菌落總數(shù)的測定-11-29菌落計數(shù)課件

醬油中菌落總數(shù)的測定——菌落計數(shù)、計算與報告醬油中菌落總數(shù)的測定——菌落計數(shù)、計算與報告1復(fù)習提問1、菌落總數(shù)的測定步驟2、測定醬油中菌落總數(shù)時稀釋度選擇的原則是什么？3、本次醬油中菌落總數(shù)測定實驗的設(shè)計？復(fù)習提問1、菌落總數(shù)的測定步驟2樣品制備10倍梯度稀釋接種倒平板倒置培養(yǎng)菌落計數(shù)報告菌落總數(shù)測定步驟菌落總數(shù)計算樣品制備10倍梯度稀釋接種倒平板倒置培養(yǎng)菌落計數(shù)報告菌菌落總3表1醬油中菌落總數(shù)的測定結(jié)果與報告稀釋度10-110-210-3空白菌落總數(shù)報告平板1平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)計算方式平板2平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平均稀釋度菌落數(shù)稀釋度菌落數(shù)稀釋度菌落數(shù)表1醬油中菌落總數(shù)的測定結(jié)果與報告稀釋度10-110-2104主要內(nèi)容一、平板菌落計數(shù)的原則和方法二、各組進行菌落計數(shù)，并填表三、菌落總數(shù)計算方法四、學生練習計算方法五、報告方法六、各組進行報告主要內(nèi)容一、平板菌落計數(shù)的原則和方法5一、平板菌落計數(shù)的原則與方法（一）原則1、平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用2、

若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，則可以計算半個平板后乘以2，以代表一個平板的菌落數(shù)3、若菌落分布均勻，300以下的平板直接進行菌落計數(shù)，大于300的可記為多不可計。4、當平板上有鏈狀菌落生長時，且無明顯界限的，則每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算。一、平板菌落計數(shù)的原則與方法（一）原則6不可計數(shù)不可計數(shù)64圖1、菌落計數(shù)原則不可計數(shù)不可計數(shù)64圖1、菌落計數(shù)原則7（二）菌落計數(shù)方法1、肉眼觀察，記號筆點數(shù)，300以下的記錄具體數(shù)據(jù)；300以上的可以不計數(shù)，寫“多不可計”。2、多，密，且均勻，可以分四個小格，數(shù)一個小格，乘以4。3、可以使用放大鏡觀察。（二）菌落計數(shù)方法1、肉眼觀察，記號筆點數(shù)，300以下的記錄8圖2、菌落計數(shù)方法圖2、菌落計數(shù)方法9二、各組進行菌落計數(shù)，并填表稀釋度10-110-210-3空白菌落總數(shù)報告平板1平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板2平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平均二、各組進行菌落計數(shù)，并填表稀釋度10-110-210-3空10三、稀釋度的菌落數(shù)計算1、若兩個平板均為“無法計數(shù)”，則填“無法計數(shù)”。2、若一個平板“無法計數(shù)”，則用另外一個平板菌落數(shù)代表該稀釋度菌落數(shù)。3、若兩個平板都有具體數(shù)據(jù)，則求平均，用整數(shù)表示。三、稀釋度的菌落數(shù)計算1、若兩個平板均為“無法計數(shù)”，則填“11三、稀釋度菌落數(shù)的計算稀釋度例110-1例210-2例310-3例410-4菌落總數(shù)報告平板1無法計數(shù)無法計數(shù)無法計數(shù)28平板2無法計數(shù)多不可計28827平均無法計數(shù)多不可計28828三、稀釋度菌落數(shù)的計算稀釋度例1例2例3例4菌落總數(shù)報告平板12稀釋度：原溶液被沖淡的程度。稀釋倍數(shù)：溶液被稀釋的倍數(shù)。例如：稀釋度為10-1和10-2，即1:10,1:100稀釋倍數(shù)依次是10倍，100倍。

四、菌落總數(shù)的計算方法稀釋度高稀釋度：原溶液被沖淡的程度。四、菌落總數(shù)的計算方法稀釋度高131、選擇稀釋度菌落數(shù)在30~300之間的，若只有一個，則用該稀釋度菌落數(shù)乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)2、若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)都大于300CFU，則對稀釋度最高的平板進行計數(shù)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計算。3、若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU，則應(yīng)按稀釋度最低的平板菌落數(shù)計算。

四、菌落總數(shù)的計算方法1、選擇稀釋度菌落數(shù)在30~300之間的，若只有一個，則用該144、若所有稀釋度平板均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計算。5、若所有稀釋度的平板菌落數(shù)一部分小于30CFU或大于300CFU時，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。4、若所有稀釋度平板均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)15試樣例次稀釋度選定計數(shù)稀釋度菌落總數(shù)/(CFU/mL)10-210-310-41平均菌落數(shù)380521810-3520002無法計數(shù)56831210-4312000032612510-22600400010-2<100531529210-3290006多不可計2873410-3，10-4表2菌落總數(shù)計算方法匯總表試樣例次稀釋度選定計數(shù)菌落總數(shù)/(CFU/mL)10-210166、若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按如下公式計算：

N=∑C/（n1+0.1n2）d…………（1)

式中：

N―樣品中菌落數(shù)；

∑C―適宜計數(shù)范圍內(nèi)平板菌落數(shù)之和；

nl―第一個適宜稀釋度平板數(shù)；

n2―第二個適宜稀釋度平板數(shù)；

d―稀釋因子（第一稀釋度）。6、若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按如下17稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)CFU/ml報告CFU/ml平板128835？平板228633平均例6、菌落總數(shù)計數(shù)

N==1816=2918181728734稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)報告平板128835？18五、報告原則1、菌落數(shù)小于100CFU時，按照“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報告。2、菌落數(shù)大于或等于100CFU時，第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前2位數(shù)字，后而用0代替位數(shù)；也可以用10的指數(shù)形式來表示，按照“四舍五入”修約后，采用兩位有效數(shù)字。五、報告原則1、菌落數(shù)小于100CFU時，按照“四舍五入”原19五、報告原則3、若所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù)，則報告菌落蔓延。4、若空白對照上有菌落生長，則此次檢測結(jié)果無效。5、單位：稱重的樣品，用CFU/g；量取體積的樣品，用CFU/ml。CFU——菌落形成單位五、報告原則3、若所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù)，則報告菌落20稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)CFU/ml報告CFU/ml平板1多不可計351834.5≈3535平板2多不可計3416平均多不可計3517菌落總數(shù)報告例1稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)報告CFU/ml平板121稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)CFU/ml報告CFU/ml平板12883518291818平板22863316菌落總數(shù)報告例2

N===291818290000稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)報告平板128835122稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)CFU/ml報告CFU/ml平板1無法計數(shù)無法計數(shù)無法計數(shù)菌落蔓延平板2無法計數(shù)無法計數(shù)無法計數(shù)平均無法計數(shù)無法計數(shù)無法計數(shù)菌落總數(shù)報告例3稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)報告CFU/ml平板123稀釋度10-110-210-3空白菌落總數(shù)報告平板12平板21平均菌落總數(shù)報告例4檢驗結(jié)果無效稀釋度10-110-210-3空白菌落總數(shù)報告平板12平板224六、菌落計數(shù)方法練習六、菌落計數(shù)方法練習25醬油中菌落總數(shù)的測定——菌落計數(shù)、計算與報告醬油中菌落總數(shù)的測定——菌落計數(shù)、計算與報告26復(fù)習提問1、菌落總數(shù)的測定步驟2、測定醬油中菌落總數(shù)時稀釋度選擇的原則是什么？3、本次醬油中菌落總數(shù)測定實驗的設(shè)計？復(fù)習提問1、菌落總數(shù)的測定步驟27樣品制備10倍梯度稀釋接種倒平板倒置培養(yǎng)菌落計數(shù)報告菌落總數(shù)測定步驟菌落總數(shù)計算樣品制備10倍梯度稀釋接種倒平板倒置培養(yǎng)菌落計數(shù)報告菌菌落總28表1醬油中菌落總數(shù)的測定結(jié)果與報告稀釋度10-110-210-3空白菌落總數(shù)報告平板1平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)計算方式平板2平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平均稀釋度菌落數(shù)稀釋度菌落數(shù)稀釋度菌落數(shù)表1醬油中菌落總數(shù)的測定結(jié)果與報告稀釋度10-110-21029主要內(nèi)容一、平板菌落計數(shù)的原則和方法二、各組進行菌落計數(shù)，并填表三、菌落總數(shù)計算方法四、學生練習計算方法五、報告方法六、各組進行報告主要內(nèi)容一、平板菌落計數(shù)的原則和方法30一、平板菌落計數(shù)的原則與方法（一）原則1、平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用2、

若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，則可以計算半個平板后乘以2，以代表一個平板的菌落數(shù)3、若菌落分布均勻，300以下的平板直接進行菌落計數(shù)，大于300的可記為多不可計。4、當平板上有鏈狀菌落生長時，且無明顯界限的，則每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算。一、平板菌落計數(shù)的原則與方法（一）原則31不可計數(shù)不可計數(shù)64圖1、菌落計數(shù)原則不可計數(shù)不可計數(shù)64圖1、菌落計數(shù)原則32（二）菌落計數(shù)方法1、肉眼觀察，記號筆點數(shù)，300以下的記錄具體數(shù)據(jù)；300以上的可以不計數(shù)，寫“多不可計”。2、多，密，且均勻，可以分四個小格，數(shù)一個小格，乘以4。3、可以使用放大鏡觀察。（二）菌落計數(shù)方法1、肉眼觀察，記號筆點數(shù)，300以下的記錄33圖2、菌落計數(shù)方法圖2、菌落計數(shù)方法34二、各組進行菌落計數(shù)，并填表稀釋度10-110-210-3空白菌落總數(shù)報告平板1平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板2平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)平均二、各組進行菌落計數(shù)，并填表稀釋度10-110-210-3空35三、稀釋度的菌落數(shù)計算1、若兩個平板均為“無法計數(shù)”，則填“無法計數(shù)”。2、若一個平板“無法計數(shù)”，則用另外一個平板菌落數(shù)代表該稀釋度菌落數(shù)。3、若兩個平板都有具體數(shù)據(jù)，則求平均，用整數(shù)表示。三、稀釋度的菌落數(shù)計算1、若兩個平板均為“無法計數(shù)”，則填“36三、稀釋度菌落數(shù)的計算稀釋度例110-1例210-2例310-3例410-4菌落總數(shù)報告平板1無法計數(shù)無法計數(shù)無法計數(shù)28平板2無法計數(shù)多不可計28827平均無法計數(shù)多不可計28828三、稀釋度菌落數(shù)的計算稀釋度例1例2例3例4菌落總數(shù)報告平板37稀釋度：原溶液被沖淡的程度。稀釋倍數(shù)：溶液被稀釋的倍數(shù)。例如：稀釋度為10-1和10-2，即1:10,1:100稀釋倍數(shù)依次是10倍，100倍。

四、菌落總數(shù)的計算方法稀釋度高稀釋度：原溶液被沖淡的程度。四、菌落總數(shù)的計算方法稀釋度高381、選擇稀釋度菌落數(shù)在30~300之間的，若只有一個，則用該稀釋度菌落數(shù)乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)2、若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)都大于300CFU，則對稀釋度最高的平板進行計數(shù)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計算。3、若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU，則應(yīng)按稀釋度最低的平板菌落數(shù)計算。

四、菌落總數(shù)的計算方法1、選擇稀釋度菌落數(shù)在30~300之間的，若只有一個，則用該394、若所有稀釋度平板均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計算。5、若所有稀釋度的平板菌落數(shù)一部分小于30CFU或大于300CFU時，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。4、若所有稀釋度平板均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)40試樣例次稀釋度選定計數(shù)稀釋度菌落總數(shù)/(CFU/mL)10-210-310-41平均菌落數(shù)380521810-3520002無法計數(shù)56831210-4312000032612510-22600400010-2<100531529210-3290006多不可計2873410-3，10-4表2菌落總數(shù)計算方法匯總表試樣例次稀釋度選定計數(shù)菌落總數(shù)/(CFU/mL)10-210416、若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按如下公式計算：

N=∑C/（n1+0.1n2）d…………（1)

式中：

N―樣品中菌落數(shù)；

∑C―適宜計數(shù)范圍內(nèi)平板菌落數(shù)之和；

nl―第一個適宜稀釋度平板數(shù)；

n2―第二個適宜稀釋度平板數(shù)；

d―稀釋因子（第一稀釋度）。6、若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按如下42稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)CFU/ml報告CFU/ml平板128835？平板228633平均例6、菌落總數(shù)計數(shù)

N==1816=2918181728734稀釋度10-310-410-5菌落總數(shù)報告平板128835？43五、報告原則1、菌落數(shù)小于100CFU時，按照“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報告。2、菌落數(shù)大于或等于100CFU時，第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前2位數(shù)字，后而用0代替位數(shù)；也可以用10的指數(shù)形式來表示，按照“四舍五入”修約后，采用兩位有效數(shù)字。五、報告原則1、菌落數(shù)小于100CFU時，按照“四舍五入”原44五、報告原則3、若所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù)，則報告菌落蔓延。4、若空白