梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查與技術(shù)規(guī)范課件

梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查與技術(shù)規(guī)范

朱穗蘭2013年3月2日主要內(nèi)容梅毒概述梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范梅毒概述（一）性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長(zhǎng)，傳染性越來(lái)越小到感染后2年，通過(guò)性接觸一般無(wú)傳染性母嬰傳播在妊娠7周時(shí)，梅毒螺旋體即可通過(guò)胎盤(pán)傳染未經(jīng)治療者，雖已無(wú)性傳播（病期>2年），但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒,病期越長(zhǎng)，傳染性越小;梅毒概述（二）一期梅毒硬下疳和(或)腹股溝淋巴結(jié)腫大二期梅毒

可有一期梅毒史，病期在2年以?xún)?nèi)有多形性皮疹、扁平濕疣等三期（晚期）梅毒可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上皮膚黏膜損害等，包括神經(jīng)梅毒、心血管梅毒隱性（潛伏）梅毒早期：病期在2年以?xún)?nèi)；晚期：病期在2年以上。無(wú)任何梅毒性的癥狀和體征胎傳（先天）梅毒早期：在2歲前發(fā)生；晚期：在2歲以后發(fā)病。胎傳隱性梅毒：無(wú)臨床表現(xiàn)梅毒概述（三）疑似病例、確證病例診斷依據(jù)：病史癥狀實(shí)驗(yàn)室檢查梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)診斷有決定性意義梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類(lèi)(1)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性梅毒抗體）(2)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）兩類(lèi)方法。為什么梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷需要兩類(lèi)血清學(xué)檢測(cè)方法？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來(lái)的一種類(lèi)脂成分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完全抗原，刺激機(jī)體在3周-4周產(chǎn)生類(lèi)脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。主要是IgM和IgG混合抗體?？贵w的作用無(wú)保護(hù)作用，治療監(jiān)測(cè)。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)為什么有定性和定量?jī)煞N檢測(cè)法？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原基本成分都是一樣方法包括：（1）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）（3）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)等?；境煞质切牧字蚜字湍懝檀伎乖贵w結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見(jiàn)上述方法的敏感性和特異性都基本相似試驗(yàn)特點(diǎn)點(diǎn)原理和成成分與試試驗(yàn)相同同血清不需需要滅活活不需要顯顯微鏡觀觀測(cè)結(jié)果果可作定量量試驗(yàn)有現(xiàn)成的的試劑盒盒攜帶方方便操作簡(jiǎn)單單價(jià)格便宜宜操作要點(diǎn)點(diǎn)儀器：水平旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)儀。定性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)加樣：吸吸取50ul血血清(漿)放在卡片片圈中，，并均勻勻地涂布布在整個(gè)個(gè)圈內(nèi)加抗原：：將抗原原輕輕搖搖勻，用用9號(hào)針頭加加1滴抗原反應(yīng)：將將卡片置置水平旋旋轉(zhuǎn)儀旋旋轉(zhuǎn)8分鐘，立立即在亮亮光下觀觀察結(jié)果果3.定量試驗(yàn)驗(yàn)稀釋夜準(zhǔn)準(zhǔn)備：在在圈內(nèi)加加入50uL生理鹽水水（根據(jù)需需要確定定稀釋度度），勿勿將鹽水水涂開(kāi)。。加樣：吸吸取50uL血清（漿漿）與各各圈中鹽鹽水作系列列稀釋?zhuān)?，并涂布布整個(gè)圈圈內(nèi)。下同定性性試驗(yàn)。。非梅毒螺螺旋體抗抗原血清清學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果判判斷RPRTRUST非梅毒螺螺旋體抗抗原血清清學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)臨床意意義早期梅毒毒硬下疳疳出現(xiàn)1周-2周后，，血清可可呈陽(yáng)性性。經(jīng)治療后后血清滴滴度可下下降并轉(zhuǎn)陰性，故故可作為為療效觀觀察、判判愈、復(fù)復(fù)發(fā)或再再感染的的指征。。為什么要要做定量量檢測(cè)？？非梅毒螺螺旋體抗抗原血清清學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)臨床意意義一期梅毒毒1年后后轉(zhuǎn)為陰陰性二期梅毒毒2年后后轉(zhuǎn)為陰陰性。晚期梅毒毒治治療后血血清滴度度下降緩緩慢，2年后約約50%病人血血清反應(yīng)應(yīng)仍為陽(yáng)陽(yáng)性。TRUST結(jié)果果解釋示示意圖假陽(yáng)性問(wèn)問(wèn)題假陽(yáng)性：非梅毒毒患者的的血清反反應(yīng)呈陽(yáng)陽(yáng)性①技術(shù)性假假陽(yáng)性由于標(biāo)本的的保存不當(dāng)當(dāng)（如細(xì)胞胞污染或溶溶血）、試試劑質(zhì)量差差或過(guò)期、、或?qū)嶒?yàn)室室操作錯(cuò)誤誤所造成。。②生物學(xué)假陽(yáng)陽(yáng)性是由于患者者有其他疾疾病或生理理狀態(tài)發(fā)生生變化，使使梅毒血清清試驗(yàn)出現(xiàn)現(xiàn)陽(yáng)性某些疾?。海航Y(jié)核、瘧瘧疾、肝病病、紅斑狼狼瘡、流感感、肺炎、、類(lèi)風(fēng)濕性性關(guān)節(jié)炎、、風(fēng)濕性心心臟病、風(fēng)風(fēng)疹、系統(tǒng)統(tǒng)性硬化癥癥等，疾病病發(fā)展過(guò)程程中釋放心心磷脂到血血液中呈假陽(yáng)性。老年人。生理機(jī)能發(fā)發(fā)生變化：：少數(shù)孕婦婦也可發(fā)生生生物學(xué)假假陽(yáng)性。梅毒假陽(yáng)性性反應(yīng)的處處理技術(shù)性假陽(yáng)陽(yáng)性反應(yīng)一一般是由于于操作錯(cuò)誤誤引起的假假陽(yáng)性反應(yīng)應(yīng)，經(jīng)過(guò)重重復(fù)試驗(yàn)即即可除外。。對(duì)生物學(xué)假假陽(yáng)性反應(yīng)應(yīng)，應(yīng)做TPHA（（TPPA）等試驗(yàn)驗(yàn)進(jìn)行排除除。前帶現(xiàn)象指非梅毒螺螺旋體抗原原血清試驗(yàn)驗(yàn)中，有時(shí)時(shí)血清中存存在高濃度度的抗體時(shí)時(shí)出現(xiàn)的弱弱陽(yáng)性、不不典型或陰陰性反應(yīng)的的結(jié)果，而而臨床上又又象二期梅梅毒，此時(shí)時(shí)將血清稀稀釋后再進(jìn)進(jìn)行試驗(yàn)，，出現(xiàn)了陽(yáng)陽(yáng)性的結(jié)果果，該現(xiàn)象象稱(chēng)為前帶帶現(xiàn)象。處理：將血清稀釋釋后再進(jìn)行行試驗(yàn)。耐血清性（（血清固定定）指經(jīng)抗梅毒毒治療后，，非梅毒螺螺旋體抗原原血清試驗(yàn)驗(yàn)在一定時(shí)時(shí)期內(nèi)不陰陰轉(zhuǎn)。早期期的耐血清清性常與治治療量不足足或不規(guī)則則治療、復(fù)復(fù)發(fā)、再感感染或有神神經(jīng)系統(tǒng)梅梅毒等因素素有關(guān)。梅毒螺旋體體抗原血清清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體體抗原血清清學(xué)試驗(yàn)方方法梅毒螺旋體體顆粒凝集集試驗(yàn)(TPPA)梅毒螺旋體體血球凝集集試驗(yàn)(TPHA)梅毒酶聯(lián)免免疫吸附試試驗(yàn)（ELISA））梅毒免疫層層析法-梅梅毒快速檢檢測(cè)(RT)熒光螺旋體體抗體吸收收試驗(yàn)（FTA-ABS）化學(xué)發(fā)光免免疫分析法法（CLIA）梅毒螺旋體體蛋白印跡跡試驗(yàn)（WB）TPPATPPA試試驗(yàn)用梅毒毒螺旋體致致敏明膠顆顆粒，此致致敏顆粒與與人血清中中的抗梅毒毒螺旋體抗抗體結(jié)合，，產(chǎn)生可見(jiàn)見(jiàn)的凝集反反應(yīng)，具有有較高的敏敏感性和特特異性。TPPA是是目前WHO認(rèn)可的的梅毒抗原原血清學(xué)試試驗(yàn)的“金金標(biāo)準(zhǔn)”，，常用于新新方法、新新試劑評(píng)價(jià)價(jià)的參照標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)。TPPA(TPHA)試驗(yàn)原理示示意圖梅毒螺旋體體抗原血清清試驗(yàn)的臨臨床意義一般情況下下，一旦梅梅毒患者梅梅毒螺旋體體抗原血清清試驗(yàn)呈陽(yáng)陽(yáng)性，即使使經(jīng)過(guò)正規(guī)規(guī)有效治療療治，仍將將終身陽(yáng)性性。所以TPPA等等試驗(yàn)不能能作為療效效觀察的指指標(biāo)。作為非梅毒毒螺旋體抗抗原血清試試驗(yàn)初篩陽(yáng)陽(yáng)性標(biāo)本的的確證試驗(yàn)驗(yàn)。TPPA等等陽(yáng)性不能能區(qū)分既往往感染和現(xiàn)現(xiàn)癥感染，，應(yīng)結(jié)合非非梅毒螺旋旋體抗原血血清試驗(yàn)結(jié)結(jié)果進(jìn)行診診斷。TPPA結(jié)結(jié)果解釋示示意圖梅毒血清學(xué)學(xué)試驗(yàn)結(jié)果果解釋梅毒血清學(xué)學(xué)試驗(yàn)結(jié)果果解釋梅毒檢測(cè)技技術(shù)規(guī)范簡(jiǎn)簡(jiǎn)介全國(guó)梅毒檢檢測(cè)技術(shù)規(guī)規(guī)范第一章梅毒檢測(cè)樣樣品的采集集和處理第二章梅毒血清學(xué)學(xué)檢測(cè)第三章梅毒病原體體顯微鏡檢檢測(cè)第四章梅毒病原體體核酸檢測(cè)測(cè)第五章實(shí)驗(yàn)室生物物安全第六章梅毒檢測(cè)實(shí)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量量管理第一章樣樣品的采集集和處理血清、血漿漿、全血及及腦脊液:梅毒血清學(xué)學(xué)檢測(cè)或核核酸檢測(cè)皮損部位組組織液、淋淋巴穿刺液液:梅毒病原體體檢測(cè)或核核酸檢測(cè)。。梅毒血清學(xué)學(xué)試驗(yàn)適用用范圍第二章梅梅毒血清學(xué)學(xué)檢測(cè)檢測(cè)目的:臨床診斷、、血液篩查查、流行病病學(xué)監(jiān)測(cè)以臨床診斷斷為目的的的檢測(cè)是為為了確定梅梅毒感染的的狀況。以血液篩查查為目的的的檢測(cè)是為為了防止梅梅毒的經(jīng)血血傳播。以流行病學(xué)學(xué)監(jiān)測(cè)為目目的的檢測(cè)測(cè)是為了調(diào)調(diào)查梅毒血血清學(xué)感染染率和發(fā)病病率。梅毒實(shí)驗(yàn)室室檢測(cè)策略略選擇根據(jù)目的選選擇檢測(cè)方方法及檢測(cè)測(cè)策略?？刹捎萌魏魏我活?lèi)梅毒毒血清學(xué)檢檢測(cè)方法作作為篩查試試驗(yàn)。以臨床診斷斷為目的檢檢測(cè)策略一一以臨床診斷斷為目的檢檢測(cè)策略二二策略一和策策略二比較較第三章梅梅毒體病原原學(xué)檢測(cè)檢測(cè)方法暗視野顯微微鏡檢查鍍銀染色檢檢查第四章梅梅毒核酸檢檢測(cè)可對(duì)血漿、、血清、皮皮損部位組組織液、淋淋巴穿刺液液及腦脊液液等標(biāo)本的的梅毒螺旋旋體核酸檢檢測(cè)在早期梅毒毒、神經(jīng)梅梅毒和先天天梅毒等診診斷，以及及螺旋體現(xiàn)現(xiàn)癥感染和和既往感染染鑒別診斷斷中具有一一定的價(jià)值值可應(yīng)用于梅梅毒螺旋體體的耐藥性性監(jiān)測(cè)、菌菌株流行病病學(xué)分型。。第五章實(shí)實(shí)驗(yàn)室生物物安全梅毒的生物物危害梅毒螺旋體體屬第三類(lèi)類(lèi)病原微生生物，一般般情況下對(duì)對(duì)人、動(dòng)物物或者環(huán)境境不構(gòu)成嚴(yán)嚴(yán)重危害，，傳播風(fēng)險(xiǎn)險(xiǎn)有限，實(shí)實(shí)驗(yàn)室感染染后很少引引起嚴(yán)重疾疾病，是有有有效治療療和預(yù)防方方法的致病病微生物梅毒相關(guān)檢檢測(cè)的生物物安全級(jí)別別為了保證安安全，對(duì)臨臨床和現(xiàn)場(chǎng)場(chǎng)未知樣本本的梅毒血血清學(xué)檢測(cè)測(cè)應(yīng)在符合合Ⅱ級(jí)生物物安全實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室（BSL-2））要求的實(shí)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)進(jìn)行。如有有艾滋病檢檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室室，可以在在艾滋病抗抗體檢測(cè)實(shí)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)進(jìn)行。第六章實(shí)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量量管理質(zhì)量保證質(zhì)量評(píng)估試劑評(píng)價(jià)質(zhì)量保證檢測(cè)方法和和試劑的選選擇用于臨床診診斷的檢測(cè)測(cè)方法應(yīng)使使用經(jīng)國(guó)家家食品藥品品監(jiān)督管理理局注冊(cè)批批準(zhǔn)的試劑劑，應(yīng)選擇擇敏感性高高、特異性性好的試劑劑。性病參參比實(shí)驗(yàn)室室和省級(jí)性性病中心實(shí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定定期組織開(kāi)開(kāi)展梅毒診診斷試劑的的臨床質(zhì)量量評(píng)價(jià)和新新方法與技技術(shù)的評(píng)估估。質(zhì)量評(píng)價(jià)所有梅毒檢檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室室應(yīng)參加外外部質(zhì)量評(píng)評(píng)價(jià)省級(jí)中心實(shí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參參加國(guó)家級(jí)級(jí)職能工作作考核和PT其他實(shí)驗(yàn)室室應(yīng)參加省省級(jí)職能工工作考核和和PT。質(zhì)量評(píng)價(jià)考評(píng)組織單單位根據(jù)PT考核結(jié)結(jié)果、職能能工作評(píng)價(jià)價(jià)結(jié)果及對(duì)對(duì)部分實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室現(xiàn)場(chǎng)評(píng)評(píng)價(jià)情況，，匯總各實(shí)實(shí)驗(yàn)室的最最終考評(píng)結(jié)結(jié)果，上報(bào)報(bào)相關(guān)機(jī)構(gòu)構(gòu)。考評(píng)評(píng)單單位位應(yīng)應(yīng)將將考考評(píng)評(píng)得得分分及及扣扣分分原原因因反反饋饋各各參參評(píng)評(píng)實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室，，以以適小結(jié)結(jié)1、、非非梅梅毒毒螺螺旋旋體體抗抗原原血血清清學(xué)學(xué)試試驗(yàn)驗(yàn)陽(yáng)陽(yáng)性性往往往往是是梅梅毒毒現(xiàn)現(xiàn)癥癥感感染染者者，，臨臨床床上上即即可可開(kāi)開(kāi)展展治治療療。。2、、非非梅梅毒毒螺螺旋旋體體抗抗原原血血清清學(xué)學(xué)試試驗(yàn)驗(yàn)定定量量試試驗(yàn)驗(yàn)可可作作為為療療效效觀觀察察的的指指標(biāo)標(biāo)。。3、、完完善操操作作的的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)化化，，杜杜絕絕有有個(gè)個(gè)人人特特點(diǎn)點(diǎn)的的操操作作。。4、、根根據(jù)據(jù)目目的的選選擇擇檢檢測(cè)測(cè)方方法法及及檢檢測(cè)測(cè)策策略略。?？煽刹刹捎糜萌稳魏魏我灰活?lèi)類(lèi)梅梅毒毒血血清清學(xué)學(xué)檢檢測(cè)測(cè)方方法法作作為為篩篩查查試試驗(yàn)驗(yàn)。。5、、臨床9、靜靜夜夜四四無(wú)無(wú)鄰鄰，，荒荒居居舊舊業(yè)業(yè)貧貧。。。。12月月-2212月月-22Wednesday,December28,202210、雨中黃黃葉樹(shù)，，燈下白白頭人。。。21:26:3221:26:3221:2612/28/20229:26:32PM11、以我獨(dú)沈沈久，愧君君相見(jiàn)頻。。。12月-2221:26:3221:26Dec-2228-Dec-2212、故人江海別別，幾度隔山山川。。21:26:3221:26:3221:26Wednesday,December28,202213、乍見(jiàn)翻疑夢(mèng)夢(mèng)，相悲各問(wèn)問(wèn)年。。12月-2212月-2221:26:3221:26:32December28,202214、他鄉(xiāng)生白白發(fā)，舊國(guó)國(guó)見(jiàn)青山。。。28十二二月20229:26:32下下午21:26:3212月-2215、比不了了得就不不比，得得不到的的就不要要。。。十二月229:26下午午12月-2221:26December28,202216、行動(dòng)出成果果，工作出財(cái)財(cái)富。。2022/12/2821:26:3221:26:3228December202217、做做前前，，能能夠夠環(huán)環(huán)視視四四周周；；做做時(shí)時(shí)，，你你只只能能或或者者最最好好沿沿著著以以腳腳為為起起點(diǎn)點(diǎn)的的射射線線向向前前。。。。9:26:32下下午午9:26下下午午21:26:3212月月-229、沒(méi)有有失敗敗，只只有暫暫時(shí)停停止成成功??！。12月月-2212月月-22Wednesday,December28,202210、很多多事情情努力力了未未必有有結(jié)果果，但但是不不努力力卻什什么改改變也也沒(méi)有有。。。21:26:3221:26:3221:2612/28/20229:26:32PM11、成功就是日日復(fù)一日那一一點(diǎn)點(diǎn)小小努努力的積累。。。12月-2221:26:3221:26Dec-2228-Dec-2212、世世間間成成事事，，不不求求其其絕絕對(duì)對(duì)圓圓滿(mǎn)滿(mǎn)，，留留一一份份不不足足，，可可得得無(wú)無(wú)限限完完美美。。。。21:26:3221:26:3221:26Wednesday,December28,202213、不知香積積寺，數(shù)里里入云峰。。。12月-2212月-2221:26:3221:26:32December28,202214、意志堅(jiān)強(qiáng)的的人能把世界界放在手中像像泥塊一樣任任意揉捏。28十二月月20229:26:32下午21:26:3212月-2215、楚塞三三湘接，，荊門(mén)九九派通。。。。十二月229:26下午午12月-2221:26December28,202216、少年年十五五二十十時(shí)，，步行行奪得得胡馬馬騎。。。2022/12/2821:26:3221:26:3228December202217、空山新雨雨后，天氣氣晚來(lái)秋。。。9:26:32下下午9:26下下午21:26:3212月-229、楊柳柳散和和風(fēng)，，青山山澹吾吾慮。。。12月月-2212月月-22Wednesday,December28,202210、閱閱讀讀一一切切好好書(shū)書(shū)如如同同和和過(guò)過(guò)去去最最杰杰出出的的人人談?wù)勗捲挕！?1:26:3221:26:3321:2