第二章基因工程在食品工業(yè)中的應(yīng)用

第二章基因工程在食品工業(yè)中的應(yīng)用第一節(jié)基因工程概述一、基因工程的定義二、基因工程的發(fā)展簡史一、基因工程的定義二、基因工程的發(fā)展簡史（一）遺傳物質(zhì)的研究（二）基因工程的誕生和發(fā)展（一）遺傳物質(zhì)的研究（二）基因工程的誕生和發(fā)展第二節(jié)基因工程工具酶一、限制性內(nèi)切核酸酶二、DNA甲基化酶三、連接酶四、DNA聚合酶五、堿性磷酸酯酶六、T4多聚核苷酸激酶七、S1核酸酶八、反向轉(zhuǎn)錄酶一、限制性內(nèi)切核酸酶（一）限制性內(nèi)切酶的命名（二）限制性內(nèi)切酶種類（三）限制性內(nèi)切酶的基本特性（一）限制性內(nèi)切酶的命名（二）限制性內(nèi)切酶種類1.Ⅰ類限制性內(nèi)切酶2.Ⅱ類限制性內(nèi)切酶3.Ⅲ類限制性內(nèi)切酶1.ⅠⅠ類類限限制制性性內(nèi)內(nèi)切切酶酶2.ⅡⅡ類類限限制制性性內(nèi)內(nèi)切切酶酶3.ⅢⅢ類類限限制制性性內(nèi)內(nèi)切切酶酶（三三））限限制制性性內(nèi)內(nèi)切切酶酶的的基基本本特特性性1.識(shí)識(shí)別別特特定定序序列列2.切切割割方方式式1.識(shí)識(shí)別別特特定定序序列列2.切切割割方方式式二、、DNA甲甲基基化化酶酶三、、連連接接酶酶四、、DNA聚聚合合酶酶（一一））大大腸腸桿桿菌菌DNA聚聚合合酶酶（二二））大大腸腸桿桿菌菌Klenow片片段段（一一））大大腸腸桿桿菌菌DNA聚聚合合酶酶（二二））大大腸腸桿桿菌菌Klenow片片段段五、、堿堿性性磷磷酸酸酯酯酶酶六、、T4多聚聚核核苷苷酸酸激激酶酶七、、S1核核酸酸酶酶八、、反反向向轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄酶酶第三三節(jié)節(jié)基基因因工工程程載載體體及及其其選選擇擇一、、大大腸腸桿桿菌菌載載體體二、、酵酵母母載載體體三、、植植物物載載體體四、、動(dòng)動(dòng)物物載載體體一、、大大腸腸桿桿菌菌載載體體（一一））質(zhì)質(zhì)粒粒載載體體（二二））噬噬菌菌體體（三三））柯柯斯斯質(zhì)質(zhì)粒粒載載體體（一一））質(zhì)質(zhì)粒粒載載體體（二二））噬噬菌菌體體（三三））柯柯斯斯質(zhì)質(zhì)粒粒載載體體二、、酵酵母母載載體體（一一））整整合合型型載載體體（（YIP））（二二））復(fù)復(fù)制制型型載載體體（（YRP））（三三））附附加加體體型型載載體體（（YEP））（一一））整整合合型型載載體體（（YIP））（二二））復(fù)復(fù)制制型型載載體體（（YRP））（三三））附附加加體體型型載載體體（（YEP））三、、植植物物載載體體四、、動(dòng)動(dòng)物物載載體體第四四節(jié)節(jié)目目的的基基因因的的制制備備一、、基基因因組組文文庫庫法法二、、cDNA文文庫庫法法三、、化化學(xué)學(xué)合合成成法法四、、聚聚合合酶酶鏈鏈?zhǔn)绞椒捶磻?yīng)應(yīng)（（PCR））一、、基基因因組組文文庫庫法法二、、cDNA文文庫庫法法三、、化化學(xué)學(xué)合合成成法法四、、聚聚合合酶酶鏈鏈?zhǔn)绞椒捶磻?yīng)應(yīng)（（PCR））第五五節(jié)節(jié)基基因因的的克克隆隆與與檢檢測測一、、基基因因的的克克隆隆二、、重重組組克克隆隆的的篩篩選選與與鑒鑒定定一、、基基因因的的克克隆隆（一一））基基因因與與載載體體的的連連接接（二二））重重組組DNA導(dǎo)導(dǎo)入入受受體體細(xì)細(xì)胞胞（一一））基基因因與與載載體體的的連連接接1.黏黏性性末末端端連連接接2.平平末末端端連連接接3.人人工工加加尾尾連連接接4.人人工工接接頭頭連連接接1.黏黏性性末末端端連連接接2.平平末末端連連接3.人人工工加尾尾連接接4.人人工工接頭頭連接接（二））重組組DNA導(dǎo)導(dǎo)入受受體細(xì)細(xì)胞1.生生物物學(xué)方方法2.物物理理學(xué)方方法3.化化學(xué)學(xué)方法法1.生生物物學(xué)方方法2.物物理理學(xué)方方法3.化化學(xué)學(xué)方法法二、重重組克克隆的的篩選選與鑒鑒定（一））利用用表型型特征征進(jìn)行行篩選選（二））重組組DNA電電泳檢檢測（三））內(nèi)切切酶圖圖譜鑒鑒定（四））利用用核酸酸雜交交進(jìn)行行鑒定定（五））利用用聚合合酶鏈鏈?zhǔn)椒捶磻?yīng)（（PCR））技術(shù)術(shù)鑒定定（六））免疫疫沉淀淀檢測測法（七））DNA序序列分分析（一））利用用表型型特征征進(jìn)行行篩選選1.抗抗藥藥性標(biāo)標(biāo)志的的篩選選2.ββ-半乳乳糖苷苷酶系系統(tǒng)篩篩選3.利利用用噬菌菌斑的的形成成進(jìn)行行篩選選1.抗抗藥藥性標(biāo)標(biāo)志的的篩選選2.ββ-半乳乳糖苷苷酶系系統(tǒng)篩篩選3.利利用用噬菌菌斑的的形成成進(jìn)行行篩選選（二））重組組DNA電電泳檢檢測（三））內(nèi)切切酶圖圖譜鑒鑒定（四））利用用核酸酸雜交交進(jìn)行行鑒定定（五））利用用聚合合酶鏈鏈?zhǔn)椒捶磻?yīng)（（PCR））技術(shù)術(shù)鑒定定(六)免免疫沉沉淀檢檢測法法（七））DNA序序列分分析第六節(jié)節(jié)外外源基基因的的表達(dá)達(dá)一、外外源基基因正正確表表達(dá)的的條件件二、外外源基基因在在原核核細(xì)胞胞中的的表達(dá)達(dá)特點(diǎn)點(diǎn)三、影影響外外源基基因在在原核核細(xì)胞胞中高高效表表達(dá)的的因素素四、外外源基基因在在真核核細(xì)胞胞中的的表達(dá)達(dá)特點(diǎn)點(diǎn)一、外外源基基因正正確表表達(dá)的的條件件（一））啟動(dòng)動(dòng)子（二））S-D序序列（三））起始始密碼碼子（四））終止止子（五））表達(dá)達(dá)產(chǎn)物物的后后加工工（一））啟動(dòng)動(dòng)子（二））S-D序序列（三））起始始密碼碼子（四））終止止子（五））表達(dá)達(dá)產(chǎn)物物的后后加工工二、外外源基基因在在原核核細(xì)胞胞中的的表達(dá)達(dá)特點(diǎn)點(diǎn)三、影影響外外源基基因在在原核核細(xì)胞胞中高高效表表達(dá)的的因素素（一））啟動(dòng)動(dòng)子結(jié)結(jié)構(gòu)對(duì)對(duì)表達(dá)達(dá)效率率的影影響（二））載體體的選選擇（三））S-D序序列與與起始始密碼碼子之之間的的距離離（四））轉(zhuǎn)譯譯起始始相關(guān)關(guān)序列列對(duì)表表達(dá)效效率的的影響響（五））轉(zhuǎn)錄錄終止止區(qū)對(duì)對(duì)外源源基因因表達(dá)達(dá)效率率的影影響（六））基因因拷貝貝數(shù)對(duì)對(duì)表達(dá)達(dá)效率率的影影響（七））翻譯譯后的的蛋白白修飾飾與基基因表表達(dá)的的關(guān)系系（八））提高高表達(dá)達(dá)蛋白白的穩(wěn)穩(wěn)定性性（九））培養(yǎng)養(yǎng)條件件的控控制對(duì)對(duì)表達(dá)達(dá)效率率的影影響（一））啟動(dòng)動(dòng)子結(jié)結(jié)構(gòu)對(duì)對(duì)表達(dá)達(dá)效率率的影影響（二））載體體的選選擇（三））S-D序序列與與起始始密碼碼子之之間的的距離離（四））轉(zhuǎn)譯譯起始始相關(guān)關(guān)序列列對(duì)表表達(dá)效效率的的影響響（五））轉(zhuǎn)錄錄終止止區(qū)對(duì)對(duì)外源源基因因表達(dá)達(dá)效率率的影影響（六））基因因拷貝貝數(shù)對(duì)對(duì)表達(dá)達(dá)效率率的影影響（七））翻譯譯后的的蛋白白修飾飾與基基因表表達(dá)的的關(guān)系系（八））提高高表達(dá)達(dá)蛋白白的穩(wěn)穩(wěn)定性性（九））培養(yǎng)養(yǎng)條件件的控控制對(duì)對(duì)表達(dá)達(dá)效率率的影影響四、外外源基基因在在真核核細(xì)胞胞中的的表達(dá)達(dá)特點(diǎn)點(diǎn)第七節(jié)節(jié)基基因工工程在在食品品工業(yè)業(yè)中應(yīng)應(yīng)用一、改改良食食品加加工原原料二、改改良微微生物物菌種種性能能三、應(yīng)應(yīng)用于于食品品酶制制劑的的生產(chǎn)產(chǎn)四、改改良食食品加加工工工藝五、應(yīng)應(yīng)用于于生產(chǎn)產(chǎn)保健健食品品的有有效成成分六、利利用啤啤酒酵酵母基基因工工程法法生產(chǎn)產(chǎn)索馬馬甜一、改改良食食品加加工原原料（一））改良良動(dòng)物物性食食品源源（二））改良良植物物性食食品源源（一））改良良動(dòng)物物性食食品源源（二））改良良植物物性食食品源源1.改改良良蛋白白質(zhì)類類食品品2.改改良良油脂脂類食食品3.延延熟熟保鮮鮮1.改改良良蛋白白質(zhì)類類食品品2.改改良良油脂脂類食食品3.延延熟熟保鮮鮮二、改改良微微生物物菌種種性能能三、應(yīng)應(yīng)用于于食品品酶制制劑的的生產(chǎn)產(chǎn)三、應(yīng)應(yīng)用于于食品品酶制制劑的的生產(chǎn)產(chǎn)四、改改良食食品加加工工工藝五、利利用基基因工工程生生產(chǎn)甜甜蛋白白索馬馬甜（一））索馬馬甜研研究概概況（二））利用用基因因工程程法生生產(chǎn)索索馬甜甜（三））利用用基因因工程程對(duì)索索馬甜甜進(jìn)行行改性性（一））索馬馬甜研研究概概況（二））利用用基因因工程程法生生產(chǎn)索索馬