用。(2)測(cè)定：預(yù)熱儀器，吸取2.0ml樣品溶液或標(biāo)準(zhǔn)溶液于反應(yīng)瓶中，加30g/L硼氫化鉀溶液，測(cè)定吸光度。2.測(cè)定方法(1)樣品處理：吸取10ml混勻尿樣于錐形瓶中，3.說明(1)鐵氰化鉀的作用是提高測(cè)定靈敏度，消除干擾：在酸性條件下，直接用硼氫化鉀還原，鉛化合物產(chǎn)生鉛化氫的效率很低，即測(cè)得鉛的吸收信號(hào)極小。加入鐵氰化鉀，鉛的吸收顯著提高，鐵氰化鉀的濃度為2~50g/L時(shí)，鉛的吸收信號(hào)最大且不隨鐵氰化鉀濃度的改變而改變，故測(cè)定液中鐵氰化鉀的濃度選用10g/L。除鐵氰化鉀外，重鉻酸鉀、過氧化氫、過硫酸銨等也可用來增強(qiáng)鉛的吸收信號(hào)，但靈敏度和抗干擾能力不如鐵氰化鉀；3.說明(1)鐵氰化鉀的作用是提高測(cè)定靈敏度，消除干擾：在酸(2)酸度的影響：鉛化氫的發(fā)生受酸度的影響較大，酸度過大過小，鉛的吸收信號(hào)均降低。只有當(dāng)硫酸的濃度為0.8%~1.1%時(shí)，鉛的吸收信號(hào)最大且受酸度改變的影響小。為了得到最高靈敏度和可靠的結(jié)果，采用硝酸-高氯酸-硫酸消化尿樣，并要求在消化完時(shí)，將過量的硝酸、高氯酸除去，使消化液定容后的酸度恰為發(fā)生鉛化氫的最佳酸度；(2)酸度的影響：鉛化氫的發(fā)生受酸度的影響較大，酸度過大過小(3)硼氫化鉀濃度的影響：硼氫化鉀濃度較低時(shí)，隨著其濃度的增加，鉛的吸收信號(hào)增大，當(dāng)硼氫化鉀的濃度為30~50g/L時(shí)，鉛的吸收信號(hào)最大且恒定，故采用30g/L硼氫化鉀溶液。(4)方法靈敏度、檢出限和線性范圍：在分析條件下。1％吸收靈敏度為0.13ng/ml(0.26ng)、檢出限為0.22ng/ml(0.44ng)，標(biāo)準(zhǔn)曲線在0~25ngPb2+/ml。(3)硼氫化鉀濃度的影響：硼氫化鉀濃度較低時(shí)，隨著其濃度的增

石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定尿鉛

1.原理：尿樣經(jīng)基體改進(jìn)劑稀釋后，直接注入石墨管中，用無火焰原于吸收分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，與鉛工作曲線比較定量。2．測(cè)定方法(1)基體改進(jìn)劑：稱取4g磷酸二氫銨和6g抗壞血酸，加水溶解并稀釋至1000ml，混勻。(2)石墨管的處理：在普通石墨管中加入20m110g/L鉬溶液，在氣體流速為100ml/min下，于45~70℃干燥50s，450℃灰化30s，l950℃原子化7s。重復(fù)此操作10次，處理后石墨管內(nèi)壁底部呈灰白。

石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定尿鉛

1.原理：尿樣經(jīng)基體改進(jìn)劑稀(3)工作曲線：取不同體積的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.2mgPb2+/ml，以基體改進(jìn)劑稀釋)，加基體改進(jìn)劑至0.20ml，各加正常人混合尿液0.20m1，混勻。(4)測(cè)定：取0.20m1混勻尿樣，加入0.20ml基體改進(jìn)劑，混勻。取10ml注入石墨管中，按下列儀器工作條件，測(cè)定吸光度。波長(zhǎng)283.3nm干燥45~75℃40s

狹縫l.3nm灰化450℃30s

燈電流7.5mA原子化1950℃7s

清除2050℃3s

載氣(氬)150ml／min，原子化時(shí)停氣背景校正塞曼效應(yīng)或氘燈(3)工作曲線：取不同體積的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.2mgPb2+3.說明

(1)用石墨爐原子吸收光譜法測(cè)得尿鉛的最大優(yōu)點(diǎn)是只需將尿液稀釋便可直接測(cè)定，但尿液組成成分復(fù)雜且變化大，不能忽略基體效應(yīng)的影響，常采用以下三種方法解決：①用標(biāo)準(zhǔn)加入法定量；②用基體改進(jìn)劑和石墨爐平臺(tái)技術(shù)，以工作曲線法定量；③用基體改進(jìn)劑消除基體干擾，石墨管涂鉬降低背景吸收，以工作曲線法定量。3.說明

(1)用石墨爐原子吸收光譜法測(cè)得尿鉛的最大優(yōu)點(diǎn)是只(2)基體改進(jìn)劑的作用：磷酸二氫銨可以提高灰化溫度，防止鉛的揮發(fā)損失，使基體組分在原于化前揮發(fā)，從而提高測(cè)定靈敏度；抗壞血酸能有效地降低背景吸收。(2)基體改進(jìn)劑的作用：磷酸二氫銨可以提高灰化溫度，防止鉛的(3)背景吸收的減免：將石墨管作涂鉬處理，可以有效地降低背景吸收，如用普通石墨管測(cè)定尿鉛時(shí)，使用30次背景吸收值即達(dá)到0.5Au。經(jīng)涂鉬處理后，開始的背景吸收值約為0.05A，使用100次約為O.3A，150次后，背景吸收仍在0.6A以下。(4)于標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中加入正常人尿液，繪制工作曲線進(jìn)行定量，既可使標(biāo)準(zhǔn)與樣品的基體組成接近，得到與標(biāo)準(zhǔn)加入法相同的結(jié)果，又不會(huì)使工作量增加。(3)背景吸收的減免：將石墨管作涂鉬處理，可以有效地降低背景示波極譜法測(cè)定尿鉛1.原理：尿液經(jīng)硝酸-高氯酸-鹽酸消化后，Pb2+離子在底液中產(chǎn)生靈敏的吸附催化極譜波，根據(jù)峰電流與溶液中Pb2+離子含量成正比，用工作曲線法定量。示波極譜法測(cè)定尿鉛1.原理：尿液經(jīng)硝酸-高氯酸-鹽酸消化后，

2.測(cè)定方法

(1)樣品處理：取混勻尿液25m1于錐形瓶中，加7ml硝酸-高氯酸(5+2)，2ml鹽酸，置電熱板上消化至瓶口無白煙，殘?jiān)鼮榘咨?2)工作曲線：取不同體積鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液于錐形瓶中，各加25ml模擬尿，同樣品處理進(jìn)行操作。(3)測(cè)定：用5.0ml底液溶解樣品或標(biāo)準(zhǔn)消化殘?jiān)?，倒入電解池中，在示波極譜儀上，采用三電極系統(tǒng)。測(cè)定鉛的峰電流(峰高)，鉛的峰電位在-0．5V(對(duì)飽和甘汞電極)左右。以標(biāo)準(zhǔn)的峰高對(duì)相應(yīng)的濃度作圖繪制工作曲線，用樣品的峰高從工作曲線查出鉛含量。

2.測(cè)定方法

(1)樣品處理：取混勻尿液25m1于錐形瓶中3．說明(1)尿液的消化，應(yīng)掌握消化至白色殘?jiān)靠跓o白煙，消化溫度不要太高。如有酸液殘存，會(huì)出現(xiàn)畸形峰；如溫度太高，蒸得過干，鉛會(huì)有損失，造成結(jié)果偏低。3．說明(1)尿液的消化，應(yīng)掌握消化至白色殘?jiān)?，瓶口無白煙，

(2)底液及各成分的作用

底液：稱取5.0g碘化銨，7.5g檸檬酸，1.Og抗壞血酸，用水溶解，加入25m1鹽酸，用水稀釋至500m1，混勾。碘化銨(或鉀)：碘離子能與Pb2+離子配位，形成PbI42-配離子，在酸性條件下吸附于滴汞電極表面，產(chǎn)生靈敏的吸附催化極譜峰電流，提高鉛的測(cè)定靈敏度；抗壞血酸：為還原劑，可避免碘離子在酸性條件下被氧化，失去與Pb2+離子的配位作用，延長(zhǎng)底液的保存時(shí)間，有效地消除氧和其他氧化劑的干擾；

(2)底液及各成分的作用

底液：稱取5.0g碘化銨，7.5檸檬酸(也可用酒石酸)：與干擾離子配位，起掩蔽作用；鹽酸：保持底液有一定的酸度，是鉛吸附催化波出現(xiàn)的必要條件。(3)模擬尿：稱取11.6g氯化鈉，2.0g磷酸氫二銨，溶于適量水中，加1ml硫酸，用水稀釋至1L，混勻。加入模擬尿的作用標(biāo)準(zhǔn)與樣品的基體組成匹配。檸檬酸(也可用酒石酸)：與干擾離子配位，起掩蔽作用；

尿鎘和血鎘的測(cè)定

一、概述

1.性質(zhì)：鎘為銀白色，略帶淡藍(lán)色光澤的金屬，質(zhì)軟并富有延展性。原子量為112．4，比重8.65，熔點(diǎn)320.9℃，沸點(diǎn)767℃。鎘不溶于水，可與硫酸、鹽酸、硝酸作用生成相應(yīng)的鎘鹽，對(duì)堿和鹽溶液有良好的抗腐蝕性，鎘在空氣中加熱時(shí)能燃燒并生成氧化鎘。鎘的化學(xué)性質(zhì)和鋅相似，鎘離子易與氨、氰化物、氯離子、碘離子等形成配離子，也易與雙硫腙、吡咯烷二硫代氨基甲酸銨等配位。尿鎘和血鎘的測(cè)定

一、概述

1.性質(zhì)：鎘為銀白色，略帶淡2.接觸機(jī)會(huì)

一般人群通過食物、水、空氣和吸煙接觸鎘；職業(yè)接觸鎘的機(jī)會(huì)主要有：鉛鋅礦的開采、冶煉，鎘的生產(chǎn)：鎘化合物在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用，如鎘作金屬涂層用于電纜工業(yè)，鎘顏料的生產(chǎn)和使用、鎳鎘蓄電池或礦燈的制造等。2.接觸機(jī)會(huì)

一般人群通過食物、水、空氣和吸煙接觸鎘；職業(yè)接3.毒性、代謝和監(jiān)測(cè)指標(biāo)職業(yè)接觸鎘主要是吸入鎘的蒸氣或粉塵，被人體吸收后經(jīng)血液轉(zhuǎn)移，大部分濃集于腎臟和肝臟。急性鎘中毒的靶器官是肺，主要臨床現(xiàn)為呼吸道刺激、呼吸困難、肺水腫及急性肺心病等，亦伴有嘔吐、腹瀉等。慢性中毒的靶器官是肺和腎，臨床表現(xiàn)除呼吸道刺激、肺水腫、食欲不振、惡心等外，尚可見腎功能障礙、骨軟化、全身骨痛，這即是痛痛病的主要癥狀。3.毒性、代謝和監(jiān)測(cè)指標(biāo)職業(yè)接觸鎘主要是吸入鎘的蒸氣或粉塵，鎘接觸者的血鎘和尿鎘含量明顯升高，可作為生物監(jiān)測(cè)的常用指標(biāo)。血鎘可以反映近幾個(gè)月接觸鎘的情況，近期接觸鎘量較多，血鎘升高；當(dāng)接觸情況穩(wěn)定時(shí)，血鎘可反映在工作環(huán)境中的接觸情況，是近期接觸鎘和急性中毒診斷的指標(biāo)。尿鎘是估計(jì)體內(nèi)鎘負(fù)荷和慢性鎘中毒的生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)。美國(guó)官方工業(yè)衛(wèi)生家協(xié)會(huì)(ACGIH)規(guī)定接觸鎘時(shí)，血鎘的生物接觸限值為10mg/L，尿鎘為10mg/g肌酐。鎘接觸者的血鎘和尿鎘含量明顯升高，可作為生物監(jiān)測(cè)的常用指標(biāo)。4.檢驗(yàn)方法

生物樣品中鎘的測(cè)定方法主要有原子吸收光譜法和電化學(xué)分析方法。常規(guī)火焰原子吸收光譜法的靈敏度較低，且受樣品中鹽及能與鎘形成難解離絡(luò)合物的其它金屬離子的干擾，常需要采用絡(luò)合萃取法使樣品中的鎘濃縮并與基體成分分離后測(cè)定。近年來，采用巰基棉選擇性吸附和解吸鎘，達(dá)到消除干擾和富集的目的。石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定鎘的靈敏度高，但由于鎘的沸點(diǎn)低，不能采用較高的灰化溫度使大部分樣品基體預(yù)先除掉，會(huì)有較高的背景吸收干擾。4.檢驗(yàn)方法

生物樣品中鎘的測(cè)定方法主要有原子吸收光譜法和電

近年采用的解決辦法是：加酸除去血樣中的蛋白質(zhì)，取上清夜分析；尿樣加基體改進(jìn)劑，提高鎘的熱穩(wěn)定性；使用最佳的灰化條件合較低的原子化溫度(使鎘信號(hào)與基體信號(hào)分開)；使用高效能的背景校正器；采用基體匹配標(biāo)準(zhǔn)和標(biāo)準(zhǔn)加入曲線等。電化學(xué)分析方法中，示波極譜法、陽極溶出伏安法、電位溶出法等方法均具有較高的靈敏度，儀器價(jià)格低廉，但后兩種方法要求操作條件嚴(yán)格，重現(xiàn)性較差。近年采用的解決辦法是：加酸除去血樣中的蛋白質(zhì)，取上清夜分析二、巰基棉分離-火焰原子吸收光譜法測(cè)定尿鎘

1.原理：在弱酸性條件下,尿中鎘被巰基棉吸附富集后，用稀鹽酸解吸，于228.8nm波長(zhǎng)下，用空氣-乙炔火焰原子吸收光譜法測(cè)定鎘的濃度。二、巰基棉分離-火焰原子吸收光譜法測(cè)定尿鎘

1.原理：在弱酸

2.尿樣的采集和保存

用聚乙烯瓶收集尿樣，測(cè)定比重，按尿樣總體積加入1%的鹽酸，于4℃下可保存兩個(gè)月。

2.尿樣的采集和保存

用聚乙烯瓶收集尿樣，測(cè)定比重，按尿樣3．測(cè)定方法取100m1酸化后的尿樣，加入到活塞下裝有0.1g巰基棉的分液漏斗中，用1mol/L氫氧化鈉溶液和1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0~6.0，以小于6ml/min的速度過濾。加5ml水洗滌巰基棉，待水濾盡后，加入10m10.2mol/L鹽酸解吸，速度與富集時(shí)相同。收集解吸液于10m1容量瓶中，混勻，測(cè)定。波長(zhǎng)228.8nm乙炔流量0.9L/min

狹縫0.4nm空氣流量5.5L/min

燈電流2mA3．測(cè)定方法取100m1酸化后的尿樣，加入到活塞下裝有0.14.說明(1)巰基棉是棉花纖維素的羥基在酸性介質(zhì)中與硫代乙醇酸發(fā)生多相酯化反應(yīng)的產(chǎn)物，制備方法是：取100m1硫代乙醇酸、70m1乙酸酐、32ml乙酸、0．3m1硫酸混合，加入30g優(yōu)質(zhì)脫脂棉，浸泡，密閉后于40℃保溫3天。取出，用耐酸抽濾漏斗抽慮，蒸餾水沖洗至中性，置35℃烘干。于棕色瓶中保存。(2)尿液的酸度對(duì)巰基棉的富集和解吸效率有明顯的影響，最佳的吸附pH為5.0~6.0；解吸時(shí)，0.l~0.2mol/L鹽酸可使99.8%的鎘解吸下來。4.說明(1)巰基棉是棉花纖維素的羥基在酸性介質(zhì)中與硫代乙醇

尿汞的測(cè)定

一、概述

1.性質(zhì)：汞(Hg)是一種銀白色的液體金屬，原子量為200.6。比重13.6，熔點(diǎn)-33.9℃，沸點(diǎn)357.2℃。汞能溶解除鐵和鉑外的許多金屬生成汞齊。汞不溶于水、硫酸、鹽酸及有機(jī)溶劑，易溶于硝酸和王水，能溶于類脂質(zhì)。汞鹽大部分能溶于水，如硝酸汞、硫酸汞、氯化汞等，但氧化汞、氯化低汞、硫化汞等幾乎不溶于水。尿汞的測(cè)定

一、概述

1.性質(zhì)：汞(Hg)是一種銀白色的汞易揮發(fā)，溫度越高，揮發(fā)性越強(qiáng)，0℃時(shí)汞在空氣中蒸發(fā)達(dá)到飽和濃度2.18mg/m3，已是衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)0.01mg/m3的209倍多，20℃時(shí)，則可達(dá)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的1300余倍。汞的揮發(fā)除與溫度和氣壓有關(guān)外，還與室內(nèi)空氣交換的速度以及汞的暴露面積有關(guān)。因此，在使用汞時(shí)，必須注意不要將汞暴露于空氣中，在汞的表面加水封，可有效地防止汞的揮發(fā)。濺灑到桌面或地面的汞應(yīng)用吸管吸起來。金屬汞及其無機(jī)化合物在環(huán)境中受微生物的甲基化作用，可以轉(zhuǎn)變成毒性更大的甲基汞。汞易揮發(fā)，溫度越高，揮發(fā)性越強(qiáng)，0℃時(shí)汞在空氣中蒸發(fā)達(dá)到飽和2.接觸機(jī)會(huì)

人們接觸汞的機(jī)會(huì)較多，如汞礦的開采、冶煉；用汞齊法提煉貴金屬；金屬汞廣泛用于電器器材和測(cè)量?jī)x表的制造；化工、輕工等工業(yè)使用汞的化合物。工業(yè)三廢如處理不好，可污染大氣、水源、土壤和食物，增加人們接觸汞的機(jī)會(huì)。2.接觸機(jī)會(huì)

人們接觸汞的機(jī)會(huì)較多，如汞礦的開采、冶煉；用汞3.毒性、代謝和監(jiān)測(cè)指標(biāo)汞及其化合物是有強(qiáng)烈毒性的化學(xué)物質(zhì)，世界上已有多起汞中毒事件發(fā)生，如日本的水俁病。汞及其化合物可以通過呼吸道、消化道或皮膚等途徑進(jìn)入體內(nèi)。在生產(chǎn)環(huán)境中主要是經(jīng)呼吸道吸入金屬汞蒸氣、汞化合物的氣溶膠或粉塵。汞蒸氣經(jīng)呼吸道進(jìn)入機(jī)體后，可通過肺泡壁的毛細(xì)血管吸收75%~85%。溶解度高的汞鹽可經(jīng)消化道迅速吸收。被吸收的汞在細(xì)胞內(nèi)氧化成二價(jià)汞離子，汞離子與蛋白質(zhì)的巰基結(jié)合，抑制一系列合巰基酶的活性，引起機(jī)體功能障礙。主要損傷神經(jīng)系統(tǒng)和腎臟，職業(yè)性慢性汞中毒的主要臨床表現(xiàn)為口腔炎、易興奮性和汞中毒震顫。汞接觸者尿汞含量明顯升高，因此尿汞含量可以作為監(jiān)測(cè)汞接觸的常用指標(biāo)。3.毒性、代謝和監(jiān)測(cè)指標(biāo)汞及其化合物是有強(qiáng)烈毒性的化學(xué)物質(zhì)，4.檢驗(yàn)方法

尿汞的測(cè)定方法常用雙硫腙比色法和冷原子吸收光譜法，雙硫腙比色法的靈敏度低，影響因素多；冷原子吸收光譜法的靈敏度高，特異性好，操作簡(jiǎn)便，是目前尿汞測(cè)定最常用的方法。4.檢驗(yàn)方法尿汞的測(cè)定方法常用雙硫腙比色法和冷原子吸收光尿汞的冷原子吸收光譜測(cè)定法冷原子吸收光譜法是用氯化亞錫作還原劑將尿樣中的汞還原成元素態(tài)汞蒸氣，被載氣流帶入吸收管道，汞蒸氣吸收253.7nm紫外線，且吸收的程度與汞含量成正比，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或比較法測(cè)定尿汞含量。根據(jù)所加氯化亞錫的酸堿性不同，可分為酸性氯化亞錫還原法和堿性氯化亞錫還原法兩種。尿汞的冷原子吸收光譜測(cè)定法冷原子吸收光譜法是用氯化亞錫作還原(一)堿性氯化亞錫還原法1.原理：在強(qiáng)堿性(pH=l4)和有鎘離子存在的條件下，用高濃度氯化亞錫將尿中的有機(jī)汞和元機(jī)汞還原成元素態(tài)汞。用測(cè)汞儀在253.7nm處測(cè)定汞含量。(一)堿性氯化亞錫還原法1.原理：在強(qiáng)堿性(pH=l4)和有2.尿樣的采集和保存用聚乙烯瓶收集一次尿樣，盡快測(cè)定比重，加入氫氧化鈉，使其濃度達(dá)40g/L，于4℃冰箱中可保存兩周，在分析前將尿樣徹底搖勻。2.尿樣的采集和保存用聚乙烯瓶收集一次尿樣，盡快測(cè)定比重，加3.測(cè)定方法(1)樣品處理：吸取10ml(或5ml尿樣+5ml水)于10m1具塞試管中，加入2ml500g/L氫氧化鈉溶液，0.5m110g/LDL-半胱氨酸溶液，混勻。(2)標(biāo)準(zhǔn)系列：取0、O.10、0.20、0.30、0.40和0.50mlO.5mg/ml的汞標(biāo)準(zhǔn)溶液分別置于6支10ml具塞試管中，加基體尿液至10m1，各加2m1500g/L氫氧化鈉溶液，O.5mll0g/LDL-半胱氨酸溶液，混勻。3.測(cè)定方法(1)樣品處理：吸取10ml(或5ml尿樣+5m(3)測(cè)定：將配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液依次倒入汞蒸氣發(fā)生瓶中，加1滴磷酸三丁酯，1m1氯化亞錫-硫酸鎘試劑，立即蓋緊發(fā)生瓶蓋，接通抽氣氣路，讀取最大吸光度值。以標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度對(duì)汞濃度作圖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，由樣品管的吸光度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品管的汞含量。(3)測(cè)定：將配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液依次倒入汞蒸氣發(fā)生瓶4.說明(1)尿樣中的汞在保存過程中,會(huì)因容器吸附或揮發(fā)等原因而損失，特別是烷基汞會(huì)因細(xì)菌或酶的作用而分解。每升尿樣加40g氫氧化鈉，或加20g氫氧化鈉和1g半胱氨酸(穩(wěn)定劑，防止汞吸附或揮發(fā)損失)，在4℃或室溫下可保存兩周。(2)尿中大量的有機(jī)物質(zhì)與反應(yīng)時(shí)形成的氫氧化物產(chǎn)生共沉淀，使反應(yīng)溶液變稠，影響汞蒸氣的釋放速度。為抵銷這種影響，用比重為1.015±O.002的正常人尿液作基體尿液來配制標(biāo)準(zhǔn)系列。4.說明(1)尿樣中的汞在保存過程中,會(huì)因容器吸附或揮發(fā)等原(3)本法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確與否，關(guān)鍵在于還原劑中氯化亞錫和鎘離子的濃度，只有當(dāng)反應(yīng)液中氯化亞錫達(dá)到25~50g/L，硫酸鎘達(dá)到4~8g/L時(shí)，有機(jī)汞的還原效率才能與無機(jī)汞基本相同。鎘離子作為還原反應(yīng)的催化劑，是必不可少的，如果不加硫酸鎘，總汞的測(cè)定值偏低。(4)溫度對(duì)冷原子吸收光譜法測(cè)定汞有明顯的影響，被測(cè)溶液的溫度從15℃升高至40℃時(shí)。測(cè)定值可增加一倍。所以，樣品與標(biāo)準(zhǔn)必須在同一溫度下測(cè)定。(3)本法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確與否，關(guān)鍵在于還原劑中氯化亞錫和鎘離子(二)酸性氯化亞錫還原法1.原理：酸性氯化亞錫還原法是先用高錳酸鉀和硫酸破壞尿中有機(jī)物，使尿中汞轉(zhuǎn)變?yōu)殡x子狀態(tài)的汞，然后用氯化亞錫溶液將汞離子還原成元素態(tài)汞。在253.7nm波長(zhǎng)下，用測(cè)汞儀測(cè)定汞含量。(二)酸性氯化亞錫還原法1.原理：酸性氯化亞錫還原法是先用高2.尿樣的采集和保存用聚乙烯瓶收集一次尿樣，盡快測(cè)定比重，于4℃冰箱中可保存1周。2.尿樣的采集和保存用聚乙烯瓶收集一次尿樣，盡快測(cè)定比重，于

3.測(cè)定方法

(1)樣品處理：將尿樣搖勻，吸取2.5m1于大型氣泡吸收管中，加入2m150g/L高錳酸鉀溶液，再加入1m1硫酸，放置5min，混勻。于45~50℃水浴或恒溫箱中保溫2h，取出。在振搖下滴加200g／L鹽酸羥胺溶液至褪色，敞口放置20min。連接至測(cè)汞儀上，用滴管迅速加入1m1200g/L酸性氯化亞錫溶液，立即連接抽氣氣路，讀取最大吸光度。(2)將汞標(biāo)準(zhǔn)溶液作同樣處理和測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.測(cè)定方法

(1)樣品處理：將尿樣搖勻，吸取2.5m1于

4.說明

(1)處理樣品時(shí)，先加高錳酸鉀溶液，后加硫酸，以避免加硫酸后尿樣發(fā)熱，導(dǎo)致汞揮發(fā)損失。在有高錳酸鉀存在時(shí)，即使將溶液加熱到100℃，汞也不會(huì)揮發(fā)損失。(2)在酸性高錳酸鉀條件下，尿樣在45~50℃保溫2h，可使結(jié)合態(tài)汞全部解離出來。低于45℃或少于2h，結(jié)合態(tài)汞解離不完全，使結(jié)果偏低。(3)含糖尿樣，會(huì)迅速耗盡高錳酸鉀，須及時(shí)補(bǔ)加以維持氧化狀態(tài)，或減少尿樣量。(4)苯、酮類溶劑對(duì)253.7nm紫外線有吸收，如進(jìn)入吸收管道，會(huì)干擾測(cè)定。

4.說明

(1)處理樣品時(shí)，先加高錳酸鉀溶液，后加硫酸，以

呼出氣中苯及尿中酚的測(cè)定一、概述1.苯的接觸機(jī)會(huì)：苯的生產(chǎn)；苯為化工原料；苯為常用溶劑和稀釋劑；苯為油漆等的原料。2.毒性、代謝情況和檢驗(yàn)指標(biāo)：苯在生產(chǎn)環(huán)境中主要以蒸汽存在于空氣中，通過呼吸道進(jìn)入人體。呼出氣中苯和尿中酚可作為苯的接觸指標(biāo)。美國(guó)規(guī)定苯的生物接觸指數(shù)為：班后尿中總酚50mg/L；次日班前混合呼出氣0.08mg/L；終末呼出氣0.10mg/L。呼出氣中苯及尿中酚的測(cè)定一、概述苯在體內(nèi)的代謝情況苯在體內(nèi)的代謝情況3.理化性質(zhì)苯：無色透明具芳香氣味的液體，mp5.5°C,bp80.1°C,易揮發(fā)，易溶于乙醇、乙醚、汽油、丙酮、氯仿、四氯化碳等有機(jī)溶劑中，微溶于水。苯酚：白色、半透明針狀結(jié)晶，mp41°C,bp182°C,易溶于乙醇、乙醚、氯仿、甘油和二硫化碳，溶于水，不溶于石油醚。3.理化性質(zhì)4.樣品收集呼出氣：班后用塑料袋直接收集呼出氣或用活性炭管在-70°C（丙酮-干冰浴）收集。尿樣：聚乙烯瓶收集，冰箱保存可穩(wěn)定2周。采樣時(shí)間為工作或工作日終了時(shí)的第一次尿。4.樣品收集5.檢驗(yàn)方法測(cè)定呼出氣中苯的最好方法是氣相色譜法，該法靈敏度高，操作簡(jiǎn)便。測(cè)定尿中酚可選用對(duì)硝基苯胺-亞硝酸鈉法、4-氨基安替比林法、氣相色譜法等。5.檢驗(yàn)方法生物材料檢測(cè)生物材料檢測(cè)一、基本術(shù)語

生物材料是生物體的體液(血液)、排泄物(尿液、呼出氣)、毛發(fā)和試驗(yàn)動(dòng)物臟器組織的總稱。

生物材料檢驗(yàn)是研究生物材料中化學(xué)物質(zhì)或其代謝產(chǎn)物或生物化學(xué)指標(biāo)的分析測(cè)定方法的科學(xué)。

生物監(jiān)測(cè)是指定期(有計(jì)劃)地檢測(cè)人體生物材料中化學(xué)物質(zhì)或其代謝產(chǎn)物的含量或由它們所導(dǎo)致的無害生物效應(yīng)水平，以評(píng)價(jià)人體接觸化學(xué)物質(zhì)的程度及對(duì)健康的影響。一、基本術(shù)語生物材料是生物體的體液(血液)、排泄物(正常值是指正常人(無明顯肝、腎及血液系統(tǒng)疾病，無職業(yè)有害因素接觸史)的生物樣品中某種成分的含量或生化指標(biāo)值。常通過對(duì)某地區(qū)的正常人抽樣調(diào)查所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，取95%上限值(職業(yè)接觸只引起升高的時(shí)候)或97.5%上下限之間值(過高或過低均有一定的危害的時(shí)候)。正常值是指正常人(無明顯肝、腎及血液系統(tǒng)疾病，無職業(yè)有害因素生物接觸限值是為保護(hù)作業(yè)人員健康，對(duì)生物材料(尿、血、呼出氣)中污染物或其代謝產(chǎn)物所規(guī)定的最高容許濃度，或某些生物效應(yīng)指標(biāo)改變所容許的范圍。其值相當(dāng)于健康工人吸入或接觸最高容許濃度的毒物時(shí)，生物材料中被測(cè)物的水平。生物接觸限值是為保護(hù)作業(yè)人員健康，對(duì)生物材料(尿、血、呼出氣二、生物材料檢驗(yàn)的意義為職業(yè)中毒診斷和治療效果觀察提供重要的參考指標(biāo)，為地方病和營(yíng)養(yǎng)素缺乏病的診斷防治提供依據(jù)，亦為制訂衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、正常值或生物接觸限值提供資料。二、生物材料檢驗(yàn)的意義為職業(yè)中毒診斷和治療效果觀察提供重要的三、生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)及選擇1．生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)主要有以下三個(gè)方面：(1)生物材料中化學(xué)物質(zhì)的檢驗(yàn)：如尿中Pb、Hg、Cd、Cr、Ni、V、Se、As、F、I、五氯酚、殺蟲脒的檢驗(yàn)，血中Pb、Cr、Se、Zn、Cu、Fe、Ca、Mg的檢驗(yàn)，呼出氣中苯、甲苯、氯乙烯、三氯乙烯等的檢驗(yàn)；三、生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)及選擇1．生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)生物材料檢(2)生物材料中化學(xué)物質(zhì)代謝產(chǎn)物的檢驗(yàn)：化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后，在體內(nèi)被吸收、代謝產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，需要對(duì)生物材料中某些代謝產(chǎn)物進(jìn)行檢驗(yàn)。如尿中酚、馬尿酸、甲基馬尿酸、硫撐雙乙酸、三氯乙酸的檢驗(yàn)，血中25-羥維生素D3，1,25-二羥維生素D3的測(cè)定等。(2)生物材料中化學(xué)物質(zhì)代謝產(chǎn)物的檢驗(yàn)：化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后(3)生物效應(yīng)指標(biāo)的檢驗(yàn)：化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后，在體內(nèi)引起某些生化、生理行為或其他方面的改變?？梢赃x擇適當(dāng)?shù)男?yīng)指標(biāo)作為接觸有毒物質(zhì)的檢測(cè)指標(biāo)。如鉛吸收或鉛中毒時(shí)，尿中d-氨基乙酰丙酸(d-ALA)↑、紅細(xì)胞中游離原卟啉(FEP)↑、血中鋅原卟啉(ZPP)↑；有機(jī)磷農(nóng)藥中毒時(shí)，全血膽堿酯酶活性降低。(3)生物效應(yīng)指標(biāo)的檢驗(yàn)：化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后，在體內(nèi)引起某2．生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)的選擇原則以化學(xué)物質(zhì)的代謝動(dòng)力學(xué)和監(jiān)測(cè)目的為基礎(chǔ)，根據(jù)其在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄情況選擇指標(biāo)，要求所選擇的指標(biāo)有一定的特異性和靈敏度，與接觸劑量有較好的相關(guān)關(guān)系。2．生物材料檢驗(yàn)指標(biāo)的選擇原則以化學(xué)物質(zhì)的代謝動(dòng)力學(xué)和監(jiān)測(cè)目四、生物材料檢驗(yàn)結(jié)果的判定

目前多采用與正常值或生物接觸限值相比較進(jìn)行判定。由于受地理?xiàng)l件、環(huán)境污染情況及不同測(cè)定方法結(jié)果間差異等因素的影響，同一成分的正常值可因地區(qū)、方法的不同而不同。因此，在選用正常值時(shí)，應(yīng)注意所采用的測(cè)定方法和地區(qū)差異。某些成分的含量除受職業(yè)接觸的影響外，還與受檢者的年齡、性別、生理狀態(tài)、飲食和用藥情況等因素有關(guān)，判定結(jié)果時(shí)應(yīng)加以注意。四、生物材料檢驗(yàn)結(jié)果的判定目前多采用與正常值或生物接五、生物樣品的收集和保存生物樣品的采集和保存是整個(gè)生物材料檢驗(yàn)的重要操作步驟，必須注意選擇適當(dāng)?shù)纳飿悠贩N類和采樣時(shí)間，使生物材料檢驗(yàn)的結(jié)果能反映真實(shí)情況；采用正確的采樣和保存方法，防止樣品在采樣、運(yùn)輸及保存過程中變質(zhì)、受污染，待測(cè)成分損失，保證測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。五、生物樣品的收集和保存生物樣品的采集和保存是整個(gè)生物材料檢1．樣品的種類生物樣品的種類較多，尿液、血液、呼出氣、胃液、膽汁、汗液、唾液、乳汁、糞便、毛發(fā)、指甲、骨以及動(dòng)物臟器組織等均可作為不同檢驗(yàn)?zāi)康牡臉悠贰Ｔ谶x擇生物材料的種類時(shí)，要求：(1)

選用的生物材料中被測(cè)物的濃度與環(huán)境接觸水平、或與健康效應(yīng)有劑量反應(yīng)關(guān)系；(2)樣品和待測(cè)成分(指標(biāo))足夠穩(wěn)定以便于運(yùn)輸和保存；1．樣品的種類生物樣品的種類較多，尿液、血液、呼出氣、胃液、(3)采集生物樣品對(duì)人體無損害，能為受檢者所接受。目前用得最多的生物材料是尿液，其次是血液和呼出氣。頭發(fā)生長(zhǎng)非常緩慢，所采集的樣品實(shí)際上是不同時(shí)期的混合樣，因此，其測(cè)定值與接觸劑量的關(guān)系無法確定，這就失去了作為生物監(jiān)測(cè)樣品的意義，主要用作代謝極慢金屬的定性檢驗(yàn)。(3)采集生物樣品對(duì)人體無損害，能為受檢者所接受。2．樣品的采集和保存(1)采樣時(shí)間：在很多情況下，生物材料中待測(cè)物的濃度會(huì)隨時(shí)間的伸延而變化，變化的快慢與物質(zhì)在體內(nèi)的代謝過程有關(guān)。半衰期短(幾分鐘~幾小時(shí))的待測(cè)物在各種組織中的水平變化很快，因此對(duì)采用時(shí)間有嚴(yán)格規(guī)定；半衰期長(zhǎng)(幾十小時(shí)以上)的毒物或代謝產(chǎn)物，它們?cè)诟鞣N組織中的濃度反映較長(zhǎng)時(shí)間的接觸程度，所以對(duì)采樣時(shí)間的限制就不必太嚴(yán)格。2．樣品的采集和保存(1)采樣時(shí)間：在很多情況下，生物材料中班前：進(jìn)入工作崗位前1h班中：開始工作后2h至下班前1h班末：下班前1h之內(nèi)班后：下班后1h之內(nèi)班前：進(jìn)入工作崗位前1h(2)采樣環(huán)境采樣時(shí)，工人應(yīng)離開生產(chǎn)崗位，脫去工作服，洗凈手、臉及取樣部位，在清潔、無污染的場(chǎng)所取樣。(2)采樣環(huán)境采樣時(shí)，工人應(yīng)離開生產(chǎn)崗位，脫去工作服，洗凈手(3)采樣用的容器根據(jù)待測(cè)成分、樣品種類及保存條件選擇容器。對(duì)無機(jī)金屬化合物，可選用高壓聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯、石英、硬質(zhì)玻璃等材料制成的容器，在采樣前，將容器用酸液浸泡24h，洗凈晾干；如測(cè)定有機(jī)化合物，采樣用的容器應(yīng)選用玻璃或聚乙烯制品，避免使用橡膠和添加有染料的制品。(3)采樣用的容器根據(jù)待測(cè)成分、樣品種類及保存條件選擇容器。(4