沙門菌屬課件

沙門菌屬1沙門菌屬1分類與命名

沙門菌屬隸屬于細菌域，變形菌門，γ-變形菌綱，腸桿菌目，腸桿菌科。2分類與命名沙門菌屬隸屬于細菌域，變形菌門，γ-變形菌綱，二、生物學性狀（一）形態(tài)與染色沙門菌屬細菌為革蘭陰性桿菌，菌體大小為（0.7-1.5）umx（2.0-5.0）um。無芽孢，無莢膜（除個別菌株如雞沙門菌等外），一般都有周鞭毛。3二、生物學性狀（一）形態(tài)與染色34455（二）培養(yǎng)特性沙門菌屬為需氧或兼性厭氧菌，最適生長溫度35~37℃，最適pH6.8~7.8。能在普通培養(yǎng)基上生長。在血平板上孵育24小時，可呈灰色或灰白色中等大小的圓形、濕潤菌落，菌落直徑2~4mm6（二）培養(yǎng)特性67788在中國藍，麥康凱，EMB等選擇性培養(yǎng)基上，呈透明或半透明琥珀色，邊緣整齊，中等大小的菌落。9在中國藍，麥康凱，EMB等選擇性培養(yǎng)基上，呈透明或半透明琥珀在SS平板上形成中心為黑褐色的菌落10在SS平板上形成中心為黑褐色的菌落10在HE瓊脂平板上菌落呈藍色或藍綠色，大部分菌落中央呈黑色。在XLD瓊脂平板上菌落呈紅色或中央黑色在液體培養(yǎng)基中均勻混濁生長。11在HE瓊脂平板上菌落呈藍色或藍綠色，大部分菌落中央呈黑色。1（三）生化特性可發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖和甘露醇，除傷寒沙門菌產酸不產氣外，其余沙門菌均產酸產氣；不發(fā)酵乳糖和蔗糖（亞利桑那菌除外）；不分解尿素；大多可產生H2S；動力陽性；IMVIC試驗結果為++--，MIU試驗為+--。12（三）生化特性12IMVIC試驗I:吲哚（indol）試驗M:甲基紅（methylred）試驗V:V.P（Voges-Proskauer）試驗C:檸檬酸（citrateutilization）實驗(枸櫞酸鹽)作用：這4個試驗主要是用來快速鑒別大腸桿菌和產氣腸桿菌，多用于水的細菌檢查。13IMVIC試驗I:吲哚（indol）試驗131.吲哚試驗①試驗菌用蛋白胨水培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24小時.②在培養(yǎng)液中加入乙醚1ml(使呈明顯的乙醚層)充分振蕩,使吲哚試劑溶于乙醚.靜置片刻,待乙醚浮于培養(yǎng)液上面時沿管壁慢慢加入吲哚試劑10滴.呈玫瑰紅的為陽性,不變色的為陰.(注:加入吲哚試劑后,不可再搖動,否則紅色不明顯)2.甲基紅試驗①試驗菌用葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24小時.②沿管壁加入M.R.(甲基紅)試劑3-4滴.紅的為陽性,黃的為陰性.141.吲哚試驗143.V.P試驗①試驗菌用葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24小時.②加入40%KOH10-20滴,再加入等量α-茶酚,用力振蕩(拔去棉塞)再放入37℃4h后再觀察,仍無色產生為陰.4.檸檬酸實驗①將試驗菌培養(yǎng)在檸檬酸鹽培養(yǎng)基斜面上37℃培養(yǎng)24-28小時.②觀察有無細菌生長與培養(yǎng)基顏色變化.如果含有溴麝香草酚藍的斜面藍色者為陽性反應,呈綠色的為陰性反應;含苯酚紅的斜面如果呈紅色為陽性反應,呈黃色為陰性反應.153.V.P試驗15MIU試驗為動力、吲哚及脲酶復合試驗原理：培養(yǎng)基為含尿素、蛋白胨的半固體培養(yǎng)基，指示劑為酚紅。具色氨酸酶的細菌能分解色氨酸產生吲哚，加入吲哚試劑后，培養(yǎng)基上層的吲哚會變紅；具脲酶的細菌能分解尿素產氨，使整個培養(yǎng)基變堿呈紅色；有動力的細菌沿穿刺線擴散生長。作用：常用于腸桿菌科細菌的鑒定。16MIU試驗為動力、吲哚及脲酶復合試驗16（四）抗原構造沙門菌的抗原結構較復雜，主要包括菌體O抗原，鞭毛H抗原，少數(shù)的菌種有表面Vi抗原，均具有分類鑒定的意義。17（四）抗原構造171.菌體抗原（O抗原）化學成分是脂多糖，耐熱，它刺激機體產生的抗體以IgM為主，與相應的抗體結合出現(xiàn)顆粒狀凝集。是沙門菌分群的依據(jù)，每個沙門菌的血清型可具有一種或樹種O抗原，將具有共同O抗原成分的歸為一個群。臨床上常見的是A~F群。181.菌體抗原（O抗原）182.鞭毛抗原（H抗原）化學成分為蛋白質，不耐熱，刺激機體產生的抗體以IgG為主，與相應抗體結合出現(xiàn)絮狀凝集。是沙門菌分型的依據(jù)。H抗原分兩個相：第一相為特異相；第二相為沙門菌所共有，稱非特異相。僅具有一相H抗原的為單相菌，具有兩相H抗原的稱為雙相菌。192.鞭毛抗原（H抗原）193.表面抗原（Vi抗原）位于菌體外層，抗原性強，相應抗體可作為篩選帶菌者指標;不耐熱；能阻止O抗原與相應抗體發(fā)生凝集反應，影響沙門菌的血清學鑒定。203.表面抗原（Vi抗原）20（五）抵抗力對理化因素抵抗力弱尤其對酸敏感對消毒劑敏感易產生耐藥性對膽鹽和煌綠等抑制劑有抵抗力21（五）抵抗力21臨床意義致病物質：菌毛、內毒素、Vi抗體所致疾病：1.胃腸炎

2.菌血癥或敗血癥

3.食物中毒

4.腸熱癥免疫性：病后免疫力牢固，以細胞免疫為主。22臨床意義致病物質：菌毛、內毒素、Vi抗體222323微生物學檢驗標本采集：根據(jù)不同疾病，不同病程取不同標本，最好在使用抗生素前采集。腸熱癥的標本采集第一周取血液第2~3周取糞便和尿液全程可取骨髓24微生物學檢驗標本采集：242525檢驗方法——血清學鑒定首先用A~F多價O血清進行玻片凝集。再用單價O因子血清鑒定到具體的群。再用第一相與第二相H因子血清定型。若細菌生化反應符合沙門菌屬，但與A~F多價O血清不產生凝集現(xiàn)象，應考慮是否有表面抗原（Vi）存在，可將細菌懸液水浴加熱30分鐘后再進行凝集試驗。26檢驗方法——血清學鑒定首先用A~F多價O血清進行玻片凝集。2檢驗方法——免疫學診斷肥達反應原理：肥達反應是用已知傷寒沙門菌O、H抗原以及甲型、乙型、丙型副傷寒沙門菌H抗原與受檢者血清進行凝集試驗，測定受檢者血清中有無相應抗體及其效價。意義：輔助診斷傷寒和副傷寒（腸熱癥）27檢驗方法——免疫學診斷肥達反應27腸熱癥病人血清抗體出現(xiàn)情況28腸熱癥病人血清抗體出現(xiàn)情況28肥達反應結果判定：O凝集效價達到或超過1:80H抗體效價達到或超過1:160副傷寒H抗體效價達到或超過1:80病程中逐周檢查效價遞增或恢復期達到初次效價的4倍或以上者，才有診斷意義。O與H抗體的診斷意義：O、H效價均升高：已感染傷寒O、H效價均低于正常值：未感染沙門菌或免疫低下O升高、H正常：某型沙門菌感染早期H升高、O正常：以往接種過疫苗或非特異性回憶反應29肥達反應結果判定：29謝謝大家30謝謝大家30沙門菌屬31沙門菌屬1分類與命名

沙門菌屬隸屬于細菌域，變形菌門，γ-變形菌綱，腸桿菌目，腸桿菌科。32分類與命名沙門菌屬隸屬于細菌域，變形菌門，γ-變形菌綱，二、生物學性狀（一）形態(tài)與染色沙門菌屬細菌為革蘭陰性桿菌，菌體大小為（0.7-1.5）umx（2.0-5.0）um。無芽孢，無莢膜（除個別菌株如雞沙門菌等外），一般都有周鞭毛。33二、生物學性狀（一）形態(tài)與染色3344355（二）培養(yǎng)特性沙門菌屬為需氧或兼性厭氧菌，最適生長溫度35~37℃，最適pH6.8~7.8。能在普通培養(yǎng)基上生長。在血平板上孵育24小時，可呈灰色或灰白色中等大小的圓形、濕潤菌落，菌落直徑2~4mm36（二）培養(yǎng)特性6377388在中國藍，麥康凱，EMB等選擇性培養(yǎng)基上，呈透明或半透明琥珀色，邊緣整齊，中等大小的菌落。39在中國藍，麥康凱，EMB等選擇性培養(yǎng)基上，呈透明或半透明琥珀在SS平板上形成中心為黑褐色的菌落40在SS平板上形成中心為黑褐色的菌落10在HE瓊脂平板上菌落呈藍色或藍綠色，大部分菌落中央呈黑色。在XLD瓊脂平板上菌落呈紅色或中央黑色在液體培養(yǎng)基中均勻混濁生長。41在HE瓊脂平板上菌落呈藍色或藍綠色，大部分菌落中央呈黑色。1（三）生化特性可發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖和甘露醇，除傷寒沙門菌產酸不產氣外，其余沙門菌均產酸產氣；不發(fā)酵乳糖和蔗糖（亞利桑那菌除外）；不分解尿素；大多可產生H2S；動力陽性；IMVIC試驗結果為++--，MIU試驗為+--。42（三）生化特性12IMVIC試驗I:吲哚（indol）試驗M:甲基紅（methylred）試驗V:V.P（Voges-Proskauer）試驗C:檸檬酸（citrateutilization）實驗(枸櫞酸鹽)作用：這4個試驗主要是用來快速鑒別大腸桿菌和產氣腸桿菌，多用于水的細菌檢查。43IMVIC試驗I:吲哚（indol）試驗131.吲哚試驗①試驗菌用蛋白胨水培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24小時.②在培養(yǎng)液中加入乙醚1ml(使呈明顯的乙醚層)充分振蕩,使吲哚試劑溶于乙醚.靜置片刻,待乙醚浮于培養(yǎng)液上面時沿管壁慢慢加入吲哚試劑10滴.呈玫瑰紅的為陽性,不變色的為陰.(注:加入吲哚試劑后,不可再搖動,否則紅色不明顯)2.甲基紅試驗①試驗菌用葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24小時.②沿管壁加入M.R.(甲基紅)試劑3-4滴.紅的為陽性,黃的為陰性.441.吲哚試驗143.V.P試驗①試驗菌用葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24小時.②加入40%KOH10-20滴,再加入等量α-茶酚,用力振蕩(拔去棉塞)再放入37℃4h后再觀察,仍無色產生為陰.4.檸檬酸實驗①將試驗菌培養(yǎng)在檸檬酸鹽培養(yǎng)基斜面上37℃培養(yǎng)24-28小時.②觀察有無細菌生長與培養(yǎng)基顏色變化.如果含有溴麝香草酚藍的斜面藍色者為陽性反應,呈綠色的為陰性反應;含苯酚紅的斜面如果呈紅色為陽性反應,呈黃色為陰性反應.453.V.P試驗15MIU試驗為動力、吲哚及脲酶復合試驗原理：培養(yǎng)基為含尿素、蛋白胨的半固體培養(yǎng)基，指示劑為酚紅。具色氨酸酶的細菌能分解色氨酸產生吲哚，加入吲哚試劑后，培養(yǎng)基上層的吲哚會變紅；具脲酶的細菌能分解尿素產氨，使整個培養(yǎng)基變堿呈紅色；有動力的細菌沿穿刺線擴散生長。作用：常用于腸桿菌科細菌的鑒定。46MIU試驗為動力、吲哚及脲酶復合試驗16（四）抗原構造沙門菌的抗原結構較復雜，主要包括菌體O抗原，鞭毛H抗原，少數(shù)的菌種有表面Vi抗原，均具有分類鑒定的意義。47（四）抗原構造171.菌體抗原（O抗原）化學成分是脂多糖，耐熱，它刺激機體產生的抗體以IgM為主，與相應的抗體結合出現(xiàn)顆粒狀凝集。是沙門菌分群的依據(jù)，每個沙門菌的血清型可具有一種或樹種O抗原，將具有共同O抗原成分的歸為一個群。臨床上常見的是A~F群。481.菌體抗原（O抗原）182.鞭毛抗原（H抗原）化學成分為蛋白質，不耐熱，刺激機體產生的抗體以IgG為主，與相應抗體結合出現(xiàn)絮狀凝集。是沙門菌分型的依據(jù)。H抗原分兩個相：第一相為特異相；第二相為沙門菌所共有，稱非特異相。僅具有一相H抗原的為單相菌，具有兩相H抗原的稱為雙相菌。492.鞭毛抗原（H抗原）193.表面抗原（Vi抗原）位于菌體外層，抗原性強，相應抗體可作為篩選帶菌者指標;不耐熱；能阻止O抗原與相應抗體發(fā)生凝集反應，影響沙門菌的血清學鑒定。503.表面抗原（Vi抗原）20（五）抵抗力對理化因素抵抗力弱尤其對酸敏感對消毒劑敏感易產生耐藥性對膽鹽和煌綠等抑制劑有抵抗力51（五）抵抗力21臨床意義致病物質：菌毛、內毒素、Vi抗體所致疾病：1.胃腸炎

2.菌血癥或敗血癥

3.食物中毒

4.腸熱癥免疫性：病后免疫力牢固，以細胞免疫為主。52臨床意義致病物質：菌毛、內毒素、Vi抗體225323微生物學檢驗標本采集：根據(jù)不同疾病，不同病程取不同標本，最好在使用抗生素前采集。腸熱癥的標本采集第一周取血液第2~3周取糞便和尿液全程可取骨髓54微生物學