無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測技術(shù)

無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測技術(shù)胡博帆、技術(shù)原理無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測，又稱為無創(chuàng)產(chǎn)前DNA檢測、無創(chuàng)胎兒染色體非整倍體檢測等。無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測技術(shù)僅需采取孕婦靜脈血，利用新一代DNA測序技術(shù)對母體外周血漿中的游離DNA片段（包含胎兒游離DNA）進(jìn)行測序，并將測序結(jié)果進(jìn)行生物信息分析，可以從中得到胎兒的遺傳信息，從而檢測胎兒是否患三大染色體疾病。香港中文大學(xué)教授盧煜明在1997年和1998年的工作中發(fā)現(xiàn)，母體血液中存在著胎兒的游離DNA。胎兒染色體異常會帶來母體中DNA含量微量變化，通過深度測序及生物信息可分析檢測到該變化，為項目提供理論依據(jù)。基于這些早期發(fā)現(xiàn)，盧煜明展開了一系列前沿工作來研究這些胎兒游離DNA的特性，證明了使用胎兒游離DNA來診斷遺傳性疾病的可行性和實際性，最終開創(chuàng)了利用第二代基因測序來檢測唐氏綜合癥的新途徑，并在90多個國家得到了應(yīng)用。僅在中國，每年就有超過一百萬孕婦接受這項測試。這種革命性的方法為全球無數(shù)的孕婦提供了無創(chuàng)產(chǎn)前診斷。二、技術(shù)應(yīng)用到2012年以來，該方法能準(zhǔn)確檢測唐氏綜合征（T21）、愛德華綜合征（T18）、帕套綜合征（T13）三大染色體疾病,且檢出率均在90%以上。。無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測的無創(chuàng)傷性可以避免因為侵入性診斷帶來流產(chǎn)、感染風(fēng)險。而DNA測序技術(shù)的成熟性能保證技術(shù)的準(zhǔn)確率，孕婦在12周以上即可檢測，12個工作日出檢測結(jié)果。2012年11月20日，美國婦產(chǎn)科學(xué)會（ACOG）與美國母胎醫(yī)學(xué)會（SMFM）共同發(fā)表委員會指導(dǎo)意見：按照以下適應(yīng)癥，可推薦無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測作為非整倍體高危人群的初篩檢測：（1）母親年齡超過35歲；（2）超聲結(jié)果顯示非整倍體高危；（3）生育過三體患兒；（4）早孕期，中孕期或三聯(lián)篩查、四聯(lián)篩查呈現(xiàn)非整倍體陽性結(jié)果（5）父母為平衡羅伯遜易位，并且胎兒為13-三體或21-三體高危。該聲明說明在美國婦產(chǎn)科界已經(jīng)形成行業(yè)共識，明確支持無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測可用于高齡、高危人群的初篩。這個鮮明的信號也預(yù)示著國際上將在無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測領(lǐng)域向前邁進(jìn)一大步。具體的操作步驟為：（1）離心孕婦外周血后獲得血清，從血清中提取DNA，在從總DNA中收集符合長度在100-200bp的片段，因為這個長度的游離DNA片段中，胎兒的DNA片段所占比例最高，有利于后續(xù)檢測。（2）然后使用T4DNA聚合酶（T4DNApolymerase）、克列諾片段（Klenow確定接受無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢』簽署《知情同意辜》、渤賽、領(lǐng)職采血包抽職降脈血（無須空源｝采血后2周，出檢刪報告Fragment）、T4核苷酸激酶（T4PNK）是片確定接受無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢』簽署《知情同意辜》、渤賽、領(lǐng)職采血包抽職降脈血（無須空源｝采血后2周，出檢刪報告（3）用磁珠發(fā)純化擴(kuò)增產(chǎn)物，對得到的DNA片段進(jìn)行隨機(jī)的大規(guī)模平行測序。然后通過與參考序列比較，將這些片段歸類到每一條染色體。最后通過數(shù)學(xué)模型和數(shù)據(jù)分析，計算每條染色體片段數(shù)量占總?cè)旧w片段數(shù)量的百分比，即可檢測出胎兒的染色體

異常。三、技術(shù)優(yōu)缺點優(yōu)點：（1）無創(chuàng)性。此項檢測只需抽取10ml的母體靜脈血即可，沒有感染和流產(chǎn)的風(fēng)險，極大地緩解了孕婦及家屬的心理負(fù)擔(dān)。srtE.皿清株曲北苞項諺晌展3聲（NTt時SfflONA美瞄括率3汨srtE.皿清株曲北苞項諺晌展3聲（NTt時SfflONA美瞄括率3汨K陽性拿0,3%混產(chǎn)率信比率校出率60輪-3曉奧出率植出率93%檢出率99%醐11-2CH-6117417-2112-2621-"ft22件所有隙色陣非3X雄體舞整數(shù)倍.s倘塞50%60變解性珈出培果時間侗告天塑（3）靈敏度/特異性高。無創(chuàng)DNA產(chǎn)前基因檢測技術(shù)針對唐氏綜合征（T21）、愛德華氏綜合征（T18）、帕陶氏綜合征（T13）進(jìn)行檢測。三大染色體的非整倍體疾病的檢測靈敏度/特異性均可達(dá)到99%以上。（4）孕早期檢測且檢測周期短。該檢測在孕早期，即懷孕12周以上即可檢測，在采血后的12個工作日內(nèi)即可出具檢測結(jié)報告。缺點：（1）對染色體三體疾病中的雙胎，多胎情況,檢測技術(shù)的靈敏度與特異性可能會下降；（2）篩查的目標(biāo)疾病少，僅對21-三體，18-三體，13-三體整倍體異常，不能檢測出胎兒染色體