微生物限度檢查方法適用性試驗(yàn)課件

微生物限度檢查方法適用性試驗(yàn)方案PAGEPAGE10驗(yàn)證方案組織與實(shí)施組，參與實(shí)施。部門(mén)/職務(wù)簽部門(mén)/職務(wù)簽名日期質(zhì)量管理部QC部門(mén)/職務(wù)簽部門(mén)/職務(wù)簽名日期質(zhì)量管理部QC經(jīng)理部門(mén)/職務(wù)批準(zhǔn)人部門(mén)/職務(wù)批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期質(zhì)量管理部質(zhì)量總監(jiān)目 錄一、概述二、驗(yàn)證目的和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估三、驗(yàn)證內(nèi)容四、方法判定六、參考文獻(xiàn)七、結(jié)果評(píng)價(jià)及結(jié)論1、概述：母菌計(jì)數(shù)方法的適用性試驗(yàn)和控制菌檢查方法的適用性試驗(yàn)，以確認(rèn)所采用的方法適合于該產(chǎn)品的需氧菌、霉菌和酵母菌數(shù)的測(cè)定和控制菌檢查。由于依照中國(guó)藥典2010版的檢查方法驗(yàn)證,需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌均采用平皿法。故現(xiàn)升級(jí)為中國(guó)藥典2015版，需氧菌、霉菌和酵母菌及控制菌均采用平皿法進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)。2、試驗(yàn)?zāi)康暮惋L(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：物限度檢查。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：項(xiàng)目未按方案執(zhí)行試驗(yàn)過(guò)程操作不當(dāng)3、驗(yàn)證內(nèi)容：

潛在失效模式試驗(yàn)部分項(xiàng)目出現(xiàn)偏差和漂移未達(dá)到試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

失效影響正確性試驗(yàn)失敗

采取措施嚴(yán)格執(zhí)行經(jīng)批準(zhǔn)的試驗(yàn)方案未嚴(yán)格遵循試驗(yàn)方案規(guī)定品名批號(hào)規(guī)格來(lái)源胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基微生物限度檢查用中檢所沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基微生物限度檢查用中檢所胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基無(wú)菌檢查和微生物限度檢查用中檢所沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基微生物限度檢查用中檢所麥康凱瓊脂培養(yǎng)基微生物限度檢查用中檢所麥康凱液體培養(yǎng)基確認(rèn)人：微生物限度檢查用確認(rèn)日期：中檢所培養(yǎng)基名稱(chēng)配制方法培養(yǎng)基名稱(chēng)配制方法PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液取本品14.63g，加水1000ml，加熱溶解，分裝，121℃，15分鐘滅菌，備用。胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基40g1000ml，加熱溶解，分裝沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基65.0g1000ml，加熱溶解，分裝胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基29.8g1000ml，加熱溶解，分裝沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基30.0g1000ml，加熱溶解，分裝麥康凱瓊脂培養(yǎng)基50.0g1000ml，加熱溶解，分裝麥康凱液體培養(yǎng)基35.01000ml，加熱溶解，分裝確認(rèn)人： 確認(rèn)日期：名稱(chēng)型號(hào)名稱(chēng)型號(hào)校驗(yàn)單位有效期至生化培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱確認(rèn): 確認(rèn)日期：、驗(yàn)證試驗(yàn)用菌種：菌種名稱(chēng)代號(hào)傳代代數(shù)來(lái)源金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003中檢所大腸埃希菌CMCC（B）44102中檢所銅綠假單胞菌CMCC（B）10104中檢所枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501中檢所白色念珠菌CMCC（F）98001中檢所黑曲霉菌CMCC（F）98003中檢所確認(rèn)人：確認(rèn)日期：試驗(yàn)方法：取供試品10 g加PH7.0氯化蛋白胨緩沖液至100ml→1:10供試液。需氧菌、霉菌和酵母菌控制菌采用常規(guī)法。菌液的制備：取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌的胰酪大豆胨瓊脂斜面培物一鉑金餌，加入胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中置30～3518～24h1ml加入9ml0.910-11010～71ml20ml各菌懸液平行制備兩個(gè)平皿，平皿法培養(yǎng)計(jì)數(shù)，取小于100CFU/ml和1000CFU/ml的菌液備用。取白色念珠菌的沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)物，加入沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中置20～2524～48h1ml9ml0.910-1的菌液，依法1010～7，1ml注入平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基25ml液平行制備兩個(gè)平皿，平皿法培養(yǎng)計(jì)數(shù)，取小于100CFU/ml和1000CFU/ml的菌液備用。5-73-5ml0.05%聚800.9%1ml0.05%809ml0.9%10-11010～71ml25ml100CFU/ml1000CFU/ml的菌液備用。需氧菌、霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)：供試液制備：取供試品10（ml或c2，加PH7.0100m1:10供試液。實(shí)驗(yàn)條件：需氧菌培養(yǎng)溫度3～5天 培養(yǎng)箱：霉菌和酵母菌培養(yǎng)溫度5～7天 培養(yǎng)箱：試驗(yàn)方法：試驗(yàn)組：0.1ml1000CFU的銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯1ml45℃20ml30～35℃320.1ml1000CFU白色念珠菌、黑曲霉菌液，混勻后分別1ml45℃20ml30～35℃521ml45℃的沙氏葡萄20ml20～25℃529.9ml0.1ml1000CFU的菌液，按試驗(yàn)組操作,傾注溫度不超過(guò)45℃的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，置與試驗(yàn)組相同條件下培養(yǎng),計(jì)數(shù)。每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿。供試品對(duì)照組：取供試液1ml，傾注溫度不超過(guò)45℃2實(shí)驗(yàn)結(jié)果范圍內(nèi)。比值=試驗(yàn)組菌落數(shù)～供試品對(duì)照組的菌落數(shù)*對(duì)照組菌落數(shù)需氧菌計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)結(jié)果供試品菌種類(lèi)型試驗(yàn)組菌液組比值對(duì)照組供試品菌種類(lèi)型試驗(yàn)組菌液組比值對(duì)照組銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉檢驗(yàn)人： 日期：復(fù)核人： 日期：供試品菌種類(lèi)型試驗(yàn)組菌液組比值對(duì)照組供試品菌種類(lèi)型試驗(yàn)組菌液組比值對(duì)照組銅綠假單胞菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉檢驗(yàn)人： 日期：復(fù)核人： 日期：試驗(yàn)次數(shù)供試品批:供試品菌種類(lèi)型 試驗(yàn)組 菌液組對(duì)照組比值銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉檢驗(yàn)人：日期：復(fù)核人：日期：3.7.4.3霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)次數(shù)供試品批:供試品菌種類(lèi)型 試驗(yàn)組 菌液組對(duì)照組比值白色念珠菌黑曲霉檢驗(yàn)人：日期：復(fù)核人：日期：試驗(yàn)次數(shù)供試品批:供試品供試品菌種類(lèi)型試驗(yàn)組菌液組比值對(duì)照組白色念珠菌黑曲霉檢驗(yàn)人： 日期：復(fù)核人： 日期供試品菌種類(lèi)型試驗(yàn)組菌液組比值對(duì)照組供試品菌種類(lèi)型試驗(yàn)組菌液組比值對(duì)照組白色念珠菌黑曲霉檢驗(yàn)人： 日期：復(fù)核人： 日期結(jié)論:檢驗(yàn)人： 日期：復(fù)核人： 日期：控制菌微生物檢測(cè)方法適用性試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)方法：10ml100cfu培養(yǎng)18-24小時(shí),取上述培養(yǎng)物1ml100ml24-4830～35℃18-72小時(shí)。試驗(yàn)組應(yīng)生長(zhǎng)良好。10ml,加入胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，置30～35℃18-24對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。100cfu大腸埃希菌菌液加入胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，置30～35℃培養(yǎng)18-24小時(shí),取上述培養(yǎng)物1ml接種至100ml麥康凱液體培養(yǎng)基中，42～44℃培養(yǎng)24-48小時(shí)。取麥康凱液體培養(yǎng)物劃線(xiàn)接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上30～35℃培養(yǎng)18-72小時(shí)。陽(yáng)性對(duì)照組應(yīng)生長(zhǎng)良好。3.8.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)次數(shù)：1供試品批號(hào):控制菌項(xiàng)目常規(guī)法試驗(yàn)組大腸埃希菌陽(yáng)性對(duì)照組陰性對(duì)照組檢驗(yàn)人： 日期：復(fù)核人： 日期：試驗(yàn)次數(shù)：2供試品批號(hào):控制菌項(xiàng)目常規(guī)法試驗(yàn)組大腸埃希菌陽(yáng)性對(duì)照組陰性對(duì)照組檢驗(yàn)人： 日期：復(fù)核人： 日期：控制菌項(xiàng)目常規(guī)法試驗(yàn)組大腸埃希菌陽(yáng)性對(duì)照組控制菌項(xiàng)目常規(guī)法試驗(yàn)組大腸埃希菌陽(yáng)性對(duì)照組陰性對(duì)照組3.8.3結(jié)論：檢驗(yàn)人： 日期：復(fù)核人： 日期：