熒光光譜儀課件

熒光光譜分析儀分析測試中心陳仕云熒光光譜分析儀分析測試中心1分子熒光光譜儀A原子熒光光譜儀B分子熒光光譜儀A原子熒光光譜儀B2第一節(jié)熒光光譜分析儀第一節(jié)熒光光譜分析儀3一、概述

熒光：某些物質(zhì)吸收光能量后，可發(fā)射波長與激發(fā)光波長相同或不同的光，當(dāng)激發(fā)光源停止照射試樣時，再發(fā)射過程立即停止，這種再發(fā)射的光稱為熒光（fluorescence）。熒光包括分子熒光和原子熒光。熒光分析法：通過測定物質(zhì)分子產(chǎn)生的熒光強度進行物質(zhì)的定性與定量分析的方法。熒光光譜儀：采用熒光分析法來測量的儀器。一、概述

熒光：某些物質(zhì)吸收光能量后，可發(fā)射波長與激發(fā)4一、概述

熒光產(chǎn)生機制

物質(zhì)的分子吸收了照射光的能量后，處于基態(tài)最低能級的分子被激發(fā)到電子激發(fā)態(tài)的各個振動能級。被激發(fā)的分子與周圍的分子碰撞，并把部分能量以熱能的形式傳給周圍的分子，自己降落到單線第二電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級。然后，由此最低振動能級向基態(tài)的各個振動能級躍遷，同時以發(fā)光的形式釋放出其能量。這種光即為熒光。一、概述

熒光產(chǎn)生機制物質(zhì)的分子吸收了照射光的能量5一、概述

1.振動弛豫

2.內(nèi)轉(zhuǎn)換

3.猝滅

4.系間跨越

s單重態(tài)T多重態(tài)1,2激發(fā)波長;熒光3磷光分子去活化過程及熒光產(chǎn)生示意圖一、概述

1.振動弛豫2.內(nèi)轉(zhuǎn)換3.猝滅4.系間6一、概述

熒光分析的特點優(yōu)點：靈敏度高（可達10～12g數(shù)量級）；選擇性強，有利于分析復(fù)雜的多組分混合物；用樣量少、特異性好、操作簡便。缺點：對溫度、pH值等因素變化比較敏感；應(yīng)用范圍較窄，只能用來測量發(fā)熒光的物質(zhì)，或與某些試劑作用后發(fā)熒光的物質(zhì)。一、概述

熒光分析的特點7二、熒光分析的基本原理（一）激發(fā)光譜和熒光光譜任何發(fā)射熒光的物質(zhì)都具有兩個特征光譜，即激發(fā)光譜（excitationspectrum）和熒光光譜(fluorescencespectrum)。激發(fā)光譜和熒光光譜是熒光分析中定性和定量的基礎(chǔ)。二、熒光分析的基本原理8激發(fā)光譜：連續(xù)改變激發(fā)光波長，固定熒光發(fā)射波長，測定不同波長的激發(fā)光照射下，物質(zhì)溶液發(fā)射的熒光強度的變化。以激發(fā)光波長為橫坐標，熒光強度為縱坐標作圖，即可得到熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜。從激發(fā)光譜圖上可找到發(fā)生熒光強度最強的

激發(fā)波長λex。激發(fā)光譜：連續(xù)改變激發(fā)光波長，固定熒光發(fā)射波長，測定不同波長9熒光光譜：用λex作激發(fā)光源，并固定強度，測定不同波長的熒光強度。以熒光波長為橫坐標，熒光強度為縱坐標作圖，便得熒光光譜。熒光強度最強的波長為λem。熒光物質(zhì)的λex和λem

是鑒定物質(zhì)的依據(jù)，也是定量測定中所選用的最靈敏的波長。熒光光譜：用λex作激發(fā)光源，并固定強度，測定不同波長的熒光10（二）物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和熒光的關(guān)系強熒光物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)特征：①具有大的共軛π-π雙鍵結(jié)構(gòu)，共軛體系越大，越容易產(chǎn)生熒光；②具有剛性平面結(jié)構(gòu)；③具有最低的單線電子激發(fā)態(tài)，S1為π-π型；④若取代基團為給電子取代基，熒光強度增加。（二）物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和熒光的關(guān)系11三、熒光光譜儀的原理與分類

熒光光譜儀的工作原理在激發(fā)光的頻率、強度以及液層厚度不變的情況下，熒光物質(zhì)所發(fā)射的熒光強度與溶液的濃度成正比。因此，可以通過測定熒光強度來求出該物質(zhì)的含量。熒光分析法所測量的是待測物質(zhì)所發(fā)射的熒光強弱，屬于發(fā)射光譜分析，熒光光度計和熒光分光光度計屬于發(fā)射光譜儀器。三、熒光光譜儀的原理與分類熒光光譜儀的工作原理12三、熒光光譜儀的原理與分類

熒光光譜儀分類熒光光度計（fluorophotometer）：采用濾光片做單色器，結(jié)構(gòu)較簡單，功能也較差。熒光分光光度計（fluorospectrophotometer）：采用棱鏡或光柵為色散元件，結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，功能較強，但價格遠遠高于熒光光度計。

三、熒光光譜儀的原理與分類熒光光譜儀分類13三、熒光光譜儀的原理與分類

FP-6500熒光分光光度計三、熒光光譜儀的原理與分類FP-6500熒光分光光度計14三、熒光光譜儀的原理與分類

JascoFP8500熒光光譜儀三、熒光光譜儀的原理與分類JascoFP8500熒光光15三、熒光光譜儀的原理與分類

ARL9800系列X射線熒光光譜儀三、熒光光譜儀的原理與分類ARL9800系列X射線熒16三、熒光光譜儀的原理與分類

三、熒光光譜儀的原理與分類17熒光光譜儀的主要結(jié)構(gòu)激光光源：單色器：樣品池：檢測器：記錄顯示系統(tǒng)：熒光光譜儀的主要結(jié)構(gòu)18光源激發(fā)單色器吸收池檢測放大系統(tǒng)熒光光度計結(jié)構(gòu)示意圖0.208發(fā)射單色器四、熒光光譜儀的結(jié)構(gòu)光源激發(fā)單色器吸收池檢測放大系統(tǒng)熒光光度計結(jié)構(gòu)示意圖0.2019熒光光譜儀課件20熒光分光光度計光路圖熒光分光光度計光路圖21

PF8500熒光光譜儀的性能指標主要包括：靈敏度:800:1波長范圍:Ex:200-850nmEm:200-850nm波長精度:±0.3nm分辨率:1nm光譜帶通:0.3nm信噪比PF8500熒光光譜儀的性能指標主要包括：22靈敏度靈敏度是指能被儀器檢出的最低信號，或某一標準熒光物質(zhì)稀溶液在選定波長的激發(fā)光照射下能檢出的最低濃度，是儀器最重要的性能指標之一。多數(shù)熒光光譜儀的靈敏度較高，可達10-10g~10-12g水平，有利于檢測體液中的微量物質(zhì)。靈敏度23波長范圍波長范圍指熒光光譜儀的有效工作波段，包括激發(fā)通道波長范圍、投射通道波長范圍和熒光通道波長范圍。波長范圍越大，應(yīng)用范圍越廣。一般熒光分光光度計都采用氙燈作光源，光柵為單色器分光元件，其有效工作波段在200nm～1000nm范圍之內(nèi)。波長范圍24波長精度指其波長計數(shù)器的指示值與真實光波長的數(shù)值相符的程度。特定的激發(fā)波長和發(fā)射波長是定性分析和定量測定的基礎(chǔ)，因此波長精度也是熒光光譜儀的核心指標之一。目前熒光分光光度計的波長精度誤差在±（0.2nm～2nm）范圍之內(nèi)。波長精度25分辨率指熒光儀器對靠近的峰尖分開的能力，它與波長精度有密切關(guān)系，決定著對混合物成分分析特異性的好壞。常用儀器的分辨率在0.2nm～5nm之間，主要由光柵的每毫米刻線數(shù)決定。分辨率26光譜帶通指儀器主機狹縫寬窄程度的指數(shù)。以一定狹縫幾何密度對應(yīng)的光譜半寬度來直接表示光譜純度。光譜純度直接影響儀器的分辨率、靈敏度以及背景干擾。目前的熒光分光光度計的光譜帶通在0.15nm～20nm之間，一般都采用連續(xù)可調(diào)方式。光譜帶通27信噪比與響應(yīng)速度用空白樣品測得的峰值叫做噪聲峰值，待測樣品測得的峰值和噪聲峰值之比就叫做信噪比。信噪比越高，檢測結(jié)果的準確性也越高。儀器的響應(yīng)速度是指電路樣品通道對光電信號反映的快慢。響應(yīng)速度關(guān)系到波長掃描速度的選擇、光譜峰的尖銳程度以及隨機噪聲的大小。信噪比與響應(yīng)速度28PF8500熒光光譜儀的操作PF8500熒光光譜儀的操作29PF8500熒光光譜儀的操作PF8500熒光光譜儀的操作30PF8500熒光光譜儀的操作PF8500熒光光譜儀的操作31PF8500熒光光譜儀的操作開機：插上電源插頭，打開儀器power，再打開電腦。雙擊桌面“SpectraManger”，打開測試軟件，雙擊SpectraMeasurement。點擊SearchMaximun進行Ex、Em的最大波長掃描（最大波長掃描時Ex、Em燈打開）。PF8500熒光光譜儀的操作32PF8500熒光光譜儀的操作單擊“Measure”菜單中“Paramenters”，進行參數(shù)設(shè)置，測量Em：固定Ex，起始波長與Ex相差10-20nm波長，終止波長不作要求；測量Ex：固定Em，終止波長小于Em，起始波長不作要求；參數(shù)設(shè)置好后點ok，設(shè)置完畢。關(guān)閉“Ex”、“Em”，點擊“autozero”進行調(diào)零。PF8500熒光光譜儀的操作33PF8500熒光光譜儀的操作打開“Ex、Em”，點“S”進行樣品測試。點擊“File”菜單中“Export”保存“txt”文件。關(guān)機：先關(guān)測試軟件和電腦，再關(guān)儀器。PF8500熒光光譜儀的操作34熒光光譜儀的使用與維護嚴格按照儀器規(guī)定的操作步驟進行操作。電源：電壓、電流、電源的穩(wěn)定須符合儀器規(guī)定。

光源：需預(yù)熱20min，燈及其窗口要保持清潔。

單色器：應(yīng)注意防潮、防塵、防污和防機械損傷。

光電倍增管：加高壓時切不可受外來光線直接照射。

樣品池：使用時應(yīng)同一個方向插放，不能經(jīng)常磨擦。熒光光譜儀的使用與維護35熒光光譜儀的使用與維護放入樣品后注意關(guān)閉樣品倉蓋，避免入射光露出樣品倉。樣品檢測完畢后，需要對樣品進行專門的回收處理，不得隨意倒入水池中，避免污染環(huán)境，造成對自己和他人健康的危害。熒光光譜儀的使用與維護36熒光光譜儀的故障排除儀器出現(xiàn)故障，必須請專門人員進行檢修。安全防護：操作者不能直視光源，以免紫外線損傷眼睛。遇到突發(fā)事件，要先關(guān)儀器，再關(guān)電閘。熒光光譜儀的故障排除儀器出現(xiàn)故障，必須請專門人員進行檢修。37七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用38七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用39七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用40七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用41七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用42七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用43七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用44七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用45七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用46七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用47第二節(jié)原子光譜分析儀第二節(jié)原子光譜分析儀48一、概述原子光譜分析儀的特點優(yōu)點：分析速度快、操作簡便、選擇性好、靈敏度高、測定范圍廣、試劑用量少等，可同時測定多種元素，不必進行復(fù)雜的分離處理。缺點：對溫度、pH值等因素變化比較敏感；應(yīng)用范圍較窄，只能用來測量發(fā)熒光的物質(zhì)，或與某些試劑作用后發(fā)熒光的物質(zhì)。一、概述原子光譜分析儀的特點49一、概述原子光譜分析儀的分類原子光譜分析儀器原子吸收光譜儀原子發(fā)射光譜儀原子熒光光譜儀一、概述原子光譜分析儀的分類原子光譜原子吸原子發(fā)原子熒50二、原子熒光光譜儀

原子熒光光譜分析法（AFS）：利用原子熒光譜線的波長和強度進行物質(zhì)的定性與定量分析的方法。在一定實驗條件下，被測元素的濃度與熒光強度成正比，據(jù)此可對物質(zhì)進行定量分析。特點：設(shè)備簡單、靈敏度高、光譜干擾少，工作曲線線性范圍寬，可以進行多元素測定，應(yīng)用廣泛。二、原子熒光光譜儀原子熒光光譜分析法（AFS）：51原子熒光光譜儀分類色散型原子熒光光譜儀非色散型原子熒光光譜儀兩類儀器的結(jié)構(gòu)基本相似，差別在于非色散型儀器不用單色器。二、原子熒光光譜儀原子熒光光譜儀分類二、原子熒光光譜儀52色散型原子熒光光譜儀結(jié)構(gòu)特點輻射光源：激發(fā)產(chǎn)生原子熒光；單色器：選擇熒光譜線，排除其他光的干擾；原子化器：將被測元素轉(zhuǎn)化為原子蒸氣；檢測器：檢測光信號并轉(zhuǎn)換為電信號，常用光電倍增管；顯示和記錄裝置：顯示和記錄測量結(jié)果，包括了電表、數(shù)字表、記錄儀等。二、原子熒光光譜儀色散型原子熒光光譜儀結(jié)構(gòu)特點二、原子熒光光譜儀53二、原子熒光光譜儀

AF-610D環(huán)保型原子熒光光譜儀二、原子熒光光譜儀AF-610D環(huán)保型原子熒光光譜儀54二、原子熒光光譜儀

AF-630環(huán)保型原子熒光光譜儀二、原子熒光光譜儀AF-630環(huán)保型原子熒光光譜儀55我國最新推出的AF-630環(huán)保型原子熒光光譜儀是世界上第一臺三通道環(huán)保型原子熒光光譜儀，實現(xiàn)了世界首創(chuàng)的“高效除汞技術(shù)”，有效解決了汞污染。二、原子熒光光譜儀我國最新推出的AF-630環(huán)保型原子熒光光譜儀是56

熒光光譜儀的性能指標：檢測靈敏度特征濃度分辨率基線穩(wěn)定度波長精度測量精度熒光光譜儀的性能指標：57檢測靈敏度檢測靈敏度是指在一定濃度時，測量值的變量（dA）與相應(yīng)的待測元素濃度的變量（dC）之比，即s=dA/dC。就是校準工作曲線的斜率，表明吸光度對濃度的變化率，可以理解為單位被測元素濃度變化量引起的吸光度變化量。變化率越大，靈敏度越高。檢測靈敏度58特征濃度指產(chǎn)生1％吸收或0.0044吸光度時所對應(yīng)的被測元素的濃度或質(zhì)量。特征濃度S值越小，表示分析靈敏度越高。特征濃度還不能用來表征某儀器對某元素能被檢出所需要的最小濃度，但它可以用于估算較適宜的濃度測量范圍及取樣量。特征濃度59檢出限指在選定的實驗條件下，被測元素溶液能給出的測量信號3倍于標準偏差時所對應(yīng)的濃度（mg/L）或質(zhì)量(mg或g)，反映儀器對某元素在一定條件下的檢出能力。既反映儀器的質(zhì)量和穩(wěn)定性，也反映儀器對某元素在一定條件下的檢出能力范圍越大，應(yīng)用范圍越廣。檢出限越低，說明儀器性能越好，對元素的檢出能力越強。檢出限60原子光譜分析儀的使用嚴格按照儀器規(guī)定的操作步驟進行操作：開機參數(shù)設(shè)置打開主機、PC電源，進入

WINDOWS界面，啟動工作站，聯(lián)機，儀器初始化自檢結(jié)束后，即可開始工作進入菜單，選擇測定的元素?zé)?，設(shè)置實驗所需的參數(shù)調(diào)節(jié)使燃燒頭和光路平行并位于光路正下方按測量的方式(火焰或石墨爐)不同選擇實驗測量的條件和步驟根據(jù)實驗所得結(jié)果進行分析，獲得相關(guān)的信息，產(chǎn)生報告光路調(diào)整樣品測定結(jié)果分析關(guān)機退出工作站，關(guān)掉PC和主機電源、氣體主閥、空壓機、風(fēng)機原子光譜分析儀的使用開機參數(shù)設(shè)置打開主機、PC61原子光譜分析儀的常見故障開機故障或沒有吸收；靈敏度低；精密度差；表針回零不好；基線不穩(wěn)，噪音過大。

出現(xiàn)故障，必須請專門人員進行檢修。原子光譜分析儀的常見故障開機故障或沒有吸收；62原子光譜分析儀在臨床檢驗中的應(yīng)用血漿（或血清）中鈉、鉀離子火焰光度法測定血清鋅的原子吸收法測定石墨爐原子吸收光譜法測定血鉛石墨爐原子吸收光譜法測定血中鎘含量砷元素測定原子光譜分析儀在臨床檢驗中的應(yīng)用63原子光譜分析儀的新進展全譜直讀功能智能化、小型化、實用化、低分析成本原子光譜分析儀的新進展64全譜直讀等離子體發(fā)射光譜儀全譜直讀等離子體發(fā)射光譜儀65便攜式光譜儀便攜式光譜儀66謝謝！謝謝！67熒光光譜分析儀分析測試中心陳仕云熒光光譜分析儀分析測試中心68分子熒光光譜儀A原子熒光光譜儀B分子熒光光譜儀A原子熒光光譜儀B69第一節(jié)熒光光譜分析儀第一節(jié)熒光光譜分析儀70一、概述

熒光：某些物質(zhì)吸收光能量后，可發(fā)射波長與激發(fā)光波長相同或不同的光，當(dāng)激發(fā)光源停止照射試樣時，再發(fā)射過程立即停止，這種再發(fā)射的光稱為熒光（fluorescence）。熒光包括分子熒光和原子熒光。熒光分析法：通過測定物質(zhì)分子產(chǎn)生的熒光強度進行物質(zhì)的定性與定量分析的方法。熒光光譜儀：采用熒光分析法來測量的儀器。一、概述

熒光：某些物質(zhì)吸收光能量后，可發(fā)射波長與激發(fā)71一、概述

熒光產(chǎn)生機制

物質(zhì)的分子吸收了照射光的能量后，處于基態(tài)最低能級的分子被激發(fā)到電子激發(fā)態(tài)的各個振動能級。被激發(fā)的分子與周圍的分子碰撞，并把部分能量以熱能的形式傳給周圍的分子，自己降落到單線第二電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級。然后，由此最低振動能級向基態(tài)的各個振動能級躍遷，同時以發(fā)光的形式釋放出其能量。這種光即為熒光。一、概述

熒光產(chǎn)生機制物質(zhì)的分子吸收了照射光的能量72一、概述

1.振動弛豫

2.內(nèi)轉(zhuǎn)換

3.猝滅

4.系間跨越

s單重態(tài)T多重態(tài)1,2激發(fā)波長;熒光3磷光分子去活化過程及熒光產(chǎn)生示意圖一、概述

1.振動弛豫2.內(nèi)轉(zhuǎn)換3.猝滅4.系間73一、概述

熒光分析的特點優(yōu)點：靈敏度高（可達10～12g數(shù)量級）；選擇性強，有利于分析復(fù)雜的多組分混合物；用樣量少、特異性好、操作簡便。缺點：對溫度、pH值等因素變化比較敏感；應(yīng)用范圍較窄，只能用來測量發(fā)熒光的物質(zhì)，或與某些試劑作用后發(fā)熒光的物質(zhì)。一、概述

熒光分析的特點74二、熒光分析的基本原理（一）激發(fā)光譜和熒光光譜任何發(fā)射熒光的物質(zhì)都具有兩個特征光譜，即激發(fā)光譜（excitationspectrum）和熒光光譜(fluorescencespectrum)。激發(fā)光譜和熒光光譜是熒光分析中定性和定量的基礎(chǔ)。二、熒光分析的基本原理75激發(fā)光譜：連續(xù)改變激發(fā)光波長，固定熒光發(fā)射波長，測定不同波長的激發(fā)光照射下，物質(zhì)溶液發(fā)射的熒光強度的變化。以激發(fā)光波長為橫坐標，熒光強度為縱坐標作圖，即可得到熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜。從激發(fā)光譜圖上可找到發(fā)生熒光強度最強的

激發(fā)波長λex。激發(fā)光譜：連續(xù)改變激發(fā)光波長，固定熒光發(fā)射波長，測定不同波長76熒光光譜：用λex作激發(fā)光源，并固定強度，測定不同波長的熒光強度。以熒光波長為橫坐標，熒光強度為縱坐標作圖，便得熒光光譜。熒光強度最強的波長為λem。熒光物質(zhì)的λex和λem

是鑒定物質(zhì)的依據(jù)，也是定量測定中所選用的最靈敏的波長。熒光光譜：用λex作激發(fā)光源，并固定強度，測定不同波長的熒光77（二）物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和熒光的關(guān)系強熒光物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)特征：①具有大的共軛π-π雙鍵結(jié)構(gòu)，共軛體系越大，越容易產(chǎn)生熒光；②具有剛性平面結(jié)構(gòu)；③具有最低的單線電子激發(fā)態(tài)，S1為π-π型；④若取代基團為給電子取代基，熒光強度增加。（二）物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和熒光的關(guān)系78三、熒光光譜儀的原理與分類

熒光光譜儀的工作原理在激發(fā)光的頻率、強度以及液層厚度不變的情況下，熒光物質(zhì)所發(fā)射的熒光強度與溶液的濃度成正比。因此，可以通過測定熒光強度來求出該物質(zhì)的含量。熒光分析法所測量的是待測物質(zhì)所發(fā)射的熒光強弱，屬于發(fā)射光譜分析，熒光光度計和熒光分光光度計屬于發(fā)射光譜儀器。三、熒光光譜儀的原理與分類熒光光譜儀的工作原理79三、熒光光譜儀的原理與分類

熒光光譜儀分類熒光光度計（fluorophotometer）：采用濾光片做單色器，結(jié)構(gòu)較簡單，功能也較差。熒光分光光度計（fluorospectrophotometer）：采用棱鏡或光柵為色散元件，結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，功能較強，但價格遠遠高于熒光光度計。

三、熒光光譜儀的原理與分類熒光光譜儀分類80三、熒光光譜儀的原理與分類

FP-6500熒光分光光度計三、熒光光譜儀的原理與分類FP-6500熒光分光光度計81三、熒光光譜儀的原理與分類

JascoFP8500熒光光譜儀三、熒光光譜儀的原理與分類JascoFP8500熒光光82三、熒光光譜儀的原理與分類

ARL9800系列X射線熒光光譜儀三、熒光光譜儀的原理與分類ARL9800系列X射線熒83三、熒光光譜儀的原理與分類

三、熒光光譜儀的原理與分類84熒光光譜儀的主要結(jié)構(gòu)激光光源：單色器：樣品池：檢測器：記錄顯示系統(tǒng)：熒光光譜儀的主要結(jié)構(gòu)85光源激發(fā)單色器吸收池檢測放大系統(tǒng)熒光光度計結(jié)構(gòu)示意圖0.208發(fā)射單色器四、熒光光譜儀的結(jié)構(gòu)光源激發(fā)單色器吸收池檢測放大系統(tǒng)熒光光度計結(jié)構(gòu)示意圖0.2086熒光光譜儀課件87熒光分光光度計光路圖熒光分光光度計光路圖88

PF8500熒光光譜儀的性能指標主要包括：靈敏度:800:1波長范圍:Ex:200-850nmEm:200-850nm波長精度:±0.3nm分辨率:1nm光譜帶通:0.3nm信噪比PF8500熒光光譜儀的性能指標主要包括：89靈敏度靈敏度是指能被儀器檢出的最低信號，或某一標準熒光物質(zhì)稀溶液在選定波長的激發(fā)光照射下能檢出的最低濃度，是儀器最重要的性能指標之一。多數(shù)熒光光譜儀的靈敏度較高，可達10-10g~10-12g水平，有利于檢測體液中的微量物質(zhì)。靈敏度90波長范圍波長范圍指熒光光譜儀的有效工作波段，包括激發(fā)通道波長范圍、投射通道波長范圍和熒光通道波長范圍。波長范圍越大，應(yīng)用范圍越廣。一般熒光分光光度計都采用氙燈作光源，光柵為單色器分光元件，其有效工作波段在200nm～1000nm范圍之內(nèi)。波長范圍91波長精度指其波長計數(shù)器的指示值與真實光波長的數(shù)值相符的程度。特定的激發(fā)波長和發(fā)射波長是定性分析和定量測定的基礎(chǔ)，因此波長精度也是熒光光譜儀的核心指標之一。目前熒光分光光度計的波長精度誤差在±（0.2nm～2nm）范圍之內(nèi)。波長精度92分辨率指熒光儀器對靠近的峰尖分開的能力，它與波長精度有密切關(guān)系，決定著對混合物成分分析特異性的好壞。常用儀器的分辨率在0.2nm～5nm之間，主要由光柵的每毫米刻線數(shù)決定。分辨率93光譜帶通指儀器主機狹縫寬窄程度的指數(shù)。以一定狹縫幾何密度對應(yīng)的光譜半寬度來直接表示光譜純度。光譜純度直接影響儀器的分辨率、靈敏度以及背景干擾。目前的熒光分光光度計的光譜帶通在0.15nm～20nm之間，一般都采用連續(xù)可調(diào)方式。光譜帶通94信噪比與響應(yīng)速度用空白樣品測得的峰值叫做噪聲峰值，待測樣品測得的峰值和噪聲峰值之比就叫做信噪比。信噪比越高，檢測結(jié)果的準確性也越高。儀器的響應(yīng)速度是指電路樣品通道對光電信號反映的快慢。響應(yīng)速度關(guān)系到波長掃描速度的選擇、光譜峰的尖銳程度以及隨機噪聲的大小。信噪比與響應(yīng)速度95PF8500熒光光譜儀的操作PF8500熒光光譜儀的操作96PF8500熒光光譜儀的操作PF8500熒光光譜儀的操作97PF8500熒光光譜儀的操作PF8500熒光光譜儀的操作98PF8500熒光光譜儀的操作開機：插上電源插頭，打開儀器power，再打開電腦。雙擊桌面“SpectraManger”，打開測試軟件，雙擊SpectraMeasurement。點擊SearchMaximun進行Ex、Em的最大波長掃描（最大波長掃描時Ex、Em燈打開）。PF8500熒光光譜儀的操作99PF8500熒光光譜儀的操作單擊“Measure”菜單中“Paramenters”，進行參數(shù)設(shè)置，測量Em：固定Ex，起始波長與Ex相差10-20nm波長，終止波長不作要求；測量Ex：固定Em，終止波長小于Em，起始波長不作要求；參數(shù)設(shè)置好后點ok，設(shè)置完畢。關(guān)閉“Ex”、“Em”，點擊“autozero”進行調(diào)零。PF8500熒光光譜儀的操作100PF8500熒光光譜儀的操作打開“Ex、Em”，點“S”進行樣品測試。點擊“File”菜單中“Export”保存“txt”文件。關(guān)機：先關(guān)測試軟件和電腦，再關(guān)儀器。PF8500熒光光譜儀的操作101熒光光譜儀的使用與維護嚴格按照儀器規(guī)定的操作步驟進行操作。電源：電壓、電流、電源的穩(wěn)定須符合儀器規(guī)定。

光源：需預(yù)熱20min，燈及其窗口要保持清潔。

單色器：應(yīng)注意防潮、防塵、防污和防機械損傷。

光電倍增管：加高壓時切不可受外來光線直接照射。

樣品池：使用時應(yīng)同一個方向插放，不能經(jīng)常磨擦。熒光光譜儀的使用與維護102熒光光譜儀的使用與維護放入樣品后注意關(guān)閉樣品倉蓋，避免入射光露出樣品倉。樣品檢測完畢后，需要對樣品進行專門的回收處理，不得隨意倒入水池中，避免污染環(huán)境，造成對自己和他人健康的危害。熒光光譜儀的使用與維護103熒光光譜儀的故障排除儀器出現(xiàn)故障，必須請專門人員進行檢修。安全防護：操作者不能直視光源，以免紫外線損傷眼睛。遇到突發(fā)事件，要先關(guān)儀器，再關(guān)電閘。熒光光譜儀的故障排除儀器出現(xiàn)故障，必須請專門人員進行檢修。104七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用105七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用106七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用107七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用108七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用109七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用110七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用111七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用112七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用113七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用七、熒光光譜儀的臨床應(yīng)用114第二節(jié)原子光譜分析儀第二節(jié)原子光譜分析儀115一、概述原子光譜分析儀的特點優(yōu)點：分析速度快、操作簡便、選擇性好、靈敏度高、測定范圍廣、試劑用量少等，可同時測定多種元素，不必進行復(fù)雜的分離處理。缺點：對溫度、pH值等因素變化比較敏感；應(yīng)用范圍較窄，只能用來測量發(fā)熒光的物質(zhì)，或與某些試劑作用后發(fā)熒光的物質(zhì)。一、概述原子光譜分析儀的特點116一、概述原子光譜分析儀的分類原子光譜分析儀器原子吸收光譜儀原子發(fā)射光譜儀原子熒光光譜儀一、概述原子光譜分析儀的分類原子光譜原子吸原子發(fā)原子熒117二、原子熒光光譜儀

原子熒光光譜分析法（AFS）：利用原子熒光譜線的波長和強度進行物質(zhì)的定性與定量分析的方法。在一定實驗條件下，被測元素的濃度與熒光強度成正比，據(jù)此可對物質(zhì)進行定量分析。特點：設(shè)備簡單、靈敏度高、光譜干擾少，工作曲線線性范圍寬，可以進行多元素測定，應(yīng)用廣泛。二、原子熒光光譜儀原子熒光光譜分析法（AFS）：118原子熒光光譜儀分類色散型原子熒光光譜儀非色散型原子熒光光譜儀兩類儀器的結(jié)構(gòu)基本相似，差別在于非色散型儀器不用單色器。二、原子熒光光譜儀原子熒光光譜儀分類二、原子熒光光譜儀119色散型原子熒光光譜儀結(jié)構(gòu)特點輻射光源：激發(fā)產(chǎn)生原子熒光；單色器：選擇熒光譜線，排除其他光的干擾；原子化器：將被測元素轉(zhuǎn)化為原子蒸氣；檢測器：檢測光信號并轉(zhuǎn)換為電信號，常用光電倍增管；顯示和記錄裝置：顯示和記錄測量結(jié)果，包括了電表、數(shù)字表、記錄儀等。二、原子熒光光譜儀色散型原子熒光光譜儀結(jié)構(gòu)特點二、原子熒光光譜儀120二、原子熒光光譜儀

AF-610D環(huán)保型原子熒光光譜儀二、原子熒光光譜儀AF-610D環(huán)保型原子熒光光譜儀121二、原子熒光光譜儀

AF-630環(huán)保型